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Prueba Rápida OnSite Toxo IgG/IgM - Casete (Suero / Plasma)
Catálogo Número R0233C
Diagnóstico In vitro
USO
La prueba rápida OnSite Toxo IgG/IgM es un inmunoensayo cromatográfico de flujo lateral para la
detección simultánea y diferenciación del anti-Toxoplasma gondii IgG e IgM (T. gondii) en suero o
plasma humano. Este kit está destinado a ser utilizado como una prueba de detección y como una
ayuda en el diagnóstico de la infección con T. gondii. Cualquier muestra de reactivos con prueba
rápida OnSite Toxo IgG/IgM se deben confirmar con un método alternativo de prueba(s) y hallazgos
clínicos.
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9. No fume, beba ni coma en las áreas donde se manipulen muestras o reactivos del kit.
10. Deseche todas las muestras y los materiales del kit usados como residuos biológicos peligrosos.
11. Manipule los controles positivos y negativos de la misma forma como a las muestras de los
pacientes.
12. Los resultados de las pruebas deben ser leídos dentro de los 15 minutos después de agregar la
muestra al pozo de muestra. Leer los resultados después de los 15 minutos puede generar
resultados erróneos.
13. No procese la muestra en un lugar con fuerte corriente de aire, con ventiladores o aire
acondicionado.
PREPARACION DE REACTIVOS E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO
Todos los reactivos están listos para usar como fue suministrado. Dispositivos de prueba que no se
utilicen deben estar entre 2°C-30°C. No congelar el kit. No exponga el equipo de más de 30°C. Los
controles positivos y negativos se mantendrán a 2°C-8°C o a la temperatura indicada. Si los conserva
a 2°C y 8°C, asegurarse de que el dispositivo de prueba sea traído a 15°C-30°C antes de abrirlo. El
dispositivo de prueba es estable, hasta la fecha de caducidad impresa en el pouch sellado.
RESUMEN Y EXPLICACIÓN DE LA PRUEBA
RECOLECCIÓN Y MANIPULACIÓN DE LA MUESTRA
T. gondii es un parásito protozoario intracelular con una distribución mundial1,2. Los datos serológicos
indican que aproximadamente el 30% de la población de la mayoría de los países industrializados está
infectado crónicamente con el organismo3.
Considere todos los materiales de origen humano como infecciosos y manipule usando los
procedimientos de bioseguridad.
Una variedad de pruebas serológicas para la detección de anticuerpos contra T. gondii se han utilizado
como una ayuda en el diagnóstico de la infección aguda y para evaluar la exposición previa al
organismo. Estos ensayos son: la prueba de ensayo en tinte de Sabin-Feldman, aglutinación directa,
hemoglutinación indirecta, aglutinación en látex, inmunofluroescencia indirecta y ELISA4-7.
Recienetemente, inmunoensayo cromatográfico de flujo lateral como la prueba rápida OnSite Toxo
IgG/IgM que se ha presentado en clínica para la detección instantánea de la infección de T. gondii.
PRINCIPIO DE LA PRUEBA
La prueba rápida OnSite Toxo IgG/IgM es un inmunoensayo cromatográfico de flujo lateral. El
dispositivo de la prueba consiste en: 1) una almohadilla de conjugado de colores burdeos que contiene
antígenos de T. gondii recombinante conjugado con oro coloidal (conjugados de T. gondii) y
conjugados de oro de IgG de conejo, 2) una tira de membrana de nitrocelulosa que contiene dos
grupos de prueba (bandas M y G) y una banda de control (banda C). La banda M está pre-recubierta
con anticuerpo monoclonal IgM anti-humano para la deteccion de IgM anti-T. gondii, la banda T es prerecubierta con reactivos para la deteccion de anticuerpos IgG anti-T. gondii, y la banda C es prerecubierta con anticuerpo de cabra anti-IgG de conejo.
Identificación
de la muestra
Línea de
Control
Líneas de
Test
Pozo de
Muestra
Plasma
1.
Recolecte la muestra en un tubo tapa lila, azul o verde (que contenga EDTA, Citrato o
Heparina) por venopunción.
