CAC onANTICITOPLASMÁTICOS INFORMACIÓN gr QUE PUEDEN APORTARNOS es oN ac ion al de lL ab or ato rio Cl íni co 20 15 Dra Mª Belén Aparicio Hernández Complejo Universitario Salamanca Co ¿DE QUÉ HABLAMOS CUANDO NOS ng REFERIMOS A AC ANTICITOPLASMÁTICOS? re so Na cio na ld el La bo ra t or NÚCLEO CELULAR CÉLULA COMPLETA io Cl íni co 20 CITOPLASMA 1 5 CELULAR BIO RAD LABORATORIES Education and Training Tools Co ng CICLO CELULAR re so Na cio n al PROFASE de METAFASE lL ab or ato rio ANAFASE TELOFASE Cl CEL. ínDIVIDIDA ico 20 1 5 Co DETERMINACIÓN DE ANTICUERPOS ng ESTRATEGIA A SEGUIR r • • es oN Inmunofluorescencia indirecta (IFI) ac – Sustratos: io n al AMA, LKM) • TRIPLE TEJIDO (ASMA, de • HEp-2 (ANA) l La • LEUCOCITOS HUMANOS (ANCAS). b or – Subjetivo ato Inmunoensayos rio – ELISA Cl íni – Inmunoblot co – Eliminan la variación intra e inter observador de la 2 IFI 01 5 Co nIFI gr es oN • Informe ac – Positivo/negativo ion al – Patrón fluorescencia d – intensidad/título el L – intervalos referencia • Conjugado ab or – Anti IgG humana – FITC/proteína (3) – Contenido Ab (30-60 µg/ml) – Dilución trabajo Substrato Hep 2 Triple tejido (Riñón/hígado/estómago) Leucocitos humanos. ato rio Muestra CSuero lín ico 2 01 5 Co ng Patrones de fluorescencia HEP 2 re so N ac NUCLEAR ion homogéneo/periférico, moteado, centromérico, nucleolar, aldots, membrana nuclear, granular difuso PCNA, nuclear de lL CITOPLASMÁTICO ab o ra citoesqueleto. moteado, granular, punteado, tor io Cl MITÓTICO íni Cenp-F huso mitótico, centrosoma, NuMA, cuerpo medio, co 20 15 Co Anticuerpos Citoplasmáticos ng re Células Hep 2 so Na cio na ld el La bo ra tor io Cl íni M2 co 20 Actina JO1 Tropomiosi na Vimentina SRP RIBOSOMAL Citoesquel. Moteado Otros Citoqueratina LISOSOMAL Vinculina GOLGI Mitocond 15 Dra Mª Belén Aparicio Hernández Complejo Universitario Salamanca Co ng ANTI JO1 re so Na cio n al de ANTICUERPO Anti Jo-1 ANTÍGENO HISTIDIL-t-RNA SINTETASA ENFERMEDADES ASOCIADAS POLIMIOSITIS Y DERMATOMIOSITIS SID. OVERLAP l LPATRÓN TÍPICO ab or ato rio NOTAS HEP 2. PATRÓN MOTEADO FINO DIFUSO EN TODO EL CITOPLASMA. MATERIAL CROMOSÓMICO NO SE TIÑE. CCONSIDERADO UNO DE l í LOS n 6 ENAS ico INDIVIDUALES. EL MAS FRECUENTE EN 2 LAS MIOSITIS. 0 15 Co ANTI P- RIBOSOMIAL ng re so Na cio n al de lL ANTICUERPO Anti P- RIBOSOMIAL ANTÍGENO PROTEÍNAS RIBOSOMIALES P0,P1 Y P2 ENFERMEDADES ASOCIADAS LES ASOCIADO A SÍNTOMAS NEUROLÓGICOS ab or TÍPICO PATRÓN ato rio NOTAS HEP 2. PATRÓN HOMOGÉNEO GRANULAR DENSO EN TODO EL CITOPLASMA. NUCLEOLOS MARCADOS HOMOGÉNEAMENTE. Cl íni NORMALMENTE NO INCLUIDO EN c o DETERMINACIONES DE 20 ENA SCREENING. 