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MACROPROCESO DE APOYO
PROCESO GESTION APOYO ACADEMICO
GUIA DE PRACTICA
CODIGO: AAAr051
VERSION: 4
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Luz Nancy Mateus Vargas
[email protected]
•
../ Protector naso bucal .
../ Bata manga larga, cerrada en color blanco .
../ Zapato cerrado en suela antideslizante
../ Pantalón largo (holgado)
../ Gorro desechable (cabello recogido)
../ Gafas de laboratorio
../ Guantes de vinilo o nitrilo
El uso de dispositivos electrónicos está limitado a la actividad académica que se esté
PERMEABILIDAD DE LA MEMBRANA CELULAR
Reconocer aspectos de la fi
a de la membrana celular
Establecer los fenómenos de difusión, osmosis y plasmólisis y sus características
Analizar algunas variables que afectan los procesos que se llevan a cabo en la membrana
celular
La célula, para llevar al cabo sus funciones vitales, requiere de un intercambio constante de
materia y energía con su entorno. Para esto, las moléculas, requieren atravesar la membrana que
la recubre.
La membrana plasmática, por el tipo de moléculas que la componen, es de naturaleza no polar.
Las moléculas no polares tendrán libre paso a través de ella, dependiendo de su grado de
solubilidad en lípidos y de su tamaño; a mayor liposolubilidad, la penetración es más rápida. Una
molécula debe satisfacer dos condiciones para difundir al interior de una célula a través de la
membrana plasmática: debe estar presente en concentración más elevada fuera de la célula, y la
membrana debe ser permeable a ella. Una membrana puede ser permeable a un soluto
determinado porque pasa directamente a través de la bicapa de lípidos, o porque es capaz de
atravesar un poro situado en el espesor de la membrana que impide el contacto del soluto con las
moléculas lipídicas de la bicapa.
Otro factor que determina la velocidad de penetración de un compuesto a través de una
membrana, es su tamaño. Las moléculas de menor tamaño tienden a penetrar en la bicapa de
lípidos de una membrana con mayor rapidez en comparación con la molécula más grande. Las
moléculas de agua se desplazan con mucha mayor rapidez a través de una membrana celular que
los iones y pequeños solutos polares comúnmente presentes en las células. Debido a esta
diferencia de
ilidad del
con solutos
dice
las membranas
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de precipitados 1, 2 Y 3.
Deja transcurrir 10 minutos. Después de este tiempo extrae los pedazos de papa de los vasos
de precipitados, retira el clip y el exceso de agua y pésalos uno por uno en la balanza
granataria electrónica.
Repite la operación cada 10 minutos durante 1 hora. NOTA: Es importante que los cilindros de
papa queden totalmente sumergidos en las soluciones de cloruro de sodio yagua destilada.
Registra los datos en una tabla.
Después de haber tomado los datos durante 1 hora, saca los cilindros de papa y realiza cortes
transversales de cada uno de ellos. Obsérvalos al microscopio con el objetivo de 10x. Para
observarlos mejor puedes agregar una gota de colorante safranina o azul de metileno. Elabora
dibujos de lo que observaste y anota tus resultados.
2. Observación de osmosis en huevo
• Afloja la cascara del huevo dando golpes suaves en la zona de la cámara de aire (zona más
ancha)
• Retirar parte de la cascara realizando un orificio sin romper la membrana interna (tcrn"
mínimo)
• Con un alfiler en el otro extremo punzar el huevo atravesando la cascara y la membrana
• Extraer el alfiler
• Colocar el huevo en un vaso desechable de manera que la parte sin cascara quede abajo y el
orificio de alfiler hacia arriba
• Llenar el vaso con agua hasta la mitad del huevo
• Realizar observaciones cada 10 minutos durante una hora
• Realizar las anotaciones
3. Efecto de los factores ambientales sobre la permeabilidad celular
• Con anterioridad realice corte de varios trozos de remolacha de aproximadamente tcm",
lávelos en un vaso de precipitado para remover el pigmento de las células dañadas en el
corte. Realice varios lavados hasta que deje de salir pigmento, divídalos en tres grupos y
congele uno de ellos hasta el día del laboratorio.
• En el laboratorio marque 3 tubos de ensayo: 1, 2 Y 3.
