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142-
Importancia de la Biotecnología
Microbiana: Bioinformática
JOSE ROBERTO ALEGRIA COTO
Jefe Depto. de Desarrollo Científico y Tecnológico
[email protected]
Escuela de Biología
Facultad de Ciencias Naturales y Matemática
OBJETIVOS
● Presentar un bosquejo de la importancia
de la biotecnología microbiana.
● Proporcionar información para accesar a
bases de datos de fácil disponibilidad en la
bioinformatica microbiana.
● Reflexionar sobre acciones propuestas
de carácter transversal para el impulso de
la biotecnología en El Salvador.
Principios de Biotecnología
Microbiana
● Por centurias, la cerveza, vino, vinagre, salsa de soya y
otros alimentos fueron producidos a través de fermentación
espontánea de la actividad natural de microorganismos o
por agregar semillas de microbios de previo lotes de
producción. El desarrollo de métodos científicos de tamizaje
y aislamiento permitieron la selección de microorganismos
deseables de la naturaleza o mutados para propósitos
específicos de interés industrial, agrícola o ambiental.
Esos métodos acoplados con el avance de técnicas de
esterilización a gran escala de medios de cultivo, suministro
adecuado de oxígeno y homogeneidad de la mezcla de los
sistemas de cultivo permitieron la explotación de
microorganismos anaerobios (levaduras y algunas
bacterias) y aerobios (hongos y algunas bacterias).
Principios de Biotecnología
Microbiana
● La biotecnología microbiana fue impulsada en los años
ochenta cuando la fermentación continua y procesos de
fermentación de transporte aéreo se desarrollaron para la
producción de alimentos y de proteínas microbianas para
subproductos industriales.
Estos procesos conducen a un ahorro considerable en
costos de capital, energía y mano de obra.
● Las técnicas modernas de manipulación genética, de
bioinformática avanzada y biocomputación son
herramientas poderosas para la investigación de la genómica
y proteómica microbiana.
● Los avances científicos que siguieron han hecho posible la
fabricación industrial de productos no-microbianos, tales
como la hormona del crecimiento humano, interferon y
vacunas virales.
Principios de Biotecnología
Microbiana
El biotecnólogo microbiano puede escoger el área
de investigación ya sea en la industria enzimática,
farmaceútica, alimenticia; agricultura; producción
de biocombustibles; bioremediación,
biolixiviación, bioacumulación o bioadsorción.
Hay que tener en cuenta la multidisciplinaridad e
integración de la investigación, con: Microbiología;
Biología Molecular; Bioquímica; Ingeniería
Bioquímica, Química y Genética; Química
Orgánica; Electroquímica, entre otras.
Aplicaciones de la BIOTECNOLOGÍA MICROBIANA
En la industria farmacéutica se utilizan metabolitos
microbianos para producir; antibióticos, hormonas, y
esteroides. En esta industria se han hecho
aplicaciones de la tecnología de ADN recombinante,
para obtener productos de gran valor comercial
tales como:
i)
ii)
iii)
iv)
v)
Hormonas humanas,
Agentes antivirales y antitumorales,
Factores de coagulación sanguínea),
Activador de plasminógeno tisular,
Vacunas y anticuerpos monoclonales
(diagnostico y terapia).
Aplicaciones de la BIOTECNOLOGÍA MICROBIANA
En la alimentación el consumo de bacterias
lácticas o PROBIÓTICOS, (promotores de la
vida), como parte de la dieta, permite el
restablecimiento y mantenimiento de la microbiota
intestinal. Alimentos complementados con estos
microorganismos ayudan a la buena digestión y
al fortalecimiento del sistema inmune.
Las investigaciones buscan aislar diferentes bacterias lácticas
productoras de biocinas de sustratos tales como materia
fecal, carnes, vegetales, cereales, con el fin de obtener
microorganismos iniciadores que puedan ser utilizados para
que garanticen un periodo de utilidad del producto más
amplio,después de haber sido retirado del refrigerador.