2.
Separe el plasma por centrifugación.
1.
Cuidadosamente transfiera el plasma a un tubo nuevo.
Suero
1.
2.
3.
1.
Recolecte por venopunción la muestra en un tubo tapa roja (sin anticoagulantes).
Espere la formación del coagulo.
Separe el suero por centrifugación.
Cuidadosamente transfiera el suero a un tubo nuevo.
Procesar las pruebas lo más pronto posible a la toma de la muestra. Almacene las muestras de 2°C a
8°C si no se van a procesar inmediatamente.
Las muestras son estables almacenadas de 2° a 8°C durante 5 días. Las muestras pueden congelarse
a -20°Ċ para almacenamientos prolongados.
Evite múltiples ciclos de congelación y descongelación de las muestras. Antes del ensayo, lleve las
muestras congeladas a temperatura ambiente lentamente y mezcle con suavidad. Las muestras que
contengan partículas visibles, deben ser eliminadas por centrifugación antes de la prueba. No utilizar
muestras que demuestren lipemia, hemolisis o turbidez con el fin de evitar interferencias en la
interpretación de los resultados.
PROCEDIMIENTO
Cuando un volumen adecuado de muestra de la prueba se dispensa en el pocillo de muestra del
casete de la prueba, la muestra migra por acción capilar a través del casete. El anti-T. gondii IgM si
está presente en la muestra se unirá a los conjugados de T. gondii. El inmunocomplejo se captura
entonces sobre la membrana por el anticuerpo anti-IgM humana de pre-recubierto formando una línea
M de color borgoña, que indica un resultado positivo o reactiva IgM contra T. gondii.
El anti-T. gondii IgG si está presente en la muestra se unirá a los conjugados de T. gondii. El complejo
inmunológico es capturado por los reactivos con revestimiento previo de la membrana formando una
línea G de color burdeos, lo que indica un resultado positivo o reactivo IgG contra T. gondii .
Paso 1:
Lleve las muestras y componentes del ensayo a temperatura ambiente si es refrigerada o
congelada. Mezcle bien la muestra antes del ensayo una vez descongelado.
Paso 2:
Cuando esté preparado para realizar la prueba, abra el empaque y saque el dispositivo.
Colóquelo sobre una superficie limpia y plana.
Paso 3:
Asegúrese de marcar el dispositivo con la identificación del paciente.
Paso 4:
Llene el gotero de plástico con la muestra.
Con el gotero en posición vertical, agregue 1 gota (30-45 µL) de muestra en el pozo de
muestra asegurándose de que no hayan burbujas de aire.
La ausencia de cualquier líneas M y G sugiere un resultado negativo o no reactivo. La prueba contiene
un control interno (banda C), que debe mostrar una línea de color burdeos del inmunocomplejo de
cabra anti-IgG de conejo/conejo conjugado IgG-oro independientemente del desarrollo de color en
cualquiera de las líneas de test. De lo contrario, el resultado de la prueba no es válida y el espécimen
debe ser analizado de nuevo con otro dispositivo.
Inmediatamente adicione 1 gota (aprox 30-45 µL) de diluyente de la muestra en el pozo
de muestra con la botella en posición vertical.
Resultado
REACTIVOS Y MATERIALES SUMINISTRADOS
1. Bolsas de aluminio selladas que contiene:
a. Un dispositivo de casete
b. Un desecante
2 Goteros de plástico
3. Diluyente de muestra (1 botella, 5 mL)
4. Un inserto (instrucciones de uso)
MATERIALES QUE SON REQUERIDOS Y NO SON SUMINISTRADOS
15 minutos
1 gota de muestra
1 gota de diluyente
de la muestra
Paso 5:
Contabilice el tiempo.
Paso 6:
Los resultados pueden ser leídos en 15 minutos. Resultados positivos pueden ser visibles
en un minuto.
1. Control Positivo
2. Control Negativo
No lea los resultados después de 15 minutos. Para evitar confusión descarte el
casete después de leer el resultado.
