XXIII CONGRESO NACIONAL DE , MICROBIOLOGIA SEM 11-14 JULIO-2011 SALAMANCA COM ITE CIENTIFICO XXIII SEM SEM XXIII SALAMANCA CONGRESO SOCIEDAD ESPANOLA DE MICROBIOLOGiA Enriqueta Arias Juan Jose Borrego Francisco Javier Carballo Ernesto Garcia Jose Antonio Gil Tomas Gonzalez Villa Ricardo Guerrero Jorge Lalucat Montserrat Ll agostera German Larriba Ana Ma Martin Jose Pedro Martinez Jose Antonio Miron Maria Molina Juan Luis Munoz Jesus Murillo Amparo Querol Jose Luis Revuelta Asuncion de los Rios Luis Rodriguez Carlos Rodriguez-Vazquez de Aldama Yo landa Sanchez Eulogio Valentin Antonio Ventosa Miguel Vinas P.14. Hongos filamentosos y levaduras HL P 42 Es tud io do 13 felacion fu nc ional cntrc las proleinas le lraspan Ooilp, Oni2p y Prmlp e n cl proeeso de eonJug3cio n de SchlzoS.lcch;Jromycos pombo ~. M.R. Shanfmoghad3m , N . De Leon, M. Hoya, C. Ooneel, J.A. Cle mente· Ramos. E. Calpena , M.H . Valdivieso . [email protected] s. Depat1amenlo de lWl:fobiologia y Gcnelical lBFG Univcrsldad de SalamancaJCSIC. Dnilp, Dn l2p y Prmlp son proteinas COil cualro dominlos Imnsmcmbranll (tolm sp:'!n) de Schilosaccharomyces pDmoo cuya expresi6n 50 indu ce dlm:Jnlo Hl P 44 Isolation and analysis of Iip2 g ene from Trichod erma han./anum Vaz M'. Belo. H' . Jorge. l. u, Gonzalez, F. ' . Monte, E. l and ChoupI" a. A. 11 Ema it: [email protected] 'Instllulo Politecnico de Braganr;a. Escola Supenor Agrtll1a, Campus de Santa Apol6nia. Ap.artado 1172, 5301·854 Braganr;;a, Portuga l. 'eIMO- Centro de Invos tiga~o de Mootanha, Cam pus de Santa Apolonia. Ap.a rtado 1172, 5301· 854 Bra9811~a. Portugal. 'Departamento de Mocroboologia y Genetica . Universidad de Satamanca. Plaza Doclores dB Ia Roina $In, 37007 Sa llllllanC<l. Spa in. 'Cen tro de Invest;ga oon det Cancor. Camp us Miguel de Unamuno J7007 Salamanca. Spain. al proeaso de conjugac.cm. Adem<is, On;1p y Dni2p comparl!!n con l.ls cl audinllS 18 presencia (Ie unas cisleinas en posicioncs conservadas del prim er dominic 1!~lracc lu lar. Las Ires prolein as 51! localizan en un subdominto conCl'I:lto de fa membrana plasmatiC<!, en la zona de conlaclo urllm los p;;Jren lokls QUO osl~n conjugando. Dnilp y Dn i2p coloca lizan Dnilp no 5 (1 localiza correclam(lnle en un mutanle dm"2 y Dni2p no S6 lucallza corroctarnon ll) (In un mu tanl(l dnil . 10 que su giere que Dni l p y Dni2p forman un complejo. La 10cal lzac06 n de Prrnlp es in dependiente du Onilp y On i2p, y viceversa . La au so ncia de Dnilp. de Dn i2P. 0 de amba~ proteinas cond uce 1:1 un defeclo en la fu si6n celu lar durante la co njugacion que sO lo se manil iesta a ternparatura s medio·altas . La au sencia de Prm lp produce un dcfucto en 10 fusi6 n cclular drlls ti oo a CliillQuior lumpuratum. Un anillisi s al microscopio electr6n ico ha d emoslra do qU (l en los mutantes dnil l . dnil dni2 y prml hay una grave desonJemzaoon de Is membrana ptasm;itica y de ta pared cel ular en Is zon a de conta CIO entm los p.arcntakls. La sobreexpresiOn del gen dnil' os lelll!. y esla Ictalida d so aoomparla por la presencia de gran des invilginaciones IIfl la membrana plasm.