Aplicaciones de la BIOTECNOLOGÍA MICROBIANA
En agricultura, la biotecnología microbiana, se
emplea en biofertilización, utiliza organismos como
Agrobacterium tumefaciens para modificar
genéticamente a las plantas. Plantas modificadas
para ser resistentes a insectos tienen genes de
tóxinas de Bacillus thuringiensis. Uso como
biofertilizantes (solubilizadoras de fósforo,
productoras de fitohormonas) y fijadoras de
nitrógeno (Herbaspirillum sp., luconacetiobacter
sp., Azotobacter sp.) La Biotecnología microbiana,
también se usa en medicina veterinaria.
Aplicaciones de la BIOTECNOLOGÍA MICROBIANA
Los profesores Steve Hutcheson
y Ron Weiner, de la Universidad
de Maryland usando a la bacteria
S. degradans han realizado un
proceso que puede hacer etanol
y otros BIOCOMBUSTIBLES de
Degradación de papel periódico.
diferentes tipos de plantas y de fuentes celulósicas.
http//www.sciencedaily.com/releases/2008/03/080310164901.htm
Hay bacterias mesófilas tales como Zymmonas
mobilis y E. coli recombinante, así como otras
termofilas que producen etanol.
Aplicaciones de la BIOTECNOLOGÍA MICROBIANA
En BIOREMEDIACIÓN DE SUELOS se usa la
habilidad de microbios, plantas o sus enzimas para
degradar y descontaminar distintos compuestos en
suelos y tierras de naturaleza urbana e industrial.
En los países en desarrollo, hay dos tipos principales
de contaminación que amenazan la salud humana:
Desechos orgánicos y Metales pesados
(plomo, mercurio, cadmio). Ejemplo, las pilas
contaminan tanto porque contienen metales
pesados, que no se pueden destruir por
procesos biodegradables en la naturaleza.
www.greenpeace.org
Aplicaciones de la BIOTECNOLOGÍA
MICROBIANA
La Biotecnología microbiana también se usa en:
Biolixiviación, denominada lixiviación
bacteriana, consiste en el ataque químico
de distintos materiales por bacterias, como Thiobacillus
ferrooxidans (mesófila). Se aplica en minas de cobre, uranio
y oro.
Bioacumulación o bioadsorción, utilizan las biomasas, vivas
o muertas, con distintos tipos de microorganismos, para
la descontaminación de efluentes líquidos cargados en
metales pesados. Son técnicas complementarias a otras
comúnmente usadas como la precipitación química de
hidróxidos y de sales metálicas de naturaleza varia.
Aplicaciones de la Nano BIOTECNOLOGÍA
MICROBIANA
Nanobiotecnología
manipula átomos
y moléculas para crear biomateriales,
dispositivos y sistemas en la escala de una mil
millonésima de metro.
Diagnóstico y tratamiento de tuberculosis usando
nanotecnología. En 1993 la OMS la declaró una
emergencia global a Micobacterium tuberculosis (TB), por
su incrementada resistencia a múltiples antibióticos.
En la India han desarrollado un kit de diagnóstico de TB
basado en nanotecnología, portátil, no requiere entreno,
costo menor a US $ dólar por prueba. En USA investigan
sobre biosensores ópticos para rápida detección de TB.
