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MANUAL DE BIOLOGIA CRIMINALISTICA
Tte Cnel. Ana Julia Maza Aranguren y colectivo de
autores Sección Biología
2003
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MANUAL DE BIOLOGIA CRIMINALISTICA
I .- INDICE
II .- INTRODUCCION
III.- ANTECEDENTES HISTORICOS
IV .- SANGRE
IV.1 - Introducción.
IV.2 - Antecedentes históricos.
IV.3 - Fundamentos teóricos.
IV.3.1 - Afectaciones hemostáticas que se producen en la sangre.
IV.3.2 - Antígenos.
IV.3.3 - Anticuerpos.
IV.3.4 - Reacciones antígeno anticuerpo.
IV.4 - Investigación en sangre seca.
IV.5 - Investigaciones analíticas.
IV.5.1- Investigación de la presencia.
IV.5.2 - Investigación de la especie.
IV.5.3 - Diagnóstico individual.
- Establecimiento de aglutinógenos por absorción cuantitativa.
- Determinación de aglutininas por Lattes.
- Determinación de aglutininas por centrifugación.
- Reacción de aglutinación mixta.
- Reacción de Adsorción-Elución.
- Tipaje de las muestras de sangre líquida.
- Otras determinaciones en sangre seca.
IV.6 - Perspectivas.
IV.7 - Referencias bibliográficas.
IV.8 – Anexos.
V.- SEMEN
V.1- Introducción.
V.2 - Características de la esperma.
V.3 - Composición del plasma seminal.
V.4 - Investigaciones analíticas.
V.5 - Referencias bibliográficas.
V. 6 – Anexos.
VI.- OTRAS INVESTIGACIONES
VI. 1- Introducción.
VI.2 - Fundamentos teóricos.
VI.3 - Determinación del sexo.
VI.4 - Secreciones femeninas.
- Células vaginales.
- Células menstruales.
VI.5 - Secreción salival.
VI.6 - Investigaciones analíticas.
VI.7 - Secreciones nasales.
VI.8 - Productos excretados por el organismo.
VI.8.1- Orina.
VI.8.2 - Sudor.
VI.8..3 - Heces fecales.
VI. 9 - Referencias bibliográficas.
VI.10 – Anexos.
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VII.- TEJIDOS
VII.1- Introducción.
VII.2 - Antecedentes históricos.
VII.3- Fundamentos teóricos.
VII.4 - Investigaciones analíticas.
VII.5 - Referencias bibliográficas.
VIII.- ADN
VIII.1- Introducción.
VIII.2 - Antecedentes históricos.
VIII.3 - Fundamentos teóricos.
VIII.4 - Investigaciones analíticas.
- Obtención de ADN.
- Técnicas para la detección de los polimorfismos de ADN.
- Valoración de los resultados.
- Ejemplos de aplicación.
VIII.5 - Perspectivas.
VIII.6 - Referencias bibliográficas.
VIII.7 – Anexos.
IX.- PELOS
IX.1- Introducción.
IX.2 - Antecedentes históricos.
IX.3 - Fundamentos teóricos.
IX.3.1- Morfología e histología.
IX.3.2 - Estructura del pelo.
IX.3.3 - Composición química.
IX.3.4 - Incorporación de los elementos traza en el pelo.
IX 3.5 - Colección y preparación de las muestras.
IX.3.6 - Técnicas descriptivas.
IX.4 - Investigaciones analíticas.
IX.4.1- Métodos analíticos empleados.
- Microscopía óptica.
- Microscopía electrónica de barrido.
- Análisis elemental.
- Espectrometría de Absorción Atómica.
- Otras investigaciones.
IX.5 - Perspectivas.
IX.6 - Referencias bibliográficas.
IX.7 – Anexos.
X.- BOTANICA
X.1- Introducción.
X.2 - Antecedentes históricos.
X.3 - Fundamentos teóricos.
X.4 - Investigaciones analíticas.
X.5 - Perspectivas.
X.6 - Referencias bibliográficas.
X.7 – Anexos.
XI.- FIBRAS
XI.1- Introducción.
XI.2 - Antecedentes históricos.
XI.3 - Fundamentos teóricos.
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XI.4 - Investigaciones analíticas.
XI.5 - Perspectivas.
XI.6 - Referencias bibliográficas.
XI.7 – Anexos.
XII.- RESTOS OSEOS.
XII.1.- Introducción.
XII.2.- Generalidades.
XII.3.- Estudio macroscópico elemental de los huesos. Desarrollo.
XII.4.- Composición química y propiedades físicas.
XII.5.- Características diferenciantes de las especies de interés.
XII.6.- Bibliografía consultada.
XIII.- INVESTIGACIONES ESPECIALES
XI1I.1- Algunas experiencias de la especialidad.
XIV.- LA BIOSEGURIDAD EN LOS LABORATORIOS.
XIV.1 - Introducción.
XIV.2 - Tipos de Riesgos en el laboratorio.
- Riesgo Físico.
- Riesgo Químico.
- Riesgo Biológico.
- Riesgo Humano.
XIV.3 - Bioseguridad.
- Definición.
- Principios.
- Organización.
XIV.4 – Funciones de la Comisión de Bioseguridad.
XIV.5 – Medidas de Bioseguridad.
XIV.6 – Bibliografía.
XV.- ANEXOS.
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II.- INTRODUCCION
La Biología Criminalística es la rama de la Ciencia Criminalística que investiga todos los
elementos de origen animal, vegetal y humano, relacionados con un delito. Como ciencia
independiente, se basa en los fundamentos de las Ciencias Naturales (Biología, Medicina
y Bioquímica), ha desarrollado sus propios métodos y metodologías que permiten su
función, atendiendo a las características que poseen los elementos biológicos hallados en
el lugar del hecho y en sus participantes.
Los procesos de investigación de elementos de origen biológico se realizan por lo general
en condiciones ideales. Las evidencias y huellas biológicas sin embargo, se ocupan en
condiciones reales, como se encuentran, sometidos a muy diversas circunstancias que
influyen negativamente en su investigación, como son los factores ambientales, la
cantidad, el estado de conservación, etc. A lo largo del trabajo biológico criminalístico se
han desarrollado novedosas técnicas para superar esas adversidades y obtener la
máxima información de cada tipo de huella o evidencia.
Desde la creación de esta especialidad en Cuba, y con mayor resultado después del
triunfo de la Revolución, el empeño de sus especialistas ha sido investigar cada elemento
biológico y dar una respuesta que permita la identificación individual del elemento en
relación con las muestras que se analizan, esta identificación, llega a ser categórica en
las determinaciones del ADN.
Con independencia de los estudios tradicionales de la especialidad, son objeto de interés,
además, las investigaciones de determinados procesos biológicos en los que apoyados
en los conocimientos que ofrecen determinadas ciencias, la criminalística aporta un modo
de estudio que permite establecer la relación entre el elemento o proceso y las
circunstancias propias del hecho, tal es el caso de las investigaciones microbiológicas,
veterinarias, entomológicas, etc, las que se agrupan dentro de las llamadas
Investigaciones Especiales.
Ejemplos que ilustran lo hasta aquí expresado, constituyen los estudios hematológicos en
las Ciencias Médicas, en estas se realizan las investigaciones con la sangre líquida, en
óptimas condiciones de conservación y suficiente cantidad. Sin embargo las huellas
hemáticas generalmente se ocupan secas y el tiempo de su hallazgo puede ser reciente o
no, sometidas a los efectos de temperatura, humedad, acción del soporte, etc. Estas
condiciones desfavorables inciden en las propiedades de las biomoléculas, de ahí la
necesidad de aplicar métodos especiales para la investigación de estas huellas que
permitan detectar propiedades más estables.
Los pelos son elementos biológicos propios de los animales y del hombre, su
investigación criminalística reviste gran importancia, ya que aportan elementos que
permiten vincular al autor con los posibles participantes. A partir del estudio de sus
propiedades bioquímicas y morfológicas, que constituye una peculiaridad de la Ciencia
Criminalística. En Dermatología Humana y Veterinaria, se estudian los pelos con otros
fines, sin embargo el estudio morfológico y comparativo en los pelos humanos que realiza
La Criminalística es un elemento importante para definir la relación entre el lugar del
hecho, víctima y victimario.
Así, pudiéramos mencionar muchos ejemplos que ilustran el trabajo específico que
abarca La Biología Criminalística, pero en los capítulos contenidos en este Manual,
explicaremos detalladamente las características de cada huella biológica, los
fundamentos teóricos de los métodos de investigación, así como los resultados que
hemos sido capaces de alcanzar en nuestro país entre otros. Abordamos también los
antecedentes históricos de la especialidad, aspecto que hasta el momento no había sido
escrito.
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OBJETIVOS.
Durante varias décadas de trabajo, La Biología Criminalística ha resuelto numerosos
casos y sus especialistas pertenecientes a tres generaciones, han acumulado un caudal
de experiencias y de conocimientos que se han recogido en pocos materiales escritos.
Nuestra intención con esta obra, es plasmar esas experiencias, resumir con ejemplos
ilustrativos el desarrollo que ha alcanzado esta especialidad de la Criminalística, tanto el
trabajo en el lugar del hecho como en el laboratorio de las huellas y muestras biológicas.
Desde el punto de vista docente, consideramos que también será un buen recurso para la
formación de las generaciones venideras, que aunque como ciencia continuará su
desarrollo, servirá como base de los conocimientos adquiridos en esta época que nos ha
tocado vivir y la anterior a la nuestra.
Es importante poder contar con un material que posea un enfoque criminalístico de la
Biología, pues existe una amplia gama de literatura que contiene el estudio de diferentes
compuestos, u organismos biológicos, sin embargo en nuestro país es escasa la
bibliografía que contenga esta temática resumida como pretendemos desarrollar en este
Manual.
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III.- ANTECEDENTES HISTORICOS.
El Laboratorio de Biología Legal tuvo su antecesor en el Laboratorio del Gabinete
Nacional de Identificación (G.N.I.) al igual que las restantes dependencias del actual LCC.
El G.N.I. como tal, resultaba una especie de copia de la organización implantada en los
Estados Unidos por el FBI del Departamento de Justicia norteamericano para la lucha
contra el crimen organizado.
Así el FBI poseía el “Homicide Squard”, formado por pelotones o equipos entrenados
para la investigación de los homicidios, estos detectives recibían el nombre de “G-Merr”.
En la Cuba de entonces el G.N.I. contaba con el llamado Buró de Homicidios, cuyos
detectives tenían igual función en el territorio de Cuba. El FBI poseía un selecto grupo de
peritos en sus laboratorios. El G.N.I, desde 1927 creó sus laboratorios y registros de
delincuentes, etc. con fines análogos a los de sus colegas norteamericanos.
Al producirse un hecho grave en cualquier lugar de Cuba, en el que perdiera la vida
alguien, las autoridades policiales del lugar avisaban por telégrafo u otro medio rápido al
Gabinete, levantaban las actuaciones primarias y esperaban por los agentes del Buró de
Homicidios y los peritos del Laboratorio para que se realizaran las investigaciones del
caso.
Para estos casos el G.N.I. poseía un móvil denominado “Investigadora No. 1”, dotado de
un laboratorio portátil. Con este equipo formado por detectives y peritos se llevaban a
cabo todas las investigaciones en el lugar del suceso. La organización de este “aparato”
era muy singular en cuanto a la subordinación.
El Laboratorio pertenecía al Gabinete, éste a la Policía Judicial, pero a su vez el Gabinete
dirigía técnicamente al Buró de Homicidios, el cual, administrativamente pertenecía a la
Policía Secreta Nacional. Como se podrá suponer existía una interesante mezcla de
intereses que en ocasiones chocaba con los del cuerpo policial más numeroso y corrupto
de aquella sociedad, la División Central de la Policía Nacional, aparato represivo que
contaba con la sección radio represiva (las perseguidoras).
Como parte de la ciudadanía, se observaban situaciones en las cuales entraban en
pugna todos estos intereses más aún los del Laboratorio del SIM (Servicio de
Inteligencia Militar), al final de la dictadura batistiana.
Volviendo a los inicios del G.N.I., encontramos que las actividades del mismo fueron
reglamentadas en 1927 mediante el Decreto Presidencial No. 1348, de fecha 5 de Agosto
de 1927, firmado por el General Gerardo Machado y Morales. Dos años después de la
caída de Machado este Decreto fue ratificado mediante una resolución ministerial del
entonces Secretario de Gobernación Dr. Max A. Smith, en la cual el Gabinete mantenía la
dirección técnica del Buró de Homicidos y operaba la guardia operativa con los agentes
del Buró y los peritos del Laboratorio.
Al triunfo de la Revolución, se creó el 5 de enero de 1959, la Policía Nacional
Revolucionaria, después de la depuración del viejo aparato represivo existente. El resto
de 1959 y gran parte del año 1960 se produce el reordenamiento de los diferentes
servicios policiales. El 6 de Junio de 1960 se funda el Ministerio del Interior como sucesor
de las funciones del extinto Ministerio de Gobernación. El Comandante de la Revolución
Ramiro Valdés, Ministro del Interior, tomó la decisión de reorganizar los necesarios
servicios de investigación criminalística.
El 20 de diciembre de 1960 se crea la División General de Criminalística y dentro de ella
la Dirección Técnica de Investigaciones, designándose al compañero Gabriel Vega
Cazañas, técnico de Laboratorio Clínico para el Laboratorio de Biología, conjuntamente
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con el técnico Gabriel González Figueras. El trabajo de la especialidad consistía
fundamentalmente en el análisis de las huellas hemáticas.
En las instalaciones del antiguo Laboratorio del SIM situado en Ave. 31 y Calle 114
(Hospital Militar Carlos J. Finlay), quedaron organizado el servicio de los diversos
laboratorios del Laboratorio Central de Criminalística.
La preparación técnica del primer grupo de peritos del LCC, se realizó en la URSS a
fines de 1962, y entre ellos, por la especialidad de Biología, participó el técnico González
Figueras por un período de 8 meses.
En 1963 se funda el Laboratorio Central de Criminalística, y paralelamente se crea el
Laboratorio de Biología. Su primer especialista y jefe de la especialidad, Nelson García
Sifredo recibe su formación en la ex URSS, junto con otros compañeros que se forman en
las demás especialidades de la Criminalística.
Desde su creación en 1963, el Laboratorio de Biología se dedicó a la investigación de
diferentes tipos de huellas biológicas. Se realizaban peritajes de sangre, semen, saliva,
pelos, tejidos, restos óseos, Antropología, Retrato hablado (este último por los peritos
Nelson García y Juan Martínez), superposición cráneo-fotográfica, peritajes de madera y
fibras vegetales empleadas en la confección de sogas y textiles, peritajes botánicos
(hojas, plantas, tallos herbáceos, entre otros).
Para realizar muchas de estas investigaciones, la especialidad se apoyaba en un
prestigioso grupo de asesores nacionales pertenecientes a importantes instituciones
científicas como la Universidad de la Habana, el Centro Nacional de Investigaciones
Científicas, Instituto Finlay, Jardín Zoológico, Banco de Sangre Provincial de la Habana
entre otros.
Esta colaboración con otras instituciones científicas del país, no puede circunscribirse a la
primera etapa de desarrollo de la especialidad, sino que se ha mantenido hasta nuestros
días. Vale destacar que el desarrollo científico técnico alcanzado por importantes
instituciones entre ellas, las que conforman el Polo Científico de nuestro país, han
contribuido de forma muy notable a los resultados alcanzados, materializándose esta
colaboración mediante convenios de trabajo con estos centros.
Entre ellos podemos mencionar el Instituto de Ecología y Sistemática, Centro Nacional de
Sanidad Agropecuaria (CENSA), Centro Nacional de Parasitología, Instituto de
Hematología (IHI), Hospital Hermanos Ameijeiras, Instituto de Investigaciones
Fundamentales de la Agricultura Tropical (INIFAT), Centro Nacional de Restauración y
Museología (CENCREM), Centro de Ingeniería Genética y Biotecnología (CIGB),
Laboratorio de Investigaciones de la Defensa Civil.
Entre las personalidades ilustres de nuestro país que contribuyeron en la primera etapa
de desarrollo de nuestra especialidad podemos citar al destacado Ingeniero Julián Acuña
Galé, botánico que trabajó hasta su muerte con el Dr. Juan Tomás Roig y Mesa, Dr.
Antonio Palacín, (bacteriólogo), Dr. Manuel Rivero de la Calle (antropólogo), Dra. Rosa
Elena Simeón, Dr. Carlos González, Ing. Alejandro Cabello y otros que harían
interminable la relación.
El quinquenio 1971-1975 resultó un paso de avance en el desarrollo de la especialidad
tanto en la actividad docente como investigativa. Tuvo su antecedente en el período
comprendido entre los años 1963 y 1970 en el cual se llevaron a cabo las primeras
investigaciones, se perfeccionaron peritajes como el de Retrato Hablado que culminó con
la confección del IB-3 (técnica y equipo) realizado íntegramente en el Biológico; la
Superposición Cráneo-Fotográfica; la Investigación de Pelos, de Saliva, etc, por solo citar
algunas.
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Casos relevantes como la identificación de los restos óseos de combatientes caídos en la
invasión de mercenaria de Girón mediante la Antropología y la Superposición CráneoFotográfica, también aplicada en diferentes casos de muertes violentas.
Al crearse los primeros Laboratorios Provinciales de Criminalística: Santiago de Cuba,
Villa Clara y Camagüey, se inicia la formación de otros peritos en la especialidad de
Biología, impartiéndose en el año 1972, el primer curso masivo de la especialidad a los
compañeros Alain Toirac, Tania Martínez, Jesús Hernández y Rosario Brizuela, los cuales
fueron los fundadores de la especialidad en sus respectivas provincias.
Posteriormente y de manera paulatina se forman peritos de todas las provincias,
incluyendo el MEIJ. El Laboratorio Provincial de Ciudad de La Habana se constituyó en
1976, nutriéndose de especialistas de experiencia del LCC, quienes asumieron la
compleja situación operativa de la capital del país.
La formación de peritos no se circunscribió a los especialistas de nuestro país, sino que
también se impartieron cursos a peritos de Nicaragua, Angola, República del Congo,
Mozambique y Sao Tomé y Príncipe. La actividad docente también ha comprendido la
impartición de innumerables conferencias a personal de diferentes instituciones (Fiscalía,
Instrucción, Investigadores, Universidad de La Habana, etc.), así como cursos de
entrenamientos sobre ramas específicas de la especialidad.
El desarrollo alcanzado en el quinquenio 1971-1975 culminó con la investigación
realizada por el grupo de peritos del Laboratorio de Biología que lograron la producción (a
escala comercial experimental) de antisueros precipitantes para la determinación de la
especie en sangre y tejidos de origen humano o animal (ganado vacuno, equino, ovinocaprino, conejo, ave, perro, gato y dos especies que no las fabricaban nuestros
proveedores: reptiles y peces con elevada especificidad para nuestros fines.
En el período de 1974 al 1976 se incorporaron los primeros estudiantes universitarios
procedentes de la carrera de Licenciatura en Biología, quienes laboraron como
insertados, constituyendo la primera fuerza profesional en la especialidad.
A partir del año 1976 se recibió asesoramiento técnico procedente de países del antiguo
campo socialista, consistente en un adiestramiento en la técnica de electroforesis por
parte de un especialista de la RDA, un perito nuestro completó su formación en el
Instituto de Criminalística de la RDA y posteriormente se realizaron visitas de intercambio
a Bulgaria, Polonia y la URSS. En 1985 se recibió el asesoramiento de una especialista
del Instituto de Criminalística de Hungría de la especialidad de Hematología Forense y de
otro especialista de la RDA en microfibras textiles.
En el quinquenio 1985-90, se modernizó la técnica de electroforesis y se desarrollaron
diferentes metodologías relacionadas con el estudio de variantes polimórficas de varios
sistemas de proteínas. En este período se incorporaron otras técnicas de avanzada como
la Microscopía Electrónica de Barrido y Microanálisis de Rayos X que se aplicaron en las
investigaciones de pelos y huellas vegetales.
En 1991, como consecuencia de la desintegración del campo socialista, la especialidad,
al igual que el resto de las ramas de la Criminalística, se afectó considerablemente,
dejándose de recibir importantes recursos para su desarrollo, por lo que se dirigieron los
esfuerzos hacia la sustitución de importaciones. Entre ellos el más importante fue la
producción de sueros antitotales de las diferentes especies animales y humano, ya que
dejaron de recibirse estos renglones de Checoslovaquia y la URSS.
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Esta producción se realizó primeramente en colaboración con el Centro Nacional de
Parasitología y posteriormente se constituyó un centro de producción en la provincia de
Holguín, el cual abastece a todo el país de este importante renglón.
Como hecho importante puede destacar la incorporación de la técnica de ADN en nuestra
práctica pericial, lo que constituyó un importante paso de avance. Esta importante
tecnología que se comenzó a aplicar en el campo forense en 1985, fue implantada
rápidamente por países altamente desarrollados.
Gracias a la colaboración de otras instituciones como el Centro de Ingeniería Genética y
Biotecnología, el Departamento de Genética del Hospital Hermanos Ameijeiras y el
Laboratorio de Investigaciones de la Defensa Civil. Esta técnica se incorporó en el año
1991, laborando en otras instituciones hasta que se creó el Laboratorio de ADN en la
propia instalación del LCC.
Es importante resaltar la participación de los especialistas de Biología en diferentes
eventos científicos tanto de carácter nacional como internacional, entre ellos, Simposio
Internacional de Criminalística en Rumania, Congresos Nacionales e Internacionales de:
Ciencias Forenses, de Botánica, Genética, Simposios Nacionales de Técnica
Criminalística, XIV Congreso Nacional de Criminalística de Brasil, Forums de Ciencia y
Técnica.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
1.- Revista de Identificación y Asuntos Generales de la Secretaría de Gobernación Vol. I
y II, pág 279. Inauguración de los nuevos Departamentos y del Laboratorio del Gabinete
Nacional de Identificación. Ed. Talleres Tipográficos, Carasa y Cia., Habana, 1934.
2.- “El Buró de Homicidios”. Castellanos Israel. Ed. Mp. P. Fernández y Cia. S en C.
Habana, 1954.
3.- “Bajo el mando del General Benitez”. Compilación de los reporteros policiales Esteban
Yanis Pupel, del Periódico Información. Manuel Alburquenque de “Pueblo” y Manuel de
Jesús Hernández de “Luz”. Ed. Única, Habana 1943.
4.- Entrevistas a Erundino Videla, ex jefe de la Policía Secreta Nacional, en 1948- 50 por
Carlos Grenet Orbe.
5.- Entrevistas al Dr. Manuel Ramírez Nodarse, 1996-1998 por Carlos Grenet Orbe.
6.- Entrevista al Dr. José Antonio Díaz Padrón, Director del Laboratorio de Química Legal,
por Carlos Grenet, 1980.
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IV.- SANGRE
IV.1- INTRODUCCION
En el desarrollo evolutivo, ganar en complejidad organizativa, significa entre otras cosas,
tener vida independiente del medio exterior, aún cuando resulte imprescindible la
interrelación. Como una adaptación fisiológica a esta necesidad, aparecen los fluidos
extracelulares que a través de diversos sistemas motores de bombeo, cada vez más
evolucionados, son transportados a todas las células del organismo, ganando su
complejidad funcional a medida que se avanza en la escala zoológica.
En los mamíferos como grupo animal más desarrollado, la sangre constituye el fluido
extracelular vital que además de mantener su función trófica esencial, adquiere otras
tales como la regulación del volumen del organismo, el transporte de gases, defensa del
organismo así como en los mecanismos de Hemostasia y Coagulación.
Como fluido, la sangre está compuesta por una parte líquida el plasma y elementos
formes (eritrocitos, leucocitos y plaquetas).
El plasma constituye entre el 55 y 60% del volumen total de la sangre que en el hombre
es de aproximadamente 79 ml/kg de peso corporal y está compuesto por proteínas,
aminoácidos libres, lípidos e iones y otros elementos disueltos en un volumen de 80 %
de agua.
Se considera que el número de proteínas plasmáticas en la especie humana, es superior
a 150, de las cuales han sido aisladas puras más de 70 (1), entre las fundamentales se
encuentra la albúmina, las haptoglobinas, transferrinas, globulinas y fibrinógeno, las que
presentan manifestaciones individuales en la especie, la mayoría genéticamente
condicionadas, muchas asociadas a estados patológicos o de adaptación evolutiva y
otras como resultado de mutaciones, siendo en todos los casos demostrable las diversas
formas de expresión mediante las técnicas adecuadas (Anexo No.1).
Los eritrocitos constituyen la forma celular más numerosa en la sangre de los
vertebrados, también se les denomina “glóbulos rojos”. En muchos mamíferos y en el
hombre en particular, tienen forma de disco bicóncavo y son anucleados. Su número
promedio en nuestra especie, aunque es variable, oscila entre 4800 000 y 6000 000 en
el hombre y entre 4100 000 y 5200 000 en la mujer. Su principal función, es el transporte
de Hemoglobina y por lo tanto de oxígeno.
En los glóbulos rojos humanos, la hemoglobina está concentrada en el citoplasma en una
concentración de 34 g/100 ml de eritrocitos. La membrana eritrocitaria, formada por un
complejo de proteínas y lípidos, aporta también un componente de especificidad (1)
(Anexo No. 2).
Los glóbulos blancos o leucocitos, cuya función básica en el organismo, es la defensa,
también presentan sistemas antigénicos que unidos a los eritrocitarios, forman parte de
las investigaciones criminalísticas en Biología Legal (Anexo No. 3).
La Ciencia Criminalística, tiene entre sus funciones la aplicación de los conocimientos
científico-técnicos para el esclarecimiento del delito. Considerando que dentro de las
evidencias o huellas que se obtienen en la investigación de un hecho delictivo, la sangre
constituye el indicio más frecuente (aparece en más del 60% de los hechos),
dedicaremos especial atención a su estudio.
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La investigación de sangre como la generalidad de las pericias biológicas y en particular
de fluidos y secreciones, persigue el objetivo de establecer la presencia de tejido
sanguíneo, diagnosticar sus características específicas y correlacionar las propiedades
bioquímicas e inmunológicas del mismo con las víctimas y/o sospechosos a fin de
establecer un rango de coincidencia que permita unido a las restantes evidencias
obtenidas, probar la relación de la sangre con los elementos indubitados objetos de
estudio.
El diagnóstico en Criminalística, debe realizarse en condiciones que difieren de la rutina
clínica, considerando que se trata del análisis de máculas hemáticas en las que se ha
depositado el estroma eritrocitario y los componentes plasmáticos, los que producto
de la desecación y de otros efectos ambientales, sufren distintos procesos de
transformación y descomposición que son necesarios conocer y estudiar con el objetivo
de dirigir la marcha analítica de investigación y ofrecer una respuesta veraz en las
pericias biológicas que se realicen.
IV.2 ANTECEDENTES HISTORICOS.
Desde que en 1901, el hematólogo vienés Karl Landsteiner, descubrió la existencia de
tres grupos sanguíneos para el denominado Sistema de Histocompatibilidad Mayor ABO
(2), las investigaciones químicas y legales, sufrieron un vuelco radical. Con posterioridad,
este investigador y Weiner, demostraron el concepto de la individualidad de la sangre
humana, plantearon la hipótesis de que la preparación de un antisuero heteroinmune
(inyección de glóbulos rojos humanos en animales), así como el hallazgo de los
antisueros isoinmunes (los que se encuentran en la misma especie), conducirían a la
aparición de un gran número de diferencias antigénicas entre los propios glóbulos rojos
(3).
A partir de 1939-1940, Levine y sus colaboradores (4), llegaron a la conclusión de que en
la sangre humana existían diferentes sistemas antigénicos con herencia acoplada a las
leyes de Mendel y expresión individual aún desde la etapa fetal.
El fin de la II Guerra Mundial y la necesidad de identificación de diferentes cadáveres,
unido a los conocimientos de la época, motivaron el desarrollo acelerado de la
Hematología Forense.
En términos legales, la posibilidad de identificación mediante el estudio de las
características individuales de la sangre, atendiendo a sus propiedades inmunológicas, no
se instaura definitivamente hasta la década de 1920.
En los primeros años del Siglo XX, seguidores del notable médico italiano César
Lombroso, tratando de demostrar sus teorías sobre la existencia de un “delincuente nato”,
realizaron estudios con diez personas confesas por crímenes o detenidos in fraganti,
haciendo énfasis en los elementos biológicos que lo diferenciaban de los no criminales,
pretendieron demostrar mediante diferencias de viscosidad, fluidez y otras propiedades
físicas de la sangre, la presencia de características individuales que debían agruparse en
un cierto número para considerar válida la existencia de criminales de nacimiento.
Brown (1916) (5), expuso en un compendio sobre identificación de la sangre, que
ciertamente era posible establecer diferenciación en una mezcla de este fluido
atendiendo al comportamiento de los elementos formes, planteando que en la mezcla,
unos se “replegaban” y otros permanecían “libres”. A la luz actual, tales vivencias
pudieran relacionarse con el fenómeno de isoaglutinación.
En términos de diagnóstico específico, es menester señalar que en esta apretada reseña
histórica, los aportes en 1899 de F. Ya. Chistovich, quien estableció que no sólo los
microorganismos estimulan la elaboración de una respuesta por parte del organismo,
demostró que si a los conejos se les introducen eritrocitos de carnero o suero ajeno
contra los mismos, también se presenta una respuesta, este acontecimiento fue el punto
de partida para los estudios de inmunología no infecciosa.
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A partir del descubrimiento de Landsteiner hasta la fecha, el número de sistema
isoantigénicos en los eritrocitos humanos, es superior a 20, incluyendo más de 80
antígenos. El suero de la sangre humana, se ha demostrado que contiene cerca de 40
antígenos, mientras que los sistemas de isoantígenos localizados en los leucocitos,
abarcan más de 30, muchos de estos sistemas sanguíneos, han ido incluyéndose
paulatinamente en las investigaciones criminalísticas de individualidad.
En Cuba prerevolucionaria, según consta en los documentos del Gabinete Nacional de
Identificación, 1936 (6), durante la investigación de sangre, se llegaban a aportar
elementos identificantes fundamentalmente para el sistema de grupo ABO. Así se
plantea:
CONCLUSION
Que se trató de conocer el mecanismo del delito por el examen hematoscópico, auxiliado
del diagnóstico individual de las manchas de sangre obtenidas de distintos lugares en el
escenario del crimen, no habiéndose podido lograr dicho propósito por hallarse incluidos
en el mismo grupo sanguíneo o sea el grupo O, dos de los occisos.