~lica. La sobreexpresi6n de dni2' 0 de prm" no causa defoclos en las cl!lulas. pcro la sobreexpresn'Jn de dm 1" en mulantos dl,;21 0 prm li no es lellli porq ue Dni l p no sa Iocaliza en la membrana plasmlllica. Fin almonto, se han rcalizado ,malisis geneticos y se ha delerm;nado quo Onilp y Om2p acluan en la mlsma ruta funcional. miontras Que Prmlp aclva en una .ula diforonlo. Trichoderma spp. covers a group of fungi extremely co mm Oll ill so ils 01 al l climat;c areas. These fung i arc efficient en zyme producers. WIth industrial applica tions, or in nat ure, involved in tho degradation of tM co il Wil li of the phytopathogens as we ll as in Iho degradati on of other fungi . organic matter an d nutrien ls secreled by roots TrichOderma st ra in s produce eX1raceliular enzym es and ant ibiot ics with anlifungal eHects. mainly T. hi.lrzianum, T. virens and T. viride. being by this way used as biocontrol agents. Among the degradation enzyme s of the cell walls we find ~-1.3 and ~-1 ,6 glucanases, d\itinasos and prot oases. Lipases cou ld also be in~olved in enzymatic a cti~ity re lated with bio control . This work mten tion was the isol ation and study ef th a lip2 gene from T hanianum. lip2 gene was cloned in an expres sion system, uSlIl[l the pET -2BfI(.) vector. and \he e~pression evalua tion of \he lip2 protein wa s made In a SOS·PAGE gel at dillerent inductioo times . The obtained results in the cloning showed a 6564 bp band Indicating IM t lhe d oning was well succeeded. The protein expression was venl ied al 8 hours of Induction by the presence of a band With an eslimaled molecular weigh! of 44 kDa. in a SOS-PAGE gel. Benitoz. T .• 01 aI., Bioconlrol mlK:hanisms 01 Trichode/ma stra ins 200<1. International Microbiology. 7:249-260 Harman. G.E. Overview of mechanism s and uses 01 Trichoderma spp. 2006. Phytopathology, 96: 190·194 . Monle. E. Understanding Trichoderma: be ...·lC en blotectmology and microbial ecoIo9 ~. 2001. International of Microbiology, 4 : 1-4. Acknowledgements : The Projecl COM8ATIN TAJSP2.Pl1102 intelle g IliA Cross-Borde r Coope ral ion Spain-Portugal. financed by Th(l Europ ean Re giona l Development Fund, and th e Projtlct -ldenllfi C<ltion, characterization and role of mOlecular factors associated with the mechani sms of inflJ ctlOll or F/lgaceae sp<!cies by Phytophthora cmnamomr (P TOCIAGR-AAMl676 2BI20D6) FCT, supported this worK HL P43 El Dominic C NH de Rgflp (GEF d!l Rholp en pombe) C!i nccesario para su funcien en NETO Sc/1ilos~cch~romyces HL P45 Characterintion or a g luc;:rna se Inhibitor protllin Phyfophfhor3 c;nnamomi involved in planl defenSI! responses from (New End Take Off) Sora MuflOl., ElVIra ManJ6n. Patricia Garcia y Yolanda Sanchez. InslllulO do B lOlogia funu onal y GenOmica. CSIClUOIversidad de Salamanca aud Quparla Oll!nlo do Mio obiologia y Genetics, Unlvef5idad da Sala maoca. E mall: [email protected] s En levaduras. la GTPasa Rho tp regula I.. in togridad colubr OOQfOmando Ia disposicibn del cilocsquelelu de achna y microliJbulos con Ia 5ecre06n y la biosinlesls de la parcd celular en las zonar. de cfIlcimicnto. Nosol ros eslamos estudiando los prindpales actlvadores de Rholp (Rg l1 p, Rgl2p y Rg13 ) en S. pombe. Los Ires purte ne<:l!n a la faml"a de proteinas GEF {guanine nuclOOllde !!xchange !actors) !ju e actiJan mod~iC<lnde 01estado dB uni6n a nucl06hdo de Is GTPasa y