• En el tubo 1 coloque tres o cuatro bloquecitos de remolacha, adicione 2 mi de agua destilada
hasta cubrirlos y caliéntelo controlando la temperatura con un termómetro hasta el momento
en que comience a salir el pigmento
• En el tubo 2 coloque igual cantidad de remolacha congelada y cubra con 2 mi de agua
destilada
• En el tubo 3 deje los bloques de remolacha en 2 mi de agua destilada al medio ambiente
• Después de 20 minutos registre los cambios observados en cada tubo y explique los
resultados
4. Determinación de la concentración osmótica celular
• Coloque al lado izquierdo de una lámina portaobjetos una gota de solución de sacarosa al
10% Y sobre esta una hoja de Elodea
• Luego cubra el montaje con una laminilla (si es necesario complete el volumen del líquido con
la solución
• Aliado derecho de la misma lamina coloque una gota de agua de acuario (o grifo) y otra hoja
de elodea de tamaño semejante a la primera (no permita que se sequen los montajes)
• Observe al microscopio 20 células, preferiblemente ubicadas en el ápice de la hoja, determine
si se presenta plasmólisis en algunas de ellas y anote el tiempo transcurrido entre el montaje
de la preparación y la iniciación de la plasmólisis (se consideran la producción de plasmólisis,
cuando el 50% de las células están deshidratadas, compare con el montaje de control, realice
la observación de cada montaje mínimo por 5min)
• Elabore esquemas de lo observado con el objetivo de 40x
• Repita el procedimiento con las soluciones restantes de sacarosa (20% y 30%) Y compárelas
con las concentraciones de solución de NaCI.
• Tabule la información obtenida e indique las concentraciones hiposmotica, hiperosmotica e
iso-osmotica.
5. Diálisis
• Tome un vaso de precipitado y caliente 30 mi de agua
• En dos vaso desechables coloque los 30 mi de agua caliente y en el otro 30 mi de agua fría
• En cada uno de los vasos dele caer una gota de tinta china
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su mayor parte por fosfolípidos.
~ Tamaño: La mayor parte de las moléculas de gran tamaño no pasan a través de la membrana.
Sólo un pequeño número de moléculas no polares de pequeño tamaño pueden atravesar la
capa de fosfolípidos.
~ Carga: Las moléculas cargadas y los iones no pueden pasar, en condiciones normales, a
través de la membrana. Algunas sustancias cargadas pueden pasar los canales proteicos o
con la ayuda de una proteína transportadora.
4
1
1
1
3
Balanza
1
mi
50
mi
50
mi
50
mi
50
mi
1
10%
Solución de sacarosa
20%
Solución de sacarosa
30%
1
2
Pipetas Pasteur o
oteros
4
Vasos desechables
Safranina
1
Papa grande
Beaker de 100 mi
10
•
•
•
•
En el vaso 3 agrega 50 mi de
disolución de NaCI al 20%
Obtén 3 cilindros de papa con el
cuchillo.
Corta los extremos de los cilindros
hasta obtener pedazos de papa con
la misma masa (peso).
Extiende un clip e introdúcelo por
uno de los extremos de la papa
cuidando que atraviese la papa en
línea recta hasta que salga por el
otro extremo (ver imagen 1).
Sumerge los 3 cilindros de papa con
los el
atravesados, en los vasos
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semipermeables. El agua se mueve rápidamente a través de una membrana semipermeable desde
una región de baja concentración hasta otra de alta concentración de soluto. Este proceso se
denomina ósmosis y puede demostrarse fácilmente colocando la célula en una solución con una
concentración de soluto diferente de la presente en el interior de ella. Cuando se colocan las
células en una solución con una concentración salina similar a la de su medio (isotónica), la
concentración de agua permanece constante dentro y fuera de la célula, por lo que su volumen y
forma no se alteran. Los eritrocitos humanos pueden conservarse por largos periodos en una
solución de cloruro de sodio al 0.9% sin presentar alteración ni hemólisis. Cuando las células son
colocadas en soluciones de menor concentración de soluto que la propia (hipotónicas), el agua
tiende a pasar hacia donde está la mayor concentración, dando lugar a que las células se hinchen.
Por otra parte, cuando se colocan en soluciones de mayor concentración de soluto que la de ellas
(hipertónicas), el agua tiende a salir ocasionando la contracción celular.
En las células vegetales, la presencia de una pared celular rígida, les ayuda a evitar un incremento
excesivo de volumen ante soluciones hipotónicas, sin embargo, en soluciones hipertónicas, sí se
puede apreciar la contracción del citoplasma por la pérdida de agua.