Gabinete Nacional de Identificación
(17 de Julio de 1936) (6) ION
Con el triunfo de la Revolución y la incorporación de los conocimientos de las escuelas
eslava y germana de Criminalística, la vinculación de profesionales de todas las
especialidades de las Ciencias Biológicas, los avances científico-técnicos, las
investigaciones de sangre, han pasado por diferentes etapas en las que se han ido
introduciendo análisis de sistemas de grupo y estudios del polimorfismo proteico, cada
vez más informativos, con el empleo de técnicas de alta sensibilidad y especificidad
pudiéndose en la actualidad establecer en una mácula sanguínea hasta 10 sistemas de
grupo con más de 20 antígenos sin contar con la incorporación de las técnicas de ADN
que aportan un diagnóstico individual certero.
IV.3. FUNDAMENTOS TEORICOS.
La interpretación de la marcha de investigación en Biología Legal para la sangre y para
los restantes fluidos, requiere del conocimiento elemental de Inmunología y de
determinados procesos y transformaciones bioquímicas que sufren los componentes
sanguíneos al producirse la desecación así como de los procesos post mortem y su
interpretación para la pericia biológica.
La Inmunología es la ciencia que estudia los mecanismos de reacción genética,
moleculares y celulares del organismo a las sustancias ajenas. Estas pueden ser
microorganismos, células o tejidos que son ajenos en el sentido genético, productos de la
actividad vital de las células ajenas, proteínas, polisacáridos, nucleoproteínas, etc., u
otras “moléculas ajenas” que pueden ser sintetizadas artificialmente.
El sistema de órganos y de células que reaccionan contra las sustancias ajenas, recibió el
nombre de sistema inmune del organismo.
Las sustancias que intervienen en estos procesos son los antígenos y anticuerpos cuya
definición elemental abordaremos más adelante. Estas en general son proteínas que
presentan diversas formas dentro de la especie y aún dentro de los individuos. Según
Ford, polimorfismo genético es la aparición en un mismo locus de 2 ó más alelos
de un gen o sea la variabilidad de expresión de un carácter dado, en propiedades
tales que no sean atribuibles a la mutación.
Estas propiedades presentes en las proteínas y enzimas de la sangre y otros fluidos,
constituyen la base de la identificación criminalística en Biología Legal.
13
Por otra parte, el cuerpo de la mayoría de los mamíferos, consta de 10 12-1013células
genotípicamente idénticas una a la otra, cada una de ellas naturalmente, está sometida al
riesgo de mutación. En las grandes poblaciones celulares, estas mutaciones no
constituyen un riesgo de supervivencia aunque si son reflejos individuales detectables en
los estudios genéticos. En criminalística pudieran también utilizarse estas mutaciones
como expresiones de individualidad para la identificación.
IV.3.1 AFECTACIONES HEMOSTATICAS QUE SE PRODUCEN EN LA SANGRE.
Los mecanismos de coagulación y fibrinolisis que en los seres vivos interactúan para
mantener el equilibrio hemostático, al cesar las funciones vitales, sufren un importante
desequilibrio que se manifiesta en el predominio de la actividad fibrinolítica y en una
transformación gradual de los componentes del flujo sanguíneo, produciéndose lo que se
conoce como “descoagulación postmortem”.
Una determinación de suma importancia en el campo de las Ciencias Forenses lo
constituye el esclarecimiento de la fecha de la muerte atendiendo a la cantidad de
elementos que aporta en la investigación de un delito por lo que es un aspecto que debe
ser establecido con la mayor precisión.
Desde el punto de vista médico-legal, se aplican diversas técnicas para realizar este
diagnóstico, sin embargo se reportan muchas otras más exactas por razón del estudio
electroforético mediante el estudio de los productos de degradación del fibrinógeno que
guardan una relación muy estrecha con el tiempo de muerte.
El otro aspecto que merece nuestro interés en este sentido, es la transformación
bioquímica que se produce en los componentes de la sangre. Como resultado de los
procesos autolíticos se produce la hemólisis al hacerse permeable la cubierta lipídica de
los hematíes. La hemoglobina entonces da lugar a diversos derivados por el efecto del
ácido sulfídrico enteral formándose sulfometahemoglobina.
El establecimiento de éste y sucesivos derivados de la hemoglobina, constituye en la
actualidad, uno de los aspectos utilizados en la determinación de la antigüedad.
IV.3.2 ANTIGENOS
En una forma general, se puede definir el ANTIGENO como una sustancia que
introducida parentalmente en un individuo, es capaz de estimular la producción de un
ANTICUERPO, el cual reaccionará con el antígeno que lo estimuló. Generalmente un
anticuerpo producido por un determinado antígeno, reacciona sólo frente a este y no con
otro. Sin embargo, puede ocurrir que dos antígenos posean ciertos grupos químicos en
común y que un anticuerpo producido por uno de ellos, pueda reaccionar en un
determinado grado frente al otro. Esta aparente dualidad específica, se conoce con el
nombre de Reacción cruzada.
Existen cuatro conceptos que caracterizan la sustancia como antígeno: carácter ajeno,
carácter antigénico, especificidad e inmunogenético.
Carácter ajeno: Es el concepto inseparable del antígeno. Si se toma albúmina del
conejo, entonces para este animal no resultará antígeno, puesto que no resulta ajeno, sin
embargo lo será para otra especie.
Carácter antigénico: Es la medida de la calidad antigénica o sea la mayor o menor
capacidad de provocar la formación de anticuerpos. Así por ejemplo si se utiliza la
ganmaglobulina como antígeno, tendrá mayor carácter antigénico que la albúmina.
14
Especificidad: Son aquellas propiedades que diferencian un antígeno del otro y están
condicionadas por la secuencia de los aminoácidos que forman la cadena polipeptídica,
en particular en su sitio activo o EPITOPO.
Carácter inmunogénico: Es la propiedad de crear la inmunidad y está más relacionada
con los antígenos microbianos.
En la medicina forense, el término antígeno, se identifica con aglutinógeno o sustancia
capaz de producir reunión de otras, mientras que estas otras sustancias son las
aglutininas.
Los antígenos de grupo sanguíneo, son sustancias que están situadas en depresiones
que existen en la superficie de los glóbulos rojos y su naturaleza química aunque aún no
establecida, se asocia a polisacáridos y aminoácidos. Estos antígenos, no están situados
a un mismo nivel en la superficie del hematíe, siendo posible que algunos estén alojados
más profundamente que otros, de ahí su carácter antigénico y su estabilidad ante efectos
negativos.
Los antígenos de grupo sanguíneo, no ocupan en la misma cantidad la superficie de los
glóbulos rojos, por ejemplo, cualquier aglutinógeno del sistema ABO, sobrepasa en miles
a los aglutinógenos del sistema Rh, atendiendo a esta propiedad, es que en condiciones
de máculas hemáticas, resulta también más factible la detección de uno u otro grupo
sanguíneo.
Numerosos antígenos recubren la célula eritrocitaria y se pueden clasificar en:
1.- Antígeno heterófilo: Están repartidos en la naturaleza y por lo tanto sin ninguna
especificidad para la especie humana.
2.- Antígenos de especie: Se encuentran sólo en los glóbulos rojos humanos, aunque
son comunes a todas las personas.
3.- Antígenos específicos: Son propios de los eritrocitos humanos, aunque no están
presentes en todas las personas. Estos son los característicos de los grupos sanguíneos.
Los aglutinógenos en general son sustancias estables y según observaciones de J.
Tumarov, algunos se han hallado en cadáveres de hasta 500 años. Se ha planteado que
durante el proceso de secado de la sangre a temperatura ambiente y luz difusa, ocurre
una disminución inicial de la capacidad de adsorción de los aglutinógenos que tiende a
permanecer estable por un tiempo relativamente largo.
Artamonov L.T, Preserova (9) y otros, han abordado los efectos desnaturalizantes de las
condiciones externas tales como temperatura, luz U.V, humedad que afectan
decisivamente a los sistemas antigénicos menos estables.
Los sistemas de antígeno que se identifican en las manchas de sangre son:






Sistema ABO.
Sistema MNS.
Sistema Rh.
Sistema Kell.
Sistema Lutheran.
Sistema HLA (leucocitos).
IV.3.3 ANTICUERPOS (8).
Los anticuerpos son proteínas que se refieren a una u otra clase de Inmunoglobulinas
cuya síntesis se estimula después de la entrada parenteral del antígeno. Los anticuerpos
o aglutininas poseen la capacidad de interreaccionar específicamente con el antígeno lo
cual es debido a los dominios presentes en cada molécula de anticuerpo. Los dominios
15
son un conjunto de aminoácidos que provocan una estructura de convergencia de la
zona CDR (zonas de reconocimiento complementario) lo que posibilita el acople
específico con el sitio activo del antígeno.
Los anticuerpos constituyen por ende uno de los factores específicos de la inmunidad.
Se conocen cinco clases de Inmunoglobulinas: IgA, IgM, IgG, IgD e IgE. La cantidad
total de inmuoglobulinas en la sangre constituye cerca del 2,5 % (residuo seco), es decir
más de 1/3 de las proteínas plasmáticas como se expresa en la tabla siguiente:
FRACCION
PROTEINAS
Lipoproteínas
Ceruloplasmina
Transferrina
Ig M
Ig G
Ig A
Haptoglobinas
PESO
MOLECULAR
3 000 000
150 000
3 000 000
100 000
160 000
150 000
85 000
CONCENTRACIÓN
1,5
0,3
3,0
1,0
11,0
1-2
1,0
La capacidad de reaccionar con la elaboración de inmunoglobulinas específicas
(anticuerpos), es propia no sólo de los mamíferos. En todos los vertebrados se han
reportado al menos las IgM, por lo que desde el punto de vista filogenético, es la forma
más temprana de los anticuerpos.
El suero de un animal inmunizado contra determinado antígeno, que contiene anticuerpos
se llama suero inmune o antisuero. Estos son los productos que la Biología Legal, emplea
en los diagnósticos específicos e individuales de las máculas hemáticas, los que deben
ser capaces de tener títulos elevados de reacción para lograr mayor sensibilidad.
En la actualidad, para obtener anticuerpos monoespecíficos con respecto a los antígenos
aislados se utilizan los anticuerpos monoclonales. G. Kohler y K. Milstein (1975) (10)
elaboraron la metodología de obtención de los híbridos celulares (hibridomas), mediante
la unión de los linfocitos normales de los animales inmunizados con las células de cepas
mielómicas cultivadas en un medio nutritivo.
La unión de los linfocitos con las células mielómicas, se realizan con ayuda de
polietilglicol.
Las células hibridómicas resultantes reciben del linfocito la capacidad de sintetizar el
anticuerpo determinado y sobrevivir en el medio (HAT) del cultivo mielómico reciben la
capacidad de multiplicarse indefinidamente in vitro, los anticuerpos sintetizados a partir de
esta clona son idénticos en todos los parámetros e interacciona sólo con un antígeno.
Los anticuerpos eritrocitarios son numerosos y pueden agruparse atendiendo a su
especialidad, a la forma de actuar sobre los glóbulos rojos o según su aparición.
Entre otras clasificaciones atendiendo a su especialidad pueden dividirse en:
 Heteroanticuerpos: los que aglutinan los glóbulos rojos de diferentes especies.
 Isoanticuerpos: Reaccionan con los glóbulos rojos de ciertas personas. Son los
anticuerpos de los grupos sanguíneos.
Según su aparición pueden dividirse entre los que aparecen sin que se haya producido
una inmunización o estímulo antigénico a los que se denominan anticuerpos naturales y
tienen como característica principal la de actuar “in vitro” a temperaturas menores de las
del cuerpo humano; entre estas se encuentran las aglutininas anti A y anti B del sistema
AB0, MNS, P y otro grupo de anticuerpos inmunes cuya óptima reacción ocurre a la
temperatura del cuerpo humano, ejemplo sistema Rh.
16
Atendiendo al medio en que reaccionan se clasifican en completas e incompletas. Las
aglutininas que reaccionan con el glóbulo rojo en cualquier medio de dilución (salino o
coloidal) son las aglutininas completas bivalentes o salinas. Por el contrario las que no
son capaces de reaccionar en medio salino se les denomina monovalentes, incompletas,
albuminoideas, etc. Las aglutininas naturales del sistema AB0 son del tipo completo.
IV.3.4 REACCIONES ANTIGENO-ANTICUERPO
Las reacciones de la interacción específica de los anticuerpos séricos con los antígenos
contra los cuales están dirigidas son fenómenos de superficie que no altera la estructura
primaria de las moléculas involucradas y tienen como característica:
1.- Especificidad: El anticuerpo puede fijarse únicamente con el antígeno del cual
procede. Este concepto se aplica a la detección de todos los sistemas de grupo
sanguíneo ya que las reacciones pueden ocurrir in vivo o in vitro mediante la Adsorción.
Es el denominado principio “llave-cerradura” (Anexo No.4).
2.- Reversibilidad: Esta reacción antígeno anticuerpo constituye una reacción de
equilibrio sometida a la ley general de acción de masas, siendo necesaria para el
desplazamiento del equilibrio, ciertas condiciones de pH, fuerza iónica y temperatura,
posibilitando la separación del anticuerpo de su antígeno, proceso conocido como
Elución.
Se conocen diversos tipos de reacciones entre antígeno y anticuerpos, cuya observación
es fácil en condiciones de laboratorio.
Aglutinación
Los antígenos que se encuentran en suspensión, en presencia de los anticuerpos se
adhieren entre sí formando grumos visibles, esta aglutinación puede ser directa si
anticuerpos y antígenos actúan directamente o pasiva en los casos en que el antígeno se
añada a un portador corpuscular (partículas de látex, etc.) y la adición de los anticuerpos
a estos portadores conducen a su adhesión. Esta reacción de aglutinación pasiva se
caracteriza por su alta sensibilidad y es capaz de revelar cantidades muy pequeñas de
anticuerpos.
Precipitación
Es el efecto de agregación de las partículas antigénicas por la presencia de anticuerpos,
produciendo una turbidez en la zona de reacción produciendo un complejo insoluble
antígeno anticuerpo, sólo si existe proporción entre ambas biomoléculas. De no existir
correspondencia se forma un complejo diluible. La reacción puede ocurrir en medios
líquidos o gelificados y pueden aplicarse diversos métodos:
 Inmunofluorescencia que consiste en añadir colorante fluorescente a las
moléculas de anticuerpos y hacerlos reaccionar con los antígenos
correspondientes, siendo detectadas por reacciones ultravioleta.
 Concurrencia con el antígeno radioactivo (radio inmunológico) permite un
registro cuantitativo de la reacción antígeno anticuerpo mediante la medición de
radioactividad del precipitado.
 Método inmunoenzimático, consiste en fijar antígenos o anticuerpos a un soporte
específico poner en contacto estas con el elemento a investigar, para que se
produzca la acción de precipitación se marcan los antígenos o anticuerpos con
enzimas y se añaden al medio anterior, estos anticuerpos o antígenos marcados
se unen a los complejos formados y se añade entonces el sustrato colorante. De
17
ser positiva la reacción, se producirá un cambio de color como resultado de la
degradación del sustrato por la enzima fijada (Anexo No.5).
3.- Fenómeno de lisis: es la capacidad de algunos anticuerpos de disolver las células
contra las cuales ellas surgieron, para esto es necesario la presencia de complemento.
4.- Existen otros tipos de reacciones antígeno anticuerpo como el fenómeno de
retardo específico, de neutralización de toxinas, el fenómeno de opsonificación,
etc.
El estudio de estas biomoléculas, no resultaría imprescindible en la Biología Legal si ellas
como otras proteínas y enzimas, no tuvieran diversas formas de aparición o sea no fueran
polimórficas.
Según Cavallisforza, la aparición en un locus de más de una forma de un gen o sea de
varios alelos, es el polimorfismo y el carácter que lo determina, carácter polimórfico. Esta
multiplicidad de expresión de los antígenos y anticuerpos, condicionan su uso como
marcadores genéticos en el diagnóstico individual de la mácula y su correlación con
víctimas y/o autores.
IV.4 INVESTIGACION EN SANGRE SECA.
El objetivo final en Biología Criminalística en cuanto a sangre se refiere, es tipificar la
mancha e identificar la fuente de origen, de ahí la importancia del análisis de la mayor
cantidad posible de antígenos que permitan llegar a conclusiones precisas. Estas
determinaciones están limitadas por determinados efectos propios del hecho o de la
fragilidad de la huella hemática, tales como:
Poco material disponible.
Carácter de irrepetibilidad.
Interferencia del soporte.
Antigüedad de la mácula.
Presencia de contaminantes.
Factores ambientales.
La actividad de los antígenos de la célula roja varía con el tiempo, estas variaciones están
condicionadas por las condiciones ambientales a que estuvieran expuestas las máculas,
pudiendo en los casos severos, llevar a la inactivación de las propiedades. Por lo
general, cuando se produce un secado rápido, se retienen por mayor tiempo las
propiedades inmunológicas.
Por otra parte los efectos ambientales fundamentalmente el medio húmedo, facilitan el
crecimiento de microoorganismos que actúan como contaminantes, llegando a producirse
durante el diagnóstico de la agrupación falsas aglutinaciones por expresión predominante
del antígeno de los microorganismos (Maza y colaboradores, 1995).
Dentro de las propiedades antigénicas de la sangre, la detección de aglutinógenos,
resulta más estable que la de aglutininas, utilizándose por ello técnicas diferentes para el
estudio de las primeras. Resulta vital el conocimiento del tipaje de las muestras de los
involucrados a fin de seleccionar que antígenos analizaremos en la huella hemática
considerando los dos primeros limitantes expuestos.
Atendiendo a que en las condiciones de la sangre seca, los hematíes están destruidos y
no es posible visualizar las reacciones antígeno-anticuerpo por el fenómeno de
aglutinación, es necesario aplicar métodos indirectos.
18
En sangre seca, al realizar los estudios de individualidad, debe preveerse en lo posible
tomar áreas maculadas, próximas a la zona de mayor intensidad (costras), desechando
de ser posibles éstas al considerar que durante el proceso de secado, tienden a quedar
hacia las áreas exteriores de la mácula, los componentes del plasma, concentrándose en
el centro de ésta, los estromas eritrocitarios atendiendo a su mayor densidad.
Por otra parte, al trabajar en sangre seca, vale mencionar que para ofrecer una respuesta
pericial, cualquiera sea la determinación que se realice, constituyen requisitos
indispensables el trabajo con controles y obtener un resultado sin término de dudas, para
lo cual deberán realizarse cuantas repeticiones sean necesarias, siendo lo anterior un
aspecto inviolable según establecen las buenas prácticas de laboratorio.
Otro aspecto a considerar en la investigación de las máculas, es la detección del
mecanismo que motivó su formación. Según Simonin, se pueden distinguir los siguientes
mecanismos:
1.- PROYECCION: Cuando la sangre sale proyectada con cierta fuerza, bien
describiendo una curva parabólica o en caída libre.
2.- ESCURRIMIENTO: La sangre por determinada concentración, al ir cayendo por
acción de la gravedad, forma regueros, charcos.
3.- CONTACTO: Cualquier objeto ensangrentado, al contactar con un receptor, deja una
impresión, en los casos de mayor concentración se le denomina IMPREGNACION.
4.- LIMPIADURAS: Es un mecanismo mixto de contacto e impregnación, en ella
generalmente decrece la intensidad del color hacia uno u otro sentido.
Cuando una mancha cae perpendicularmente sobre una superficie, la mácula
redondeada que se produce, depende de la cantidad de sangre que forma la gota, de la
altura de la caída y de la superficie sobre la que cae.
 Altura: Si es pequeña, la mancha tiene forma de un disco redondeado, medida que
aumenta la altura, el diámetro es mayor y los contornos más irregulares, apareciendo
pequeñas gotas satélites que se forman al romperse la tensión superficial de la
sangre.
 Naturaleza del soporte: En superficies no absorbentes se forman gotas más
circulares, en superficies rugosas o interrumpidas, las máculas son irregulares y con
numerosos satélites mientras que en substratos porosos o absorbentes, predomina el
mecanismo de impregnación y no hay satélites.
Si por el contrario, la caída es oblicua, la mácula se alarga en el sentido de la dirección
del movimiento, llegando a formarse gotas alargadas con satélites en punta cual signo de
admiración que indican el sentido de la inclinación.
Si se hallasen numerosas pequeñas gotas a gran distancia y en ausencia de otras
mayores, deberá pensarse en un mecanismo de proyección a gran velocidad como un
disparo a boca tocante.
De cualquier manera la observación de los mecanismos de formación, es específica en
cada caso y nunca conducirá a conclusiones categóricas, siendo su función aportar
elementos que permitan reproducir las condiciones del hecho (Anexo No.6).
IV.5 INVESTIGACIONES ANALITICAS
IV.5.1 INVESTIGACION DE LA PRESENCIA DE SANGRE
Establecer la presencia de sangre, conlleva dos momentos definidos:
19
1.- Posibilidad de Orientación
2.- Certeza.
Las reacciones de posibilidad son aquellas orientadoras, presuntivas, muy sensibles que
indican la probable existencia de sangre. En esta gama de pruebas las hay físicas como
la iluminación con UV que produce una fluorescencia inespecífica para todos los
compuestos orgánicos, basadas en la generación de color u organolépticas (olor, color,
impregnación) cuyo resultado negativo es categórico ya que existen otras sustancias que
pueden tener similar comportamiento.
Las pruebas de certeza, se basan en las propiedades bioquímicas e inmunológicas o en
el establecimiento de los componentes de la sangre, confirman por tanto sin dudas la
presencia de sangre y requieren de una rutina analítica más compleja.
De acuerdo con la metodología empleada, las pruebas de certeza se pueden dividir en
técnicas microscópicas, microquímicas o cristalográficas e inmunológicas.
El principio básico del método de Adler o Bencidina acética el más usado como
orientación, reside en la propiedad de la hemoglobina como otras peroxidasas de unirse
reversiblemente con el oxígeno en reacciones REDOX, en función del pH del medio. La
unión de la Hemoglobina con el oxígeno, responde a:
HHb
+
O2
HbO2 +
H.+
Atendiendo a la concentración de hemoglobina y el pH del medio, la reacción se
desplaza en uno u otro sentido, viéndose favorecida hacia la formación de
oxihemoglobina (oxidada) en un medio básico y hemoglobina en forma reducida cuando
el medio es ácido. La prueba de Adler consiste en enfrentar la supuesta mácula hemática
(portadora de la hemoglobina) con peróxido de hidrógeno en un medio ácido,
suministrado por la bencidina acética para favorecer la forma reducida con liberación de
oxígeno y aparición de una coloración azul intensa que corresponde a la forma oxidada
de este azocompuesto.
Los métodos para el establecimiento de la presencia de sangre, también utilizan
sustancias como el guayacol, luminol o toluidina, fenolftaleina, peróxido de
hidrógeno (para las catalasas). Otros sin embargo están basados en técnicas
microcristalográficas (cristales de Teichman) al tratar la supuesta mácula con ácido
sulfúrico concentrado o microespectroscópicas destinadas al establecimiento de los
derivados de la hemoglobina en especial hemocromógeno y hematoporfirina.
Por otra parte existen métodos basados en la absorción atendiendo a las propiedades
que tienen las sustancias de absorber luz a determinada longitud de onda, es la conocida
reacción de Takayama. Se utilizan también la Cromatografía en placa fina basada en el
Rf característico de la sangre.
IV.5.2 INVESTIGACION DE LA ESPECIE.
El diagnóstico específico consiste en la determinación de la especie a que corresponde la
sangre cuya presencia demostramos. Para realizar estas determinaciones se utilizan
reacciones antígeno-anticuerpo del tipo de precipitación en medios líquidos (ChistovichUhlenhuth) como en medios gelificados (Inmunodifusión radial de Ouchterlony) o
medios gelificados con gradiente eléctrico (contrainmunoelectroforesis).
En todos los casos se enfrenta el antígeno desconocido a una batería de heterosueros de
diversas especies obtenidos por inmunización de animales de laboratorio, estos
antisueros obtenidos deben cumplir como condición esencial el tener un título elevado
20
(1:10 000), entiéndase por tal la mayor dilución a la que este suero es capaz de
reconocer los antígenos homólogos (Anexo No.7).
La determinación de la especie, presenta como posibilidad de error, todas las que se
derivan de la calidad del antisuero usado o de la proporción entre la cantidad de antígeno
(mácula), cantidad de antisuero, estos errores no abarcan la existencia de reales
reacciones cruzadas o simultaneidad de respuesta, aspecto que puede y debe ser
resuelto en la analítica de trabajo, ante esta posibilidad se hace necesaria la repetición de
la determinación y el control de cada componente de reacción.
IV.5.3 DIAGNOSTICO INDIVIDUAL
Comprende el conjunto de marcadores genéticos que una vez tipificados en las muestras
de víctimas y sospechosos y reconocido en las máculas hemáticas, permiten establecer o
no la relación entre ellos.
De los sistemas de enzimas que se localizan en la sangre, las metodologías de
investigación para sangre seca, abarcan siete sistemas de grupo con 15 alelos y 12
sistemas de proteínas y enzimas polimórficas cuyo estudio escalonado permite establecer
dos situaciones:
1ra.- La mácula coincide con los sistemas de grupos o marcadores analizados lo que
conlleva a una conclusión pericial de correspondencia en la que deben especificarse los
marcadores para los que hay coincidencia.
2da.- La mácula de sangre expresa propiedades de grupo o fenotipos diferentes a las
muestras analizadas. En estos casos la conclusión que formulará el informe pericial,
expresará también la no-correlación.
Además de los sistemas o antígenos de grupo ya citados (ABO, MNS, Rh, Lewis, etc.)
que constituyen la etapa inicial en el diagnóstico individual, se analizan atendiendo a sus
polimorfismos sistemas proteicos como:




Hemoglobina (Hb)……… con cinco fenotipos
Transferrina(Tf)………… con cuatro fenotipos
Haptoglobinas(Hp)……… con tres fenotipos.
Albúminas(Alb)………… con tres fenotipos.
Se analizan también sistemas polimórficos de enzimas como fosfoglucomutasa (FGM),
esterasas (Est) y fosfatasa ácida (FA).
Para el análisis de estos sistemas de proteínas se utilizan métodos electroforéticos en
diferentes soportes (papel, acetato de celulosa, acrilamida, almidón), atendiendo al
tamaño, fuerza iónica y característica de las proteínas.
La Criminalística ha empleado diversos métodos para el análisis de los sistemas de grupo
en manchas de sangre en sus distintas etapas de desarrollo, en busca de respuestas
más certeras, específicas y rápidas. En unos se establecen las propiedades de los
anticuerpos y en otros de los antígenos. Aún cuando evidentemente unos métodos
superan a otros en especificidad, son las condiciones del hecho y de su aplicación
materiales y recursos disponibles, los que en última instancia condicionan la selección del
método. Sirva de ejemplo a la expresado, la necesidad de realizar la revelación de
aglutininas (Método de Lattes), ante la ausencia del o los antisueros correspondientes ej:
Anti H para revelar grupo O.
Se presenta a continuación una breve reseña de los principios que sustentan los métodos
empleados en el diagnóstico de individualidad mediante los estudios de los grupos
sanguíneos en particular del Sistema ABO.
21
 Establecimiento de aglutinógenos en manchas de sangre por el Método de
Absorción-Cuantitativa. (1981).
Basado en el fenómeno de absorción de las aglutininas, es decir, en la capacidad de los
aglutinógenos de la sangre de absorberlos o unirlos mediante el contacto. La reacción
debe iniciarse comprobando la actividad de las aglutininas del suero, luego de producida
la absorción, la titulación final y el descenso del título inicial del suero en al menos tres
grados, indicará el aglutinógeno presente en la mancha.
Debe precisarse que un desbalance cuantitativo entre aglutininas y aglutinógenos, puede
provocar falsos resultados.
 Determinación de las aglitininas alfa y beta por el Método del cubreobjetos o
Lattes (1981). Método de aglutininas por centrifugación (1976).
En ambas metodologías se plantea la forma de revelar las aglutininas presentes en una
mácula hemática, basadas en la capacidad recíproca de estas de aglutinarse frente a
hematíes (portadores de antígenos) homólogos.
Durante la realización de estos métodos debe considerarse que existe un grado desigual
de estabilidad entre las aglutininas beta y alfa siendo mayor en las primeras así como la
posible influencia de fenómenos no específicos que producen aglutinaciones fácilmente
reversibles por ligeros toques en la preparación.
Para la interpretación de los resultados se deben considerar los casos de los grupos O y
AB que portan ambas o no portan aglutininas respectivamente.
Por último, la elección de uno u otro método estará en dependencia de la cantidad de
mácula a investigar su antigüedad y soporte portador, siendo recomendable el método de
centrifugación, cuando se trate de pequeñas máculas muy viejas o adheridas
fuertemente a un soporte con poca reflexión.
 Determinación de la agrupación a través de la reacción de aglutinación mixta.
Se fundamenta en la bivalencia de los anticuerpos, de esta forma el anticuerpo se une a
los antígenos de la mancha por una de sus valencias y luego de añadir la suspensión de
eritrocitos homólogos, se unirán por la otra valencia produciéndose una aglutinación que
evidencia la posibilidad de la reacción.
Este método se utiliza en pequeñas máculas donde no es posible la detección separada
de aglutinógenos y aglutininas.
 Determinación de antígenos por el Método de Adsorción-Elución (1984).
Basado en las características de las reacciones antigénicas de Adsorción reversible del
antígeno, consta de dos etapas básicas, la primera para el reconocimiento entre antisuero
y antígeno de la mancha y la segunda en la que al incrementar la temperatura de
reacción, se produce la Elución o separación del complejo formado, el que es
posteriormente revelado por aglutinación en presencia de las suspensiones de eritrocitos
homólogos.
Mediante este método es posible la detección de los antígenos eritrocitarios que se
estudian en al especialidad, con pequeñas modificaciones en función de sí los
anticuerpos son naturales o inmunes, completos o incompletos.
 Tipaje de las muestras de sangre líquida.
22
A.- Método directo: Basado en la propiedad de eritrocitos y sueros homólogos de
aglutinarse cuando se enfrentan. Es válido para la detección de los antígenos de los
sistemas ABO, MNS y Rh.