Aplicaciones de la Nano
BIOTECNOLOGÍA MICROBIANA
Biosensor de detección de Salmonellas basado
en hetero nanovarillas de Oro y Sílice, donde se inmovilizan
las moléculas de reconocimiento (anticuerpos conjugados con el
oro) y las miles de moléculas fluorescentes de señalización en
las varillas de sílice, pueden detectar a una sola bacteria. En
principio el protócolo usado puede detectar bacterias patógenas
que afectan alimentos, como E. coli, Staphylococcus ,
Campylobacter y tóxinas de alimentos como: Ricina, Abrin o
C. botulinum, si se usa el anticuerpo apropiado.
Tiene ventajas sobre técnicas tradicionales, Método ISO 6579,
anticuerpos fluorescentes (FA), Ensayo Inmunoabsorbente
ligado a enzimas (ELISA) o Reacción en Cadena de la Polimerasa
(PCR), que consumen tiempo, son dificultosos y poco sensibles.
http://www.nanowerk.com/spotlight/spotid=4963.php
Bioinformática Microbiana
Información rápida
y precisa al servicio
de la investigación
que permite la detección
temprana de patógenos,
identificación de proteínas
de uso Industrial y el estudio de las respuestas
en las comunidades de microorganismos ante
cambios ambientales.
1 – Secuencias banco de genes
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/Sequin/
1000 genomas procarióticos están
ahora completos y disponibles en
la Base de Datos Genome.
Textos completos libres. Mas de
1.500.000 artículos de más de
450 journals. Ligadas a PubMed
que se pueden buscar
Explora estructuras de 3D de moléculas de
proteínas, ADN y ARN. Examina relaciones
secuencia-estructura, sitios activos,
interacciones moleculares, actividades
biológicas de enlaces químicos, y
biosistemas asociados.
Datos de estudios de Genome
Wide Association que ligan genes
y enfermedades. Ver variables de
estudios, protocolos y análisis.
IMPORTANCIA DEL SITIO Y RECURSOS:
i) Determina la comparación entre dos organismos;
ii) Obtiene textos completos en artículos científicos: Blast, Bookshelf, Gene, Genoma, Nucleótidos;
iii) Diseña primers para PCR y revisa su especificidad;
iv) Encuentra genes homólogos para un gen en otro organismo.
2 - ALINEACIONES
http:̸̸̸̸̸̸ ̸̸̸www.ebi.ac.uk̸̸̸Tools̸̸̸̸̸̸muscle̸̸̸
SCLE: Comparación de secuencias múltiples, se utiliza para
lograr la exactitud, mejor promedio y mejor velocidad.
http:̸̸̸̸̸̸ ̸̸̸www.ebi.ac.uk̸̸̸Toolsclustalw2̸̸̸index.html
ClustalW2: Programa de alineamiento múltiple de
secuencias de ADN o de proteínas. Se producen
alineaciones múltiples biológicamente significativas de
secuencias divergentes.
Calcula la mejor combinación para las secuencias
seleccionadas, y las alinea de manera que se puedan ver
las identidades, similitudes y diferencias y las relaciones
evolutivas se pueden ver a través de visualización o de
Phylograms.
3 – EDITORES DE ALINEACIONES
http://www.jalview.org/
JALWIEV: Editor de alineamiento múltiple escrito en Java. Se utiliza
ampliamente en una variedad de páginas web (por ejemplo, el servidor EBI
CLUSTALW y la base de datos de dominio de proteínas Pfam), está disponible
como un editor de efectos de alineación general, apoya desde 2009 hasta 2014
al BBSRC y Universidad de Dundee.
http://www.mbio.ncsu.edu/BioEdit/page2.html
BIOEDIT: Editor de secuencias de aproximación y análisis de la secuencia del
programa, está destinado a proporcionar un único programa que puede manejar
secuencias sencillas y edición de la alineación y las funciones de manipulación
que los investigadores puedan hacer sobre una base diaria, así como secuencias
básicas.
http://www.nrbsc.org/gfx/genedoc/
GeneDoc: Completo editor de secuencias de alineación múltiple, análisis de
datos y visualización, puntuación asistida, alineación manual altamente
configurable, las cifras exportadas y árboles filogenético de apoyo.