de es te modo inlluenciiln &llocatizaci6n y su activaciOn . RglIl> actlva a Ia GTPasa Rholp durante c l crecimientc poiarizado y pa.ticip a al mono s on Ires proccsos diferenles: la sintesis do la pored celular. el mantl.lnimi ento (11.1 ia in tcgridad ce lular y el crecimienlo r)(}~1rizado (1) . Ftg fl P us una protelna con cuatro dominios allamenle conserva dos : DEP (DI s h e ~e l l ed . Eg l- l 0 y Plecksln n), OH (Obi Homology), PH (P lekstrin Homology) y CNH (C itron Kinasu Homology ). De ellos solo se conoce la co nt.ibuci6n dal domlnlo DH-PH qUI.l as ase ncia l para su lunci6n calalilic1:l. Nosotros homos obtc nido mutantes en cada UIlO de los dom inios de la prolelna y hl.lmos vista qul.l el dominio CNH que esla pfI! S01ll1.l en protelna s dl.l serlali zaCl6n como NIK y citr6n kinasas , os esencial para la localizaCl 6n dl.l la ploloina on el polo nuevo de crecimienlo. Las cl<lular. Que careccn da los ulti rno ~ t6 5 aminoacidos (8a) son mormpoiares igu al que la cep a rgfl sin embargo Il dil arencia del mulanle nub que mu estra un 30% de li sis. esta s c~ lulas no pierclen 103 integnd ad. Hemos realizado mutag ~ne6'6 par PCR dcgenara tJ lI dal oxtrema C-termin al y hem:Js VIsto (IUa la cl;mlno ci6n do los iJlllmos J.4 aa produce cekrla s Incapaces de activar 01 crecimienlO por el polo nuovo. EI domlllio OE P tambtCn es importanle en 103 locailldCl6n de Rgf lp puc slo Que la deleclon parcial de este dornmio libCfa ta mayor parte de Ia proteina Rgllp de los palos y la cencenlra en cI nucleo. Tanto en los mutantes oblenodos on 01 dominio C NH como los oblenldos ell al dominic OEP. las drferonclas on la 10caliza06n son debidas exclu5'Vamellta a 10 pcrdidll del ancla]e a la mombrana do tas proleinas metadas 0 a la lalta de interaccion con ouas proteinas , puOSlo que la canlldad de R911 -CNH y Rg lI-OEP ItS similar a Ia cantidad de Rgl1p SIlvestre. (1 ) GARCIA , P., et al. -The Rholp exchangl! factor Rgllp signals upstroam from the Pmk 1 mitogen-actIVated prolein klnaso pOlhway In fiss ion yeasI' 2009 Mol Bioi Cell. 20: 721 ·73 1 Martons I.tA t . , . Martins . F '. Bolo. H.', Vaz, M.' and Cl lOuplna. A.'J e ·mail: [email protected] ' Instil ulo Pohtc cnico de Braganr;;a, Escola Superior AgraM, Cllmpus de Santa ApoIOnia. Ap.artado 1172, 5301 -854 Braganr;:a, Port ugal. :CIMO- Centro de tnvc stigar;:oo de Montanha. Campus de Santa ApolOnia. Apartado , 172. 530 1· 85-1 Braganr;a . Portugal. Oomycelos from the genus Phylophlhosa ille fungus·tiko plant p.athogans thai are devastating l or agricullure and nlltmal ecosyste ms . Oue 10 thelf partIcular phy siological characleristics, no cll iclllnitrealmonls agalnsl dIseases caused by th ese microOf!janisms are presently availabkl . To develop such treal ments. " appears essenlial to dissect the molecula r IIlllchllnism s that dll tcrminl.l the inleraction ootween Phytopflthora species and host pla nts. One of the mos t widely distributed Phytopi lihora specie. with nearty 1000 host species is Phylopllillora cinnamomi. Thi s path oga n is ablo to sl!c fllle a glucanaso inhibitor prote in (GIP) H\a t inhibit the actNlty 0/ endoglucanases (EGases ). involved in plant delon se respon ses , in clu ding dunng the pla nt infection proce ss of