B.- Reacción Cruzada o Método de Schiff: En sangres bien conservada, donde es
posible la decantación de los elementos formes del plasma, se investigan por
separado ambos componentes enfrentando el plasma a antígenos conocidos y los
eritrocitos a la batería de antisueros conocidos, produciéndose reacciones de
aglutinación ante los reconocimientos antígeno-anticuerpo homólogos.
 Otras determinaciones.
Además de los aspectos ya abordados, en hechos de abortos criminales o infanticidios,
resulta determinante el establecimiento de alfa feto proteínas (AFP) en las evidencias con
máculas hemáticas, lo cual es posible a través de una reacción antígeno-anticuerpo que
se desarrolla por Contrainmunoelectroforesis con el uso de antisueros comerciales
contra AFP.
La AFP es una seroproteína de una cadena polipeptídica, cuya concentración es muy
elevada durante todo el embarazo en la madre y el feto y que tiende al descenso en los
tres primeros meses de vida. Se plantea que funcionalmente está asociada a
mecanismos de inmunidad y migra electroforeticamente entre la albúmina y las gamma
globulinas.
Otras determinaciones como la región de procedencia y el sexo a que corresponden, así
como los estudios de ADN en sangre, son presentados en otros capítulos del texto.
IV.6 PERSPECTIVAS.
El desarrollo de la Biología Molecular en el mundo y en particular en nuestro país, han
permitido aislar el ADN de células y tejidos y con ello lograr un alto grado de
individualización al permitir discriminar la procedencia del fluido de una u otra persona.
Evidentemente esta constituye la primera perspectiva
de desarrollo en las
investigaciones de sangre. Sin embargo, no resulta aún factible la generalización de éstos
análisis en todas las pericias de sangre por lo que consideramos deben existir dos líneas
fundamentales de investigación que ya se desarrollan.
 Búsqueda de métodos más sensibles y eficaces en la detección de los marcadores ya
establecidos.
 Búsqueda de nuevos sistemas polimórficos que amplíen la respuesta pericial.
En cuanto a nuevos métodos de trabajo, se labora en la implantación de un método
inmunoenzimático para la determinación del grupo en sangre seca (SISTABO) (Anexo
No. 8).
Estas y otras determinaciones encaminadas a lograr antisueros monoclonales o
policlonales purificados para el diagnóstico específico, permitirán cumplir el objetivo de
ofrecer respuestas cada vez más individualizantes en el menor tiempo posible y con ello,
coadyuvar al esclarecimiento del hecho delictivo.
IV.7 REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
1.- Giblett (E.R)- Genetics Markers in human blood. Oxford, Londres, 1975.
2.- Landsteiner Karl (1900). Citado de Hematología Clínica. Ed. Rev., 1972.
23
3.- Weiner (R.R) et Sangre (E). Blood group in man. Edimb., 1975.
4.- Levine (T) et al. Citado de Hematología Clínica. Ed. Rev., 1972.
5.- Brownm (A:H). Compendio of Identification. Toronto, 1976.
6.- Lagajo Gabinete Nacional de Identificación. Tomo 1, 1936.
7.- Cavallisforza M. Ford F. The distribution of the human blood groups. N.Y. Esh., 1935.
8.- Petrov. R.V. Inmunología. Editorial Mir, Moscú. 1987.
9.- Artamonov L.T, P.Ya. Fundamentos celulares de la hematopoyesis. M.M, 1977.
10.- Kohler .U. K.M. Hibridomas. Sci., 1985.
11.- Maza y colaboradores. Falsas aglutinaciones por contaminación microbiana. LCC.
1995.
REFERENCIAS GENERALES.






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Calabuig. J. A. Medicina Legal y Toxicológica. Edic. ISBN, 1983.
Maxwell M. Wintrobe M.D. Hematología Clínica. Ed. Rev. 1971.
Prokop O. Los grupos sanguíneos humanos. Ed. Científico Médico, 1970.
Reimann. O. Prokop. Vade Medum de Medicina Legal. Ed. científico-técnico, 1987.
Súarez Batista LE, Rivero Jiménez RA, Bencomo Hernández AA y col. Ensayo de
terreno de anticuerpos momoclonales hemoclasificadores obtenidos en Cuba,
1997;13 (1): 63-69.
Bencomo Hernández AA, Alfonso Valdés Y, Alfonso Valdés y col. Frecuencia de
los grupos sanguíneos A1, A2, Aint, Ael, B y O en donantes de sangre, 1997; 13
(2): 124-131.
Alfonso Valdés Y, Bencomo Hernández AA, Díaz Salazar M y col. Caracterización
serológica de anticuerpos monoclonales contra el sistema ABO y antígenos
relacionados, 2000.
V. SECRECIONES ESPERMATICAS
V.1 INTRODUCCION
Los delitos sexuales presentan en sí los más variados aspectos de la alteración de las
relaciones sexuales; violación de los menores, violación valiéndose del estado indefenso
o utilizando la fuerza física, acciones depravadas, abusos deshonestos, estrupo, etc.
La investigación de semen en la criminalística está relacionada con los delitos sexuales,
siendo de gran importancia la determinación de este en la ropa de la víctima, lo que
constituye un elemento de prueba importante en el esclarecimiento de estos hechos.
En todos los casos de delitos sexuales una de las pruebas fundamentales son las huellas
de líquido seminal.
La importancia consiste no solo en su identificación, sino que al igual que el resto de las
secreciones del organismo humano, posee las propiedades de grupo, por lo que es
posible determinar el grupo sanguíneo en él, pudiendo establecer una relación entre el
semen y el individuo a investigar.
El líquido espermático se puede presentar al investigador de tres formas:
 Como mancha impregnando un tejido.
 Como fluido mezclado con otros fluidos corporales, como la secreción vaginal.
24
 Como semen o líquido espermático cuando se obtiene directamente del sujeto para
una investigación de fertilidad.
El estudio del líquido espermático bajo cualquiera de estas formas, resulta de interés para
la criminalística relacionado con los delitos sexuales.
Entre las huellas que pueden resultar de la comisión de un delito contra la libertad sexual
figuran las manchas de esperma sobre las ropas, sobre el propio sujeto o sobre la
víctima, constituyendo así una prueba de la mayor importancia.
Además la presencia de esperma en la vagina puede ser el único dato para establecer el
diagnóstico de la cópula en una mujer ya desflorada.
Por otra parte el abuso deshonesto se materializa en la relación de actos libidinosos, cuya
ejecución quedaría automáticamente demostrada por la presencia del líquido espermático
sobre la víctima, siempre que las circunstancias del caso no merecieran una tipificación
de mayor gravedad, como violación en grado de tentativa.
Cuando se trata de una investigación sobre la víctima de una violación o hecho de
Pederastía, se busca el líquido en la vagina o el recto respectivamente, mediante
exudados.
El tiempo post-coito en el que se puede encontrar espermatozoides en la cavidad vaginal
varía de unos autores a otros. Summer (1965) dice haberlos demostrado después de
algunos días. Rupt (1969) encuentra espermios en vagina durante un período de 14
horas. Glaister ha detectado espermatozoides completos hasta después de 85 horas. De
todos modos, cuanto más precozmente se proceda, mayores posibilidades de éxito
habrá.
V.2 Características del esperma.
El esperma es un líquido filante, de color opalino, que tiende a amarillo verdoso cuando
pasa el tiempo y de olor típico.
Está constituido por dos elementos:
 Células o espermatozoides, que proceden de los túbulos seminíferos del testículo.
 Plasma seminal, que proceden del epidídimo, próstata, vesículas seminales y
glándulas de Cowper. Sirve como soporte, vehículo, medio nutricio y de estabilización
al espermatozoide.
El líquido espermático contiene unos 100 millones de células por cm 3. El esperma es muy
característico desde el punto de vista morfológico, el espermatozoide es tan peculiar
entre todas las células que cuando se ha visto uno al microscopio, no se olvida jamás.
V.3 Composición del plasma seminal:
 Bioquímicas:
Glúcidos.- fructuosa, ribosa, inositol y sorbitol.
Compuestos nitrogenados., gran concentración de aminoácidos libres, aminas
(espermina, colina y etanolamina) y ergotionina.
 Antigénicas:
Albúmina, dos o tres -globulinas (una de ellas es una fosfatasa ácida y otra una
glicoproteína), dos -globulinas (una de ellas es una siderofilina) y una -globulina.
De los 8 antígenos descritos en el plasma seminal, cuatro son específicos del mismo, es
decir, tienen especificidad del órgano.
25
 Enzimáticas:
Fibrinolisina, aminoxidasa, fosfatasa ácida, fosfatasa alcalina y 5-nucleotidasa.
 Lípidos:
Lecitinas y ácidos grasos (prostaglandinas).
 Minerales:
Cinc y calcio.
Cuando el semen aparece en forma de mancha, su morfología varía según el soporte
donde aparece:
Sobre la piel, cuando se deseca, adopta el aspecto de una película fina, como de
pegamento, que clásicamente se compara a un “rastro de caracol”. Estas manchas
deben buscarse tanto en la víctima como en el sospechoso, a nivel de zonas típicas:
Pubis, cara interna de los muslos y labios mayores. Los pelos impregnados tienen un
aspecto como engomado.
Sobre tejidos absorbentes forma unas manchas típicas, con una característica tiesura,
como si el tejido estuviera almidonado. Si la mancha es reciente tiene un olor típico.
La morfología de las manchas es irregular, con unos contornos bien delimitados, que
han justificado su comparación con “cartas geográficas”. Adquieren rigidez como si
estuviera apergaminado o almidonado y los bordes son generalmente más oscuros.
Según el mecanismo de formación, también varía su morfología:
Si se debe a una eyaculación se produce una gran zona manchada con su típico
aspecto en mapa.
Si se debe a una limpieza del meato o al enjugamiento del miembro, la mancha no
tiene ese aspecto típico.
Las prendas sospechosas deben ser examinadas a la luz ultravioleta de Wood. Las
manchas de esperma dan una fluorescencia blanco-amarillenta, que va ganando amarillo
con el tiempo. El examen de fluorescencia permite diferenciarlas de las manchas debidas
a otros productos, como orina (fluorescencia celeste), pus, moco o secreción vaginal. Se
trata de una prueba de gran valor de orientación y localización.
V.4 INVESTIGACIONES ANALITICAS
Prácticamente se plantean idénticos problemas a los expuestos para las manchas de
sangre:
 Un diagnóstico genérico o de la naturaleza espermática de la mancha.
 Un diagnóstico de especie.
 Un diagnóstico individual.
En esta secreción existen determinadas enzimas que no se presentan en la misma
cantidad en otras secreciones humanas. Estas son la hialuronidasa, la histaminasa y la
fosfatasa ácida. Esta última constituye una prueba de orientación para la presencia de
semen.
Marcha analítica para el diagnóstico de las manchas de esperma (Anexo No. 9).
V.5 REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
Calabuig. J. A. Medicina Legal y Toxicología. Edic. ISBN, 1983.
Crowe. G, Moss D and Elliot D. The effect of laundering on the detection of acid
phosphatase and spermatozoa on cotton T-shirts. Canadian Society of Forensic
Science. Vol. 33. No. 1. 2000.
26
Cushing. E. John. Principios de Inmunología. Cap. XIII, XIV y XV. Pág. 237-302.
VI. OTRAS INVESTIGACIONES
VI.1 INTRODUCCION
En el campo de la Biología Criminalística se investigan otras manchas biológicas como
la secreción vaginal, saliva, orina, heces fecales que aunque no constituyen
investigaciones de rutina, pero en algunos casos particulares se interesa su
determinación. En determinados casos pueden constituir elementos importantes para el
esclarecimiento de un delito.
Los antiguos filósofos y naturalistas, en especial Aristóteles en la Antigüedad y Paracelso
en el Renacimiento, llegaron a la conclusión de que “todos los animales y vegetales,
por más complicados que sean, están constituidos por unos pocos elementos que
se repiten en cada uno de ellos”. Se referían a las estructuras macroscópicas de un
organismo, como las raíces, hojas y flores comunes a diferentes vegetales o a los
segmentos u órganos que se repiten en el reino animal.
27
Muchos siglos después, gracias a la invención de las lentes de aumento, se descubrió
que detrás de esa estructura macroscópica existe todo un mundo de dimensiones
microscópicas.
Por lo tanto, la célula es una unidad morfológica y fisiológica en la estructura de los seres
vivos, así como el átomo lo es en la estructura química.
El desarrollo y perfeccionamiento de las técnicas microscópicas permitieron obtener un
mejor conocimiento de la estructura celular, no solo como aparece en una célula muerta
por fijación, sino también como se le ve en estado viviente.
La Citología (o como se le denomina actualmente, Biología Celular, es una de las
ramas más jóvenes de las ciencias naturales, no es más que el estudio científico de las
células, sus estructuras, funciones, actividades, etc.).
VI.2 FUNDAMENTOS TEORICOS
Las investigaciones citológicas en la Criminalística permiten entre otras con su estudio
afirmar que estamos en presencia de células de origen genital ya sea femenino o
masculino.
Tras la búsqueda de definir el lugar de procedencia de las células epiteliales, es decir, de
que órgano provienen, en estas investigaciones se estudian sus características
morfológicas, tipo de células, tamaño, etc.
En las huellas de sangre pudiéramos con esto no solo llegar a concluir el grupo por
determinado sistema, sino que con las investigaciones citológicas, puede determinarse si
la sangre es de origen vaginal, nasal, bucal o de alguna otra parte del cuerpo humano.
Constituye también objeto de estudio de esta rama, la determinación del sexo en
diferentes elementos biológicos.
En un delito sexual es de suma importancia el hallazgo tanto de las células espermáticas
en las prendas de vestir de la mujer, como células vaginales en las prendas interiores del
hombre.
VI.3 DETERMINACION DEL SEXO.
En la mayoría de los mamíferos, es posible diferenciar en sus células la cromatina X,
mientras que la Y es sólo reconocible en el hombre y el gorila.
En la sangre seca, sólo con una porción de 0,5 cm 2, es posible la realización de esta
investigación que se basa en técnicas de tinción y observación al microscopio de
fluorescencia para la detección de la cromatina Y, la que se presenta en los neutrófilos y
eosinófilos como una semiluna tanto en la membrana del núcleo como en su superficie.
Es necesario realizar además tinciones en la propia preparación que conlleven a la
detección de la cromatina X. Al valorar los resultados si la sangre es del sexo masculino,
sólo se observará la cromatina Y, sucediendo lo propio en caso del sexo femenino.
En el caso de pelos arrancados (con envoltura vaginal), es posible la detección del sexo
en estas células de la raíz, realizando el proceso de extracción a partir de ellas. En este
caso en el que no es posible una mezcla de sexo, con sólo 5 células investigadas y
observando en tres de ellas la cromatina Y y en ninguna la cromatina X, se trata de un
pelo procedente de un hombre.
La determinación de sexo, también es factible realizarse en células de secreciones en las
que también pueden observarse por métodos de microscopía, los corpúsculos de Barr o
cromatina X, así como las posibles anomalías relativas a sexo (trisomías).
Actualmente se emplea la técnica de ADN para determinar el sexo (Ver Capítulo VIII).
28
VI. 4 SECRECIONES FEMENINAS
Las secreciones femeninas pueden ser de dos tipos:
 Secreciones vaginales.
 Secreciones menstruales.
Secreciones vaginales:
Las secreciones vaginales son objetos de análisis en las prendas de vestir
correspondientes al hombre en los casos de delitos sexuales.
El órgano genital femenino está recubierto de células epiteliales que contienen gran
cantidad de glucógeno, el que junto con el almidón constituyen los polisacáridos de
reserva más importantes.
El contenido de glucógeno en las mujeres varía de acuerdo con la edad, estando ausente
en la edad de la infancia, la pubertad y la menopausia. Se observa en abundancia a partir
del período de pubertad y durante el embarazo.
El epitelio vaginal está formado por diferentes capas de células:
 Células basales: son las más pequeñas, con un núcleo relativamente grande en
correspondencia con el diámetro de la célula, se colorea intensamente con
Hematoxilina, no siendo posible la observación de la cromatina.
 Células parabasales: se forman en la superficie del epitelio. Tienen forma
redondeada, pudiendo ser ovoides. El núcleo es mayor que en las basales. Se puede
reconocer mejor la estructura cromática.
 Células intermedias: aparecen hasta la terminación de la etapa de maduración por la
acción de las hormonas. Son las más grandes y su núcleo es pequeño. El citoplasma
es rico en glucógeno y se presentan fundamentalmente durante el embarazo.
 Células superficiales: son las más maduras del epitelio, con un núcleo pequeño y
abundan durante la etapa de la pubertad y anterior a esta.
Secreciones menstruales:
El útero está recubierto por células epiteliales y endometriales. La sangre de la
menstruación se presenta durante el período de reproducción de la mujer y normalmente
en un ciclo de 28 días. Debido a esto se desprende del útero durante la menstruación
células epiteliales, tejido endometrial y tejido hemático.
La sangre de menstruación está compuesta por eritrocitos, leucocitos, células intermedias
y células endometriales.
Las células endometriales son células agrupadas, con poco citoplasma y de núcleo
grande en relación con el citoplasma. Las células se superponen, por lo que es difícil
definir el citoplasma de una y otra.
El glucógeno se observa al microscopio en forma de una roseta alrededor del núcleo y se
tiñe de rosado con Best Carmín.
Las secreciones vaginales pueden ser objeto de análisis de dos formas:
Como huella de secreción vaginal.
29
Investigar una huella de sangre en la zona vaginal pudiendo estar mezclada con
secreción vaginal o con semen.
Para este análisis es necesario dilucidar tres cuestiones:
Que la sangre provenga de una lesión vaginal (herida).
Que la sangre sea producto de una desfloración.
Que la sangre corresponda a sangre menstrual.
La sangre proveniente de lesiones vaginales se identifica por la presencia en ellas de
células intermedias del epitelio con glucógeno en el citoplasma, no siendo posible
establecer si es producto de una desfloración.
La sangre menstrual se reconoce por la presencia de células endometriales con
glucógeno en su citoplasma.
INVESTIGACIONES ANALITICAS.
Marcha analítica para el diagnóstico de las secreciones femeninas. (Anexo No. 10).
VI.5 SECRECION SALIVAL.
La cavidad bucal está cubierta por la mucosa y esta está formada por varias capas de
tejido epitelial y conjuntivo.
Las células de la superficie se desprenden e incrementan la saliva y la sangre de dicha
región. Por esto las células basales del epitelio se renuevan.
La saliva es un líquido alcalino claro, algo viscoso, secretado por las glándulas salivales.
Contiene agua, mucina, albúmina, tialina, globulina, leucocitos, restos epiteliales,
carbonatos y fosfatos alcalinos, sulfucianato de potasio y algunas toxinas. Sirve para
humedecer y ablandar los alimentos, facilitando de este modo la masticación de los
mismos, por el fermento tialino que convierte el almidón en ázucar.
La saliva está constituida por dos fracciones:
 Fracción serosa: contiene la tialina, donde se encuentra la amilasa, enzima que
contribuye a la digestión y degradación del almidón.
 Fracción mucosa: es la encargada de la lubricación.
Las principales glándulas salivales son las parótidas, submaxilares y sublinguales; existe
además un gran número de glándulas bucales pequeñas, constituidas fundamentalmente
por células epiteliales que no contienen glucógeno.
Las células intermedias que conforman este epitelio son relativamente mayores que las
existentes en las secreciones vaginales.
La saliva por lo general, se investiga en las colillas de los cigarros y tabacos y en algunos
casos en los sobres de correo y máculas.
El estudio de la clase de tabaco, la marca del cigarro, la costumbre individual de fumar,
de apagar el cigarro, etc., tienen también cierto valor; además la investigación de la saliva
en la colilla de cigarro da la posibilidad de establecer el grupo a que esta pertenece.
La saliva por ser una secreción, pertenece al mismo grupo (en los individuos secretores)
que el semen, secreciones vaginales y la sangre en un individuo.
30
Para determinar la presencia de saliva en una mácula, se investiga la presencia de la
amilasa a través de los reactivos de Almidón y Lugol, obteniéndose como resultado una
reacción colorimétrica.
INVESTIGACION ANALITICA.
Marcha analítica para el diagnóstico de las manchas de saliva (Anexo No. 11).
VI.6 SECRECIONES NASALES
Las cavidades nasales y contiguas están constituidas por dos regiones:
 Región respiratoria.
 Región olfatoria.
Estas están cubiertas de mucosas. La mucosa respiratoria está constituida por varias
capas de epitelio que a su vez está formada por células cilíndricas y epidérmicas.
Las células cilíndricas tienen un núcleo grande, con citoplasma de forma ovalada, aunque
también alargada en forma de cono, aparecen generalmente agrupadas, no presentan
glucógeno en el citoplasma.
INVESTIGACION ANALITICA.
Marcha analítica para el diagnóstico de las manchas de secreción nasal. (Anexo No. 12).
VI.7 PRODUCTOS EXCRETADOS POR EL ORGANISMO
VI.7.1 ORINA
La orina como excreción humana puede encontrarse en el sitio del suceso en forma
líquida si las condiciones son adecuadas, o en formas de máculas sobre diferentes
soportes.
La naturaleza de las manchas puede ser confirmada a través de sus compuestos
mayoritarios: la urea, por medio de la ureasa (Domínguez) y la creatina, mediante el
reactivo Saffe (2).
Composición de la orina (3):
Sustancias orgánicas: Urea, Acido úrico, Creatinina, Acido hipúrico, Cuerpos
cetónicos.
Sustancias inorgánicas: Iones sodio, potasio, calcio, magnesio, cloruro, amonio.
La urea está presente en cantidades apreciables en la orina por lo que ha sido la
sustancia más utilizada en la criminalística para determinar la presencia de la orina.
El método utilizado por su sencillez, sensibilidad y rapidez es el de la Xanthylurea y ácido
acético por unas horas, posteriormente se observa al microscopio los cristales de
Xanthydrol si la reacción es positiva (3).
VI.7.2 SUDOR
31
El sudor constituye otra forma de eliminación no solo del agua sino también de diversas
sales. Contiene aproximadamente el 0.4% de NaCl, sustancias orgánicas en pequeñas
cantidades y aminoácidos (4).
La procedencia de las manchas de sudor en las pruebas materiales se puede demostrar
por medio del establecimiento en ellas del aminoácido serina (5).
La serina esta contenida no solo en el sudor, sino también en la sangre. Sin embargo la
cantidad en el sudor es considerablemente mayor. La reacción de la serina, en la
metodología y técnica conocida de la investigación prácticamente es específica y útil para
fines jurídicos - médicos.
Esta basada en el principio de la determinación de la serina según Fizel que no es más
que la oxidación de la serina, con formación de formaldehído, que da una reacción de
color con el ácido cromotrópico.
Es una reacción sensible de gran especificidad, se puede trabajar con máculas hasta de
hasta 4 meses con sólo aumentar unos miligramos del material a investigar.
VI.7.3 HECES FECALES
Las heces fecales son el producto de la eliminación de materiales no utilizables del
organismo, a través de los intestinos. Su análisis en clínica Médica es de gran valor, pues
aporta muchos elementos sobre la patología de las personas (5).
Entre los elementos que componen las heces fecales se encuentran los pigmentos
biliares: estercobilina (estercobilinógeno) y la bilirrubina, los cuales son eliminados
normalmente en cantidades variables que van desde simples trazas hasta niveles
apreciables, resultando muy raras las muestras de heces fecales con ausencia de estos
pigmentos.
La bilirrubina es típica del contenido del intestino delgado mientras la presencia de
estercobilinógeno indica la estancia muy prolongada de la materia fecal en el intestino
grueso (6).
La determinación de la presencia de heces fecales en máculas se realiza a través del
establecimiento de los pigmentos biliares, empleando una reacción de colorimétrica con
el Bicloruro de Mercurio y también por la técnica del percloruro de hierro en medio ácido
(7).
VI.8 REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
1.- Haurowitz, Feliz. Introducción a la Bioquímica. (1970).
2.- Gisbert Calabuig, J.A. Medicina Legal y Toxicología. (1983).
3.- Laboratorio Central de Criminalística. Metodología para el establecimiento de la
presencia de orina, 1986.
4.- Karlson P. Manual de Bioquímica, 1962.
5.- Sonnen W, Jarret L., Métodos de Diagnóstico del Laboratorio Clínico, 1983.
6.- Laboratorio Central de Criminalística. Metodología para la investigación de heces
fecales, 1986.
7.- Haurowitz, Feliz. Introducción a la Bioquímica. (1970).
VII. TEJIDOS
VII.1 INTRODUCCION
32
Se llama tejido a cada uno de los diversos agregados de elementos celulares,
entrelazados o adheridos entre sí, que forman las partes sólidas de los cuerpos
organizados como son el tejido adiposo, conjuntivo, muscular, óseo, entre otros.
El tejido muscular en general es el más usado por la criminalística y como componente
fundamental, las proteínas que nos aportan la mayor información para nuestro trabajo.
Otro tejido muy usado en la Biología Legal es el tejido óseo tanto el animal en delitos de
HSIGM para determinar la especie, edad y data de la muerte como en casos de
Asesinato y Homicidios para identificar a los occisos por técnicas antropológicas e
individualización por técnicas de ADN.
Dentro de los delitos más frecuentes de la Biología Criminalística en Cuba están las
relacionadas con los hurtos y/o HSIGM. Solamente se contaba con técnicas
inmunológicas y de contrainmunoelectroforesis con el fin de determinar la especie animal
en maculaciones hemáticas sobre pruebas materiales y tejido muscular, así como el
marcador genético de hemoglobina por técnicas electroforéticas para las máculas y
tejidos pero además para el tejido se debe tener en cuenta los caracteres bioquímicos
genéticos de las especies y las posibilidades de detectar sus variantes polimórficas por
medio de técnicas electroforéticas, la aplicación de estas determinaciones nos permite
detectar varios sistemas proteicos simultáneamente. Estos son hemoglobina, albúmina,
postalbúmina, transferrina y postransferrina.
VII.2 ANTECEDENTES HISTORICOS
La incrementada incidencia de los hechos de Hurto y Sacrificio Ilegal de Ganado Mayor,
en especial de ganado vacuno, motivó la necesidad de ampliar las investigaciones con
tejido animal a fin de poder establecer una relación entre el tejido ocupado a los
sospechosos del delito y la muestra del animal sacrificado. En tal razón, en 1986, se
ampliaron las investigaciones diagnósticas del tejido y se estableció una metodología que
permitiera la comparación electroforética de un grupo de proteínas y con ello la posible
relación entre los elementos investigados.
VII.3 FUNDAMENTOS TEORICOS
En particular la investigación comparativa de los cinco sistemas de proteínas se basa en
la movilidad electroforética de las proteínas Hemoglobina, Transferrina, Albúmina,
Postalbúmina y Posttransferrina que son capaces en un sistema continuo, de revelarse
simultáneamente.
La selección de estas proteínas, se realiza atendiendo a su alta estabilidad para nuestras
condiciones así como al polimorfismo que presentan aún en animales de cría como es el
caso de nuestra masa ganadera.
El inconveniente que representa el tamaño variable de estas proteínas, se salva con la
realización de un gel con diferentes gradientes de concentración que permite el tamizado
adecuado de acuerdo al peso molecular de cada proteína.
VII. 4 INVESTIGACIONES ANALITICAS
Las determinaciones que nos permiten el diagnóstico específico (especie) en los tejidos
se basan en las reacciones antígeno anticuerpo descritas en el capítulo de SANGRE.
En el campo de las Ciencias Criminalísticas adquiere cada vez mayor importancia la
caracterización de nuevos sistemas polimórficos en los estudios comparativos tanto de
sangre como de tejido muscular en los casos de hurto y/o HSIGM con el fin de buscar
semejanza en cuanto los marcadores genéticos entre el tejido de un animal sacrificado y
33
muestras de tejidos ocupadas a sospechosos o un caso de prueba de paternidad en los
hechos de hurto, mediante la aplicación de técnicas eficaces como son las electroforesis
en Gel de Poliacrilamida (E.P.A.) (2).
Los caracteres bioquímicos (entendido en una manera amplia) tales como grupo
sanguíneo, proteínas de transporte, enzimas y otros son polimórficas al menos en
algunas especies. Entre los más estudiados se destacan la hemoglobina, proteína
conjugada la cual contiene cuatro grupos hemo y globina, dada su función en la
transportación de oxígeno. Las transferrinas, proteínas encargadas del transporte de
hierro de los sitios de adsorción del intestino. La albúmina que es de gran importancia
fisiológica con varias funciones en el organismo (3).
Esta técnica tiene como objetivo la utilización de un método capaz de estudiar cinco
sistemas polimórficos en un sólo sistema en Gel de Poliacrilamida con el consiguiente
ahorro de tiempo, materiales y muestras así como lo simple de su aplicación.
Hoy en día en Cuba no sólo se trabaja el tejido muscular de los animales aunque sí es la
mayoría por la cantidad de delitos de HSIGM, sino que es posible individualizar a
personas a través de técnicas donde es posible detectar su agrupación al igual que en la
sangre, saliva y semen.
Las células musculares están constituidas principalmente de nucleoproteínas que
presentan cerca del 5% de su materia seca. En la estructura de las nucleoproteínas se
encuentra el ácido dexosirribonucleíco (ADN) y su contenido es de 40-45.
Esto nos permite individualizar a través del tejido muscular a personas por la técnica
establecida para el ADN ya que en tejido animal resulta extremadamente costoso.
VII. 5 REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
1.- Diccionario de la Lengua Española publicado bajo la dirección de A. José Alemany de
la Real Academia Española . Editorial Ramón Supema. Barcelona Pg. 1028. 1950.
2.- Rodríguez R. et al. Determinación simultanea de cinco sistemas polimórficos en
plasma de ganado vacuno por electroforesis vertical en Gel de Poliacrilamida. Archivo
LCC MININT. 1984.
3.- Grahne Bo, et al. Horizontal Poliacrylamid Gradient Gel Electroforesis for the
Simultaneus Phenotyping of Transferriny, Posttransferrin, Albumina and Postalbumina in
the Blood Plasma of Gattle Anim Blood Grps. Biochem. Genetic. 8: 127-137. (1977).