MATERIALES REQUERIDOS PERO NO SUMINISTRAN
CONTROL DE CALIDAD
1. Reloj o temporizador
ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES
Para uso Diagnostico In Vitro
1. Este inserto debe ser leído completamente antes de la realización de la prueba. Si no se sigue el
inserto se pueden generar resultados erróneos.
2. No abra el empaque sellado hasta que no se vaya a realizar la prueba.
3. No use los dispositivos si se encuentran vencidos.
4. Atempere los reactivos de 15 a 30°C antes de usarlos.
5. No utilice los componentes de otro tipo de prueba como sustituto de los componentes de este kit.
6. No utilice sangre hemolizada para la prueba.
7. Usar ropa protectora y guantes desechables mientras manipule los reactivos del kit y las muestras
clínicas. Lave sus manos después de realizar la prueba.
8. Los usuarios de esta prueba deben seguir las precauciones universales del CDC de Estados
Unidos para la prevención de transmisión del VIH, el VHB y otros patógenos de transmisión
sanguínea.
1.
Control Interno: Esta prueba contiene un control incluido, la banda C. Esta se desarrolla
después de adicionar la muestra y diluyente de muestra. De lo contrario, revise el
procedimiento y repita la prueba con un nuevo dispositivo.
2.
Control Externo: Las Buenas Prácticas de Laboratorio recomiendan el uso de controles
externos, positivos y negativos, para asegurar el funcionamiento adecuado de la
prueba, particularmente en las siguientes circunstancias:
a. Cuando un nuevo operador utiliza el kit, antes de que procese las muestras.
b. Cuando se inicia un nuevo kit.
c. Un nuevo envío de kits es utilizado.
d. Cuando la temperatura de almacenamiento se sale del rango de 2°C-30°C.
e. La temperatura del sitio de procesamiento esta por fuera de 15°C-30°C.
f. Para verificar una frecuencia mayor que la esperada de los resultados positivos o
negativos.
g. Investigar la causa de resultados no válidos repetidos.
Prueba Rápida OnSite Toxo IgG/IgM - Casete (Suero / Plasma)
INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS
1.
4.
RESULTADO NEGATIVO: Si solo se colorea la banda C, hay ausencia de las bandas G y M
indica que no hay anticuerpos anti-T. gondii en la muestra. El resultado es negativo o no-reactivo.
5.
6.
2.
RESULTADO POSITIVO:
2.1 Además de la presencia de la línea C, si sólo la línea M se desarrolla, la prueba indica la
presencia del IgM anti-T. gondii en la muestra. El resultado es positivo o reactivo.
7.
2.
3.
Además de la presencia de la línea C, aunque sólo la línea G es desarrollada, la prueba
indica la presencia de IgG anti-T. gondii en la muestra. El resultado es positivo o reactivo
4.
5.
6.
2.3
Además de la presencia de la línea C, si tanto el M y la línea G son desarrolladas, la prueba
indica la presencia de IgG e IgM anti-T. gondii en la muestra. El resultado es también
positivo o reactivo.
Un resultado negativo o no-reactivo puede ocurrir si la cantidad de los anticuerpos anti-T. gondii
presentes en la muestra se encuentra por debajo de los límites de detección del ensayo o los
anticuerpos que se detectan no están presentes durante la etapa de la enfermedad en la que
se recoge una muestra
Algunos ejemplares contienen inusualmente altos títulos de anticuerpos heterófilos o el factor
reumatoide puede afectar a los resultados esperados.
Si los síntomas persisten cuando el resultado de la prueba rápida OnSite Toxo IgG/IgM es
negativo o no reactivo, es recomendable tomar una nueva muestra días despues o usar algún
método diagnóstico alternativo.
Los resultados obtenidos con esta prueba sólo deben interpretarse en conjunto con otros
procedimientos de diagnóstico y hallazgos clínicos.
REFERENCIAS
1.
2.2
Página 2 de 2
7.
Krick JA and Remington JS: Toxoplasmosis in the adult: An overview. New Eng. J. Med.
