UNIVERSIDAD DE COSTA RICA ESCUELA DE BIOLOGÍA B-0110. BIOLOGÍA DE LOS ORGANISMOS PRÁCTICA 2 VIRUS Y ORGANISMOS PROCARIÓTICOS Los Virus son entes moleculares que dependen de organismos vivos para reproducirse. Son partículas microscópicas formadas por ácidos nucleicos (ARN o ADN) encapsulados en una cubierta proteica o cápside. No poseen metabolismo propio, utilizan los mecanismos de duplicación de material genético de las células para reproducirse, interfiriendo con el metabolismo normal de las células hospederas, por lo que causan diferentes enfermedades en el ser humano, así como en plantas y animales. Síntomas externos de enfermedades virales en plantas son: clorosis, mosaicos, moteados, necrosis, manchas y anillos, arrollamiento de la hoja, enanismos, tumores, aborto y esterilidad del polen, entre otros. Los Organismos Procarióticos (Dominios Archaea y Bacteria) se caracterizan por ser unicelulares. No poseen un núcleo, ni organelas citoplasmáticas. Las bacterias verdaderas contienen el ADN en un cromosoma que puede ser circular, pero no experimentan el proceso de mitosis, se reproducen por fisión binaria simple. Existen varios grupos de bacterias; entre éstos se hallan parásitos importantes de animales y plantas. En general, los procariotas se pueden separar en bacterias Gram positivas y Gram negativas según la capacidad de sus paredes celulares de absorber tinciones específicas. Las bacterias Gram positivas tienen una capa de peptidoglicanos mayor y se tiñe más fuertemente que las bacterias Gram negativas que tienen una capa más delgada y una membrana lipídica extra, externa a los peptidoglicanos. Las cianobacterias son bacterias gram negativas, fotosintetizadoras, con clorofila, anteriormente llamadas “algas verdes azuladas” y cumplen un papel importante en los ecosistemas como productores primarios y fijadoras de nitrógeno. Se considera como el grupo más importante en la oxigenación atmosférica del Precámbrico OBJETIVO Identificar las principales características, la importancia y los efectos de algunos virus de plantas y de varios organismos procarióticos. MATERIALES Plantas infectadas con virus Leche agria o vinagre casero Muestras de bacterias Gram (+) y Gram (-) Raíces de leguminosas Colonias de Oscillatoria Cápsulas de Spirulina Colonias de Nostoc o Anabaena Zanahoria con colonias bacterianas Cultivos bacteriales de interés médico de diversos tipos Azul de metileno Rojo congo Alcohol acidificado Estereoscopios y microscopios Aceite de inmersión y papel de limpieza de objetivos PROCEDIMIENTO A- VIRUS (DEPENDE DE LA DISPONIBILIDAD DE MATERIAL) Proceda a examinar las diversas plantas mostradas en el laboratorio con infecciones virales y procure tener una buena caracterización de los síntomas visuales de la enfermedad. Describa los principales efectos y modos de transmisión de éstos. Analice el impacto de estas enfermedades sobre las plantas. B- BACTERIAS Fundamentalmente existen tres grupos según su forma: Cocos (las bacterias redondas), bacilos (las alargadas) y espirilos (espiraladas). Los cocos a menudo permanecen unidos después de dividirse y forman agrupaciones características como diplococos, estafilococos (en forma de racimo) y estreptococos (en forma de cadenas). 1. Cocos Coloque una gota de agua en un portaobjetos limpio y agréguele una gota de leche agria o de vinagre. Distribuya el material en el portaobjetos y déjelo secar al aire. También, se puede secar a la llama, manteniendo el portaobjetos a una distancia que permita pasar la mano entre él y la llama. Cuando la preparación se ha secado, agregue una gota de Azul de Metileno, espere 5 minutos y lave cuidadosamente con agua. Deje secar de nuevo. Observe con el objetivo de inmersión las cadenas de bacterias esféricas. Descríbalas y caracterícelas lo mejor que pueda. Revise todas las láminas fijas disponibles. 2. Bacilos Triture tejidos de zanahoria atacados por bacterias y mezcle una pequeña cantidad con una gota de agua en un portaobjetos limpio. Agregue una gota del colorante rojo congo, extienda la mezcla uniformemente y deje secar al aire sin calentarla. Lave con alcohol acidificado dejándolo caer gota a gota sobre el portaobjetos inclinado; esto cambia el color de la preparación de rojo a azul. Deje secar el alcohol y observe con el objetivo de inmersión. Haga ilustraciones de lo que observa. Repita el procedimiento con material de nódulos de raíces de leguminosas. Revise todas las láminas fijas disponibles. 3- Espirilos Revise todas las láminas fijas con este tipo de bacterias. 4- Cianobacterias: Son organismos procarióticos fotosintéticos que poseen clorofila, carotenoides y los pigmentos acuosolubles ficocianina (azul) y ficoeritrina (rojo), llamados comúnmente ficobilinas. i- Nostoc o Anabaena. Haga una preparación con una pequeña cantidad de Nostoc o Anabaena en un portaobjetos con una gota de agua. Cúbrala con un cubreobjetos y observe en alto poder. Haga todas las observaciones y anotaciones que considere convenientes. ii. Oscillatoria o Spirulina. Repita el procedimiento anterior con una pequeña cantidad de estos géneros y observe el movimiento característico de las colonias. 5- Nódulos bacterianos de Rhizobium: Revise raíces de plantas de leguminosas y observe forma, tamaño, color, ubicación y número de nódulos. Fig. 1 Formas principales de las bacterias
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