34
VIII. ADN
VIII.1 INTRODUCCION
En la década del 80 se produjo una revolución en el campo de la Biología Molecular, como
resultado del desarrollo de métodos novedosos para el aislamiento y posterior análisis del
ADN, que ha permitido a los científicos la manipulación de segmentos de ADN y su
recombinación para producir nuevos genes con características deseadas (1).
El desarrollo de esta tecnología ha facilitado importantes avances en diferentes ramas de la
ciencia y dentro de ellas la Biología Forense. La identificación de un individuo a partir de los
elementos biológicos que son objeto de estudio en la criminalística (manchas de sangre,
semen, pelos, saliva, etc.), ha sido desde hace muchos años el propósito de los
investigadores forenses. El desarrollo de la Biología Molecular también dotó a los biólogos
forenses de herramientas poderosas para el establecimiento de la fuente de origen de un
fluido biológico (1).
Durante más de 50 años se desarrollaron métodos para la investigación de sistemas de
grupos sanguíneos y proteínas polimórficas, sin embargo estas proteínas son codificadas
por el ADN. Se han encontrado diferencias entre las personas en regiones del ADN que no
participan en la codificación de proteínas y estas diferencias son utilizadas para la
identificación de las personas.
Los avances en el campo de la Biología Molecular en los últimos años, han proporcionado
los medios para lograr el análisis individual de los genes, entre ellos el conocimiento de la
genética de bacterias y las enzimas de restricción que dieron lugar al desarrollo de la
tecnología del ADN recombinante, lo que hizo posible el aislamiento de cantidades útiles
de genes individuales. Otros descubrimientos importantes fueron el desarrollo de los
métodos de secuenciación, la síntesis de oligonucleótidos y el descubrimiento más
importante: la técnica de la Reacción en Cadena de la Polimerasa (2).
Estos descubrimientos han permitido la realización del denominado “Proyecto Genoma
Humano”, programa internacional en el que participan varios países, que lleva a cabo la
secuenciación del ADN, con el objetivo de conocer las regiones específicas de los
cromosomas que son responsables de las expresiones bioquímicas, ya sea de
enfermedades en particular o de las proteínas que ellos codifican. Un reto actual de la
Biología Molecular es descifrar la función de más de 3000 millones de pares de bases en el
genoma humano que no codifican ni proteínas ni RNA.
VIII. 2 ANTECEDENTES HISTÓRICOS
El método de análisis de ADN, se utilizó por primera vez en el campo forense en 1985, en
el Reino Unido y se aplicó en los Estados Unidos en 1986 por laboratorios comerciales y en
1988 por el FBI. Estos laboratorios demostraron la potencialidad de esta técnica en el
campo forense, comprobando que las muestra forenses contenían cantidad de ADN
suficiente para ser analizada y que este permanecía tan estable que permitía ser tipado o
caracterizado.
En publicaciones del año 1985 se comenzó a reportar el término “DNA fingerprint”
denotando una identificación absoluta, a similitud de las huellas dactilares (3).
A partir de esta fecha, numerosos laboratorios incorporaron la técnica y se hizo necesario
normar internacionalmente los principios básicos de los análisis para garantizar la fiabilidad
y validez del método, así como lograr una uniformidad entre todos los laboratorios forenses
del mundo (4,5).
Para ello los diferentes países se encuentran agrupados en diferentes organizaciones o
comités de análisis técnicos que garantizan dicha uniformidad en los análisis, emiten
recomendaciones técnicas y existen programas de control de la calidad en el ámbito
35
internacional y se encuentran normados los requisitos que permiten validar si un
Laboratorio Forense reúne los requisitos para asumir los análisis de ADN (3).
En nuestro país se comenzaron a dar los primeros pasos en la incorporación de esta
técnica, en el año 1990, con el entrenamiento de especialistas de nuestro laboratorio en el
campo de la Biología Molecular. Posteriormente, sobre la base de la bibliografía existente,
se fueron incorporando diferentes técnicas de obtención de ADN a partir de diferentes
fluidos biológicos, lográndose obtener resultados mediante el análisis de diferentes
marcadores de ADN que ya se venían aplicando en las pruebas de paternidad en nuestro
país.
Durante esta etapa fue posible materializar este trabajo gracias a la colaboración de
diferentes instituciones como el Hospital Hermanos Ameijeiras, Centro de Ingeniería
Genética y Biotecnología y Laboratorio de Investigaciones de la Defensa Civil.
Mediante la aplicación de esta tecnología a los casos trabajados en el laboratorio se ha
logrado, de manera importante esclarecer numerosos hechos, que con los métodos que
hasta el momento contábamos en nuestro laboratorio no era posible dar una respuesta.
De manera paulatina nuestro organismo ha ido adquiriendo el equipamiento necesario y ya
a principios del año 1998 se comenzó a trabajar en la propia instalación del LCC, con el
empleo de marcadores que se utilizan internacionalmente en el campo forense en estos
momentos.
VIII.3 FUNDAMENTOS TEORICOS
El ADN es la sustancia activa de los genes y porta todos los mensajes codificados de la
herencia en todas las células vivas: animales, plantas, bacterias y otros microorganismos.
En el humano, la información portada por el ADN aparece en todas las células que tienen
núcleo incluyendo los leucocitos de la sangre, células espermáticas, células que rodean la
raíz del pelo, la saliva y los tejidos incluyendo el tejido óseo (5).
Los genes humanos se encuentran organizados en 23 pares de cromosomas, formando un
código genético denominado "GENOMA", el cual contiene toda la información genética del
organismo y es el responsable de la gran variabilidad genética y de la síntesis de proteínas
que permiten el desarrollo y mantenimiento de las funciones vitales de las células (3).
Este material genético lo constituye una sustancia de naturaleza química: el ácido
desoxirribonucleico (ADN), que presenta una estructura covalente formada por una
sucesión de nucleótidos, compuestos por un azúcar (desoxirribosa), un grupo fosfórico y
una base nitrogenada unidos mediante enlaces glicosídicos.
Existen cuatro tipos de bases en el ADN: dos son del tipo pirimidínicas con un solo anillo: la
timina (T) y la citosina (C). Las otras dos son del tipo púricas y poseen dos anillos: la
adenina (A) y la guanina (G).
Estas bases se encuentran presentes en el organismo con cierta regularidad en cuanto a su
composición: Suma de purinas = Suma de pirimidinas (Reglas de Chargaff) y la Suma de
aminobases A y C = Suma de cetobases y los pares A-T y G-C están presentes en
cantidades equivalentes.
Las cuatro bases se agrupan en combinaciones de tres nucleótidos para codificar diferentes
aminoácidos y constituir los bloques constitutivos de las proteínas. Un gen, que es la
unidad básica de la herencia es una secuencia de alrededor de 1000 a 2 millones de
nucleótidos. Se estima que el genoma humano contiene unos 50 000 a 100 000 genes. El
número total de un set de 23 cromosomas (genoma haploide) se estima en los 3 billones
(3).
Las variaciones de la secuencia de bases en las partes que codifican proteínas da lugar al
polimorfismo de las proteínas (diferentes variantes de una misma proteína con determinada
36
función biológica) o en la aparición de enfermedades de origen genético como la fibrosis
quística y fenilcetonuria, sin embargo las zonas del genoma más útiles para los forenses lo
constituyen las regiones no codificantes del ADN.
La estructura química de la molécula fue estudiada con profundidad y se formularon
diferentes teorías, entre ellas el modelo planteado por Watson y Crick que postularon una
estructura de doble hélice sostenida por puentes de Hidrógeno (Anexo No. 13).
Cada uno de estos nucleótidos se une a otros tres: dos de ellos están en el mismo eje,
conformándose una cadena lineal, mientras que el tercero pertenece a otra cadena
dispuesta paralelamente, formando un dúplex o doble hélice, adoptando una estructura
tridimensional que se conoce como del tipo B que es la más frecuente, presenta como
características generales el enrollamiento a la derecha de las cadenas, las dos cadenas son
antiparalelas y están envueltas una con la otra, de tal forma que no se pueden separar sin
desenrollar la hélice, las bases están ubicadas en el interior de la hélice mientras que las
cadenas fosfato y el azúcar están en la periferia (3).
Cada base unida a la base correspondiente en la otra cadena forma un plano casi
perpendicular al eje de la hélice y sólo se pueden acomodar o parear en dos formas A con
T y G con C y viceversa. La geometría de estos pares de bases se denomina pares de
Watson y Crick.
Ambos pares de bases son intercambiables pudiendo ser reemplazadas unas por otras en
la doble hélice sin alterar las posiciones del azúcar y el fosfato. Cualquier otro tipo de
asociación entre las bases distorsiona la doble hélice, por lo que se refiere como una
propiedad la característica de que una cadena es complementaria a la otra, de tal forma
que si un segmento de cadena tiene la siguiente secuencia: AGTCGCTGAC la
complementaria será TCAGCGACTG (Anexo No. 14).
Se han encontrado otras estructuras de la molécula de ADN que son las conformaciones Z
y A pero son menos frecuentes y se han reportado que algunos segmentos de ADN de tipo
“B” adopte otras conformaciones como un mecanismo de interrupción de la regulación de la
expresión genética. Estas conformaciones se diferencias en la forma que adopta la doble
hélice, el número de pases por vuelta y otras características estructurales (1).
Las moléculas de ADN son muy grandes y de un elevadísimo peso molecular, de forma
extremadamente alargada, lo que la hace muy susceptible de sufrir daños mecánicos por
manipulación.
La molécula de ADN no presenta la complejidad estructural de las proteínas ya que
presenta muy pocas estructuras secundarias, el mayor rango de variaciones está dado por
las propiedades físicas y químicas de las cuatro bases nitrogenadas y las fuerzas que
mantienen las estructuras secundarias. La molécula adopta diferentes formas de
enrollamiento que explican su compactación en los cromosomas.
Una propiedad muy importante es la desnaturalización y renaturalización y debe
considerarse como aspecto crucial el concepto de apareamiento de bases que involucra
tanto la formación de pares de bases como el rompimiento de dicho apareamiento. Cuando
las moléculas de doble cadena se someten a temperaturas o pHs extremos los puentes de
Hidrógeno se rompen y las cadenas se separan, en estas condiciones se dice que el ADN
está desnaturalizado y cambia de una doble hélice a una estructura al azar (5,1).
Las moléculas de ADN adoptan una estructura de superenrollamiento que puede ser
positivo o negativo y la adopción de una u otra forma depende de las funciones que en ese
momento realice la molécula, el superenrollamiento negativo o desenrollamiento prepara la
molécula para la replicación, recombinación y transcripción, mientras que el positivo
compacta la molécula de forma muy eficiente, aunque dificulta la separación de las hebras.
37
El genoma eucariótico posee un elevado grado de organización estructural, aunque
contienen un exceso de ADN comparado con la cantidad que pudiera esperarse para
codificar proteínas (1).
La complejidad y frecuencia de repetición describe las propiedades de los componentes de
un genoma. Hay dos tipos generales (3):
 Moderadamente repetitivo.
 Altamente repetitivo.
El ADN moderadamente repetitivo está formado por secuencias que están presentes en
350 copias en cada genoma.
Se conoce que el genoma humano contiene cientos de segmentos o regiones de elevado
polimorfismo, dados por una secuencia que se repite determinado número de veces. La
variación alélica está dada por el número de copias de la secuencia que se repite. Esos
segmentos o regiones se conocen de forma general como "HVR" (regiones
hipervariables) que se subclasifican en mini y microsatélites, atendiendo a la longitud y
estructura de la secuencia que se repite (3).
Los minisatélites o VNTR (Variable Number of Tandem Repeat) presentan una longitud
de menos de 20 pares de bases, mientras que los microsatélites o STR (Short Tandem
Repeat) presentan de 2 a 4 pares de bases (4). La alta informatividad de estas regiones
las hacen muy útiles para fines identificativos, tanto para las pruebas de paternidad como
para lograr el diagnóstico de la individualidad genética.
Mediante el análisis de varios marcadores de ADN ó diferentes regiones altamente
polimórficas se puede establecer la identificación del individuo, reportándose que con el
empleo de al menos 5 de ellos, se logra esta respuesta categórica, debiéndose analizar
varios marcadores. En nuestro laboratorio hemos tomado como norma en casos de
exclusión analizar al menos dos marcadores y en casos de inclusión un mínimo de 5.
Según los reportes bibliográficos más recientes, se está trabajando en lograr la uniformidad
de los marcadores que se utilizan en cada laboratorio forense, y en muchos laboratorios se
han ido incorporando los microsatélites o STR, ya que al tener la longitud del segmento que
se repite más pequeña, facilita aún más el análisis del ADN muy degradado y no interfieren
en la determinación algunos contaminantes que sí lo hacen en el análisis de los
minisatélites. Por otra parte requieren menos cantidad de ADN para el análisis (4,6,7).
El ADN reúne determinadas características que lo hacen útil para la investigación forense
que son las siguientes (3):
1.- El ADN como portador de la información genética se trasmite de padres a hijos de
acuerdo a las leyes de Mendel, de forma tal que la mitad del ADN proviene del padre y la
otra mitad de la madre.
2.- El ADN es altamente estable en el medio ambiente y ha sido posible aislarlo e
identificarlo a partir de células de meses e incluso años de antigüedad. Se ha descrito la
identificación de ADN a partir de momias de varios miles de años.
3.- Debido a que se encuentra presente en todos los núcleos celulares es posible comparar
el ADN obtenido de un material biológico y compararlo con otros, ejemplo manchas de
sangre, muestras de sangre líquida, huesos, tejidos, raíz del pelo, ya que el ADN obtenido
de todas estas fuentes presenta la misma expresión.
38
4.- Las largas cadenas de ADN, compuestas por decenas de miles de pares de bases,
presentan regiones en las cuales los pares de bases se repiten de una forma secuencial y
determinada, específicas en longitud y localización para cada persona. El polimorfismo está
dado por el número de veces en que esa secuencia específica se repite. Por ello el ADN se
considera como una "huella dactilar molecular" o "huella dactilar genética" específica para
cada individuo, excepto para los gemelos univitelinos que presentan la misma estructura de
ADN.
VIII. 4 INVESTIGACION ANALITICA
VIII.4.1 OBTENCION DE ADN.
El ADN puede ser extraído de cualquier tipo de material biológico: leucocitos, semen, raíz
capilar, tejidos o huesos.
De acuerdo al material de que se trate se utilizan diferentes técnicas, de ellas las más
usadas son las siguientes:
Para las manchas de sangre y muestras de sangre líquida se somete el material a un
proceso de lisis celular para lograr la ruptura de las células y de sus núcleos y
posteriormente se eliminan los contaminantes (proteínas, lípidos, RNA). Finalmente el ADN
se precipita con etanol y se resuspende adecuadamente (8). Un método muy eficaz para
obtener ADN de sangre seca es el de Chelex 100 (9), el cual es el utilizado en nuestra
práctica pericial.
Debido a que el ADN se encuentra dentro del núcleo de las células, es posible, en caso de
exudados vaginales y máculas de semen en los que hay presente una mezcla de células
vaginales y espermáticas, realizar una lisis diferencial, primeramente del material femenino
en el cual no se lisan los espermatozoides, separándose éstos por centrifugación, y
posteriormente el ADN que contiene las células espermáticas es lisado mediante la acción
de una proteasa y un agente reductor. Este proceso permite obtener simultáneamente ADN
procedente de la víctima y del autor del hecho con una sola muestra (10).
Cuando se trata de tejidos óseo se procede a pulverizar los mismos con nitrógeno líquido y
se realiza primero un proceso de descalcificación por tratamiento con EDTA, posterior
digestión con Proteinasa K y precipitación de las proteínas con solventes orgánicos. En este
tipo de muestras es necesario concentrar y dializar mediante tubos especiales
denominados Centricon, que permiten purificar los ADNs obtenidos (11, 12).
Para los tejidos se puede utilizar un proceso similar al de los huesos y también se emplea
un método que utiliza CTAB en la digestión.
Una vez obtenido el ADN se comprueba su integridad y se procede a su cuantificación,
mediante técnicas electroforéticas que permiten estimar la cantidad de ADN total y a través
de sondas específicas que reconocen secuencias altamente repetitivas de ADN humano.
En el caso de utilizar los métodos de extracción con Chelex 100, los ADNs obtenidos
pueden ser analizados por la técnica de PCR de manera directa, sin requerir su
comprobación ni cuantificación.
VIII.4.2 TECNICAS PARA EL ANALISIS DE LOS POLIMORFISMOS DEL ADN.
Se pueden utilizar para estos fines la técnica de Southern, que consiste en digerir el ADN
obtenido con enzimas de restricción, su separación en un gel de electroforesis y
posteriormente se transfieren los fragmentos de ADN digeridos a un soporte sólido
(membrana de nitrocelulosa).
Este filtro es hibridado con una sonda previamente marcada con sustancias radioactivas,
las que se unirán a los fragmentos de ADN correspondientes de acuerdo a la
complementariedad de las bases. Finalmente se coloca el filtro con una placa de Rayos X
39
en un proceso de autorradiografía y se obtiene un patrón de bandas. Esta técnica tiene la
desventaja de requerir gran cantidad de ADN, utiliza sustancias radioactivas y largo tiempo
de ejecución. Esta técnica fue la primera que se aplicó y aún continúa aplicándose en
muchos laboratorios (3).
En 1985 se descubrió la técnica de “Reacción en Cadena de la Polimerasa” ó (PCR), la
cual significó un gran avance desde el punto de vista tecnológico. Consiste en replicar o
amplificar una secuencia de ADN hasta infinitas veces, (en la práctica hasta tener material
suficiente), partiendo de cantidades del orden de los picogramos pueden obtenerse
cantidades en el orden de los microgramos. Se trata de reproducir de forma in vitro el
proceso que ocurre normalmente en la naturaleza (2).
La esencia de esta técnica constituye la principal ventaja de su uso en la Criminalística ya
que en un gran porciento de los casos se dispone de poco material biológico.
Para poder amplificar un pequeño segmento de ADN es necesario contar con los siguientes
elementos:
 Pequeños segmentos de ADN denominados iniciadores o "primers" que marcan la
porción que será reproducida.
 La enzima que promueve la replicación genética en todas las células vivientes.
 Los nucleótidos, elementos fundamentales para la síntesis del ADN.
Este proceso ocurre por cambios sucesivos de temperatura que permiten, primero la
separación de las cadenas, segundo: unión de los "primers" a la secuencia complementaria
en la región de interés y tercero incorporación de nucleótidos libres por medio de la enzima
Taq DNA Polimerasa. A cada uno de estos pasos se les denomina ciclos y se producen
unas 30 ó 35 veces.
Finalmente la cantidad de ADN obtenida es 2n veces la cantidad inicial, o sea el aumento
de ADN se produce de manera exponencial (Anexo No. 15).
También es posible investigar el sexo a que pertenece un fluido biológico determinado ya
que el gen de la amelogenina que se encuentra presente tanto en le cromosoma X como en
el Y, y aunque no se considera un STR, presenta un fragmento de 212 pares de bases para
el cromosoma X y de 218 pares de bases para el Y.
De esta forma, mediante la técnica de PCR y posterior electroforesis se observará una
banda (212 pb) en el caso de que sea de origen femenino y dos bandas (una de 212 y otra
de 218 pb) en caso de corresponder al sexo masculino.
VIII.4.3 VALORACION DE LOS RESULTADOS.
Para el caso de los microsatélites los productos amplificados se detectan por electroforesis
en acrilamida desnaturalizante y tinción con plata. En los geles se aplican los Ladders de
alelos que son una mezcla de los posibles alelos que pueden encontrarse y permiten tipar
o identificar los alelos presentes en cada una de las muestras estudiadas (6).
El trabajo con kits comerciales facilita el trabajo del laboratorio, pues además de garantizar
la calidad se han desarrollado los sistemas denominados Multiplex, (6) que permiten
estudiar varios marcadores de manera simultánea, disminuyendo notablemente los tiempos
de análisis (Anexo No. 16).
El análisis del ADN con fines de estudiar la individualidad genética se logra mediante el
análisis de regiones altamente polimórficas.
En estudios recientes se reporta el análisis del ADN mitocondrial, que está contenido dentro
de las mitocondrias y tiene una altísima estabilidad, presenta también regiones
hipervariables, altamente polimórficas que los hacen útiles para fines identificativos en
muestras muy antiguas, lo que permite su aplicación en estudios de restos óseos con fines
40
antropológicos o históricos. En este caso se compara la secuencia de los fragmentos
amplificados con el de la madre o cualquier descendiente por la vía materna, por lo que
este análisis no se aplica para estudios de relación filial.
En el caso del ADN mitocondrial tiene la ventaja de que el número de copias es mucho
mayor que el ADN nuclear, del cual está presente una copia por célula. En el caso del ADN
mitocondrial se emplea como parámetro de descarte y no identificativo.
VIII.4.4 EJEMPLOS DE APLICACION DE ESTE ANALISIS EN LAS INVESTIGACIONES
FORENSES Y CRIMINALISTICAS.
Hecho de asesinatos o hechos de sangre, se compara el ADN obtenido de máculas de
sangre presentes en las pruebas materiales, prendas de vestir de individuos
sospechosos o en objetos que puedan contener sangre de la víctima y se compara con
la muestra de sangre de la víctima. También se puede comparar la sangre de un
individuo sospechoso con una mácula de sangre encontrada en el lugar del hecho.
Hechos de violación, se comparan el ADN obtenido de exudados vaginales o prendas
de vestir que contengan máculas de semen con la muestra de sangre de la víctima y el
sospechoso. Mediante esta determinación se puede determinar el número de autores,
ya que cada persona expresa dos, bandas por cada marcador, si se detectan 4 bandas
indican la presencia de semen de dos individuos y si se detectan 6, indica la presencia
de semen de tres individuos.
Identificación de cadáveres, el ADN obtenido de músculos o huesos se compara con
muestras de sangre de los progenitores o descendientes y se determina la identidad,
mediante un estudio de relación filial.
VIII.5 PERSPECTIVAS
Para poder determinar la individualidad genética, resulta imprescindible contar con una
base de datos, o sea la frecuencia alélica de cada uno de los marcadores en nuestra
población lo que permitirá dar una respuesta de correspondencia entre los genotipos
detectados en las muestras investigadas y la probabilidad de que se encuentre un individuo
con similares características en la población.
Actualmente se han sustituido por sistemas fluorescentes, consistentes en “primers”
marcados con sustancias fluorescentes y los productos amplificados se detectan mediante
sistemas automatizados, siendo aún más sensibles y permiten dar una respuesta más
rápida.
El futuro de esta técnica, que ya está siendo instituido por países altamente desarrollados
como Inglaterra, E.U y otros, es la creación de un Banco de ADN, consistente en los datos
del tipaje de determinados individuos (población penal) lo que ha permitido el
esclarecimiento de casos archivados en los laboratorios.
VIII.6 REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
1.- Espinosa G., 1998, “Conferencia Curso de Postgrado sobre Biomoléculas”.
2.- Kobilinsky, 1990, “Systematic Studies on Parameters Influencing the Performance of the
Polymerase Chain Reaction, J. Clin. Chem. Biochem/Vol. 28, No. 1
3.- Saferstein R., 1993, “Forensic Science Handbook”, Volumen III.
4.- 1993, DNA Recomendations - statement by the DNA Commission of the International
Society for Forensic Haemogenetics concerning the National Academy of Sciences Report
on DNA Technology in Forensic Science in the USA, International Journal Legal Medicine
41
5.- National Research Council, 1992, “DNA Technology in Forensic Science”.
6.- Firma Promega, 1997, Manual Técnico “STR Systems”
7.- Gill et al. 1994, “Report of the European DNA profiling group (EDNAP) towards
standardisation of short tandem repeat. Forensic Science International, 65, 51-59.
8.- Technical Procedures. The FBI Protocols.
9.- Walsh S. et al. , 1991, “Chelex 100 as a Medidum for Simple Extraction of DNA for
PCR-Based Typing from Forensic Material”.
10.- Robertson et al., 1995, “Forensic applications of a rapid, sensitive and precise
multiplex analysis of the four short tandem repeat loci HUMvWF31/A, HUMTH01,
HUMF13A01 and HUMFES/FPS, Electrophoresis, 1995 16, 1568-1576.
11.- Mitchell M. et al., 1993, “Mitochondrial DNA Sequence Analysis of Human Skeletal
Remains: Identification of Remains from The Vietnam”, JFSCA; Vol 38, No. 3, PP 542-553.
12.- Gill et al, 1994, “Identification of the remains of the Romanov family by DNA analysis”,
Nature Genetics Vol 6, Feb 1994.
42
IX. PELOS
IX.1 INTRODUCCION
En el campo de las Ciencias Forenses el estudio del cabello tiene un interés identificativo
y toxicológico. Desde el punto de vista toxicológico se ha producido un incremento en su
uso como material de biopsia dada la facilidad de obtención de esta muestra y su gran
durabilidad, permitiendo además realizar estudios en cadáveres aún transcurridos varios
años del fallecimiento (1). El cabello como muestra con fines identificativos tiene gran
valor ya que esta es una huella frecuentemente hallada en la escena donde se ha
cometido un crimen, siendo en muchos casos el único elemento para inculpar o excluir a
un sospechoso.
En el campo de la medicina forense podemos referir que muchos patólogos han utilizado
el análisis de esta muestra para establecer la causa de la muerte en restos de cadáveres
descompuestos o momificados, sobre todo si ésta se ha producido por la ingestión de
modo accidental o premeditado de tóxicos metálicos tales como el arsénico, el talio, el
mercurio o el plomo, dada la característica de los mismos de acumularse en el cabello sin
sufrir variaciones aún transcurridos varios años de la muerte (9).
El desarrollo actual alcanzado por la técnica permite establecer el origen endógeno o
exógeno de los elementos contenidos en el cabello, ya que existen una serie de factores
que influyen en la presencia de estos, pudiendo citarse los tratamientos cosméticos
aplicados al cabello (champus, tintes, decoloraciones, jabones), profesión u oficio, zona
de residencia cercana a ambientes altamente contaminados (6).
El análisis del cabello ha sido aplicado también en la detección de drogas en individuos
crónicamente dependientes, refiriéndose que estos constituyen además una vía para la
eliminación de diferentes sustancias del organismo (11).
En la practica forense desde hace unos años se ha comenzado a aplicar el estudio del
ADN en la individualización de las huellas biológicas mediante la utilización de técnicas
como la de PCR (reacción en cadena de la polimerasa) lográndose establecer el origen
de la sangre, las secreciones, etc. (12).
En el caso de los pelos se ha logrado identificar el ADN mediante la técnica de PCR,
siendo extraído ADN de la raíz de un solo pelo pero este procedimiento no puede
realizarse en aquellos pelos desprovistos de raíz (13). Recientemente se están aplicando
nuevas técnicas para la determinación del ADN mitocondrial pudiendo aplicarse en
aquellos pelos desprovistos de raíz pero que son sumamente costosas.
Para el análisis de los cabellos cualquiera que sea el objetivo, se requiere de un riguroso
proceso de colección y preparación de las muestras antes de ser sometidas a los análisis
para evitar llegar a resultados que conlleven a interpretaciones equivocadas (1).
Actualmente la unión del análisis morfológico y de composición química en el cabello abre
una posiblidad en el campo de su identificación forense y especialmente si los hallazgos
en esta muestra pueden ser producidos por enfermedades, trastornos del metabolismo,
condiciones ambientales, hábitos alimentarios, etc. (9,10,11).
43
Uno de los aspectos más importantes en la identificación forense de los pelos lo
constituye el hecho de poder obtener la mayor información en una muestra tan
insignificante como un pelo o fragmento de pelo, por lo que el uso en su análisis de
microtécnicas de alta sensibilidad adquiere una importancia primordial.
En el estudio químico del cabello se utilizan diversas técnicas de análisis tales como la
espectrometría de absorción atómica, la activación neutrónica, la emisión de rayos X con
protones inducidos (PIXE), estas técnicas permiten la cuantificación de metales y
recientemente se ha introducido el uso de la cromatografía gaseosa y los métodos de RIA
para la detección de drogas (13,14,15).
Así mismo técnicas microanalíticas como la espectrometría de fluorescencia de rayos X y
el micro PIXE permiten establecer la concentración y la distribución de los elementos
traza tanto longitudinalmente como transversalmente en un simple pelo, lográndose
además distinguir el origen exógeno o endógeno de los elementos químicos detectados
(16,17).
Por otra parte la utilización de la microscopìa electrónica de barrido permite el estudio de
los cambios morfológicos que pueden ocurrir en la superficie del cabello por efectos
físicos o químicos por su gran poder de resolución, existiendo reportes de su uso con
fines forenses (18,19).
Los primeros reportes en Cuba sobre la utilización del cabello con fines identificativos
data de los años 1,700 (21), aunque estos estudios estaban solo limitados a los aspectos
macroscopicos del pelo, color, forma, etc. Posteriormente estos estudios se fueron
ampliando hacia el análisis de los aspectos microscópicos de interés en esta muestra
(22).
Independientemente del interés con que sea sometido a análisis el pelo existe un aspecto
fundamental y es el relacionado con la interpretación de los hallazgos obtenidos, tanto a
través de su estudio morfológico, químico o serológico.
IX.2 ANTECEDENTES HISTORICOS
Desde los años 1800 existen publicaciones donde se refiere la importancia del análisis de
los pelos con fines forenses. En el libro "El siglo de la investigación criminal" se cita
como la primera investigación forense del cabello la realizada en el año 1847 durante la
investigación de un hecho de asesinato y donde fueron hallados pelos en el arma
utilizada lo que permitió probar la culpabilidad del autor.
Desde hace muchos años ha sido demostrada la importancia del estudio del cabello no
solo como huella con fines identificativos sino como para la orientación en el diagnóstico
de las intoxicaciones producidas por talio, dada las deformaciones que este metal
produce en el extremo radicular del pelo (9,23,24).
Una de las primeras investigaciones utilizando el cabello como material de biopsia con
fines forenses fue la realizada en los pelos de Napoleón y donde se hallaron
concentraciones elevadas de arsénico, lo que reforzaba la hipótesis de envenenamiento
utilizando este metal (25).
En Cuba el uso del cabello con un interés identificativo de los años 1780 en este periodo
los esclavistas necesitados de identificar a sus esclavos crearon un sistema en que
uno de los rasgos a valorar era el cabello de acuerdo a sus características macroscópicas
fundamentalmente el color (21).
