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UNIVERSIDAD INDUSTRIAL DE SANTANDER
ESCUELA DE QUÍMICA
Laboratorio de Instrumentación Química I
Profesor: Daniel Ricardo Molina V.
Práctica: DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO DE CAFEÍNA - EN BEBIDA ENERGIZANTE - POR
EL MÉTODO DE ADICIÓN DE UN ESTÁNDAR Y POR EL DE LA CURVA DE
CALIBRACIÓN.
Los métodos instrumentales, que requieren calibración, relacionan la señal analítica medida con la concentración
del analito. Las metodologías más frecuentes son la curva de calibración, el método de adición estándar y el del
patrón interno.
El de adición estándar es útil para muestras complejas en las que la matriz tiene efectos considerables sobre la
señal del analito. Hay varias versiones del método. En ellas se espera que, después de la adición de un patrón
del analito, sólo cambie su concentración y que la matriz se conserve casi idéntica.
EQUIPOS: - Espectrofotómetros UV-Vis: Perkin Elmer, Lambda 4B, SHIMADZU UV-2401 PC.
REACTIVOS Y MATERIALES:
- Solución acuosa de cafeína de 100 ppm. (λ máx, que debe ser determinada por el grupo)
- Bebida energizante: RED BULL, (o PEAK u otra marca, que debe ser traída por cada grupo de
trabajo)
- Balones aforados de 50, 25 ml. Pipetas aforadas de 5, 10 y 20 ml. Buretas hasta de 25 ml.
PROCEDIMIENTO
1. PREPARACIÓN PATRONES DE CALIBRACIÓN.
Prepare en los balones aforados las soluciones de la siguiente tabla y complete el volumen con agua destilada.
Tabla 1. Patrones Adición de un estándar
Tabla 2. Patrones Curva de Calibración
Solución
ml
ml patrón Vol. Final Absorb.
Sol. ml patrón
Vol Final
Absorb.
bebida
(ml)
(ml)
1
0.5
0
1
0
50
50
2
0.5
1
50
2
2
50
3
0.5
2
3
4
50
50
4
0.5
3
4
6
50
50
5
0.5
4
5
8
50
50
2. MEDICIÓN DE PARÁMETROS.
Lea el manual de procedimiento de encendido y uso del espectrómetro. (Encienda/ barrida espectral 700-200
nm/ ajuste λ= λ máxima absorbancia/ inserte el blanco/ ajuste cero)
Llene la celda portamuestra con la solución 1 y lea la absorbancia.
Repita el punto 2.2 con los patrones 2-5.
Repita los puntos 2.2 y 2.3 hasta completar tres réplicas de cada solución.
Observaciones: cada patrón debe ser leído mínimo tres veces.
RESULTADOS.
-
Del Método de Adición Estándar y de la Curva de Calibración:
o Graficar la curva.
o Determinar la ecuación.
o Hallar la concentración de cafeína en la bebida energizante.
o Compare los resultados obtenidos por los dos métodos y explique las diferencias.