Castanea safiva Mill by P. clnnamomi. In Ihis work we report the seq uencing and chara Clarizalion of a cla ss of glucanase inhibitor protein s secre ted by P. cinnamomi. T he gip gene Irom P cinnamomi has a lotal length of 1301 bp com prising a 9dO bp ORF witch encodes a 313 aa protein. In order to unders tllnd Its lunctlon gene e~ore sslon was stUdied during growth in diflerent carbon sources (g lucos e. cellulose and sa wdu st), by RT'QPCR and a lime course 01 GIP produ ction wa s achieved Analysis of homologous e~pressi()I\ (in P . cinnamomf) and heterokl gous expression (i n Picilia pasloris), was atso perlonnud. Wo also [(!port lunction gen e expression if! vrro at differenl time s ol lnleclion of C. salwa roots wiltl the lungus. These and other resu!!s will be presenled. Heln. I., el al.. The zlg ·zag·zig on oomywtc-planl mteraCllons. 2009, Moleculal PLanl Pa thology, 10(4 ): 547 -562. Kamoun. S., A catalogue of the effector socrolome 01 ptant pathogen ic oomyceles. 2006 Annual Revlllw Phytop.alhologll;;a l, 44 (1 0): 4t -60. Acknowledgements: The Projects COM8ATtN TAlSP2 .Pt l /02 Inlerreg lilA Cross·Border Cooperation Spain-Ponugal. linanced by The E uropean RegIonal Oevelopment Fund. and - Idenl~ication , ctoardclerizahOn and 1010 01 mOlocular fa ctors associated with tho mechanISms 01 ''''action 01 Fagacelle specios by Phylophlhora cinnamomr (PT DCIAGR-AAI>N6762812006) FCT. supPOrled th,s work . 147 P.14. Hongos filamentosos y levaduras H L P46 MOLECULAR METHODS f OR IIlE NTIFICAI ION OF PATHOGENIC FACt ORS IN PHVTOPHrlfORA CINNA.\ 101.I/ Chounina A.1.l, Martins, F'., Vaz, M'" Dominguez, A .3 and Martins, I.M.' I , email: albracho@ipb .p! "n,tltulo poIitccnico de 8 raganr,;a, csoola superior agraria , campus de santa apol6nia, l CilTlQ' centro de Invesligar;Ao de mon tanha , campus do Santa Apol6nia. 1172. 5301.85 4 Braganlta, PortlJgal 'Oepartamento de Microbiologia ~ Genetlca, Universidad de Salamanca.Sala m,mca, Spain Th!,! cullu re 01 Ihe ch csll1ul tree Is extremely import;:ml in tim northern re y,on 01 Porlugal, (It;CUpymg a signific;ml proportion of useful ilgricultural oren. Ihe an nual (Ivo ra go chestnu t product ion in Porlug al can reach 20 000 ton s. naw plantatio n areilS have increaSlld if\ 11'11 lasl few dllcadlls. however Ihe ink dise ase CilUSOU by th ll oomycete Pllylophtllora r;in namomi has damago and killed many trllllS and up to now no concrele solutions hav e be an oUorod 10 control th o illnoss. thll oornyceles form a phylogenelically di stin ct group 01 oukaryoti c mi cro-org anisms that in eiudes some of the most notoriou s patll oae ns 01 plants. among IIroso, member.; of the aenus Pilyfoplilliora COlu se enormous economic 10s!;!ls on crop species as well as environ menta l dama ga in notural acosysterns. P. cinnamomi is the most 'Nidely distributed Pliyfoplrlliora s~c ie s, wilh naarly tO~D hos l Spi:cies fungicides raraly con trol them an d the few anli-oomycete produ cts aro OHOfl overcome by resis tant p3lhogen varia nlS. Ihere are no eradicallon melhods aVllllabt!;l to coml:la t those species. Oomyc eles spec ies can manipul<lte biochemical and phYSiolog ical processes in their host plants th rough a divarse array of v,rulonce or avirulen ce