En el año 1933 el doctor Israel Castellanos publica el primer artículo en Cuba titulado "El
pelo en técnica policial" pero el trabajo que se realizaba en los laboratorios de Medicina
Legal y la policía estaban dirigidos hacia el estudio identificativo de la sangre y la
determinación de tóxicos en vísceras y fluidos biológicos.
44
En el año 1949 el mismo autor presenta en el Primer Congreso Americano de Medicina
Legal un artículo titulado "Microscopía en la Investigación Criminal" donde se refiere la
importancia del estudio de fibras, polvo, proyectiles y cartuchos en la investigación de
hechos criminales. En este artículo la técnica utilizada en el análisis de las fibras era la
microscopía óptica lo que limitaba el estudio en aquel entonces solo a los aspectos
morfológicos estableciéndose en el caso de los pelos la especie y algunos rasgos de
semejanzas con determinado individuo a través del color y la forma.
Algunos trabajos relacionados con el estudio del diámetro del cabello en poblaciones de
interés forense fueron realizados en Cuba en el año 1974 por García N. y Grenet C. con
vistas a lograr establecer parámetros que permitieran llegar a su individualización no
obstante los resultados obtenidos brindaron muy pocas posibilidades en este sentido.
Sobre el uso del cabello con fines toxicológicos no obstante referir la literatura
especializada sus posibilidades en el diagnóstico de las intoxicaciones con arsénico
(26) y en las intoxicaciones con talio (9) en Cuba no se conocen referencias de su uso
con estos fines hasta el año 1983 en el diagnóstico de casos de muerte por
envenenamiento accidental con sulfato de talio (15).
Desde el año 1963 hasta la década del 80 en Cuba el estudio de los pelos con fines
identificativos estaba referido solo a su estudio al microscopio óptico a fin de establecer
características morfológicas tales como el color, el diámetro, la forma, la estructura de la
médula y de la cutícula, la forma y características de los extremos radicular y periférico y
el estudio comparativo en el caso de los pelos humanos, siguiendo lo establecido
internacionalmente en los textos de Medicina Legal (27,28).
En la actualidad es amplia la literatura donde se refiere la aplicación de la microscopía
óptica combinada con la microscopía electrónica de barrido (MEB) en el examen de los
pelos, así mismo resulta de gran valor el estudio combinado del microanálisis de rayos X,
lo que permite además conocer su composición química (29).
En nuestro país el estudio del cabello a través de las técnicas anteriormente referidas
data de los años 80, aplicándose mayormente en los pelos humanos, lográndose en
muchos casos establecer la individualidad y en otros lograr llegar hasta diferenciación de
grupo.
IX.3 FUNDAMENTOS TEORICOS
IX.3.1 MORFOLOGIA, HISTOLOGIA Y ESTRUCTURA DEL PELO.
En el estudio criminalístico de los pelos resulta de gran importancia para poder interpretar
los resultados obtenidos tanto desde el punto de vista identificativo o toxicológico conocer
de modo general algunos aspectos importantes relacionados con su morfología,
histología, estructura y composición química.
CICLO DE CRECIMIENTO DEL FOLÍCULO PILOSO
El folículo piloso humano sufre repetidos ciclos de crecimiento activo y de reposo. La
duración de cada ciclo varía con la edad del individuo y la región del cuerpo a que
corresponda el pelo pudiendo ser modificado por factores fisiológicos y patológicos y esta
dividido en tres fases o periodos (30).
Fase anágena en la cual tiene lugar la actividad de crecimiento del pelo en ella ocurren
cambios que reproducen a los que sufre el folículo durante la morfogénesis original en la
piel del feto. En el primer estadio de esta fase las células de la papila dérmica aumentan
de tamaño y se incrementa la síntesis de RNA y las células germinales del saco sufren
una intensa actividad mitótica.
En el segundo estadio la parte inferior del folículo crece hacia abajo englobando a la
papila dérmica y ya en el tercer estadio el folículo alcanza su máxima longitud y las
45
células de la matriz originan el cono de la vaina interna de la raíz. En el cuarto estadio los
melanocitos desarrollan las dendritas y comienza a formarse la melanina quedando el
pelo dentro de la vaina interna de la raíz. En el quinto estadio la punta del pelo emerge
del cono de la vaina interna de la raíz y en su sexto estadio aparece el pelo en la
superficie cutanéa iniciándose la segunda fase de crecimiento del pelo o Fase catágena.
La fase anágena esta acompañada de un incremento de la actividad metabólica de las
células matrices de la papila del folículo.
Fase catágena se produce al cesar completamente la mitosis de la raíz. En la misma se
lleva a cabo el proceso de queratinización del pelo adoptando la porción terminal del
mismo una forma redondeada.
La vaina interna de la raíz se desintegra y desaparece formando sus células un saco en
cuyo fondo se hallan las células germinales del folículo. Por debajo de este saco se
encuentra la papila dérmica la cual asciende a medida que el folículo se acorta.
Existe una cápsula de células parcialmente queratinizadas que se une a las células no
queratinizadas de la base del saco y se inicia entonces la fase telogéna del pelo.
Fase telógena es la fase de reposo del ciclo piloso. En esta fase el pelo tiene forma de
maza con su bulbo relativamente despigmentado el cual se halla unido al saco mediante
uniones intercelulares y permaneciendo en el interior del folículo hasta que se produce
el desarrollo de un nuevo pelo es decir cuando ese folículo entra de nuevo
espontáneamente en la fase anágena o es inducido a ella cuando el pelo es arrancado
prematuramente.
La duración de cada una de estas fases viene determinada por factores genéticos y
oscila entre 2 y 5 años. El crecimiento diario del pelo varía según la región del cuerpo de
que se trate. Por el examen al microscopio óptico se puede determinar si el pelo está en
la fase anágena, catágena o telógena (31).
Para medir el índice de crecimiento del cabello se utilizan diferentes métodos,
estableciéndose que el intervalo de crecimiento del pelo oscila de 129 días en el vértex,
117 días en las sienes hasta 92 días en la barbilla incluso en la repoblación capilar
espontanea necesitan hasta tres semanas para alcanzar la superficie del cuero cabelludo.
El índice de crecimiento del pelo en el hombre es de 0,35 mm por día a nivel del vértex y
en las sienes y ligeramente mayor en esas mismas áreas en las mujeres.
Se han obtenido índices de crecimiento promedio de 0,44 mm por día en el vértex y en el
pecho, de 0,29 mm/día en las sienes y de 0,27 mm/día en la barba, obteniéndose una
media de crecimiento de 0,2 a 0,5 mm/día lo que esta en dependencia de su actividad
metabólica (33).
El promedio de crecimiento del pelo en un mes es de 1 cm y en los pelos del cuerpo
(axilas pubis piernas) el índice de crecimiento oscila entre 0,2 y 0,4 m. (34). En nuestra
población el índice de crecimiento varía en la mujer entre 1 y 1,5 y en el hombre entre 0,5
y 1 cm.
IX.3.2 ESTRUCTURA DEL PELO
Los pelos están cubiertos por una capa fina denominada epicutícula de un grosor
aproximado de 25 micras la cual no es visible al microscopio. La cutícula del pelo
humano esta formada por 6 ó 10 capas de células cada una de 0,2 a 0,5 micras de
espesor. El extremo proximal del pelo esta envuelto por una capa de material cuticular de
una micra de espesor. Estas capas varían de acuerdo al grosor del pelo. Las células
que forman la cutícula se superponen como las tejas de un tejado apuntando el extremo
libre hacia la punta del pelo (35) (Anexos No. 17 y 18).
46
La corteza es la mayor de las capas del pelo y esta protegida por la cutícula, esta capa
contribuye a establecer las propiedades mecánicas del mismo. Sus células están muy
próximas entre sí y orientadas según el eje del pelo y su diámetro oscila entre 3 y 6
micras siendo su principal estructura las macrofibrillas entre las cuales hay gránulos de
melanina (36, 37).
La médula es la parte central del tallo piloso que en el hombre puede presentarse de
forma continua, discontinua o inexistente. La continua puede ser emparrillada o simple y
la discontinua fragmentada o en escalera.
La médula consiste en una trama de queratina esponjosa semejante a la corteza en las
que se apoyan unas delgadas laminillas de material amorfo que llenan los espacios
vacíos y tienen tamaños diversos (38) (Anexo No. 19).
IX.3.3 COMPOSICION QUIMICA DEL PELO.
Como señalábamos anteriormente el principal componente del pelo son las proteínas y
entre ellas se destaca la queratina la cual se halla en las células corticales. Esta
queratina es insoluble y resistente a las enzimas proteolíticas y para que se produzca
su solubilización es necesario que se rompan los puentes disulfuro mediante reacciones
de oxidación y reducción (38).
El pelo contiene un buen número de aminoácidos cuyas cantidades varían por influencia
de factores genéticos, humedad, dieta, tratamientos cosméticos y métodos analíticos y
de extracción utilizados para su detección. Se plantea que la cantidad de cístina en el
pelo también varía con el sexo el color del pelo y la zona del cuerpo de donde proviene.
El contenido de agua en el pelo es importante con respecto a sus propiedades físicas y
cosméticas, el mismo es higroscópico y su porosidad es del 20 % aproximadamente por
lo que la absorción del agua es muy rápida (39).
Los oligoelementos presentes en el pelo pueden tener diversa procedencia ya sea por un
origen exógeno u endógeno. En los oligoelementos de carácter endógeno tiene gran
importancia la matriz del pelo, la papila dérmica, las glándulas sebáceas ecrinas y
apocrinas y la epidermis superficial (33).
La mayoría de los oligoelementos presentes en el pelo son de origen exógeno ya sea por
contaminación externa debido a tratamientos aplicados en el pelo. Algunos autores
plantean que la secuencia de aparición de estos oligoelementos y su cantidad son tan
particulares en un individuo como su propia huella dactilar por lo que puede constituir un
rasgo para su individualidad. Entre estos oligoelementos se encuentran el arsénico, el
plomo, el calcio, el fósforo, el zinc y el potasio. Algunos de ellos por la forma y cantidad
pueden estar relacionados con envenenamientos como ocurre con el talio el arsénico y
el plomo (40).
IX.3.4 INCORPORACION DE LOS ELEMENTOS TRAZA EN EL PELO
Como habíamos explicado en el epígrafe anterior existen una serie de elementos
químicos que están presentes en el pelo y que pueden tener diversa procedencedencia,
existiendo seis posibles fuentes de incorporación de estos elementos en el pelo (33).
1.- Tomados a partir de la matriz del pelo durante su formación.
2.- Depositados por el cebo.
3.- Transferidos al pelo a través del sudor.
4.- Incorporados dentro del pelo permanente a través del sudor.
5.- Depositados por contaminación externa luego de haber sido expelido el pelo a
través de la piel.
47
6.- Mediante preparaciones cosméticas o farmacéuticas aplicadas en la cabeza o en otras
partes del cuerpo.
Existen otras fuentes de incorporación de estos elementos entre las que están el sudor, la
contaminación ambiental y los tratamientos cosméticos (41).
Algunos metales se combinan con los grupos sulfidrilos que forman la proteína del folículo
lo que explica las concentraciones de estos elementos en el pelo y que son mayores que
los detectados en otros tejidos o fluidos del cuerpo. En el caso del plomo existe una
rápida disponibilidad del pelo por tomarlo, de ahí que este sea usado como un tejido
indicador a su exposición. No obstante el pelo puede ser utilizado para medir
exposiciones a otros metales como el arsénico el mercurio y el talio (42).
La fase anágena o de crecimiento del pelo se considera como la fundamental en el
proceso de incorporación de los elementos endógenos en el pelo (43).
Los elementos exógenos penetran en el pelo por absorción a través de su cutícula
durante su crecimiento es decir en el pelo vivo e incluso luego de haber sido tomada la
muestra de pelo (45).
A través de estudios realizados en un pelo aplicando técnicas como el micropixe se han
detectado altas concentraciones de algunos elementos en la periferia del pelo por lo que
se asume que estos elementos pueden ser distribuidos homogéneamente hacia el
interior del pelo. Estos estudios reflejan además la contaminación exógena del pelo.
La cutícula puede ser dañada por varias influencias externas produciéndose una gradual
erosión de las capas que la forman, estas influencias pueden ser químicas o mecánicas
(33). El elemento inicialmente distribuido en la periferia del pelo puede ser concentrado
en la cutícula y absorbido hacia su interior. Esto indica la necesidad de una interpretación
cuidadosa del origen de algunos elementos hallados en el pelo los cuales pueden estar
distribuidos en la periferia del mismo.
Algunos investigadores han estudiado la absorción de iones metálicos por el pelo
mediante experimentos con vapor y humo sobre todo para el mercurio y el cadmio.
Estos resultados estuvieron sujetos a la concentración del elemento, el tiempo, la
cantidad de pelo utilizado, el método de preparación de la muestra, el cual no fue el
mismo para cada elemento (46).
La influencia de factores externos como las suciedades, la contaminación externa y la
región de procedencia del pelo dificultan en muchos casos la valoración correcta de los
resultados durante su análisis.
Hay investigadores que plantean que los pelos de región del pubis y de las axilas están
mas protegidos de la contaminación externa que los pelos de la cabeza, no obstante en
estudios realizados se encontraron mayores concentraciones de plomo en los pelos de
las axilas que en los de la cabeza señalándose que esto podía deberse a que los pelos
de otras regiones del cuerpo tienen diferente rango de crecimiento siendo la fase
anágena más larga en los pelos de la cabeza, estos pelos además no reciben los mismos
tratamientos y por otra parte los pelos de las axilas y del pubis son más afectados por las
secreciones de las glándulas apocrinas (46).
La composición del pelo es alterada por tratamientos como los tintes las decoloraciones
el ondulado del cabello. Esta puede ser la causa de la presencia de muchos elementos
en el pelo y que incluso pueden afectar la absorción de los mismos para otras sustancias
(47,48).
En los análisis de composición química del pelo la colección de las muestras y el uso de
agentes limpiadores para eliminar la contaminación garantizan la precisión de los
resultados (49,50).
48
Los aspectos señalados anteriormente deben ser valorados cuidadosamente durante
el análisis del pelo para diferentes fines brindándole una especial atención a los
métodos de colección preparación y análisis de las muestras así mismo consideramos
importante la aplicación de métodos analíticos que nos permitan diferenciar de ser
posible el origen exógeno o endógeno de los elementos químicos hallados.
IX.3.5 COLECCION Y PREPARACION DE LAS MUESTRAS DE PELOS.
Debe considerarse este aspecto dentro de las investigaciones forenses en dos partes una
la relacionada con su valor como muestra con fines toxicológicos y la otra a su interés
identificativo.
Dentro del campo de la toxicología señalábamos anteriormente las diferencias que se
pueden presentar en contenido de los elementos químicos influenciados por la región de
procedencia del pelo (axilas pubis cuero cabelludo), la edad, el sexo, los factores
ambientales, nutricionales, ocupacionales, etc.
En el momento de realizarse la toma de la muestra el factor principal descansa en la
región de procedencia de que se trate a lo cual muchos investigadores le han brindado
gran importancia.
Aún dentro de una misma zona de muestreo y en la misma persona se han reportado
variaciones con respecto a la concentración de los elementos químicos. Esto se explica
debido a que no todo el pelo de un mismo lugar se encuentra en la misma fase de
crecimiento y sus velocidades de crecimiento no son homogéneas, aspecto que fue
referido en el epígrafe 1 de este capítulo.
Los pelos de la cabeza han sido seleccionados por la mayoría de los investigadores para
utilizarlos como muestra en el análisis de metales debido a que estos pelos están en
contacto directo con el medio ambiente, tienen un crecimiento más estable y la mayoría
se encuentran en la misma fase de crecimiento (anágena) y en la cual muchos
investigadores coinciden en que se produce la mayor incorporación de los elementos
traza en el pelo.
La región por excelencia propuesta y utilizada por muchos investigadores como zona
ideal para el muestreo es la región occipital de la cabeza y en especial el vertéx
posterior debido a que el número de elementos en fase de crecimiento es mas constante
(alrededor del 85 %) al igual que su velocidad de crecimiento (0,3 - 0,4 mm/día) siendo
menos afectada por el sexo y la edad del donante (52).
La Agencia Internacional de la Energía Atómica (IAEA) recomienda esta zona de la
cabeza como zona de muestreo para el análisis de elementos traza.
Si los estudios que queremos realizar en el cabello están relacionados con cambios en su
morfología como ocurre en las enfermedades del cabello y en algunas patologías o
simplemente para el análisis identificativo del pelo con fines forenses entonces la
selección de la zona del muestreo depende de los elementos que queremos observar.
Si el estudio se debe realizar en la región de la cabeza el muestreo debe ser lo más
aleatorio posible en busca de aquellos cambios de interés que pudieran producirse en sus
diferentes regiones relacionados con el color el diámetro, etc. (Anexo No. 20).
Para la identificación forense de los pelos se estudian las características morfológicas
tales como el color forma y tipo de los pigmentos de la médula, forma de los extremos
periféricos y radiculares así como otros aspectos de interés lo que permite llegar a
conclusiones fundamentalmente en cuanto a la exclusión, tomándose muestras de todas
las regiones de la cabeza (frontal, occipital, parietales derecho e izquierdo) (53).
49
En cuanto a la conservación de las muestras de pelos para su análisis químico parece ser
un consenso entre investigadores el uso de viales plásticos o sobres de polietileno esto
evita la maculación posterior de los pelos luego de realizados los muestreos (54).
Luego de la colección de las muestras de pelos uno de los pasos más importantes lo
constituye el lavado de las mismas el cual se realiza con el fin de remover todas aquellas
suciedades tales como grasa, sudor y contaminantes químicos que se encuentran
adheridos sobre todo en la cutícula del pelo.
Cuando lo que estamos investigando es un pelo levantado como huella, antes de aplicar
este lavado debe valorarse macro y microscópicamente cada una de las sustancias o
suciedades adheridas, ya que pueden tener valor para la investigación.
Debemos señalar que aún no se ha estandarizado un proceso de lavado que permita
diferenciar entre los componentes externos e internos del pelo y una gran parte de estos
procesos son fuertemente criticados por los especialistas de diferentes países que los
mismos en general actúan sobre la cutícula del pelo, pudiendo en muchos casos
modificar su estructura y es en ella donde parecen concentrarse gran parte de los
elementos químicos y donde se produce una mayor asociación del metal por ser esta
zona muy rica en cistina (48).
En el análisis identificativo recomendamos no utilizar procesos de lavado tanto en las
muestras como en los pelos ocupados en el lugar del hecho y que puedan movilizar los
elementos exógenos presentes en el pelo o alterar el contenido de los elementos
endógenos.
IX.4 INVESTIGACIONES ANALITICAS
METODOS ANALITICOS EMPLEADOS EN EL ESTUDIO DEL CABELLO
En el estudio del cabello deben combinarse adecuadamente las técnicas descriptivas,
tales como la microscopía óptica y la microscopía electrónica de trasmisión y de barrido y
las técnicas analíticas.
El examen microscópico del tallo piloso es fundamental en el diagnóstico de diferentes
anomalías producidas por enfermedades acciones ambientales o tóxicas, o con fines
forenses identificativos (56).
Utilizando el microscopio óptico podemos obtener una imagen del pelo donde
observaremos los cambios o daños que puedan presentarse en su morfología así como
en su color, forma de la médula, raíz y tipo de pigmento. El microscopio óptico tiene una
profundidad de foco pequeña por lo que en algunos casos estos estudios son muy
limitados.
El microscopio electrónico de transmisión, a diferencia del microscopio óptico tiene una
profundidad de imagen focal mayor por lo que pueden estudiarse cambios internos de la
estructura del pelo. Para la observación de las muestras de pelos al microscopio
electrónico de transmisión, se requiere del empleo de métodos especiales para la
preparación de las muestras, dificultándose la realización de cortes ultrafinos por la
estructura queratinizada del pelo, además de que éste posee una estructura bastante
amorfa, siendo necesaria también la aplicación de técnicas especiales de coloración
tales como el acetato de uranilo y el citrato de plomo.
El microscopio electrónico de barrido (MEB), a diferencia del microscopio electrónico de
transmisión (MET), sirve para estudiar la superficie del pelo, visualizándose todos
aquellos daños en su superficie (cutícula) que pueden haber sido producidos por efectos
mecánicos o químicos o por alguna enfermedad, presentando ventajas para la
identificación de su morfología y estructura (57,58, 59, 60).
50
El estudio microscópico de pelos de individuos con enfermedades del cabello como la
tricotilosis, los distintos tipos de alopecia y la tricorrexis nodosa, se han aplicado con éxito
en las investigaciones forenses del cabello con fines identificativos (30).
Para la determinación de la composición química del cabello, se aplican métodos macro
analíticos y micro analíticos. Dentro de los métodos macro analíticos, se encuentra ante
los más utilizados internacionalmente la Activación Neutrónica y la Espectrometría de
Absorción Atómica, aunque existen otros métodos como la Emisión de Rayos X con
protones inducidos (PIXE) y la Espectrometría de Fluorescencia de Rayos X (65).
Recientemente se han desarrollado técnicas micro analíticas como la espectrometría de
fluorescencia de Rayos X y el micro PIXE las cuales permiten el estudio multielemental
cabello tanto longitudinal como transversalmente permitiendo distinguir entre los
elementos de origen exógeno y los de origen endógeno (65).
La aplicación de estos métodos disminuye los inconvenientes de los procesos de lavado
de las muestras aspecto muy polémico en este campo. Una de las mayores ventajas de
estas técnicas es su cualidad no destructiva por lo que son insustituibles en los estudios
forenses sobre todo con fines identificativos. Un microscopio electrónico de barrido
equipado con un analizador de rayos X tiene un gran poder de resolución ya que permite
realizar simultáneamente el análisis descriptivo y composicional de las muestras.
La Espectrometría de Absorción Atómica es una técnica de gran sensibilidad y
selectividad y ha sido aplicada con éxito en la determinación de elementos traza en el
pelo pero su inconveniente radica en lo tedioso y laborioso de la preparación de las
muestras para los análisis además la misma no permite realizar análisis multielementales.
Esta técnica ha sido utilizada con éxito en estudios de poblaciones expuestas a
ambientes tóxicos por elementos como el mercurio, el plomo y el arsénico.
A partir de los resultados obtenidos por diferentes investigadores en el análisis de pelos y
nuestra experiencia al respecto los métodos más recomendados son la Espectrometría
de Absorción Atómica y la espectrometría de rayos X para el análisis de composición
química del cabello y como técnicas descriptivas la microscopía óptica y la microscopía
electrónica de barrido.
Existe una metodología de trabajo que regula los pasos a seguir en el análisis de los
pelos tanto con fines identificativos como toxicológicos, por lo que nos referiremos a
continuación de modo muy general sobre este aspecto.
Uno de los aspectos más importantes en la investigación de los pelos, es el estudio de
sus características morfológicas, las cuales permiten establecer en que fase de
crecimiento se encuentra el pelo y otras interrogantes tales como cambios morfológicos
de interés en sus extremos (radicular o periférico), daños o deformaciones producidas
por diferentes enfermedades y alteración de sus estructuras por la acción de algún
agente químico o físico, elementos básicos en el análisis de los pelos con fines forenses.
El uso de las técnicas de microscopía óptica y microscopía electrónica de barrido brindan
la posibilidad de realizar estos estudios.
 MICROSCOPIA OPTICA
La microscopía óptica por luz trasmitida, permite el estudio de las estructuras internas de
la muestra, aunque este estudio presenta como habíamos referido anteriormente
limitaciones por la poca profundidad de foco, no obstante la aplicación de esta técnica es
insustituible para la determinación del color, forma de los extremos radicular y periférico,
sustancias extrañas adheridas al pelo, forma y distribución de los pigmentos, etc.
 MICROSCOPIA ELECTRONICA DE BARRIDO (MEB) CON MICROANALISIS DE
RAYOS X
51
Los microscopios ópticos tienen una resolución de 2000 A mientras que en el microscopio
electrónico es de 20 A, de ahí que su uso sea importante para el estudio de la morfología
y de los daños que pueden presentarse en el pelo. Así mismo puede observarse
detalladamente la cutícula del pelo estableciendo la región de procedencia y otros datos
de interés.
La observación al microscopio electrónico de barrido, revela la morfología del objeto a
través de los electrones secundarios, retrodispersados y trasmitidos y se emplean dos
haces de electrones sincronizados, uno barre la muestra y el otro el tubo de rayos
catódicos de forma que cada punto en la muestra tiene su punto correspondiente en la
pantalla del tubo. La velocidad de barrido puede ser suficientemente alta como para
obtener una imagen similar a la televisión.
La preparación de la muestra requiere cuidados, debido a que esta debe ser conductora
de la corriente, por lo que en algunos casos debe emplearse un recubrimiento con
vapores metálicos.
 ANALISIS ELEMENTAL
La determinación de los elementos químicos presentes en el pelo, es un elemento de
interés a valorar cuando se quiere establecer el origen de un pelo hallado en el lugar del
hecho ya que pueden estos elementos estar relacionados con el oficio de individuo,
hábitos de vida, alguna enfermedad o estado tóxico (Anexo No. 21).
Igualmente los pelos constituyen un reservorio de diferentes metales que pueden causar
estados tóxicos en el hombre por ingestión premeditada o accidental o simplemente por
exposiciones a escapes de industrias u otras fuentes.
La determinación de los elementos químicos presentes en el pelo, se establece aplicando
los diferentes métodos analíticos descritos anteriormente y con fines identificativos en los
pelos humanos debe aplicarse el microanálisis de rayos X combinado con la microscopía
electrónica de barrido.
Para los análisis anteriores deben prepararse convenientemente las muestras de pelos y
los pelos obtenidos como huella. Existe un método sencillo que no requiere de
preparaciones especiales y consiste en la formación de un poste compacto utilizando
cinta adhesiva, luego de colocados los pelos sobre la cinta se procede a torcer la cinta
sobre sí misma, luego de confeccionado el poste se procede a cortar rodajas finas con
una cuchilla, pudiendo apreciarse los cortes transversales de los pelos. Para realizar
estos cortes, el poste debe ser sometido a una temperatura entre 15 y 21 C y utilizar una
cuchilla previamente limpiada con acetona para evitar maculaciones de las superficies
transversales de los pelos.
Luego de realizados los cortes, las muestras son preparadas de igual modo que los
fragmentos de pelos y analizadas combinadamente a través de las técnicas de
microscopia electrónica de barrido y microanalisis de rayos X. Las secciones analizadas
de los pelos deben corresponder a las zonas donde existan las alteraciones morfológicas.
Para realizar los análisis químicos se utilizan aumentos de 100 X, pudiéndose realizar el
estudio de la distribución radial del elemento en el pelo. Para los análisis se seleccionan
cuatro puntos, uno en la cutícula, dos intermedios y el cuarto en el centro del pelo y que
disten entre sí una tercera parte del radio de cada pelo.
La energía aplicada en los análisis es de los 20 Kv y luego se analizan por computación
acoplada.
 ESPECTROMETRIA DE ABSORCION ATOMICA (EAA).
52
Es un método de alta sensibilidad para el análisis cuantitativo de elementos químicos,
basado en la absorción de energía radiante por átomos no combinados químicamente y
en la correlación cuantitativa entre esta absorción y la concentración de iones
originalmente presentes en la muestra.
En estos análisis son utilizadas las técnicas con llama, sin llama (horno de grafito) y por
generador de hidruros, este último utilizado en el análisis de arsénico y selenio. La
aplicación de la atomización electrotérmica sin llama, ha producido un gran vuelco en la
utilización de este método en el análisis de muestras sólidas, ya que disminuye los
riesgos en los procesos de preparación de las muestras sólidas.
El EAA es utilizado con éxito en la determinación y cuantificación de elementos tales
como cobre, zinc, cadmio, hierro, níquel, plomo y es recomendada por muchos autores
para el análisis de estos elementos en muestras de pelos.
Los limites de detección de los elementos por esta técnica están en el orden por debajo
de los picogramos. La determinación de muchos elementos tales como el arsénico, el
plomo, el antimonio, el mercurio, el manganeso, el molibdeno depende de los limites
requeridos y de la influencia de la matriz.
Las ventajas de este método descansan en su gran sensibilidad y en la posibilidad de
determinar elementos por separado o analizar una secuencia de elementos en una
muestra tanto aplicando el método con llama o sin llama. Su equipamiento es
moderadamente caro y puede ser empleado en diferentes aplicaciones.
Como desventajas de este método están la imposibilidad de realizar análisis
multielementales simultáneos, siendo una técnica destructiva. El método sin llama esta
sujeto a efectos matrices, los cuales pueden ser incómodos si no son adecuadamente
corregidos. Las muestras sólidas además requieren de un proceso de preparación en el
cual pueden contaminarse.
 OTRAS INVESTIGACIONES REALIZADAS EN EL CABELLO
Dentro del campo de la investigación forense del pelo no es posible pasar por alto las
determinaciones que se realizan mediante el estudio de diferentes marcadores genéticos
como el ADN (en los pelos arrancados se puede analizar el ADN nuclear), el grupo
sanguíneo y el estudio de diferentes tipos de proteínas.
Entre las determinaciones anteriormente señaladas ocupa un lugar principal la
determinación del ADN por constituir el marcador genético de mayor valor que permite
establecer la individualidad u origen de un pelo, no obstante explicamos al inicio de este
capitulo las limitaciones existentes en su determinación y que pueden ser mas
ampliamente estudiadas en otro capitulo de este material.
IX.5 PERSPECTIVAS
Dentro de las perspectivas de desarrollo de las investigaciones criminalísticas de los
pelos podemos referir cuatro aspectos fundamentales:
1.- Ampliación de la determinación de ADN en los pelos caídos que están desprovistos de
la envoltura vaginal así como de los pelos partidos a través de las técnicas de ADN
mitocondrial.
2.- Ampliación del estudio de las enfermedades del cabello en la identificación de los
pelos humanos.
3.- Desarrollo del estudio comparativo de los pelos animales.
4.- Continuar el estudio de la composición química de los pelos con fines identificativos.
53
IX.6 REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS.
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57
X. BOTANICA
X.1 INTRODUCCION
El reino vegetal abarca desde un pequeño organismo compuesto por una célula, hasta un
árbol gigantesco. La Botánica es la ciencia que estudia las plantas y se divide en
distintas ramas: comprende la Botánica General y la Botánica Especial y esta última se
subdivide en Botánica Sistemática y Taxonomía Botánica (1). La Sistemática Moderna
no sólo se fundamenta en la morfología externa de los vegetales, sino que estudia
además la constitución anatómica de éstos.