4- BASES DE DATOS PARA HONGOS
UNITE- http://unite.ut.ee/
Fungal Metagenomes-Taylor's Lab -University of Alaskahttp://www.borealfungi.uaf.edu
Index Fungorum- http://www.indexfungorum.org/
Rytas Vilgalys Labhttp://www.biology.duke.edu/fungi/mycolab/primers.htm
Tom Brun’s Lab- http://mollie.berkeley.edu/~bruns/
Fungal Tree of Life- http://aftol.org/
Database of PCR Primers for Phytopathogenic Fungihttp://www.sppadbase.com/
CYBERLIBER- http//www.cybertruffle.org.uk/cyberliber/
CBS- http://www.cbs.knaw.nl/
Mycobank- http://www.mycobank.org/
Myconet- http://www.fieldmuseum.org/myconet/
5 - BASES DE DATOS PARA BACTERIAS
GreenGeneshttp://greengenes.lbl.gov/cgi-bin/nph-index.cgi
.
Ribosomal Database Projecthttp://rdp.cme.msu.edu/
ARBhttp://www.arb-home.de/
probeBase
http://www.microbialecology.net/probebase/list.asp?list=probes
BioinformaticsToolKit
http://www.bioinformatics-toolkit.org
6. BASES DE DATOS PARA PLANTAS
Phytozomehttp://www.phytozome.net/
Herramienta para la genómica comparativa de los vegetales. La página
permite buscar genes y familias de genes utilizando palabras clave,
vocabularios controlados o secuencias. La familia de genes de búsqueda
incluye toda la información sobre los genes de sus miembros, así como
de nombres específico de la familia y la clasificación.
7. GENOMAS MICROBIANOS Y METAGENOMAS
JGI- http://jgi.doe.gov/
Una parte importante de los proyectos del DOE JGI están relacionados con la
bioenergía y se centran en tres áreas: el desarrollo de materias primas vegetales;
el uso de microbios para romper la celulosa de la pared celular vegetal, y la
fermentación de los azúcares en biocombustibles.
Broad Institute- http://www.broadinstitute.org/scientificcommunity/science/projects/fungal-genome-initiative/fungalgenome-initiative
IMG- http://img.jgi.doe.gov/cgi-bin/pub/main.cgi
VISTA- http://genome.lbl.gov/vista/index.shtml
MEGAN- http://www-ab.informatik.unituebingen.de/software/megan
8. ANALISIS DE PROGRAMAS PARA ESTIMADORES Y
DIVERSIDAD DE LAS COMUNIDADES
MOTHURhttp://www.mothur.org/wiki/Mothur_v.1.0.0
El objetivo de mothur es ofrecer una ventanilla única para todas las
necesidades de ecología microbiana o microbiología ambiental
bioinformática.
UNIFrachttp://bmf2.colorado.edu/fastunifrac/index.psp
UniFrac rápida es una nueva versión de UniFrac que está
específicamente diseñado para manejar grandes bases de datos. Al igual
que UniFrac, UniFrac rápido ofrece un conjunto de herramientas para la
comparación de las comunidades microbianas con información
filogenética.
9. DISEÑO DE PRIMADORES “PRIMER”
Primer3http://frodo.wi.mit.edu/primer3/
Pick cebadores de una secuencia de ADN.
OligoAnalyzerhttp://www.idtdna.com/site
10. SECUENCIACIÓN
Sanger method of DNA sequencing
http://www.dnalc.org/view/15479-Sanger-method-of-DNAsequencing-3D-animation-with-narration.html
Secuenciación 454
http://www.wellcome.ac.uk/stellent/groups/corporatesite/@msh_pu
blishing_group/documents/video/wtx056030.swf
Illumina sequencing technology
http://www.illumina.com/technology/sequencing_technology.ilmn
Helicos- Single-Molecule DNA sequencing (video)
http://link.brightcove.com/services/player/bcpid1827871101?bctid=
1618618549
11. EDICIÓN DE CROMATOGRAMAS
FinchTv
http://www.geospiza.com/Products/finchtv.shtml
Phred/Phrap
http://www.phrap.org/
12. ANALISIS PHYLOGENETICO
Phylogenetic Analysis- http://www.r-phylo.org/wiki/Main_Page
Tree of Life Projects- http://www.phylo.org/atol/
TreeBase- http://www.treebase.org/treebase-web/home.html
NESCent- http://www.nescent.org/index.php
PHYLIP- es un paquete gratuito de programas para inferir filogenias.