15 10-20%. PACIENTES. Co AC ng APARATO DE GOLGI re so Na cio n al de ANTICUERPO COMPLEJO DE GOLGI ANTÍGENO LOCALIZADOS EN EL COMPLEJO DE GOLGI l LENFERMEDADES ab ASOCIADAS or ato PATRÓN TÍPICO rio LES,SÍNDROME SJOGREN. INFECCIONES NEOPLASIAS HEP 2. PATRÓN GRANULAR IRREGULAR FOCALIZADO CERCA DEL NÚCLEO EN CITOPLASMA(INTERFASE). TINCIÓN DIFUSA CITOPLASMÁTICA (CELS DIVISIÓN) Cl ín ico 20 15 Co ng AC ANTI LISOSOMAL re so ANTICUERPO LISOSOMAL Na ANTÍGENO PROTEÍNAS LISOSOMALES cio Y LAMPS (ASOCIADOS A na LAS PROTEÍNAS DE LAS MEMBRANAS ld LISOSOMALES) el ENFERMEDADES S (POCO FREC) LASOCIADAS ab SÍN ASOCIACIÓN CLÍNICA IMPORTANTE. or ato PATRÓN TÍPICO HEP 2. PATRÓN GRANULAR MEDIO, rio IRREGULAR GRUESO EN EL CCITOPLASMA.. línHAY FLUORESCENCIA NO ico Y NUCLEOLOS EN NUCLEO 20 15 LE . Co ng AC ANTI SRP re so Na cio n al de ANTICUERPO SIGNAL RECOGNITION PARTICLE ANTÍGENO COMPLEJO DE 6 POLIPÉPTIDOS DE RIBONUCLEOPROTTEÍNAS ENFERMEDADES ASOCIADAS POLIMIOSITIS. RARO: DERMATOMIOSITIS ESCLEROSIS SITÉMICA FIBROSIS PULMONAR INTERSTICIAL lL ab or ato rio PATRÓN TÍPICO NOTAS HEP 2. PATRÓN MOTEADO GRANULAR CITOPLASMÁTICO. NÚCLEO NEGATIVO. Cl íni MOTEADO PATRÓN CITOPLASMÁTICO. c o2 INMUNOBLOT. 01 5 Co ng AC ANTI F ACTINA re so Na cio n al de ANTICUERPO Ac CITOPLASMÁTICO CITOESQUELETO. ANTÍGENO F ACTINA ENFERMEDADES ASOCIADAS HEPATITIS AUTOINMUNE 1 CIRROSIS BILIAR PRIMARIA ENFS TJ CONECTIVO lL ab or PATRÓN TÍPICO ato rio NOTAS HEP 2. PATRÓN DE MICROFILAMENTOS RECTILÍNEOS Y PARALELAS. NÚCLEO Y NUCLEOLOS NEGATIVOS. Cl íniPACIENTES CON HAI Y 20% ASMA c NO SON F ACTINA. o IFI HEP 2, INMUNOBLOT o 2 01 ELISA. 5 Co ngAC ANTI re so Na cio na l VIMENTINA de ANTICUERPO Ac CITOPLASMÁTICO CITOESQUELETO ANTÍGENO VIMENTINA ENFERMEDADES ASOCIADAS HEPATITIS AUTOINMUNE ARTRITIS REUMATOIDE SIND FATIGA. lL ab or PATRÓN TÍPICO ato rio NOTAS HEP 2. PATRÓN DE FILAMENTOS INTEMEDIOS CON TINCIÓN PERINUCLEAR DENSA Y FIBRILAR CITOPLASMÁTICA. Cl ín ico SU PRESENCIA TIENE UNA CORRELACIÓN INCIERTA. 20 15 Co ACnANTI CITOQUERATINA g re so Na cio n al de ANTICUERPO Ac CITOPLASMÁTICO CITOESQUELETO ANTÍGENO CITOQUERATINA ENFERMEDADES ASOCIADAS HEPATOPATÍA ALCOHÓLICA ARTRITIS REUMATOIDE PSORIASIS INDIVIDUOS SANOS. lL ab or ato rio PATRÓN TÍPICO HEP 2. PATRÓN CON TINCIÓN PERINUCLEAR DENSA Y RETICULAR CITOPLASMÁTICA. Cl ín ico 20 15 Co ACngANTI TROPOMIOSINA re so Na cio n al de ANTICUERPO Ac CITOPLASMÁTICO CITOESQUELETO ANTÍGENO TROPOMIOSINA ENFERMEDADES ASOCIADAS INDIVIDUOS SANOS. COLITIS ULCEROSA ARTRITIS REUMATOIDE ESCLEROSIS SISTÉMICA lL ab or PATRÓN TÍPICO ato rio NOTAS HEP 2. MARCAJE DE LAS FIBRAS DE ESTRÉS POR DEBAJO DE LA MEMBRANA CITOPLASMÁTICA. INTERFASE Y METAFASE