molecules, kn own as effectors. in suscapt iblo plants, these elfectors promote infection by suppressing delense responses. ~nhancing suscepliblilly, Of inducing disea se symptoms. Alterna tively, in resistant plants, ellectotS are recognized by the products of plant resistance genes, result ing in host cull death and eliectlVe defense responses known a~ the hypersensitive response (hI) We ....e idCfltiliOO and d .aracteri.zed some proteins involved in mechanisms 01 inlectl()t. by P. cinnamami: end o- l,3·betaillucanase (cornplele cd,), exoglueanase (partial cds); glucanase inhibitOf protein (gip) (complele cds); phytophthora prolein 1 (nppl) (complelO CdS ), necrosit;-lnducing IHlnsglutaminase, under the projecls id entification, ch aracterization and role molecula r faclors assooa led wi lh the mechanisms of infection of fagaceae species by P. doni/momi, p1(l d agr-aarn/6762Srm06, fund in g by fct; combating by molecolar methods 10 ink-<lisease 01 ch estnul and othe r regional CUIlUICS, Combalinla/sp2.pl 1102 . Inlerreg ilia, funding hy Fed"r, among olhers. Se veral l ec ~lIIo l ogies , surn reverse Iran sCli plase per, in VII'O (!xprossio n lechnology. ar'tu bioin forrnatics toolS have been used to sludy the expressio n 01 sc tec tod genes from fungi during infection. In th is work we in tend to in teg ra le Ihe necessary bi olnf ormatics lools Ihat WSfe used in Ihis invesli galion. These too ls include th e usc of databa ses and associalud homo lQgy programs a~ Fas la and Clu stal, lind several programs for suquence ana lyS iS lind (I e~ign of e~pe tlm e nt s such PCR. 0' HL P48 Idcnlificacion m Olecu lar de hvngos produ eloros de miC:Ol oJeinas en c:ulliyos de maj~ Iransgimico y convenclonal on Es pa i\a Arias, 11.1.1, Farinos_ G. P. l , Patino, B.2 e-mail: [email protected] es 1 Departamento de Biolog ia Medioambicntal, Centro de Investigaciones Biol6gicas, CStC. Rarni,o de Maeltu 9, 28040 Madli<!. 2 Departamento de Microbiolog ia lit. Facu ltad de CienclIIs BioIOglcas , Univel sidad Complutense de Madnu . Jose Antooio Novais 2, 28040 Madrid. La contaminaoon de cllltivos de mai z por hongos proouctores de mlCOtox~.a s es un problema que afecla principalmenle a la sa lud pUblica, pel O taml:li(!n causa pl'l rdidas en la agriCllllura . en la illdustria de ltansform aet6n de sus productos y en la ganadmia. La identificacion de las espcc ios hingic.1S implicad as y su dislribuci6n geog r<llica y climfllica nos permite predeci r el eslabl ecimillnlo de delerminadas especies y el riesgo potencial de con tam inaci6n con toxinas de esle al irn ento. Uno de los prin cipa los g{meros hingicos loxigenos que alecta al m.1l ~ duran lo III etap a de placo sBcha es Fusarium sp p., predudor de lumonisinas y tricotecenos, entra Olras tox ina s Desde 1998 en Espaiia se cul tlva comerci alm ellte un malz modificado gcnclicamenle que exp resa la loxina CrylAb de Ba cillus thu~ngien sis (malz St). Estemail es resistente ado s especies de lopid6pteros que son imporlantes plagas del cu ltivo: los taladros Sesamia nonagrioldes y Ostnn ia nubilalis. EI dal'lo prOOucido po r estos insactos es un factor quo puede pre disponor a la contaminaci6n pm mico toxinllS. ya quO producen heridas que favorcccn Ia colonizaci6n