La Taxonomía se ocupa de la clasificación de las plantas, tomando como unidad
fundamental la especie, para ello es necesario contar con elementos vegetales, tales
como una hoja completa, una hoja insertada en el tallo o rama, la flor, etc.
Para evitar confusión y llegar a la verdadera identidad de una planta, se denominaron con
nombres científicos, ya que los nombres vulgares o populares son adjudicados de formas
58
diferentes de acuerdo a la región, de forma tal que una misma planta es denominada de
varias formas, tanto en el país como en el exterior, por ejemplo la planta Nerium
oleander se conoce como adelfa o rosa francesa.
El nombre científico es válido universalmente y está formado con palabras del Latín o
latinizadas. Consta de dos palabras, la primera es el nombre del género y la segunda es
el nombre de la especie y puede existir sólo en combinación con el del género. Los
sinónimos son otros nombres científicos dados por diferentes botánicos que descubrían
una planta sin conocer que ya había sido descrita con anterioridad, lo que se ha
producido debido a la alta de comunicación entre los botánicos en épocas pasadas.
Después del nombre científico se escribe la inicial o el nombre completo del autor, por
ejemplo Hippomane mancinella L. que corresponde a Linné y en caso de haber sido
descrita por dos o más autores estos se señalan de la siguiente forma: Caesalpinia
pulcherrima (L) Sw.
El origen de la formación de las huellas vegetales al ocurrir un delito, se puede producir
por el contacto de sus participantes (víctima - victimario) con los materiales botánicos
existentes en el lugar del hecho y sus alrededores, entrada y salida del mismo, como
también es factible encontrar en los objetos utilizados en el hecho tales como, virutas de
madera, plantas venenosas, etc.
En las investigaciones de huellas vegetales se cumplen las leyes generales de la
Criminalística y son de interés tanto las huellas halladas en el Lugar del Suceso como en
el Lugar del hecho.
Pongamos un ejemplo de una huella vegetal hallada sobre el cadáver de un hecho
ocurrido en USA, según reportó el Dr. Hall (2): las hojas de diferentes especies y otras
partes del vegetal halladas en el cuerpo no correspondían con la asociación de plantas
existentes en ese lugar.
Gracias a esos indicios vegetales se pudo determinar que el cadáver había sido movido
del lugar. En la década del 70 en nuestro laboratorio se trabajó un caso relacionado
con el hallazgo de un cadáver sumergido en el agua, en cuyo jugo gástrico se
determinaron diatomeas (algas silíceas) que no correspondían con las existentes en ese
medio acuático por lo que se concluyó que la muerte no se produjo en ese lugar.
Las huellas vegetales que con mayor frecuencia hemos investigado durante todos estos
años han sido hojas y madera. Hemos demostrado que con las características internas de
las hojas y la madera, se pueden identificar pequeños fragmentos de las mismas.
También hemos incursionado en la determinación de los granos de polen en muestras de
suelo
La Botánica Criminalística, según nuestra experiencia, se encarga de dos cuestiones
fundamentales: El estudio de la vegetación ruderal y de las plantas tóxicas.
 Vegetación ruderal: Aquellas que están en contacto directo con el hombre,
como son las plantas ornamentales, malas yerbas, frutales, que habitan en
jardines, calles, caminos y carreteras, terrenos yermos etc. Este grupo de
plantas se nombra vegetación ruderal. Por su relación con el Hombre y animales
domésticos constituyen fuentes de interés criminalístico, pues son factibles de
hallarse en el lugar del hecho de cualquier delito.
 Plantas tóxicas: Constituye un objetivo principal de investigación pericial el
estudio de las plantas que son utilizadas por el Hombre como narcóticas,
venenosas, y aquellas que se emplean como comestibles o medicinales, sin
59
embargo la dosis empleada o partes de la propia planta contienen sustancias
perjudiciales al Hombre y animales domésticos.
La Criminalística no sólo investiga los hechos ya ocurridos sino trabaja preventivamente y
la Botánica también interviene en la prevención de un Homicidio o en una intoxicación por
ingestión de plantas, a través del estudio, divulgación y prevención a la población de las
características de numerosas plantas ya que algunas partes de ellas causan efectos
perjudiciales tanto al hombre como a los animales domésticos y de interés económico.
Dada la importancia que reviste hoy en día ese conocimiento de plantas perjudiciales, por
el uso masivo en nuestro país de la Medicina Verde y el incremento de una alimentación
vegetariana, en el año 1993, participamos en la elaboración de un libro “Plantas Tóxicas
Cubanas” (3) cuyo objetivo principal era contar con un material de esta índole en nuestro
país, actualizado con la experiencia cubana en los últimos diez años dada por sus
autores, entre ellos la experiencia criminalística. En este libro se reportaron plantas que
hasta el momento se desconocían sus efectos y cuando fueron investigadas tanto
morfológica como fitoquímicamente se demostró que contenían principios activos de
efectos narcóticos.
Es importante definir a qué llamamos huella y microhuella vegetal (4):
 Huella vegetal: Es todo material vegetal, ya sea una planta completa, órgano o
fragmento vegetal que está relacionado con un hecho delictivo y brinde una
determinada información de acuerdo con su interrelación con el medio participantes.
 Microhuellas vegetales: Son aquellas pequeñas partes del vegetal como esporas
y granos de polen, pelos o tricomas, fibras vegetales, microorganismos (algas,
hongos, etc.), pequeños indicios, poco visibles o no visibles a simple vista, que
impiden que sean borrados por el autor.
Las huellas vegetales pueden aparecer en diferentes delitos aunque éste haya
ocurrido o no en un lugar abierto. En los hechos que con mayor frecuencia podemos
hallar huellas vegetales son: delitos contra la vida y la salud, Hurto y Sacrificio Ilegal de
Ganado Mayor, delitos sexuales, Robo con Fuerza entre otros.
El significado de la aparición de huellas vegetales en los delitos es el siguiente:
Las plantas en su propagación dependen del clima, agua y suelo. Es por ello que en
cada región habitan determinadas especies de plantas que se diferencian de otras
asociaciones vegetales. Por esto a través de las huellas vegetales podemos identificar
determinada región.
Muchas plantas o fragmentos de ellas poseen por sus características morfológicas la
facilidad de adherirse a la ropa y calzado o a los cabellos de las personas. Con este
tipo de huella podemos establecer la relación de determinada persona con el lugar del
delito.
Las microhuellas vegetales que no son fáciles a simple vista de reconocer son
factibles de permanecer en los elementos de un delito ya que no son borrados por el
autor.
Las huellas vegetales aparecen con frecuencia en objetos o sobre otras huellas, por
ejemplo en el polvo, huellas de suelo, trazológicas, sangre, etc. y sobre los objetos
como prendas de vestir e instrumentos.
Las huellas vegetales no se deterioran por la presencia en sus paredes de celulosa y
pueden permanecer durante años en condiciones para su identificación excepto si se
guardan húmedas ya que sufren un proceso de descomposición.
60
En la Criminalística, los especímenes vegetales difieren en tamaño y tipo de acuerdo a
las características del hecho.
Debido a la diversidad del mundo vegetal y su interrelación con el medio ambiente, ya
bien por sus usos alimentarios, medicinal, tóxico, así como las diferentes formas en la
tecnología, la Botánica se encuentra muy relacionada con la Criminalística.
La investigación de las huellas vegetales, permite, en dependencia del suceso y del
material investigado (huellas y las muestras o huellas solamente) realizar una
investigación de comparación y determinar su origen y correspondencia con el lugar del
delito.
En nuestro país la floración y la caída de las hojas de algunas especies, varían de
acuerdo a la época de año por la influencia del clima. Esto es un elemento importante a
tener en cuenta cuando trabajamos la existencia de determinada huella vegetal y su
relación con el delito.
X.2 ANTECEDENTES HISTORICOS
En Cuba antes del triunfo de la Revolución, se reporta un caso de Robo con Fuerza que
ocurrió en 1948, donde las huellas papilares de la autora estaban empasteladas por la
presencia de harina de trigo y residuos de pescado, lo que permitió establecer que la
criada de la casa era quién había robado las joyas.
Con la fundación del Laboratorio Central de Criminalística y la creación del Laboratorio de
Biología, desde sus inicios se trabajaron varios casos conjuntamente con especialistas
botánicos como el Dr. Vilo Acuña, la Dra. Sara Bota, el ingeniero agrónomo Alejandro
Cabello, entre otros. En 1974 la Lic. Mirna Surlí, egresada de la Universidad de La
Habana, inició los primeros pasos para establecer esta investigación en nuestro
laboratorio. En el LPC de Villa Clara el perito biólogo Jesús Hernández Arias, trabajó
varios casos con huellas de madera, contando para ello con un muestrario y
microfotografías de cortes histológicos de distintas especies.
En 1977 visitamos la ex-RDA y conocimos al botánico Michael Munske, cuyo trabajo en
esta especialidad fue fundamentalmente basado en la rama de la Sistemática y muy
especialmente en el estudio de los granos de polen, quien durante años obtuvo buenos
resultados en el esclarecimiento de muchos delitos de ese país.
Se comenzó a sistematizar el trabajo pericial e investigativo de la Botánica Criminalística,
en 1979 gracias a la colaboración de varios asesores botánicos de diferentes
instituciones del país principalmente del Instituto de Ecología y Sistemática (IES, CITMA)
como es el Dr. Miguel Vales, el Lic. Pedro Herrera, la Ing. Ramona Oviedo y otros más
que nos brindaron sus conocimientos y experiencias de esta ciencia lo que contribuyó a
iniciar y desarrollar dentro de la Criminalística.
X.3 FUNDAMENTOS TEORICOS
No es común contar para este tipo de investigación con un órgano completo o con los
requisitos que exige normalmente la Taxonomía, sino por el contrario restos o fragmentos
vegetales.
Partiendo del concepto de huellas según el doctor Rafael Hernández de la Torre (5):
“todo elemento que en un momento determinado puede generar la realización de
61
peritajes, por ejemplo: manchas de sangre, fragmentos de vidrio, etc.".
Por esta razón de acuerdo con este concepto se impone la necesidad de clasificar una
huella vegetal no solamente con los métodos generales establecidos en la Taxonomía,
sino con métodos propios enriquecidos con el desarrollo de la Ciencia y la Técnica.
La investigación de huellas vegetales se realiza con los métodos anatómicos con fines
sistemáticos de la Botánica. Nuestro trabajo lo separamos en dos grandes divisiones:
Investigación anatómica macroscópica e Investigación anatómica microscópica.
Para la investigación anatómica macroscópica se emplean determinados instrumentos
y equipos como son: lupa, estereomicroscopio, micrótomo de deslizamiento, baño de
María, instrumentos de laboratorio (tijeras, pinzas, agujas de disección, entre otros).
El análisis de la huella vegetal se complementa con el estudio comparativo de las
colecciones o registros criminalísticos botánicos, estos son:
Espermoteca.
Herbario.
Preparaciones fijas del tejido vegetal (epidermis foliar, madera y polen).
Estos registros de interés criminalístico se confeccionan sobre la base de las plantas
seleccionadas como son: Plantas tóxicas, narcóticas y vegetación ruderal principalmente.
Con relación a las preparaciones fijas de madera se tiene en cuenta aquellas de uso
industrial tanto nacional como importadas.
La Espermoteca consiste en una colección de semillas previamente fumigadas, de las
distintas especies que por su uso se relacionan con la Criminalística, pertenecientes a la
vegetación ruderal o tóxicas, además de uso alimenticio.
El Herbario, es una colección de especies herborizadas o secas, también sometidas a
reactivos que la protegen de los hongos y bacterias. Deben ser ejemplares que muestren
si es posible, sus flores y frutos. En nuestro caso se herborizan las especies de interés
criminalístico, ya que en todo Jardín Botánico se conservan los ejemplares de las
especies de la Flora cubana y de especies introducidas, cuyos materiales en
determinados casos son necesarios consultar.
La investigación anatómica macroscópica se basa en la observación de las
características externas de la huella vegetal y su estudio comparativo con los registros
criminalísticos. No siempre se obtiene resultados satisfactorios con este análisis, pues
la huella puede pertenecer a otras especies, por lo que debemos consultar con las
colecciones biológicas de otras instituciones, bibliografía, etc.
Desempeña un papel importante para la identificación de la huella vegetal los
antecedentes del caso, pues estos pueden orientarnos sobre la procedencia de la
misma, región, provincia o país, las causas de la investigación, etc.
Si nuestra huella vegetal es de pequeña dimensión, debemos compararla con las
preparaciones fijas, cuya observación se realiza bajo el microscopio óptico. En
dependencia de la parte del vegetal a que pertenezca compararemos con los diferentes
registros criminalísticos.
La palinoteca o preparaciones fijas de polen, son útiles para la identificación de la
referida huella vegetal. Los granos de polen presentan una amplia gama de
características morfológicas que permiten diferenciar hasta especie (Anexo No. 22).
En nuestro trabajo, estas huellas no son muy fáciles de distinguir pues aparecen
generalmente en el suelo y además de realizar la técnica que requiere su observación
62
microscópica, se necesita aún más especialización para su separación y aislamiento de la
tierra. Los registros criminalísticos juegan un importante papel en este tipo de microhuella,
pues se confeccionan aislados y nos permiten discernir su clasificación.
Las preparaciones fijas de madera, comprenden los tres cortes que se realizan de la
misma, esto nos facilita una comparación con la huella vegetal maderable, que en
dependencia de sus dimensiones se podrá clasificar familia, género o especie a que
pertenece.
Las microhuellas foliares, en los casos que lo permitan sus dimensiones, se ampliarán las
técnicas que posteriormente se describen en este trabajo. Los registros criminalísticos de
este especimen vegetal, contribuyen a su determinación, pues se confeccionan siguiendo
el principio de las especies de interés criminalístico.
De acuerdo con el tipo de suceso, no sólo se compara la huella con los registros
criminalísticos, sino con las muestras vegetales ocupadas en el lugar del hecho. Esto
significa que en esta investigación de huellas vegetales existen dos tipos de estudios
comparativos: la primera mencionada se refiere a la comparación con fines identificativos
entre la huella y los especímenes vegetales previamente clasificados. La segunda es
establecer la relación (semejanzas o diferencias) entre la huella y las muestras de
vegetación ocupadas en el lugar del hecho.
La Anatomía Sistemática es fundamentalmente descriptiva y se basa en la comparación
de datos obtenidos de los materiales previamente fijados, cortados y teñidos para
observaciones microscópicas. Este es el fundamento teórico de las Investigaciones
Anatómicas Microscópicas.
X.4 INVESTIGACIONES ANALITICAS
En la Botánica Criminalística se realizan estudios microscópicos en tres de las técnicas
de investigación anatómica de la Botánica:
1.- Anatomía de la epidermis foliar.
a- Microscopía electrónica de barrido.
b- Microscopía óptica.
2.- Histología Foliar.
a- Corte transversal.
b- Microscopía óptica.
3.- Anatomía de la madera.
a- Microscopía óptica.
Estas técnicas revisten gran importancia en nuestro campo criminalístico, pues
constituyen la llave principal para la identificación de las Microhuellas Vegetales.
1a.- Cuando la microhuella foliar alcanza dimensiones muy pequeñas y no es posible
realizar los métodos que a continuación explicaremos, es necesario el uso de la
Microscopía Electrónica de Barrido (Anexo No. 23). Esto constituye una investigación
complementaria en nuestro trabajo que ha resultado muy útil cuando por Microscopía
Optica no es posible identificar la microhuella.
Para ello se procede de cada una de las muestras a recortar una pequeña porción foliar,
montadas por la superficie adaxial y abaxial. Posteriormente se cubren con una capa de
oro de 80 a 100 Aº.
1b.- Para la realización de los estudios de las células epidérmicas se hace necesario la
separación por métodos físicos o químicos de la cutícula foliar, donde queden impresas
las características de las células epidérmicas, complejos estomáticos, tricomas o pelos. El
análisis cuticular se hace tomando en consideración aquellos caracteres estables que no
son influenciados por los factores ecológicos donde habita la planta.
63
Maceración:
La maceración del tejido foliar se puede realizar a través del método de Franklin
(1945),que consiste en tomar una porción de 0,5 a 1 cm 2 de la parte central de la hoja,
sumergirla en una solución de peróxido de hidrógeno y ácido acético en una relación de
1:1 a temperatura que oscila entre 70 y 80 C durante dos horas aproximadamente.
También se puede utilizar el ácido nítrico al 50% diluido con agua destilada. Con estos
reactivos, si la hoja está fresca, se puede lograr la separación de la cutícula en adaxial y
abaxial en menos tiempo, que oscila desde 15min.hasta una hora.
Posteriormente se procede a enjuagar cuidadosamente, pues el tejido es susceptible a
fraccionarse fácilmente. Para lograr cierto contraste y una buena observación al
microscopio, ya que el tejido queda transparente, se puede teñir con safranina u otros
colorantes.
Este proceso de maceración es trabajoso y sus resultados dependen mucho de la textura
de la hoja, estado de conservación de la misma, tiempo de caída o arrancada, entre
otros. La eliminación del mesófilo entre las dos superficies no resulta fácil con
condiciones adversas, como es un fragmento foliar deteriorado.
Por lo general, la huella vegetal no reúne las condiciones ideales. Para superar esas
condiciones, una de las variantes que podemos aplicar es sumergir el fragmento vegetal
en agua sometida al calor hasta que ebulla un tiempo alrededor de 15 minutos, de esta
forma logramos la turgencia del tejido, se extiende sobre un papel y secándola
medianamente realizamos a continuación el proceso de maceración.
Cuando la textura de la hoja es coriácea el tiempo de maceración es mayor, la hoja debe
estar más tiempo sumergida en los ácidos.
2a.- Los fragmentos foliares de las Poaceae requieren para su estudio realizar el corte
transversal, pues sus características fundamentales no estriban sólo en la epidermis sino
en el tejido vascular y los otros tejidos que componen el mesófilo de la hoja.
El corte se realiza con un micrótomo de deslizamiento acoplado a un balón de nitrógeno o
a mano alzada. Previamente se colocan los pequeños fragmentos de hojas en una
solución de fenol, ácido acético y alcohol (FAA). Los cortes transversales se realizan
variando el ángulo de la cuchilla, logrando la menor medida que permita obtener cortes
de un mínimo grosor.
Los cortes transversales obtenidos se colocan primeramente en agua, luego se someten
a un proceso de desclarificación y luego se realiza la tinción con diferentes colorantes
como verde brillante, safranina, azul de anilina entre otros.
2b.- En la epidermis foliar de las dicotiledóneas, se observan diferentes tipos de
complejos estomáticos según la clasificación de van Cothem (1970), características de las
paredes periclinales y anticlinales de las células epidérmicas de las superficies superior e
inferior de la hoja, tipo de tricoma o pelo y características de la base de ellos (Anexo No.
24).
El estudio de la hoja de las especies estudiadas de la familia de las Poaceae, no sólo se
analiza la epidermis foliar de las mismas sino se realiza un estudio histológico a través de
cortes transversales. Los métodos de clasificación coinciden con los descritos por los
autores la Dra. Evangelina Sánchez (6) y de los anatomistas Metcalfe y Chalk (7).
Se observaron en las especies estudiadas, caracteres histológicos que varían entre los
diferentes géneros, tanto valores cualitativos como los cuantitativos. Se fijaron una serie
de parámetros de esos caracteres como son: forma y número de las células buliformes,
64
forma y cantidad de los haces conductores, presencia y disposición de los tejidos
esclerénquima, parénquima, presencia de espinas, pelos y papilas, etc. (Anexo No. 25).
A continuación describiremos los estudios realizados en las huellas maderables, de forma
general mencionaremos los métodos empleados y las características fundamentales que
constituyen la base para una respuesta pericial en este tipo de huella. Es necesario que
este estudio de este tipo de material vegetal continúe su desarrollo y profundización en
este tema.
3.- Para el estudio de la madera se utiliza igualmente el método de maceración por
Franklin durante dos horas aproximadamente de acuerdo al tipo de madera. La astilla de
madera se va tornando blancuzca señal que el tejido se desintegra.
El otro método que se emplea es el Seccionamiento:
Si contamos con una huella de madera de aproximadamente 1x1x2 cm como mínimo se
pueden realizar los cortes a través del micrótomo de deslizamiento. Para ello es
necesario primeramente un proceso de ablandamiento, que de acuerdo a la dureza del
tejido el proceso dura desde dos semanas hasta meses. Existen otros métodos de
ablandamiento tanto químicos como físicos pero no son recomendables ya que producen
alteraciones en el tejido.
En el micrótomo se realizan secciones finas de 20 a 30 µm de las superficies transversal,
longitudinal tangencial y longitudinal radial. Por último se deshidratan en pasos
consecutivos con alcohol etílico y finalmente son sumergidos en xilol.
Cuando estamos en presencia de partículas de madera se utiliza el método de inclusión
de parafina lo que permite con posterioridad efectuar los cortes.
Es factible también realizar a las microhuellas los cortes a mano alzada con hojas de
bisturí.
3a.- En las maderas se distinguen dos grandes grupos de acuerdo a la división de las
plantas: Gimnospermas (No Porosas, Anexo No. 26) y Angiospermas (Porosas, Anexo
No. 27). Por sus características internas se pueden clasificar por géneros e incluso hasta
especies.
Como señalamos anteriormente las maderas de acuerdo a su estudio anatómico se
dividen en:
GIMNOSPERMAS
El leño de las Gimnospermas (No Porosas) resulta relativamente más homogéneo y
sencillo cuando se compara con el de las Angiospermas (Porosas). En estas plantas el
transporte de los nutrientes se realiza a través de las células o elementos alargados y no
perforados en sus extremos a los cuales se les llama traqueidas.
Estas pueden tener sus paredes más o menos engrosadas y cubiertas con puntuaciones
o punteaduras areoladas. Ocasionalmente en algunos géneros se observan
engrosamientos de la pared alrededor de las puntuaciones, éstas se denominan
crásulas.
Además de las traqueidas, el leño de las Gimnospermas presenta otros elementos
constituyentes de la madera como son las células parenquimatosas de los radios
medulares y del tejido axial.
En algunos géneros como en Pinus los radios medulares además de estar constituidos
por las células parenquimatosas, presentan las traqueidas radiales.
65
Los diferentes géneros de las Gimnospermas son posibles de identificar a través del tipo
de puntuación que existe en los denominados campos de cruce.
Se entiende en Anatomía por campo de cruce el rectángulo formado por las paredes de
una célula de los radios y los de una traqueida axial, en sección radial. De esta forma se
pueden distinguir 5 tipos de puntuaciones en los campos de cruce:
Fenestriforme.
Pinoide.
Piceoide.
Cupresoide.
Taxodioide.
Los dos primeros caracterizan al género Pinus. Existen además otros caracteres que
tienen valor diagnóstico en la identificación como es la presencia de canales resiníferos
tangenciales y verticales.
El grosor de la pared de las células epiteliales de estos canales, sirve también en
ocasiones para discernir entre diferentes géneros por ejemplo, en el género Pinus estas
células tienen paredes finas, mientras en el género Larix éstas son gruesas.
El parénquima axial es otro carácter que nos sirve en la identificación, estando presente
en algunos géneros y ausentes en otros como en Pinus.
ANGIOSPERMAS
Como primera característica diferencial de las Angiospermas en relación con las
Gimnospermas, tiene la presencia de poros o vasos. A través de éstos se conducen los
nutrientes a las partes verdes de la planta.
Estos vasos están constituidos por un gran número de células a los cuales se les
denomina elementos o miembros de los vasos. Como primera característica de éstos,
encontramos que presentan orificios en sus extremos. Estos orificios se denominan
platinas de perforación, que pueden ser:
Simples.
Escaliriformes.
Foraminados.
En forma de ned.
Los vasos o poros se clasifican también por su distribución, forma y agrupamiento.
Por su distribución se conocen tres tipos:
Difusos
Semianular
Anular
El estado del conocimiento actual ha reflejado hasta el momento que el tipo más
abundante en las especies tropicales es la distribución difusa.
Cuando observamos en sección transversal, en las maderas se aprecian tres formas
fundamentales:
Redondos
Ovales
Angulosos
Otro elemento de gran valor en la identificación de las maderas es la presencia o no de
parénquima axial. Se distinguen dos grandes grupos de parénquima axial:
66
Apotraquial: cuando no está en contacto directo con los poros. Este tipo se subdivide
en:
Difuso.
En bandas.
Agrupado.
Terminal.
Escaleriforme.
Paratraquial: cuando está en contacto directo con los poros y se subdivide en:
Vasicéntrico.
Aliforme.
Confluente.
En bandas.
Unilateral.
Escaso.
Otros elementos a considerar en las maderas, son los denominados radios medulares.
Estos están constituidos por células parenquimatosas, las cuales pueden ser de dos
tipos: procumbentes: más largas que altas y erectas o cuadradas: más altas que largas o
de iguales dimensiones.
Por último el elemento más abundante pero menos complejo desde el punto de vista
anatómico es la fibra, cuya función principal es la de sostén es decir mecánica. Estos se
clasifican en dos tipos fundamentales: fibrotraqueidas y libriformes.
Como hemos plasmado aquí existe una gama amplia de caracteres y muchos autores
han demostrado que el estudio de la anatomía de la madera permite una certera
clasificación hasta especie de la misma (8).
A través de estos veinte años hemos trabajado numerosos casos dando respuesta hasta
el nivel de clasificación que nos ha permitido la huella maderable. Consideramos que es
importante profundizar en este estudio para obtener incluso una base de datos por este
método de las huellas de madera.
Para el estudio de la epidermis foliar, que fue objeto de tesis de doctorado, se consultó
con los métodos de clasificación de Metcalfe y Chalk y de David L. Dilcher (9) en el
caso de las dicotiledóneas y de la Dra. Evangelina Sánchez para las monocotiledóneas.
Las descripciones anátomo-morfológicas foliar de 52 especies seleccionadas de interés
criminalístico, han estado fundamentadas en las características internas de cada una de
ellas, teniendo en cuenta aquellos parámetros fijos, que no sufren cambios ecológicos.
Se observaron microscópicamente las características que posee cada especie estudiada,
en tres ejemplares de cada una de ellas. No es factible en este “ Manual de Biología
Criminalística”, volcar los resultados de las descripciones realizadas de esas especies,
lo que si recomendamos es que como literatura de referencia se consulte para una mayor
profundización de este tema en esta especialidad dentro de la rama biológica, el Atlas de
epidermis foliar de 52 especies cubanas.
Los resultados obtenidos demuestran la autenticidad y confiabilidad de las descripciones
y caracterización de cada especie. La práctica pericial ha desempeñado una forma de
comprobación de este sistema de clasificación, con la investigación de pequeños
fragmentos vegetales que han sido descritos anatómicamente y comparados con los
registros criminalísticos conformados con las preparaciones microscópicas de epidermis
foliares, se han mantenido estables los caracteres que se han conferido a las especies
de interés criminalístico aquí estudiadas.
67
Con las características cualitativas hemos podido diferenciar los distintos géneros y
especies. Realizamos las mediciones microscópicas a través del sistema computarizado
MADIP, de los distintos elementos anatómicos, (abertura estomática, área de las células
epidérmicas, longitud de los pelos, etc.) cuyos resultados no fueron significativos ya que
no aportaron diferencias entre las mismas. Debemos señalar que nuestro estudio se
basó en especies de distintos géneros en su mayoría y de distintas familias.
Consideramos que pueden ser útiles estas mediciones o valores cuantitativos cuando se
realiza un estudio entre géneros y especies.
Se corroboró la necesidad de analizar ambas superficies (adaxial y abaxial) en las
especies pertenecientes a las dicotiledóneas. Se hallaron en algunas especies marcadas
diferencias entre sus superficies. Un ejemplo típico de esto lo observamos en la
Cannabis sativa L. ssp. indica (Marihuana), cuyas variaciones en los tricomas son
ostensiblemente diferentes en cuanto al tipo que presentan en cada superficie. Pero
además los elementos anatómicos analizados la separan bien del resto de las especies
estudiadas.
Los caracteres anatómicos que se valoraron, en las 12 especies pertenecientes a las
monocotiledóneas, de la familia Poaceae (10), se obtuvieron a través de los cortes
transversales de sus hojas. En el mesófilo de las hojas se presentan células buliformes,
los haces conductores, tejidos del clorénquima, esclerénquima, parenquimatoso entre
otros, presencia o no de espinas, pelos, con notables diferencias por su distribución e
incluso de tamaño de muchos de estos elementos anatómicos entre las especies.
Las descripciones histológicas foliares de estas especies de las gramíneas o Poaceae,
constituyen un logro científico, ya que hasta el presente la clave taxonómica de esta
familia está basada en las características florales o inflorescencias (11). Este trabajo
además de ser muy útil en nuestra especialidad, facilitará el estudio de las malezas que
cotidianamente se determina en los Centros de Sanidad Vegetal en nuestro país. Tiene
también gran interés en la Universidad de La Habana y muy especialmente en el Dpto. de
Biología Vegetal
Actualmente contamos con una Metodología de trabajo de Botánica Criminalística y con
varios peritos biólogos en la mayoría de las provincias del país, que recibieron un curso
especializado para acometer esta especialidad.
X.5 PERSPECTIVAS
Con la formación de un grupo de peritos botánicos criminalistas, que se encuentran
investigando a lo largo de nuestro archipiélago, se continuará desarrollándose esta
especialidad a fin de optimizar las respuestas periciales y obtener mejor y mayor cantidad
de evidencias que ayuden el esclarecimiento del delito.
Todos los elementos botánicos resultan de interés en la Criminalística, ya que el hallazgo
de los mismos y su clasificación pueden contribuir a los objetivos de esta Ciencia.
Aún queda por enriquecer la especialidad con el desarrollo de la investigación de los
granos de polen, sobre todo en la sistematización de esta investigación pericial.
La digitalización de Imágenes por computación es un medio de perspectiva de desarrollo
en la Botánica Criminalística, pues logra fijar, reproducir y mejorar las imágenes captadas
por microscopía óptica.
Consideramos que en el futuro se debe realizar el estudio florístico de cada región del
país, lo que permitirá en la Botánica Criminalística tener una información detallada de la
Flora en las mismas, incluyendo las singularidades como el endemismo y la distribución
fitogeográfica por zonas de interés criminalístico.