NEGATIVO. Cl ín ico INTERACTÚA CON OTRAS MOLÉCULAS EN LA CONTRACCIÓN MUSCULAR 20 15 Co ng AC ANTI VINCULINA re so ANTICUERPO Ac CITOPLASMÁTICO Na CITOESQUELETO cio ANTÍGENO VINCULINA na l d ENFERMEDADES INDIVIDUOS SANOS. el ASOCIADAS MIASTENIAS GRAVIS TROMBOCITOPENIA La INMUNE bo ato PATRÓNrTÍPICO HEP 2. FIBRAS A LO rio FLUORESCENTES LARGO DE LA ClMEMEBRANA CITOPLASMÁTICA íDIRIGIDAS nic HACIA EL NÚCLEOo 20 15 Co AC ANTIMITOCONDRIALES ng re so Na cio n al ANTICUERPOS ANTIMITOCONDRIALES 9 TIPOS M1-M9. 96% M2 ANTÍGENO COMPLEJO PIRUVATO DEHIDROGENASA (PDC). de ENFERMEDADES l ASOCIADAS La bo PATRÓN TÍPICO ra tor io CIRROSISBILIAR PRIMARIA (CBP) ESCLERODERMIA,CREST, LES,SIND. SJOGREN,SIND OVERLAP. HEP 2. PATRÓN CITOPLASMÁTICO GRANULAR IRREGULAR DESDE EL NUCLEO POR TODO CITOPLASMA. NOTAS Cl ín ico CONFIRMAR EN TRIPLE TEJIDO: TINCIÓN GRANULAR CITOPLASMÁTICA EN HEPATOCITOS, TÚBULOS RENALES Y CEL. PARIETAL ESTÓMAGO. 20 15 PATRONES AC CITOPLASMÁTICOS Co ng re so Na cio GRANULAR MOTEADO na l DIFUSO FINO MIT HEP 2 d GOLGI elLISOSOMAL La bo HEPATOCITOra GW tor LC-1 CITOESQUELETO PUNTEADO LKM-1 io OTRAS ACTINA CEL PARIETAL GÁSTRICA Cl ín GSTT-1 ico 20 15 Report of the first international consensus on standardized nomenclature of antinuclear antibody HEp-2 cell patterns 2014–2015 Edward K. L. Chan1, Jan Damoiseaux2, Orlando Gabriel Carballo3,4, Karsten Conrad5, Wilson de Melo Cruvinel6, Paulo Luiz Carvalho Francescantonio6, Marvin J. Fritzler7, Ignacio Garcia-De La Torre8, Manfred Herold9, Tsuneyo Mimori10,11, Minoru Satoh12, Carlos A. von Mühlen13 and Luis E. C. Andrade14,15* Frontiers in Immunology August 2015. Volume 6. Article 412. The 12th International Workshop on Autoantibodies and Autoimmunity Co ng re so Na cio n al , held in Sao Paulo, Brazil, on August 28 2014, de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 15 Frontiers in immunology. August 2015,Vol 8, Article 412. Chan et al. Co ngRecordando y Participando re so 1. Cuál deNlos ac siguientes autoanticuerpos son ion criterios diagnósticos de HAI tipo 1 al de lL A. ANA y ASMA. ab o ra B. LKM3 y ASMA. tor C. LKM-1 y LC-1. io C lín D. LKM-1 y ANA. ico 20 15 Co IFI ng AutoAc Hepatitis Autoinmune re so Na cio n al de lL ab or ato rio Cl ín ico R. Liberal et al. / Autoimmunity Reviews 13 (2014) 435–440 20 15 Co ng re so Nacriterio diagnóstico definitivo de HAI 2. Se considera cio presenta una de las siguientes cuando un paciente na respuestas: ld el A. IgG en concentracionesLmenores a 1 vez el límite ab superior normal. or a B. Presentar hepatotoxicidad por talcohol or o fármacos. i o C inferiores a C. Presencia de autoanticuerpos a títulos lín 1/40. ico D. Ninguna de las anteriores. 