http://evolution.genetics.washington.edu/phylip.html
PAUP- http://paup.csit.fsu.edu/
MrBayes- http://mrbayes.sourceforge.net/
http://www.asm.org/
Acerca de ASM
La Sociedad Americana de Microbiología es la más antigua en el mundo. La
membresía ha crecido de 59 científicos en 1899 a más de 39.000 miembros,
en 26 disciplinas de especialización microbiológica, además de una división
para los educadores de la microbiología.
Para ser Miembro de pleno derecho está abierta a cualquier persona que esté
interesado en la microbiología y sea titular de al menos un título universitario o
experiencia equivalente en microbiología o un campo relacionado. Muchos
miembros tienen grados avanzados, incluyendo un gran número en nivel de
maestría, PhD, ScD, DrPH y MD. Un estudiante regular matriculado en
microbiología o un campo relacionado es elegible para convertirse en un
miembro de los estudiantes. También hay distintas categorías de membresía
para los becarios posdoctorales y para los científicos de transición en los
primeros años de una carrera.
http://www.msafungi.org/
La Sociedad Micológica de América es una sociedad científica
dedicada al avance de la ciencia de la micología - el estudio
de los hongos de todo tipo, incluidos los hongos setas,
hongos, trufas, hongos, líquenes, patógenos de plantas, y de
importancia médica. Nuestra revista académica Mycologia es
una de las series de los mejores de todo el mundo micológico.
Nuestro boletín bimensual inóculo mantiene a los miembros
al día en las noticias de hongos de todo tipo. Miembros de la
MSA se reúnen anualmente para intercambiar información
sobre todos los aspectos de los hongos.
La sociedad abre sus puertas a nuevos miembros.
● El Viceministerio de Ciencia y Tecnología, Ministerio
de Educación, le apuesta a la realización de acciones
estratégicas para impulsar la investigación científica y
tecnológica, entre otras: i) el “Programa Nacional de Becas
de Doctorado en Ciencias Exactas e Ingenierías”; y
ii) el “Calificador de la Actividad de los Investigadores
Salvadoreños”.
● Cómo estrategia de “formación de capital humano
avanzado para la investigación científica, tecnológica y de
innovación vinculada al desarrollo productivo”, se debería
incorporar el establecimiento de: i) alianzas y de cooperación
con universidades extranjeras para elevar la calidad de las
carreras de ingenierías y de ciencias; ii) programas de
maestrías y de doctorados en la UES de ingenierías y en
ciencias naturales.
● Se necesita el establecimiento de un entorno favorable a la
investigación y la innovación; capacitación de personal
calificado en BIOTECNOLOGÍA; fomentar en el sistema
educativo nacional, la Biotecnología, así como la Nanociencia
y TIC´s; apoyo a la dotación de infraestructura a los centros de
investigación.
● Creación de nuevos centros de investigación; creación de
Centros de Desarrollo Tecnológicos; establecimiento de un
parque tecnológico que incentive la convergencia de la
Biotecnología, Nanotecnología, TIC´s, y otras.
● Identificación y liderazgo de nichos de conocimiento bio y
nano tecnológicos, en los que El Salvador pueda ser referente
en la producción mundial de esos bienes y servicios.
Muchas gracias por
su atención
José Roberto Alegría Coto
www.conacyt.gob.sv
La información sobre Bioinformática Microbiana fue tomada de: B. Estela Castillo, CENTA (Ponencia del 100929)