por Fusarium. POt ella, uno de los posiblos beneficles indircctos du la adopciOn del fllai~ Bt podr;a ser la reduceoCn de las conCCfl tracioncs de micotoxinas, al rOOucirse el nivel de dal'lo producido por estas pl1l9as. EI objO tlVO de esle estudio es compasar las especoes de hongos productores de mlcotoxinas presentes en mazorcas procedentes de ca mpos comerciales de maiz Bt y no Bt do distinlas zonas geogralicas ue Espana. Las mazorcas se rocogieron justo antes de la rccoleccl6n del maiz. Una VOl procesadas las muestl3s, la idenli/icacion ue los hongos se rea lizo mediante mclodos rnolect.llares, ulilizando ccba!!Ofes y protocolos espeei/icos de PCR dlsel'lados en nuestro laboratorio Se han anali~ado 16 especies de lIon9OS pertenecientcs a los g6neros Fusarium y Asperg illus, habiCndose dl!ll!dado ufliCflmente hasta el momento F verticililoides, F. prolileralum, F. subglutinans, F. gramlnearum, Asperg illus flavus y A. niger. con algunas ~,;rere n c,as de frecuencia de aporici6n dll cspecies en tre el mail transgcnic:o y el corlVen cional. Esta investigaci6n h.1 sido financiada por el MICINN a lravc s del proyecto AG L2009·0 8B113 HL P47 La o llgomclizacion de ells3 en la regu la cion de la si n les;s de q ullln1l en S1Iceharomyces cerevisisae HL P49 Alteraciones l enolipicas, Iran s~ripcional ll$ y en rula s de , eflalizaeion del mutante de g lic osilaeion mnrr9.o. de Candida albkans SIIr:rislfm C Arcones, I., Ronooro, C. e-mail: csacris@usa\.es DeparUlmenlO de ' Aicrobiologia y Genctlca , IBFG (UOIvcrsidad SalamancalCSIC). {: iv,r.ns c .· Duriin, l.; L6pe~ , M.C; Dominguez, A. [email protected] Departamento de Microbiologia y GenehG>l, CIETUS, IBFGlCSIC, UniverslCfad de Sal<lmanca . du Chs 3 us la principat quilin sintasa de Saccharomyces cerovISl(le. Es una protelna con vatlos dominlos trans membrana que roqulel e de una sene de prol ein as acccsorias a 10 largo de la nIta de seaee,6n para su lIegada a la membrana plasmatica (MP) en una con form adOn ac Uva Mediant e ensayos de do~ hihri(loS dsspu/i s co nT,rmad os mediante Inmunoprecipi la ci6 n hemos dumostrado quu Chs3 forma oTig6rneros. La intera cc l6n pro te i ~a su produce a Iraves del extrema N·terminol de 10 prot[Jim. y poracen se r impre scin dibles los primeros 125 ami n o~'.Icidos de Iii mi sma. La forma truncada de 101 proleina en 105 primeros 125 am inoaeidos ( 126-Chs3) prusl.!l1ta una mayor rete nci6n un el reticulo undeplasrn ico (RE), sugiriend o qu e la co rrecta ol i go m e ri~aci6n de Cns3 es necus!lria para la sa lida cfi ~io nl e del mi smo. La so breexpres i6n de Chs7, 10 chaperona uspecilica de CIo s3, alivia la re tenci on obsltNada Itn et RE , permitiendo la Ilegada de la prot ltin a 126·ChsJ a la MP. Una vet qu e 126-Chs3 Ilega a 10 MP es eopaz de promove r la s;n tesis de quitlna hasta n,veles silveslres. Sill embargo, la proteina trunc ada se endoei la defi cien temen te 10 que promueve su acumula ei6n IInormal en la MP que va acomparlada de su redistribuclon a 10 largo de la misma, reduclMdosa su acumulac i6n en 01 cuello . En su conjull to, estos resullados permltcn reeoncitiar la resi~ te ncia a ca lee fluor de la cepa 126·Chs3 con la mayor !:Icumulaci6n de osta prOle ina en la MP y la mayor