ÓSMOSIS
E~ un proceso físico-químico que hace referencia al pasaje de un disolvente, entre dos
disoluciones que están separadas por una membrana con características de semipermeabilidad.
Estas disoluciones poseen diferente concentración.
Presión osmótica: Es provocada por solutos de mayor tamaño que el poro, que al no poder pasar
la membrana van a generar un gradiente de concentración que va a arrastrar agua para igualar las
concentraciones a ambos lados de la membrana. Este principio es el que se utiliza principalmente
en la diálisis peritoneal,
La cantidad de solutos que se transfieran va a depender de estos factores:
· La cantidad de líquido que se ultrafiltre
· La concentración de soluto en el disolvente
· Las propiedades de la membrana
DIÁLISIS
Es el método de separación liquido-liquido, similar a la ósmosis, porque son dos líquidos de
diferente concentración separados por una membrana semipermeable en el que la solución más
concentrada atraviesa la membrana para diluirse con la menos concentrada y así estar ambas
concentraciones con la misma concentración.
La diálisis es el proceso de extracción de los productos de desechos y del exceso de agua en el
cuerpo. Hay dos métodos de diálisis: la hemodiálisis y la diálisis peritoneal.
En la hemodiálisis se extrae la sangre del cuerpo y se bombea al interior de un aparato que filtra
las sustancias toxicas, devolviendo a la persona la sangre purificada. La cantidad de líquidos
devueltos se pueden ajustar.
En la diálisis peritoneal se infunde dentro de la cavidad abdominal un líquido que contiene una
mezcla específica de glucosa y sales que arrastra las sustancias toxicas de los tejidos. Luego se
extrae el líquido y se desecha.
Diferencia entre Ósmosis y Diálisis: La ósmosis es el paso de las moléculas de disolventes a
través de la membrana, de un lugar menos concentrado a otro más concentrado. La diálisis es la
transferencia de disolventes a través de una membrana semipermeable de un lugar más
concentrado a otro menos concentrado.
La permeabilidad de las membranas es la facilidad de las moléculas para atravesarla. Esto
depende principalmente de la carga eléctrica y, en menor medida, de la masa molar de la
molécula. Pequeñas moléculas y moléculas con carga eléctrica neutra pasan la membrana más
fácilmente que elementos cargados eléctricamente y moléculas grandes. La membrana es
selectiva, lo que significa que permite la entrada de unas moléculas y restringe la de otras. La
permeabilidad depende de los siguientes factores:
~ Solubilidad en los lipidos: Las sustancias que se disuelven en
hi
con facilidad en la membrana dado
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Observe y tome el tiempo que tardan las gotas en diluirse en el agua
Registre sus observaciones
6. Montaje uvas pasas
• Tome 5 uvas pasas y colóquelas en un vaso desechable con agua
• Realice observaciones cada hora durante las siguientes 24 horas
• Registre sus observaciones
7. Permeabilidad de la membrana
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•
•
•
Tome un huevo
Colóquelo en un frasco de vidrio
Llena el frasco con vinagre hasta que cubra el huevo
Realice observaciones diarias durante una semana
Registre sus observaciones
1.
produce el calentamiento o congelación sobre las membranas celulares?
2. ¿Cuál fue la temperatura critica en el calentamiento de las células de remolacha?
3. ¿Cuántos centímetros subió el líquido en la columna del osmómetro y en qué tiempo?
4.
¿En qué momento dejara de subir el líquido por la columna del osmómetro?
5. ¿Qué concentración de sacarosa es iso-osmotica con respecto a las células de Elodea? Y
¿En cuál se comenzó a ver la plasmólisis?
6. En el montaje de la diálisis, analice si ambas sustancias pasaron a través de la membrana
hacia el exterior o si alguna fue retenida y ¿Por qué la razón?
7. ¿Qué proceso físico tiene lugar cuando se pigmenta el agua donde se encuentra la
8.
remolacha?
ué 40... ,..,.,.. .....
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PANIAGUA, R. Biología celular. McGraw HiIIlnteramericana. España. Tercera edición. 2007.
GONZALEZ, T. Prácticas de laboratorio: Biología celular. Notas de Clase. Universidad Nacional
de Colombia. 2004.
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BERNAL, O. Manual de guías de laboratorio de Biología celular y molecular. Universidad de
Ciencias
Ambientales "U.O.C.A". 2000.
JEFE DE APOYO
ACADEMICO
Solicitante:
Cargo: Docente
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