20 15 Co ngHEPATITIS AUTOINMUNE re so Parámetros Parámetros N clínicos bioquímicos ac ion al de lL ab or ato rio Cl <1 0 íni co Sexo femenino +2 Fármacos Sí -4 No +1 FA/ALT (AST) <1.5 +2 1.5-3 0 >3 -2 Parámetros inmunológicos y virológicos Parámetros histológicos ANA, SMA O LKM -1 Hepatitis de >1/80 +3 Interfase 1/80 +2 1/40 (niños) AMA + Alcohol <25g/día >60g/día +2 -2 Otras enfermedades autoinmunes +2 Gammaglobulina o IgG >2 +3 1.5-2 +2 1-1.5 +1 +3 Infiltrado linfoplasmocitario predominante +1 +1 1/40 (adultos) Respuesta al tratamiento 0 Rosetas (aspecto seudoglandular) -4 Ninguno de los anteriores -5 (pANCA, anti.LC1, antiSLA, etc.) +2 Alteraciones biliares -3 Recaída al suspender el tratamiento +1 Otros hallazgos que sugieran otra (sólo si autoAc -) etiología Marcadores de hepatitis vírica Positivo 3 Negativo +3 +2 +1 Positividad para otros autoanticuerpos definidos (sólo si autoAc clásicos -) HLA DR3 o DR 4 Completa - -3 20 Diagnostic criteria of autoimmune hepatitis. R. Liberal et al. Autoimmunity Reviews,13,435-440.2014 15 +3 Co ng re so Na 3.Los anticuerpos mitocondriales positivos en cio riñón en IFI dentriple tejido afectan: al de lL ab A. Los túbulos renales proximales y distales. or ato B. Túbulos renales proximales. rio C. Túbulos renales distales. Cl íni D. Ninguna de las anteriores. co 20 15 Co ng IFI TRIPLE TJ RATA re so Na cio n al MITOCONDRIALES de MITOCONDRIALES lL ab or LKM 1 ato rio Cl ín ico 20 15 Co ng re so Na anticuerpos no son 4. Cuál de estos cio anticitoplasmáticos: na ld el L ab A. Ac Anti f-actina. or B. Ac Anti citoqueratina ato rio C. Ac Anti histona Cl ín D. Ac Anti mitocondriales ico 20 15 Co Anticuerpos Citoplasmáticos ng re Células Hep 2 so Na cio na ld el La bo ra tor io Cl íni M2 co 20 Actina JO1 Tropomiosi na Vimentina SRP RIBOSOMAL Citoesquel. Moteado Otros Citoqueratina LISOSOMAL Vinculina GOLGI Mitocond 15 Dra Mª Belén Aparicio Hernández Complejo Universitario Salamanca Co ng re so Na sospecha clínica, analítica o 5. Ante una cio histológica de nHAI se deben determinar los al anticuerpos: de lL A. ANAS ab or B. ASMA ato r io C. ANTI LKM1 Cl íni D. Todas las anteriores. co 20 15 Co AUTOANTICUERPOS ASOCIADOS ng re HAI so Na Hepatitis cioAutoanticuerpos Prevalencia HAI Autoinmune asociados na ld ASMA el 40-90% TIPO I La ANA 5-70% b ANTI-SLA/LP or 10-30% ato rio ANTI LKM-1 2-4% TIPO II ANTI LC-1 1-2% Cl íni 10-30% ANTI SLA/LP co 20 15 Los Tipos se establecen de acuerdo a los anticuerpos Co ng Muchas Gracias re so Na cio n al de lL ab or ato rio Cl ín ico 20 15
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