68
Con una mayor divulgación y uso de la Botánica Criminalística, se ampliarán las
posibilidades de respuestas e investigación pericial para el esclarecimiento de los
diferentes delitos en nuestro país.
X.6 REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1.- Font Quer P., 1975. “Diccionario de Botánica” . Editorial Labor, S. A. Barcelona.
2.- Hall D., 1988. “ Contribution of the Forensic Botanist in Crime Scene Investigations”.
The Prosecutor Vol. 22, No.1 Summer.
3.- Tablada R, Hilario A., Quesada N., “ Plantas Tóxicas Cubanas”. ( Libro en Prensa).
4.- Tablada R. 1998. “ La investigación Criminalística de Especímenes Vegetales en la
República de Cuba”. Tesis de Doctorado.
5.- Hernández R., 1988 “ La Ciencia Criminalística” . Ed Cap. San Luis, Managua,
Nicaragua.
6.- Sánchez E., 1979. “Anatomía foliar de las especies y variedades argentinas de los
géneros Tridens Roem et. Shult y Erioneuron Nash”. Revista Darwiniana, Vol. 22 No. 1-3
Set.
7.- Metcalfe C. R. and Chalk , 1950. “Systematic Anatomy of the leaf and Stem”. Anatomy
of Dicotyledons Secnd Edition, Vol I Oxford Science Publications.
8.- Vales M. 1986. “Anatomía de Maderas de Cuba I”. Acta Botánica Hungárica 32 (1-4)
pp. 231-245.
9.- Dilcher D. 1974, “Approaches to the identification of Angiosperm Leaf Remains”. The
Botanical Review, Vol 40. January- March.
10.- Tablada R., Pérez A., Villalón I, Pérez Baluja O. 1996. “Esclarecimientos de hechos
delictivos utilizando estudios microscópicos de especies herbáceas”. UH, Premio aplicado
de mayor aporte a la defensa.
11.- Catasús Guerra, 1997. “ Las gramíneas (Poaceae) de Cuba I.” Fonquería XLVI,
Madrid.
69
XI. FIBRAS TEXTILES
XI.1 INTRODUCCION
Las fibras y microfibras textiles han sido objeto de investigación y han constituido huellas
y microhuellas relevantes en numerosos casos en la Historia de la Criminalística Cubana
y extranjera.
Las características propias de ser poco visibles o invisibles, la durabilidad, la fácil
adherencia de las fibras a los objetos y personas y la permanencia de sus propiedades,
permiten que este tipo de huella no desaparezca fácilmente en las evidencias y en el
lugar del crimen, incluso el autor no las detecta en su empeño de ocultar los objetos que
lo vinculan al hecho, y se mantienen como testigos silenciosos.
La experiencia recibida de esta investigación en los países del ex-campo socialista, fue
estimulante, pues una de las microhuellas que mayor porciento tenía de ocupación eran
precisamente las microfibras con un 15%, (en la URSS en la década del 80); por encima
a este valor se encontraban las microhuellas de sangre y secreciones humanas con un 25
% y por debajo, los pelos con un 10 % (1).
En la ex-RDA, trabajaban arduamente también este tipo de microhuella con muy buenos
resultados, conjuntamente con el resto de las microhuellas biológicas o de otro tipo cuya
búsqueda se realizaba dentro de un sistema de trabajo criminalístico generalizado por
todo el país (2).
El valor de las fibras y microfibras textiles, en un delito es mayor cuando se cuenta con
las muestras pertenecientes a los participantes del hecho para su estudio comparativo,
aunque sin ellas se puede emitir un resultado diagnóstico de la presencia de las mismas y
por sus características presumir la posible prenda de vestir que portaba el sospechoso.
Lo más importante del trabajo de la búsqueda de las microhuellas y específicamente las
microfibras en el lugar del hecho, además de cumplimentar todo lo que está establecido
para la inspección, por ser de pequeñas dimensiones y en la mayoría de los casos
invisibles, es contar con determinados instrumentos y materiales que ayuden a su
detección, levantamiento y conservación de las mismas (3).
Su establecimiento como parte del trabajo criminalístico en 1988 necesitó de una
preparación docente y consciente de los peritos por todo el territorio nacional. Fue
precisamente instaurar un nuevo método para obtener otras pruebas que demuestran el
vínculo del autor con el delito.
Por la composición de las fibras, que pueden ser de origen natural o sintéticas, su
investigación se realiza en el laboratorio de Biología y otra parte en el laboratorio de
Química.
XI.2 ANTECEDENTES HISTORICOS
Desde los primeros años de fundado del Laboratorio Central de Criminalística, en el
laboratorio de Biología se investigaban solamente las fibras de origen vegetal y las demás
se realizaban en el laboratorio de Química que comprendía el análisis de las fibras y
tejido textil, cordeles, sogas e hilos, de acuerdo con la Metodología Criminalística
adquirida de la extinta URSS.
70
A partir de 1983 asumió esta investigación el laboratorio de Biología del LCC,
incrementando su estudio con la utilización de la Microscopía óptica. En 1985 se
recibió un curso de adiestramiento por un especialista procedente de la antigua RDA.
sobre Las Microfibras, lo que significó un avance en el desarrollo criminalístico en
este tipo de huellas.
Posteriormente se generalizó en todo el país la nueva Metodología del trabajo pericial
y en el lugar del hecho sobre Microfibras, hecho que coincidió con el desarrollo en la
Criminalística Cubana en el campo de las Microhuellas (4); contando como antecedente
la experiencia del ex-campo socialista, principalmente la URSS y la RDA, que de acuerdo
con su trabajo pericial esta investigación arrojaba, según la estadística, muy buenos
resultados para el esclarecimiento de los diferentes delitos.
Este tipo de peritaje desde sus inicios hasta la fecha ha tenido una evolución paulatina
de acuerdo con los avances de la Ciencia Criminalística y de la Ciencia y la Técnica en
nuestro país, reflejado en las respuestas periciales que se han obtenido en los múltiples
casos que se han esclarecido a través de las fibras o microfibras textiles.
La enseñanza y la aplicación de esa Metodología de trabajo en todos los laboratorios
provinciales del país, ha permitido éxitos en los resultados de trabajo pericial y en el lugar
del hecho. Se puede mencionar como hecho relevante, un caso de Violación de una
joven que estuvo sometida por el acusado a estar bajo su dominio más de seis horas,
obligándola a realizar el acto sexual y otras prácticas sexuales. El individuo había
cometido ese hecho con otras mujeres y luego de una pertinaz búsqueda fue
capturado. En sus prendas de vestir y en las de la víctima, se hallaron microfibras textiles
que permitieron establecer una relación cruzada de pertenencia, lo que resultó una
prueba fehaciente del contacto entre víctima-victimario.
En general en todos los laboratorios provinciales se han ido obteniendo resultados
superiores en esta investigación, destacándose de manera particular los LPC de
Camagüey y del Municipio Especial Isla de la Juventud (8 y 9).
XI.3 FUNDAMENTOS TEORICOS
En el trabajo criminalístico el término más común empleado para denominar este tipo de
peritaje es la fibra textil.
Fibra textil: Son compuestos macromoleculares con propiedades físicas tales como
resistencia, flexibilidad y elasticidad.
Por su origen y composición química se dividen fundamentalmente en (10):
I.- NATURALES: Se originan de los tres reinos.
Vegetal: Se extraen fibras de las distintas partes que componen un vegetal, o sea
de las semillas o fruto (algodón, de coco y Kapoc), del tallo (lino, cáñamo, yute,
ramio, kenaf) y de las hojas (abacá, henequén, sisal o agave) (5) (Anexo No. 28).
Los principales constituyentes son la celulosa, hemicelulosa, pectinas y ligninas (6).
Animal: Lana, pelos de camello, Mohair, conejo, seda (Anexo No. 29).
Su principal elemento lo constituye la proteína; en lana y en otros pelos animales es la
queratina y en la seda es la fibroína.
Mineral: asbesto, amianto y vidrio (Anexo No. 30).
II.- QUÍMICAS: Se clasifican en:
71
Polímeros naturales artificiales: que comprenden las celulósicas (rayón viscosa,
rayón acetato, y rayón cobre o cuproamoniacales) y de origen proteico (de caseína
de leche, de zeína de maíz, y de soya de frijol) (Anexo No. 31).
Polímeros sintéticos: pueden ser las que se obtienen de las heterocadenas o sea
producto formado por policondensación de resinas, carbono, azufre, etc. Ejemplo de
fibras de este tipo son: poliéster, policarbonadas, policarbamidas, poliamidas. Otro
tipo de polímero sintético son las cadenas carbonadas: Policlorovinilo, poliacrilonitrilo,
polietileno, polipropileno (7) (Anexo No. 32).
La forma de las macromoléculas ejerce influencia en las propiedades físico-mecánicas de
las fibras.
Existen varias formas de fibras:
Estirada.
Rizada.
Encorvada
Ramificada.
La forma estirada es característica de la celulosa del algodón y otras fibras de origen
vegetal. En ese caso, la fibra adquiere mayor resistencia mecánica, ya que se revelan
con más precisión los enlaces intermoleculares. Las macromoléculas de la queratina de
la lana tienen forma encorvada.
El grado de orientación de las macromoléculas en la fibra, o sea la distribución de éstas
en relación con el eje longitudinal de la fibra, influye en la resistencia de la última.
Existen estructuras desorientadas, orientadas y de elevada orientación. Las de mayor
orientación con relación al eje longitudinal de la fibra se caracterizan por ser fibras de
mayor resistencia.
No pretendemos describir todas las propiedades que poseen todas las fibras, pues en la
actualidad existe mucha literatura al respecto de cada una de los tipos de fibras, si hemos
expuesto algunos conceptos esenciales y básicos para nuestro trabajo.
Hilaza: No es más que el hilo de un tejido textil. Se produce por medio de la torsión de
fibras, que con anterioridad se escogen con determinadas características y homogéneas
en todas sus propiedades.
En nuestro trabajo recogido en la Metodología existente, se plasma que no sólo se
investigan las fibras sino también los tejidos textiles, hilos, sogas, etc., o sea todo material
de origen textil.
XI.4 INVESTIGACIONES ANALITICAS
Considerando las características ya mencionadas de las fibras textiles en cuanto a su
visibilidad, permanencia en el tiempo y otras, es que su aparición resulta frecuente en
numerosos delitos, en tal razón la incidencia en su investigación es alta, llevando como
premisa la necesidad de elementos comparativos que permitan superar la investigación
diagnóstica y establecer relaciones entre las fibras halladas y los elementos textiles
indubitados, obtenidos de víctimas y/o sospechosos.
La investigación de las fibras textiles, tiene como aspecto primario, la preservación del
lugar del hecho, pues esto evita la destrucción de las verdaderas huellas o contaminación
con material ajeno al suceso.
72
El trabajo de la búsqueda de estas huellas o microhuellas se debe seguir con un orden
lógico de acuerdo con las características del caso; un levantamiento indiscriminado de
este tipo de huellas en vez de ayudar al esclarecimiento del hecho, lo obstaculiza. Para
proceder al levantamiento de estos elementos, es menester además contar con una
iluminación adecuada, en nuestro país, el levantamiento de microfibras textiles, se realiza
por medio de cinta adhesiva transparente la que se mantiene aislada de posible
contaminación fundamentalmente con elementos textiles.
La investigación en el laboratorio de Biología se realiza fundamentalmente con el auxilio
del estereomicroscopio y por microscopía óptica. Además se realizan una serie de
reacciones químicas y pruebas de termoplasticidad que confirman su composición.
No pretendemos volcar en este manual todas las técnicas para la determinación de las
fibras o microfibras sino sólo mencionarlas.
XI.5 PERSPECTIVAS
La investigación de fibras y microfibras textiles, deberá en un futuro inmediato, ampliarse
en cuanto a las investigaciones químicas que caracterizan e individualizan a las fibras
textiles, así como en el perfeccionamiento del análisis microscópico y la utilización de
cortes que posibiliten el análisis detallado de su composición.
Fundamentalmente en la investigación de fibras textiles, el uso de la espectroscopía
infrarroja permitirá ampliar el estudio para la clasificación de estas.
Por otra parte mediante la Digitalización de Imágenes es factible aumentar las
posibilidades de caracterización de cada una de las fibras textiles, realizar estudio
comparativo entre las huellas y muestras.
XI.6 REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
1.- Pérez García P. 1988. “La investigación Criminalística de Microhuellas”. Revista
Criminalística de Cuba, No. 1.
2.- Menzer F. y Schwenzer K. 1981. “Huellas Textiles”. Revista Suche/Sicherung,
Ministerio del Interior de la RDA.
3.- Tablada R., Massola N., Rivera M. 1986. “Metodología para la investigación
criminalística de las fibras textiles y de los objetos confeccionados con ellas”. LCC,
MININT.
4.- Tablada R. 1990. “Microhuellas”. Revista Criminalística de Cuba. Semestral.
5.- Richardson W., Preston M. 1968. “Identificación de Fibras textiles.” Editorial Blume,
Madrid.
6.- Kochin D., Plasksin S., 1981. “Acabado de los tejidos planos de algodón”. Editorial
Científico-Técnica, C. Habana.
7.- Idem Menzer.
8.- Estévez E., Velazco O. 1996. “La Microscopía de Fluorescencia aplicada al estudio de
las fibras textiles”. XI Fórum de Ciencia y Técnica, LPC Camagüey.
9.- Herrera J., González F. 1996. “Investigación Criminalística por medio de las
microhuellas en el lugar del Suceso”. LPC MEIJ.
10.- James Robertson, 1992. Forensic Examination of Fibres. Simon and S. Group, New.
York.
73
Otras referencias consultadas.
1.- Griene, Mc. And Griffin, R. Is it a modacrilyc fibre ?. Science and Justice. Journal of
the Forensic Science Society.Vol. 39. No. 3. 1999.
2.- Faber, N, Jeaps, M and Maljaars, S. Determining the optimal sample size in Forensic
casework with the application ti fibers. Science and Justice. Journal of the Forensic
Science Society. Vol. 39. No. 2. 1999.
3.- Cho. L, and et al. A new method for fiber comparison using polarized Infrared
Microspectrocopy. Science and Justice. Journal of the Forensic Science Society. Vol. 44.
No. 2. 1999.
4.- Cho. L, and et al. Forensic classification of polyester fiber by Infrared Dichroic Radio
Pattern reconigtion. Journal of the Forensic Science Society. Vol. 44. No. 2. 1999.
5.- Was-Gubala, J and Salermo, R. The biogradation of the fabric of soldiers’ uniforms.
Science and Justice. Journal of the Forensic Science Society. Vol. 40. No. 1. 2000.
XII.- RESTOS OSEOS.
XII. 1.- INTRODUCCION
Los delitos de HURTO Y SACRIFICIO ILEGAL DE GANADO MAYOR, constituyen
atendiendo a su efecto económico negativo, hechos priorizados en los cuales la Técnica
Criminalística, debe actuar desde su prevención a partir del estudio de las causas y
condiciones que los favorecen, hasta el esclarecimiento en el cual es válido el aporte de
pruebas periciales que demuestren la participación de los involucrados y que en la
medida de lo posible, sean capaces de reproducir las circunstancias en las que ocurrieron
los hechos.
Constituye práctica habitual dentro de las investigaciones criminalísticas biológicas más
aplicables a esta tipicidad delictiva, la investigación de sangre, pelos, tejidos en las
evidencias ocupadas en el lugar del hecho o a los supuestos participantes. Sin embargo
si bien no es posible demeritar el aporte de estas investigaciones al esclarecimiento
del hecho, es real que cuando tales evidencias no se ocupan oportunamente por
determinadas razones entre las que predomina la no detención del o los autores, son
entonces mínimas, las pruebas que pueden presentarse para demostrar la ocurrencia del
acto delictivo y la participación o vinculación de los procesados con el hecho.
Aún cuando constituye como referíamos una tarea priorizada, el delito de Hurto y
Sacrificio Ilegal de Ganado Mayor, presenta complejidades que pasan por la situación
económica del país hasta la inexistencia de condiciones adecuadas en muchas áreas
para la protección del ganado, esta situación tiene su reflejo directo en el trabajo
investigativo, en el bajo por ciento de esclarecimiento, sirva de ejemplo a lo anterior que
en el año 1999, se obtuvo en todo el país, sólo un 39% de esclarecimiento aún cuando se
intensificó y direccionó el trabajo de todos los involucrados en tal propósito.
Consideramos que la investigación de restos óseos animales, que son el resultado final
de la ejecución del acto delictivo, pudiera generalizarse como método de trabajo, toda vez
que no sólo permite determinar con absoluta certeza la especie del animal afectado sino
que brinda aportes relacionados con la edad del animal, la fecha aproximada de
ocurrencia de los hechos, el modus operandi y la causa de la muerte. Establecer un
método de trabajo homogéneo, que permita a los menos avezados especialistas obtener
esta información a través del estudio de los restos óseos hallados, constituye el objetivo
fundamental del presente trabajo, realizando su énfasis en las especies Bos taurus
(vacuno) y Equs equs (equino)
Por otra parte la realización de este estudio llama la atención sobre el hecho necesario
de ampliar la gama de evidencias y por ende de investigaciones periciales a fin de que el
aporte de la ciencia Criminalística sea cada vez mayor y de más calidad.
74
XII.2.- GENERALIDADES.
El término, “esqueleto” se aplica a la armazón de consistencia dura que soporta y
protege los tejidos blandos de los animales. En la anatomía descriptiva de los animales
superiores, se aplica de una manera restrictiva a los huesos y cartílagos. Al tratarse de
animales muertos, al conjunto de las porciones del esqueleto, fuera de su ubicación
anatómica, se nombra “restos óseos”.
Es importante precisar que existe un patrón anatómico entre los vertebrados superiores
(aves, mamíferos), que permite ubicar cada uno de sus componentes óseos y por ende
establecer su ubicación taxonómica.
El esqueleto puede dividirse en tres grandes zonas.
 Esqueleto axil.............. Comprende la columna vertebral, costillas, esternón y
cráneo.
 Esqueleto apendicular.... Está constituido por los huesos de los miembros.
 Esqueleto esplácnico...... Diferentes huesos desarrollados en parénquima.
Según la edad, el número de huesos del esqueleto varía debido a la fusión durante el
crecimiento de elementos óseos que están separados en el animal joven, incluso en
adultos de la misma especie, se producen variaciones, por ejemplo en todos los
mamíferos domésticos, varía considerablemente el número de vértebras coccígeas.
Los huesos se dividen en tres clases según su forma y función:
 1. Los huesos largos se caracterizan por su forma alargada, cilíndrica, con
extremidades ensanchadas. Se ubican en los miembros, donde actúan de
columnas de sostén y palanca. La parte cilíndrica se llama cuerpo y comprende la
cavidad medular que aloja a la médula ósea.
 2. Los huesos planos son aquellos en que predominan dos dimensiones.
Presentan áreas suficientes para la inserción de músculos y protegen los órganos
que cubren.
 3. Los huesos cortos en los que no predominan ninguna de las dimensiones, su
principal función se relaciona con la amortiguación de efectos mecánicos, entre
ellos se encuentran los del tarso y el carpo.
A pesar de la anterior clasificación, debe resaltarse que algunos huesos, por ejemplo las
costillas, no están provistos de caracteres diferenciales típicos y otros pueden
enmarcarse en varias clasificaciones, a este conjunto de huesos se les denomina huesos
irregulares.
XII.3.- ESTRUCTURA
DESARROLLO.
MACROSCOPICA
ELEMENTAL
DE
LOS
HUESOS.
Los huesos constan principalmente de tejido óseo, pero considerados como órganos,
presentan además una membrana envolvente llamada periostio, la médula ósea, los
vasos y los nervios.
En los huesos largos típicos, la porción más gruesa, corresponde al punto medio de la
díafisis o la proximidad del mismo y la más delgada a las extremidades, es el tallo o
cuerpo del hueso se ahueca para formar la cavidad medular.
El primitivo esqueleto embrionario, consta de cartílago y tejido fibroso en el que se
desarrolla el hueso. El `proceso se designa con el nombre de osificación u osteogénesis.
Se acostumbra a designar como huesos membranosos a los que se desarrollan a partir
75
del tejido fibroso, entre ellos los de la bóveda y regiones laterales del cráneo y muchos
huesos del esqueleto
En los huesos largos, se desarrollan tres puntos primarios de osificación, uno
aparece primero para la diáfisis y otro para cada epífisis o extremidad.
que
XII.4.- COMPOSICIÓN QUÍMICA Y PROPIEDADES FÍSICAS.
Los huesos constan de materia orgánica e inorgánica, su peso está dado por la cantidad
de materia orgánica. La ausencia de calcio o descalcificación, torna al hueso blando y
maleable.
SUSTANCIA
Gelatina (materia orgánica)
Fosfato de cal
Carbonato de cal
Fosfato de Magnesia
Carbonato y cloruro sódico
%
33,3
57,35
3,85
2,05
3,45
Fresco el hueso es blanco amarillento, con el paso del tiempo, descubierto de tejido
blando, se torna blanco, su resistencia media a la tensión es considerablemente superior
al roble. Con el enterramiento, se produce un proceso gradual de calcificación del hueso
en función del suelo, a partir de un intercambio de sustancias minerales, esto puede
apreciarse en la textura y color del hueso.
XII.5.- CARACTERÍSTICAS DIFERENCIANTES DE LAS ESPECIES DE INTERES
A.- CRANEO
ESPECIE: Equs equs (caballo).
El cráneo del caballo, tiene en conjunto la forma de una pirámide de cuatro lados y base
posterior, destacan en el mismo, la prolongación de los huesos nasales, la ausencia de
apófisis córneas.
Las ramas mandibulares se fusionan entre el segundo y tercer mes del nacimiento, en la
mandíbula, hay seis (6) alveolos para los incisivos y dos para los caninos en los machos,
en las yeguas, no existen caninos o son muy pequeños. La fórmula de los dientes
permanentes de la especie es:
2(I 3/3, C 1/21, P 3 ó 4/3, M 3/3) 36 ó 38
Los incisivos de los equinos, a diferencia de todos los mamíferos, presentan en la corona
una invaginación profunda llamada infundíbulo.
TABLA DE LA EDAD MEDIA DE ERUPCION DE LOS DIENTES
Tipo de diente
Incisivos
Caninos
Premolares
molares
Edad
2½-4a
4 a 5 a.
5-6m a 4 a.
9-12m a 4 a
ESPECIE: Bos taurus (vacuno).
El cráneo es más piramidal, más corto y en cierto modo más ancho, generalmente
cuadrangular, con una mayor extensión del seno frontal que le confiere la mayor anchura.
En los machos, son evidentes las apófisis córneas y en las hembras están presentes
aunque rudimentarias.
76
Las dos mitades de la mandíbula, no se fusionan ni aún en edades avanzadas, por lo que
existe una sínfisis.
En el cuerpo mandibular hay 8 alveolos redondos y poco profundos , no existen alveolos
para los caninos.
La fórmula de los dientes permanentes es:
2( I 0/4, C 0/0, P 3/3, M 3/3)= 32
Los incisivos faltan en la rama superior, no tienen infundíbulo.
TABLA DE LA EDAD MEDIA DE ERUPCION DE LOS DIENTES
Tipo de diente
Incisivos
Molares
Edad
1 ½ a 3 años
2 ½ a 3 años.
B.- EXTREMIDAD TORACICA
La extremidad torácica, está conformada por el Cinturón escapular, el brazo, antebrazo y
la mano, dentro del cinturón escapular el coracoides y la clavícula en ambas especies
están poco desarrollados o no existen por lo que centraremos la atención en la Escápula,
hueso plano, situado en la parte anterior de la pared lateral del tórax.
ESPECIE: Equs equs (caballo).
La escápula tiene un contorno triangular, con el agujero nutricio ubicado en el tercio
inferior de la cara externa donde se ubica la espina que es poco prominente.
El brazo está constituido por el Húmero, en el que se aprecia en su extremidad proximal,
el susrco intertuberal dividido, por otra parte resalta la fosa del Olécranon muy profunda.
En el antebrazo, conformado por los huesos Radio-Cúbito, de destaca el mayor largo del
radio, mientras que el cúbito tiene menor desarrollo, en adultos ambos huesos están
parcialmente fusionados.
En los huesos de la mano, aunque existen diferencias, no se señalan por ser necesrio
una identificación inequívoca de cada uno de los huesos que la conforman.
ESPECIE: Bos taurus (vacuno).
La Escápula tiene forma de triángulo más ancho con base superior, la espina es muy
prominente y se prolonga por fuera del cuerpo del hueso para formar el acromion. El
agujero nutricio se ubica hacia el borde posterior de la espina.
En el brazo, el Húmero, no presenta división en el surco intertuberal, la fosa del
Olécranon, es poco profunda.
Los huesos Radio-Cúbito que conforman el antebrazo, tienen como carcterística distintiva
que el Radio es más corto y ancho y el Cúbito, tiene mayor desarrollo. En los animales
adultos ambos huesos están completamente fusionados.
77
C.- EXTREMIDAD PELVIANA
Al igual que la extremidad torácica, en ésta, se distinguen cuatro segmentos: Cinturón
pelviano, Muslo, pierna y pie.
En el Cinturón pelviano, destaca el hueso Coxal o Hueso de la Cadera, que aporta
notables diferencias intersexuales. Este hueso está constituido por tres husos, el Ilion, el
Isquion y el Pubis que se reúnen en el acetábulo, una ancha cavidad que articula con el
hueso del muslo(Fémur)
Un aspecto que marca las diferencias sexuales en ambas especies, es la relación de los
diámetros del hueso coxal entre hembras y machos, tanto el diámetro transverso( ancho)
como el diámetro conjugado( largo), que es significativamente mayor en las hembras a
partir de su función en la actividad reproductiva.
ESPECIE: Equs equs (caballo).
En el Cinturón Pelviano, destaca la forma oblicua de los huesos iliacos con relación al
plano horizontal, lo que le confiere una forma triangular, así como su gran tamaño
El Fémur o hueso del muslo, es el más voluminosos de los huesos largos, parece como
arrollado sobre sí, con un cuerpo cilíndrico, con gran cabeza y fosa supracondoilea muy
profunda.
En la tibia y el peroné, huesos de la pierna, , se destaca la gran reducción del peroné que
se presenta como una espina unido al cuerpo de la tibia.
ESPECIE: Bos taurus (vacuno).
En el Cinturón Pelviano, los huesos iliacos son casi paralelos entre sí y por lo tanto son
menos oblicuos con relación al plano horizontal, son relativamente pequeños, el isquion
es muy voluminoso.
El Fémur o hueso del muslo, tiene un cuerpo relativamente pequeño, que es cilíndrico en
el centro y prismático en la porción distal fosa supracondoilea poco profunda., la cabeza
es más pequeña que en el caballo.
La tibia se parece mucho a la del caballo pero es más corta, el cuerpo es claramente
encorvado y el peroné consta sólo de las dos extremidades, la cabeza está fusionada con
el cóndilo de la tibia, la extremidad distal, permanece separada y forma el maleolo lateral.
XII.6.- BIBLIOGRAFÍA GENERAL
 S. Sisson. Anatomía de los animales domésticos.. Edic. Rev, 1986.
 J.Daniels Grossman . Osteología. Rev. Dpto de Morfología Univc. Cailif, 34, 1989.
 Ibarra M. E. Anatomía Comparada de las especies de interés. Fac. Biología U.H,
1987.
78
XIII. INVESTIGACIONES ESPECIALES.
Dentro del trabajo criminalístico biológico, están otras investigaciones que no se realizan
comúnmente en nuestro laboratorio, ya que la frecuencia de esos casos es muy inferior y
nuestra política ha sido apoyarnos en otras instituciones y especialistas del Estado para
dar respuestas a los mismos.
Desde hace más de dos décadas en que surge la Criminalística Especial y con ella, el
aporte íntegro de diversas ciencias, las investigaciones biológicas, han ampliado su
capacidad de respuesta apoyadas en investigaciones aplicadas a diversas ramas de las
Ciencias Biológicas como son:
Biología Marina, Hidrobiología, Oceanología.
Ecología.
Entomología.
Microbiología General, de Alimentos.
Inmunología.
Antropología.
Ornitología
En particular los análisis microbiológicos de todo tipo de sustancias que sean de interés
criminalístico o de otro organismo competente que solicite nuestro servicio conllevan
determinadas condiciones materiales, que por lo expuesto anteriormente no contamos
con un laboratorio de ese tipo, por tanto se realizan en otros Centros y nuestros
especialistas, además de velar por el desarrollo del trabajo, se encargan de la
interpretación de los mismos.
Finalmente sus resultados, se plasman en un informe pericial, como el resto de nuestro
trabajo.
79
La Biología es una ciencia muy amplia, que abarca el estudio de los tres reinos de vida:
animal, vegetal y humana. La Criminalística está relacionada con los tres reinos. En
determinados casos se ha requerido la identificación de un insecto por lo que se ha
consultado con un especialista de esta rama de la Biología. De igual manera ha sucedido
con la identificación de determinada ave y es precisamente un ornitólogo quien por su
especialización nos ha ayudado a solucionar ese peritaje. Para dar respuesta a todo tipo
de material biológico, se necesitarían un gran número de personal en nuestra Institución
con la colaboración de determinados especialistas que realizan otras investigaciones en
otros centros, contribuyen a solucionar nuestras problemáticas.
No obstante, es política actual de nuestro Laboratorio Central de Criminalística, capacitar
los especialistas biólogos, no sólo en el curso normal de perito, sino recibir cursos de
adiestramientos en diferentes especialidades, lo que permite una interpretación correcta
de los resultados obtenidos en esas investigaciones especiales, además que con un
mayor conocimiento, podemos realizar en determinados casos la prevención de los
hechos.
ALGUNAS EXPERIENCIAS DE CASOS TRABAJADOS EN LA ESPECIALIDAD
 A partir del hallazgo de un resto óseo de un menor en una zona abierta, las
investigaciones biológicas permitieron establecer con un grupo multidisciplinario, la
edad exacta del menor, aspecto que permitió posteriormente conocer y establecer un
hecho accidental (Villa Clara, 1974).
 Actividades de agresión microbiológica durante la realización del 11no Festival
Mundial de la Juventud y los Estudiantes (1978).