1978, 298:550-553
Anderson SE and Remington JS: The diagnosis of Toxoplasmosis. So. Med. J. 1975,
68:1433-1443
Wilson CB, Remington JS, Stagno S, and Reynolds DW: Development of adverse
sequelae in children born with subclinical congenital Toxoplasma infection. Pediatrics 1980,
66:767-774
Berrebi A; Kobuch WE; Bessieres MH; Bloom MC; Rolland M; Sarramon MF; Roques C;
Fournie A: Termination of pregnancy for maternal toxoplasmosis. Lancet 1994, 344: 36-9
Fraser KB, Shirodaira PV, and Stanford CF: Fluorescent staining and human IgM Br. Med. J.
1971, 3:707
Pyndiah N, Krech U, Price P and Wilhelm J: Simplified chromatographic separation of
immunoglobulin M from G and its application to Toxoplasma indirect immunofluorescence. J.
Clin. Micro.1979, 9:170-174
Montoya JG, Rosso F. Diagnosis and management of toxoplasmosis. Clin Perinatol. 2005,
32(3):705-26.
Índice de Símbolos
REF
Las muestras con resultados positivos deberían ser confirmadas con un métodos
alternativos y otros elementos clínicos antes de determinar un resultado positivo.
3.
INVÁLIDO: Si la banda C no se colorea, el ensayo se considera inválido a pesar de que las otras
bandas se tiñan. Se debe realizar nuevamente la prueba en otro casete.
Consulte las
instrucciones de uso
Para uso diagnóstico
in vitro solamente
Número de catálogo
Número de Lote
Almacenar de 2 a
30°C
No reutilizar
Fabricante
Fecha de fabricación
CTK Biotech, Inc.
10110 Mesa Rim Road
San Diego, CA 92121, USA
Tel: 858-457-8698
Fax: 858-535-1739
E-mail: [email protected]
PI-R0233C-Spanish Rev. H
Effective date: 2014-09-23
Versión en Español
For Export Only, Not For Re-sale In the USA
CARACTERISTICAS DE RENDIMIENTO
1. Desempeño Clinico de la Prueba para IgG
Un total de 302 muestras de sujetos susceptibles fueron probadas por la prueba rápida OnSite
Toxo IgG/IgM en el lugar y por un kit comercial IgM EIA. Comparación de los resultados para
todos los sujetos se muestra en la tabla siguiente.
Prueba Rápida OnSite Toxo IgG/IgM
IgM EIA
Positive
Negative
Positive
2
0
Total
2
Negative
2
298
300
Total
4
298
302
Sensibilidad Relativa: 100%, Especificidad Relativa: 99.3%, Concordancia: 99.3%.
2.
Desempeño Clinico de la Prueba para IgG
Un total de 324 muestras de sujetos susceptibles fueron probadas por la prueba rápida OnSite
Toxo IgG/IgM en el lugar y por un kit comercial IgM EIA. Comparación de los resultados para
todos los sujetos se muestra en la tabla siguiente.
Prueba Rápida OnSite Toxo IgG/IgM
IgG EIA
Positive
Negative
Positive
22
2
Total
24
Negative
3
297
300
Total
25
299
324
Sensibilidad Relativa: 91.6% , Especificidad Relativa: 99.0%, Concordancia: 98.5%
LIMITACIONES DE LA PRUEBA
1.
2.
3.
El procedimiento de la prueba y la interpretación de los resultados debe ser analizada cuando
se detectan anticuerpos contra T. gondii en suero o plasma humano. Cualquier falla en el
procedimiento puede llevar a resultados erróneos.
La prueba rápida OnSite Toxo IgG/IgM se limita a la detección cualitativa de anticuerpos contra
T. gondii en suero o plasma humano. La intensidad de la línea de prueba no tiene una
correlación lineal con el título de anticuerpos en la muestra.
Un resultado negativo para un sujeto individual indica la ausencia de anticuerpos anti-T. gondii
detectable. Sin embargo, un resultado negativo no excluye la posibilidad de que la exposición o
infección por T. gondii.
Utilice por
N
Pruebas por
kit