canlidad de CSIII. Por L<1 nto, la 0Ii!i OfnBn~acI6n de Chs3 es nocesaria tan to para el corre<:to empa!juc tam,c nlo de 10 protcina en vesiCU las de tipo COPIt que Ie permltan salir del RE, corne para garantilar su correcto reciclado endocitico un!! vez 1I0goda II Ie MP. Estos datos lelucrzon 10 irllpurtanciil del c.orrecto plegamlento protelco de las qui\in sintasas en la regul<lcion de la biosintesis de quillna en hongos, en este caso directamente ligado a la f..,n nacron de otigomefos proleicos. La N·glicosilaoon de pmteinas es una moollicaoon que sufren les protelnas dur ante su paso por 10 l uta de secreciOn; muct\8S de elIas seran exporta das a 1.0 superficie celular. En levaduras, Ia lona m<ls Odema de til pered oolutal se enCUCfl lrll enriquecid.o en manoproteinas, las cualcs conshluycn del 30 al 40QIo del PIISO seco de la misma. Tcnlelldo en euen ta quo III fl ared calula r jucga un papel muy irnpo rlanle en procesos como la plasticidad morfel6gica y la adhes,60 y Vlful encia en Candido albir:;ans, al Iratorse (lei primer pun to de co nla clo con el l,uespe d, el estud io de la s alleraciones en mullllltll~ afucta,jos en la N-gli cosll ad6n de prole inas con lribuira a proiu ndiza r en los mecanismos (te d,rerenc ia06n morfolOgic!l y virulcncia de este hong o p<1t6 ge [1 0 oportuni sta de hu man es ·manosi ltrall sfera sa que catal iza Ia EI mulante Camnng carece de una adlclon d e manosas en enlaces J- 1.6 en el Complejo de Golg i, un a ve~ af; auida I" primera man a l nucleo oligosacaridi co de las gliceprOloinfls un este organ ulo. Esto mutante es inca pal de lIeva r II cabo 111 transiClon morfolOgica, presento altefaciol1es en la superficie de la pa red celular y una capac ;dad ue viru lencia alenuada. rcspecto a la cepa paren lal, en un modelo murino de infeccoOn sistemica. Oe los anaiisis de los perfiles globalcs de trallscripcl6n dcl mu ta nte, respecto a Ia cepa pllrcntal. crl?ciendo como levadura a 2S"C, cabo dltstacar la sob ree ~pres i6n de genes relacionados con pnrOO ce lular, quo podria expticalse como una respuesta adaptahva compensatoria y la su buXIJreslOn de genes de biogeneSIs y enS.lmblale de ribosomas y de gltnes l elacionados con las mitoconrJrias. En condICiones de inducci6n de la tolarnentaci6n a J7"C, y entre los genes menos expresados en el muranle, lamblcn se c ncoentra muy rcprcsentada esla ultima Cllt(!9oria, mlcntras que muchos de los genes de la ruta de ta glicohsis se encuentl1ln sobr ee~presados. Las categorias <kl secreoon, IranSpOrje vesicular asi como de elecimlcnto filarnantoso, estan significallvameflte rcprescntadas por genes menos cxpresados en fll me tante , 10 que pedria erqlllcar su incapacidad para lormar hi/as vcrdaderas. Hcma$. observado_ mediante expellmcnlos de Western bIQlllng", que duranle el cfCcimiento a 28"C CStO mutan te prescnta aclivadas las MAP kin asas Cekl (de la ruta rle seri"l,zaoon de creo miento Iil amen toso ) y Mkc 1 (de inlegridad celular) . Nuestros resultados apoyan l<I Idea de {jUII de fectos en la e~ten si6n de las cad en as oligosaCOlrldicas e ~ternas do las glicoprote inas, desoncadunan respuus tas celulares a trilv ill; de es tas n,tas do seilahzaci6 n 148
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