 Identificación de los combatientes caídos en el Asalto al cuartel Moncada. Se participó
en toda la búsqueda de información, elaboración de los expedientes e identificación
de los restos (1978).
 Investigación del asesinato de la Comandante Ana María en Nicaragua. Se
investigaron todos las evidencias y huellas ocupadas durante la inspección y a los
sospechosos, brindándose todos los elementos necesarios para esclarecimiento de
este hecho (1979).
 Investigación de los hechos ocurridos en la sede del Vaticano. Se realizó la inspección
del lugar del hecho y se analizaron todos los elementos ocupados en el lugar y al
sospechoso estableciéndose la culpabilidad del autor del asesinato del funcionario
cubano (1980).
 Identificación de los caídos en Granada. Se participó en los trabajos realizados junto
con otras especialidades y el IML tanto en el estudio antropológico así como de otras
características identificativas (1983).
 Investigación de la contaminación de una vacuna de Newcastle con un virus de
bronquitis aviar. Se participó en todo el trabajo de laboratorio para la detección e
identificación de la cepa conjuntamente con asesores civiles de microbiología y
posteriormente en todo el trabajo operativo encaminado a establecer las vías de
contaminación (década del 80).
 Investigación de intoxicaciones accidentales con sulfato de talio. Se aplicó el análisis
al microscopio de pelos provenientes de individuos intoxicados estableciéndose las
lesiones en los pelos producidas por la acción del metal (década del 80).
 Se trabajó en la investigación del segundo brote de Fiebre Porcina Africana, ocurrido
en la provincia de Guantánamo, estableciéndose en conjunto con un grupo
multidisciplinario el foco de origen de la enfermedad y las vías de propagación, estas
pruebas fueron presentadas en un juicio realizado a los responsables de la
propagación del foco (década del 80).
80
 En la investigación de un hecho de doble asesinato en la provincia Habana resultó
determinante en la rápida captura del autor, las valoraciones realizadas en el propio
lugar del hecho por los especialistas de Biología a partir de los mecanismos de
formación de las máculas halladas (1986).
 Las investigaciones criminalísticas de microfibras textiles, permitieron establecer en un
hecho de Violación, cual fue el vehículo en que se condujo a la víctima, al ofrecer un
resultado positivo entre las fibras del asiento y las que componían el vestuario de la
víctima (Matanzas, 1986).
 Detección del hongo Cladosporium resinae en el turbocombustible utilizado en las
naves aéreas cubanas, producto de una acumulación de agua dado por un mal
drenaje de las mismas. Este microorganismo resulta muy perjudicial para el
funcionamiento técnico de dicho equipo (1986).
 Intoxicación de ocas por la ingestión de semillas de la planta Ricinus communis L
(Higuereta) Este caso se trabajó conjuntamente por especialistas de Biología de
nuestro Centro y del CENSA, donde se pudo esclarecer la causa de la muerte de
estas aves de interés económico, primeramente con la identificación de las semillas y
con un estudio anátomo-patológico de los animales (1986).
 Como hecho excepcional, fue necesario realizar un estudio genético de los
descendientes de sementales equinos de una recría en la que, la actividad
continuada de Hurto, motivó la pérdida de más de veinte ejemplares cuyo precio
individual superaba el medio millón de dólares. Al establecer las características
genéticas en la descendencia, esta pudo recuperarse y minimizar las pérdidas a la
economía nacional (1990).
 Las investigaciones rutinarias de control de calidad a los productos cárnicos
destinados al consumo en los XI Juegos Deportivos Panamericanos, establecieron la
presencia de un microorganismo no patógeno en las concentraciones halladas, sin
embargo en un control posterior, se detectaron síntomas clínicos de intoxicación,
correspondió a la especialidad establecer el microorganismo presente, sus
concentraciones y con ello las negligencias presentes (1991).
 Fue necesario establecer desde el punto de vista biológico, a partir del análisis de la
sucesión ecológica, el tiempo de sumersión de elementos bélicos en aguas dulces,
lográndose a partir de este análisis, establecer con un error mínimo, la fecha del
hecho, aspecto vital para el esclarecimiento de una actividad enemiga (1994).
 Para establecer la causa de muerte de seis (6) niños en la Provincia de Pinar del Río,
los especialistas de Biología Legal, realizaron determinaciones de capacidad
respiratoria, concentración de oxígeno y otras, cuyo resultado posibilitó aseverar la
hipótesis de una muerte accidental (1996).
 Operación Guerrilleros Heroicos, encaminada a la identificación de los combatientes
caídos en Bolivia. Se participó en todo el trabajo de búsqueda de información y
elaboración de los expedientes así como en la aplicación de las técnicas de ADN para
la identificación de los restos óseos hallados (1996).
 La investigación de las mortalidades masivas de truchas en diferentes acuatorios del
país, permitió establecer el agente causal de las mismas, el que no había sido
reportado en nuestro país en esas condiciones (1996).
 La Investigación de un Asesinato en Pinar del Río ocasionado por una porción de
madera, el cual fue determinado su especie, Oxandra lanceolata (Sw), Baill, (yaya) y
se realizó el estudio comparativo con el árbol donde se extrajo ese fragmento cuyos
resultados fueron categóricos.
81
 La identificación de hojas enrolladas como cigarrillos, a través de métodos anátomomorfológicos, procedentes del exterior, correspondiente a la planta Heteropteris
laurifolia L. (Yagué) detectándose en la misma principios activos con efectos
narcóticos coincidentes con la literatura revisada.
Como resultado del trabajo investigativo de estos y otros hechos, se han aportado un
conjunto de medidas técnicas que permiten la profilaxis futura, en las investigaciones
criminalísticas biológicas.
XIV.- BIOSEGURIDAD
XIV.1 INTRODUCCION
82
En los laboratorios biológicos se realizan trabajos muy diferentes que implican gran
número de riesgos de diversa índole para el trabajador, el personal cercano al mismo y
para la comunidad en su conjunto.
En general, las causas que provocan un determinado daño no obedecen a un solo factor,
sino a la interacción de varios factores y para evitarlos existe una serie de medidas que
previenen o limitan los accidentes y otros riesgos relativos al trabajo del laboratorio.
Es importante conocer que los accidentes y enfermedades relacionados con el trabajo no
son inevitables. Como todo fenómeno, existe una correlación entre causa y efecto, y el
estudio y reconocimiento de las causas permiten eliminar las fuentes de peligro o por lo
menos limitarlas en la mayor medida posible.
En los últimos años el número de personas empleadas en los laboratorios biológicos se
ha incrementado considerablemente, ello ha hecho posible aumentar la preocupación por
los riesgos de infección entre el personal de laboratorio e intensificar las exigencias con
respecto a los niveles de bioseguridad.
En la Criminalística no se manipulan directamente agentes infecciosos al igual que en los
Centros de Investigación, sino de forma indirecta, a través de huellas y evidencias
ocupadas en el lugar del hecho que portan elementos de naturaleza biológica y de
muestras tomadas a las víctimas y/o sospechosos de origen desconocido, bajo
determinadas condiciones de conservación, soporte y lugar donde son ocupados, los
peritos se exponen a los agentes biológicos patógenos de la sangre y otros materiales
potencialmente infecciosos.
Los materiales investigados en la Criminalística, pueden encontrarse maculados de
sustancias de origen químico u oleico o con microorganismos que proliferan en ese medio
en dependencia de las condiciones de conservación.
Los peritos criminalistas no sólo se enfrentan a estos elementos durante la investigación
de los mismos en el laboratorio, sino también en la inspección del lugar del suceso
(viviendas, cuevas, lugares abiertos, ríos, lugares de difícil acceso, entre otros) y durante
la toma de muestras (sangre, saliva, pelos, orina) a los sospechosos y/o víctimas,
teniendo un contacto más directo con el ambiente que rodea a cada uno.
Es importante considerar, además, que todas las huellas y evidencias relacionadas con el
hecho investigado, proceden de personas de las cuales se desconocen sus antecedentes
de salud.
La manipulación en el Laboratorio de estos elementos portadores de materiales de origen
biológico, se realiza en condiciones diferentes a los Centros de Investigación, ya que sus
características y dimensiones actuales no permiten el uso de medios de protección
colectiva como los Gabinetes de Seguridad Biológica.
La ocupación de los elementos en la escena del crimen, también resulta riesgosa para el
investigador que entra en contacto con objetos filosos o cortantes, explosivos, o
materiales potencialmente infecciosos. Una vez ocupados los elementos deben ser
embalados y trasladados a los laboratorios de Criminalística para la investigación, donde
el perito a cargo está expuesto a riesgo de daño o infección .
El lugar del suceso presenta riesgos potenciales para el personal. Una comprensión y
apreciación de los riesgos potenciales más las adecuadas precauciones de seguridad
disminuirán esos riesgos.
RIESGO QUE IMPLICA EL TRABAJO CON AGENTES PATÓGENOS DE LA SANGRE
Y OTROS MATERIALES POTENCIALMENTE INFECCIOSOS.
La sangre y otros materiales potencialmente infecciosos (semen, secreciones femeninas,
saliva, otros fluidos contaminados con sangre, cultivos, órganos y tejidos) han sido
83
reconocidos como una amenaza potencial a la salud de los trabajadores que están
expuestos a estos materiales.
Ciertos microorganismos patógenos pueden ser encontrados en la sangre de individuos
infectados, a los que se les llama patógenos de la sangre y que pueden causar
enfermedades. Estos patógenos pueden ser transmitidos de un individuo infectado a otro
a través de la sangre o de otros fluidos corporales.
Debido a que la exposición a la sangre y a otros fluidos corporales conlleva un riesgo de
infección, los individuos que están expuestos a ellos, también pueden resultar infectados
con esos agentes patógenos, desarrollando la enfermedad y en algunos casos, morir.
Estos individuos son capaces además, de transmitir estos patógenos a otros.
De acuerdo a los estimados de la Administración de Seguridad y Salud Ocupacional de
los Estados Unidos (OSHA), más de 5,6 millones de trabajadores en los centros de salud
y laboratorios de investigación, están sometidos al riesgo de exposición a patógenos de la
sangre y otros materiales potencialmente infecciosos.
La inoculación parenteral accidental con agujas y otros objetos filosos ha sido la principal
causa de contaminación con los agentes patógenos de la sangre. Se plantea que los
daños ocasionados con agujas y otros objetos filosos han provocado enfermedades por
más de 20 agentes infecciosos.
Es importante conocer, para comprender la naturaleza de las infecciones de laboratorio,
las diferencias que existen entre la infección, que no es más que la entrada y desarrollo
o multiplicación de un agente infeccioso en el organismo de una persona o animal y la
infección adquirida en el laboratorio, que se define como la infección contraída en el
laboratorio producto de la exposición ocupacional directa e indirecta a los agentes
patógenos.
Entre los patógenos de la sangre más importantes y que con mayor frecuencia pueden
ser transmitidos por esta vía, se encuentran los Virus de la Hepatitis B y C (VHB y VHC)
y el Virus de Inmunodeficiencia Adquirida (VIH), aunque no son exclusivos.
Existen otros microorganismos que son considerados también patógenos de la sangre y
otros materiales potencialmente infecciosos, tales como Treponema pallidum, Brucella
spp, Leptospira interrogans, Trichomonas vaginalis, Candida albicans, entre otros.
Además de la inoculación parenteral accidental, el contacto directo de las mucosas o
heridas en la piel con materiales infectados, la transmisión a través de la vía respiratoria
por la formación de aerosoles y de la vía digestiva por ingestión, constituyen otras formas
reportadas muy frecuentemente de adquirir enfermedades por la manipulación de estos
agentes patógenos en el laboratorio.
Para reducir el riesgo de contaminación de la salud de los trabajadores ocupacionalmente
expuestos a estos patógenos, se han promulgado normas (Bloodborne Pathogens
Standard 29CFR 1010.1030, OSHA, CDC, E.U.) en las que se refiere la necesidad de
combinar una serie de aspectos, como los controles de las prácticas de trabajo e
ingenieriles, los equipos de protección individual, el entrenamiento del personal, la
vigilancia médica, la vacunación, entre otros.
De acuerdo a esta norma, tanto la sangre como los fluidos corporales son considerados
potencialmente infecciosos, por lo que para el manejo con los mismos deben ser
observadas las Precauciones Universales, que refieren que la sangre y otros fluidos
corporales deben ser trabajados como si se conociera que están infectados por los
patógenos de la sangre y otros materiales potencialmente infecciosos.
XIV.2 TIPOS DE RIESGOS EN EL LABORATORIO
84
Especialistas del Centro de Control de Enfermedades (CDC) de Estados Unidos, centro
de reconocido prestigio en la prevención de enfermedades, plantean que “Riesgo”
implica la probabilidad de que ocurra un daño, lesión o enfermedad. En el contexto de los
laboratorios microbiológicos y biomédicos, la evaluación del riesgo se concentra primero
en la prevención de la infección en el laboratorio. Cuando se trate de actividades de
laboratorio que involucren materiales infecciosos, la determinación del riesgo representa
un ejercicio crítico y productivo. Ayuda a asignar los Niveles de Bioseguridad
(Instalaciones, equipos y prácticas) que reducen al mínimo el riesgo de exposición del
trabajador o del ambiente a un agente determinado.
Los agentes físicos, químicos y biológicos se cuentan entre los que más fecuentemente
someten al individuo a riesgos potenciales y reales. El hombre, con su conducta y
organización laboral, puede constituir también una condición riesgosa.
RIESGO FISICO
Los agentes físicos, mecánicos, térmicos, eléctricos, radiantes y otros, pueden provocar
un daño considerable o mortal para el ser humano.
RIESGO QUIMICO
Las propiedades físico.químicas y tóxicas de algunas sustancias las hacen poseer
características inflamables, explosivas, corrosivas, irritantes, narcóticas, venenosas,
mutagénicas, carcinogénicas o teratogénicas, lo que puede tener efecto deletéreo o
mortífero sobre el hombre. Algunas sustancias químicas presentan inclusive varios tipos
de riesgos a la vez.
RIESGO BIOLOGICO
El Riesgo Biológico constituye el riesgo derivado de la manipulación o exposición a
agentes patógenos, que trae como consecuencia la infección del personal expuesto con o
sin manifestación de la enfermedad.
RIESGO HUMANO
Adicionalmente, existe un grupo de riesgo fundamental, constituido por factores humanos,
los cuales pueden incrementar considerablemente el riesgo de los otros factores y que
pueden estar relacionados con las aptitudes y habilidades para el trabajo, el estado físico
y psicológico del trabajador, su capacidad intelectual y entrenamiento laboral, así como
con la organización general del laboratorio.
Algunos de los factores fisiológicos que pueden afectar la susceptibilidad de un individuo
al daño o acciones que pueden resultar en daños, incluyen la habilidad auditiva, agudeza
visual, fortaleza y movilidad.
Pueden existir también variaciones temporales en el estado físico y psicológico, tales
como la fatiga, enfermedad y uso de medicamentos que pueden provocar reacciones
lentas, dificultad para la concentración y para la percepción de los riesgos.
El personal de los laboratorios biológicos está sujeto a gran cantidad de riesgos de
peligrosidad variable y de causas multivariadas, en las que intervienen varios factores: la
responsabilidad individual del trabajador y la responsabilidad colectiva y administrativa,
las que desempeñan funciones preponderantes o coadyuvantes en su existencia.
XIV.3 BIOSEGURIDAD
La BIOSEGURIDAD es el conjunto de medidas científico-organizativas destinadas a
proteger al trabajador, a la comunidad y al medio ambiente de los riesgos que entraña el
trabajo con agentes biológicos o la liberación de organismos al medio ambiente; disminuir
85
al máximo los efectos que se puedan presentar y eliminar rápidamente sus posibles
consecuencias en caso de contaminación, efectos adversos, escapes o perdidas.
La Bioseguridad consta de tres principios o elementos básicos:
1.- Técnicas y prácticas correctas de laboratorio: el elemento más importante de la
contención es el cumplimiento estricto de las técnicas y practicas microbiológicas. Las
personas que trabajan con agentes infecciosos o materiales potencialmente
contaminados, deben conocer los riesgos potenciales y tiene el mayor peso en la
prevención eficiente del riesgo biológico. Un aspecto de vital importancia es que el
personal esté debidamente entrenado para el trabajo en condiciones seguras.
2.- Equipos de seguridad: se les denomina barreras primarias, ya que constituyen la
barrera directa entre el personal y el material infeccioso. Estos equipos incluyen los
gabinetes de seguridad biológica (flujo laminar, campanas de extracción de gases), otros
equipos para la protección y los equipos de protección personal (guantes, botas,
máscaras respiratorias o faciales, entre otros).
3.- Diseño adecuado de las instalaciones de laboratorio: se les denomina barreras
secundarias, ya que garantizan la protección del personal que trabaja en el edificio
aunque fuera del laboratorio, así como de la comunidad, del posible escape accidental de
agentes infecciosos del laboratorio.
La incidencia de las enfermedades adquiridas por el personal en el laboratorio y el riesgo de
diseminación de las mismas al medio ambiente, constituye una de las premisas para que los
agentes biológicos se clasificaran en grupos de acuerdo al peligro que entrañaba su
manipulación.
Grupo de riesgo 1: (Escaso o nulo riesgo individual y comunitario).
Microorganismo que tiene pocas posibilidades de provocar enfermedades humanas o
animales.
Grupo de riesgo 2: (Riesgo individual moderado, riesgo comunitario bajo).
Agente patógeno que puede provocar enfermedades humanas o animales, pero que tiene
pocas probabilidades de entrañar un riesgo grave para el personal de laboratorio, la
comunidad, el ganado o el medio ambiente. La exposición en el laboratorio puede
provocar una infección grave, pero se dispone de las medidas eficaces de tratamiento y
prevención.
Grupo de riesgo 3: (riesgo individual elevado y riesgo comunitario bajo).
Agente patógeno que suele provocar enfermedades humanas y animales graves, pero
que de ordinario no se propaga de un individuo infectado a otro. Se dispone de las
medidas eficaces de tratamiento y prevención.
Grupo de riesgo 4: (Elevado riesgo individual y elevado riesgo comunitario).
Agente patógeno que suele provocar enfermedades graves en las personas o en los
animales y que puede propagarse fácilmente de un individuo a otro, directa o
indirectamente. No suele disponerse de medidas eficaces de tratamiento y prevención.
ORGANIZACIÓN DE LA BIOSEGURIDAD.
Resulta necesario que exista una organización que facilite la aplicación de las medidas
apropiadas que garanticen la seguridad del personal de los laboratorios y de los que le
rodean.
Garantizar la Bioseguridad en los laboratorios biológicos no puede ser una labor
individual, espontánea o anárquica. Es preciso que exista una organización de seguridad
que evalúe todos los tipos de riesgos en un laboratorio y acorde con las regulaciones y
86
recomendaciones técnicas, controle y garantice el cumplimiento de las medidas de
seguridad para el trabajo en esos lugares.
Debe enfatizarse que los dos aspectos más importantes para garantizar la seguridad en
un laboratorio son: la observancia estricta de las normas técnicas y de seguridad de
este y el entrenamiento adecuado de los trabajadores.
El equipamiento y las instalaciones de laboratorio brindan barreras de contención
adicionales, eficaces y muy importantes, pero la primera y la más importante barrera
es la disciplina y habilidad del personal que labora en los laboratorios.
Se ha señalado en algunas publicaciones, que la responsabilidad principal por toda la
seguridad, compete al director de la institución encargada de estas investigaciones. En
los centros o instituciones con gran cantidad de trabajo con alto riesgo de infección, es
esencial que exista un Responsable de Seguridad a tiempo completo, en el que el
director podrá delegar sus funciones aunque mantenga su responsabilidad.
El nivel de información, de sensibilidad y de acción que se logre entre todos aquellos que
de una u otra forma tienen que ver con el trabajo en los laboratorios biológicos,
determinará el éxito en la implementación de las medidas de seguridad y su eficiencia en
la prevención y limitación de los efectos perjudiciales.
Los laboratorios deben cumplir con los siguientes requerimientos:
1.- Hay que preveer espacio suficiente para aplicar con toda seguridad los métodos de
laboratorio.
2.- Las superficies (suelos, paredes) deberán estar pulidas, facilitando el lavado y la
desinfección en caso de necesidad.
3.- Preveer espacios en locales contiguos sólo para almacenar con seguridad, solventes,
sustancias inflamables y otros reactivos.
4.- Las superficies de las mesas de trabajo serán impermeables al agua y resistentes a la
acción de los desinfectantes.
5.- Debe existir una iluminación suficiente para toda clase de actividades, evitando los
reflejos molestos.
6.- Fuera del local de trabajo deben existir locales para guardar la ropa de calle y los
objetos personales, así como para beber, comer y fumar.
7.- Las puertas y ventanas estarán adecuadamente protegidas contra actos vandálicos y
las puertas deben permanecer selladas al concluir la jornada laboral.
8.- Deben existir en los laboratorios duchas de seguridad.
9.- Prever espacio en locales contiguos solo para almacenar con seguridad, solventes,
sustancias inflamables, gases comprimidos y otros reactivos.
10.- Los laboratorios deberán estar provistos de sistemas de alarmas contra incendios,
así como se instalarán extintores de incendio.
11.- En las puertas del laboratorio debe figurar la señal de peligro biológico y otras que
identifiquen condiciones especiales o prohibiciones.
12.- Anualmente se cumplirá un plan de comprobaciones periódicas y mantenimiento de
los equipos y sistemas técnico-ingenieros.
XIV.4 FUNCIONES DE LA COMISION DE SEGURIDAD BIOLOGICA
87
 1.- Organizar la vigilancia médica.
 2.- Elaborar el programa de preparación de los especialistas
impartición.
y participar en su
 3.- Realizar la comprobación de los conocimientos de los trabajadores una vez al año.
 4.- Comprobar la preparación del personal para el trabajo práctico.
 5.- Coordinar con el centro asistencial lo relacionado con la asistencia médica del
personal.
 6.- Controlar la vacunación oportuna y la revacunación.
 7.- Controlar permanentemente el cumplimiento de las normas reglamentarias,
analizando los resultados de las comprobaciones realizadas.
 8.- Otras funciones que surjan durante el desarrollo del trabajo relacionadas con la
preservación del medio exterior y el personal que labora en los laboratorios.
ANÁLISIS DEL POSIBLE RIESGO BIOLÓGICO ASOCIADO A LAS ACTIVIDADES
REALIZADAS EN LA CRIMINALÍSTICA.
Caracterización de los agentes biológicos que pueden estar presentes en los
elementos trabajados.
Teniendo en cuenta los elementos portadores de material potencialmente infeccioso que
son manipulados en los laboratorios de Criminalística y que los peritos criminalistas, se
ponen en contacto con estos materiales en el Laboratorio, en el lugar del hecho y en la
toma de muestras a las víctimas y/o sospechosos, los agentes biológicos que pudieran
estar presentes en dichos elementos son los siguientes:
Bacterias.
Leptospira interrogans.
Brucella spp.
Treponema pallidum.
Mycobacterium tuberculosis.
Neisseria gonorrhoeae.
Neisseria meningitidis.
Mycoplasma pneumoniae.
Salmonella typhi.
Salmonella spp.
Shiguella spp.
Staphilococcus aureus.
Streptococcus pyogenes.
Legionella pneumofila.
Virus.
Virus de la Hepatitis B (VHB).
Virus de la Hepatitis C (VHC).
Virus de la Hepatitis D (VHD).
Virus de la Hepatitis G (VHG).
Virus de Inmunodeficiencia Humana (VIH).
Virus de la Rabia.
Virus del Herpes Simple 1 y 2.
88
Hongos.
Histoplasma capsulatum.
Candida albicans.
Aspergillus fumigatus.
Cryptococcus neoformans.
Parásitos.
Sarcoptes scabiei.
Trichomonas vaginalis.
Estos agentes biológicos constituyen, en su mayoría, agentes patógenos de la sangre y
otros materiales potencialmente infecciosos, por lo que pueden estar presentes en las
muestras tomadas a las víctimas y/o sospechosos y en las huellas y evidencias
ocupadas.
Otros aparecen en el lugar donde ocurre el hecho delictivo y que puede constituir su
hábitat natural como en el caso de algunos hongos o formando parte de las prendas de
vestir y otros objetos ocupados a las víctimas y/o sospechosos, como son los parásitos
(Sarcoptes scabiei).
Todos los agentes biológicos caracterizados pertenecen al Grupo de Riesgo II, excepto
Brucella spp y Mycobacterium tuberculosis, que se clasifican dentro del Grupo de Riesgo
III.
Además de los agentes antes mencionados, debemos referirnos a los agentes de Guerra
Biológica, los cuales han sido clasificados en tres categorías A, B y C (Agents Listing,
CDC, E.U.) atendiendo a la capacidad de diseminación o transmisión, patogenicidad,
mortalidad, entre otros aspectos. En este caso sólo haremos referencia a los agentes de
la categoría A, que constituyen los más peligrosos:
Bacillus anthracis.
Clostridium botulinum.
Yersinia pestis.
Francisella tularensis.
Variola major.
REQUISITOS GENERALES Y ESPECÍFICOS A CUMPLIR DE ACUERDO A LOS
PRINCIPIOS DE LA BIOSEGURIDAD.
Teniendo en cuenta que los microorganismos que pueden estar presentes en las
muestras, huellas y evidencias trabajadas en el laboratorio y los que pueden aparecer en
el lugar del hecho, pertenecen al Grupo de Riesgo II en su mayoría, los laboratorios de
Criminalística deben cumplir con los requisitos de un Laboratorio de Nivel de
Bioseguridad II.
MEDIDAS DE BIOSEGURIDAD PARA LOS LABORATORIOS DE CRIMINALÍSTICA.
1. Definir como la zona de mayor riesgo de contaminación el Área de Descripción de
las muestras, huellas y evidencias. En este sentido todas las Secciones y
Laboratorios tienen que tener un local destinado para ello, el cual debe ser
señalizado como Área de Riesgo Biológico.
2. El trabajo con las muestras, huellas y evidencias, se realizará únicamente en esta
área y en ningún momento podrán ser trasladadas a otras áreas de la Sección.
3. Los J’ de Secciones y Laboratorios así como los Activistas de Bioseguridad en cada
una de estas Áreas, serán los responsables del cumplimiento de las medidas
establecidas y rendirán cuenta mensualmente a la Comisión de Bioseguridad de la
División de Criminalística.
89
4. No se permitirá la presencia de animales o plantas dentro de los locales de riesgo
que no tengan ningún vínculo con los trabajos que se realizan.
5. Durante el trabajo tiene que mantenerse cerrada la puerta del laboratorio.
6. Sólo tendrá acceso a las áreas de trabajo el personal que labora en las mismas, al
cual se le informará de los posibles riesgos.
7. No se permite la entrada de niños al laboratorio.
8. No se permitirá a las mujeres embarazadas trabajar con agentes biológicos y
químicos que puedan causarle riesgos al feto.
9. Para el trabajo de laboratorio es imprescindible el uso de las batas sanitarias, por lo
que para el resto de las actividades se vestirá el uniforme.
10. Utilizar guantes en todos los trabajos que entrañen contacto con sangre o material
potencialmente infeccioso.
11. El trabajo en el lugar del suceso, se llevará a cabo con la vestimenta adecuada
(trajes de protección, espejuelos, zapatillas, nasobuco y guantes quirúrgicos) en
caso que se requiera. En el resto de los casos se usarán las batas sanitarias y los
guantes.
12. Queda prohibido ir a almorzar al comedor con la ropa de laboratorio.
13. Dentro del área del laboratorio, se prohíbe fumar, beber, ingerir o guardar
alimentos o aplicar cosméticos, ni llevarse las manos a la boca, cara, oídos y ojos.
14. No se permitirá pipetear con la boca.
15. Lavarse las manos y aplicación de antisépticos cada vez que vaya a salir del
laboratorio y después de haber manipulado material infeccioso.
16. Todos los accidentes de trabajo, serán comunicados inmediatamente al Jefe de
laboratorio y al Responsable por la seguridad biológica.
17. Los medios y reactivos necesarios serán solicitados en el pedido mensual.
18. Las muestras, huellas y evidencias ocupadas en el lugar del hecho y a las víctimas
y/o sospechosos, serán embaladas correctamente. Las huellas y evidencias que se
encuentren húmedas se pondrán a secar a temperatura ambiente y luego se
embalarán.
19. En el caso de muestras, huellas y evidencias con alto riesgo de contaminación se
embalarán en dobles contenedores (nylon) y se rotularán como material de alto
riesgo (enfermedades tales como SIDA, Hepatitis, Sífilis, Gonorrea, etc.).
20. Las muestras de sangre se rotularán al igual que las huellas y evidencias indicando
en el rótulo si el donante es portador de alguna enfermedad y se embalarán en
sobres de papel o nylon.
21. Las muestras, huellas y evidencias se examinarán sobre las mesas o mesetas de
trabajo.
22. El personal de la OCDP, exigirá a los instructores que las muestras y muestras,
huellas y evidencias se reciban correctamente embaladas y en buen estado de
conservación (secas a Temperatura Ambiente).
23. Una vez terminada la descripción y trabajo con las muestras, huellas y evidencias,
se procederá a limpiar el instrumental utilizado (tijeras, pinzas, etc.) con Etanol al 70
%.
24. Se mantendrán sobre la mesa de trabajo frascos con Etanol al 70 %, en el que se
verterán las puntas plásticas y tubos Eppendorff utilizados.
25. Otros materiales como placas de porcelana, portaobjetos, tubos, etc., se verterán
sobre un recipiente, que se colocará en el área del fregadero del local de
Descripción de las muestras, huellas y evidencias y al final de la jornada de trabajo,
se llevarán para el local de fregado.
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26. En todos los casos los materiales deben permanecer 24 horas en Etanol al 70 %,
antes de proceder a su fregado.
27. Las superficies de trabajo se descontaminarán al menos una vez al día y en todos
los casos de derramamiento de material infeccioso.
28. Preparar un sobre de nailon o caja, donde se viertan los materiales biológicos de
desecho. Estos materiales serán incinerados y nunca se verterán en los cestos de
basura normales.
29. La cra. Auxiliar de Laboratorio procederá al fregado de los materiales con guantes
de goma.
30. Los desechos líquidos serán tratados en la autoclave antes de ser depuestos.
31. Mantener limpios los locales de trabajo, retirando de estos todo objeto y/o material
que no tengan relación con la investigación.
32. Se establecerá un programa de lucha contra insectos y roedores.
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