Caldo de Enriquecimiento para Listeria

CALDO DE ENRIQUECIMIENTO PARA LISTERIA
LISTERIA ENRICHMENT BROTH (7398)
Propósito de Uso
El Caldo de Enriquecimiento para Listeria es utilizado para el enriquecimiento selectivo de Listeria spp.
Resumen y Explicación del Producto
La Listeria monocytogenes, descrita por primera vez en 1926 por Murray, Webb y Swann,1 está considerada
como un problema extenso que afecta la salud pública y a la industria alimentaria. Este organismo posee la
habilidad de causar enfermedades en humanos e inclusive la muerte, particularmente en personas con
sistema inmunológico comprometido y mujeres embarazadas.2 La evidencia epidemiológica obtenida luego
de brotes de listeriosis han indicado que la principal ruta transmisión es a través del consumo de alimentos
contaminados con Listeria monocytogenes.3 Los vehículos de transmisión incluyen salchicha de pavo4,
ensalada de repollo picado, leche pasteurizada, queso tipo mexicano y el paté. Las Listeria spp. son de
naturaleza ubicua, se encuentran presentes en una amplia variedad de alimentos no procesados, en el
suelo, aguas residuales, aguas de alcantarillado y en aguas de río.5
El Caldo de Enriquecimiento de Listeria está basado en la fórmula desarrollada por Lovett et al.6 en la cual
El Caldo de Soja Tríptico es suplementado con Extracto de Levadura para un crecimiento óptimo. Las
Listeria spp. crecen en un rango de pH entre 5,0–9,6 y puede sobrevivir en productos alimenticios con
niveles de pH por fuera de este rango.7 Las especies de Listeria spp. son microaerófilas, Gram-positivas, no
formadoras de esporas, no-encapsuladas, no ramificadas con flagelos cortos y móviles. La motilidad es
pronunciada a 20°C. La identificación de Listeria en el aislamiento exitoso del organismo, su caracterización
bioquímica y su confirmación serológica.
Principios del Procedimiento
El Digerido Enzimático de Caseína, Digerido Enzimático de Harina de Soja y el Extracto de Levadura
suministran nitrógeno, vitaminas y minerales en el Caldo de Enriquecimiento para Listeria. La Dextrosa es
una fuente de carbohidratos. El Cloruro de Sodio mantiene el balance osmótico del medio de cultivo. El
Fosfato Dipotásico es el agente de tamponado. El Ácido Nalidíxico inhibe el crecimiento de organismos
Gram-negativos. La Acriflavina inhibe las bacterias Gram-positivas. La Cycloheximida es usada para inhibir
el crecimiento de hongos saprofitos.
Fórmula / Litro
Digerido Enzimático de Caseína............................................. 17 g
Digerido Enzimático de Harina de Soja .................................... 3 g
Extracto de Levadura ................................................................ 6 g
Dextrosa................................................................................. 2,5 g
Cloruro de Sodio ...................................................................... 5 g
Fosfato Dipotásico ................................................................. 2,5 g
Ciclohexamida ..................................................................... 0,05 g
Acriflavina .......................................................................... 0,015 g
Ácido Nalidíxico ................................................................... 0,04 g
pH Final: 7,3 ± 0,2 at 25°C
La fórmula puede ser ajustada y/o suplementada de acuerdo a los requerimientos para cumplir con las especificaciones de
rendimiento o desempeño.
Precauciones
1. Para uso en el laboratorio.
2. TÓXICO. Tóxico si es ingerido, inhalado o absorbido a través de la piel. Irritante para los ojos, piel y
sistema respiratorio. Posibles riesgos de daños en el feto. Posible carcinógeno.
Procedimiento
1. Disuelva 36,1 g del medio en un litro de agua purificada.
2. Mezcle completamente.
3. Autoclave a 121°C durante 15 minutos.
PI 7398 Rev 4 diciembre 2015
Especificaciones de Control de Calidad
Apariencia del Deshidratado: Polvo suelto homogéneo, de color beige claro.
Apariencia del Preparado: El medio preparado es transparente a ligeramente nublado, de color dorado a
naranja-ámbar con la parte superior de color verde opalescente, y posiblemente con un precipitado ligero.
Respuesta Esperada del Cultivo: Respuesta esperada en Caldo de Enriquecimiento para Listeria incubado
aeróbicamente a 30± 2°C y examinado para determinar crecimiento después de 18–48 horas de incubación.
Microorganismo
Escherichia coli ATCC 25922
Listeria monocytogenes ATCC 7644
Listeria monocytogenes ATCC 15313
Staphylococcus aureus ATCC 25923
Inóculo Aproximado
(UFC)
1000
10 – 300
10 – 300
10 – 300
Resultado
Inhibido
Buen crecimiento
Buen crecimiento
Crecimiento suprimido a las 24 horas;
Ninguno a justo crecimiento a las 48
horas
Los organismos listados son los mínimos que deben ser evaluados para propósitos de análisis y pruebas de control de calidad.
Procedimiento de la Prueba
Para aislamientos de Listeria, refiérase a los procedimientos de laboratorio adecuados recomendados para
muestras alimentarias.
Resultados
Consulte las referencias y procedimientos adecuados para obtener resultados confiables.
Almacenamiento
Almacene el envase conteniendo el medio de cultivo deshidratado sellado firmemente y a una temperatura
entre 2–30°C. Una vez abierto y cerrado nuevamente, coloque el envase en un ambiente con baja humedad
a la misma temperatura de almacenamiento. Proteja el producto de los efectos de la humedad y de la luz
manteniendo el envase firmemente cerrado.
Expiración
Referirse a la fecha de expiración estampada en el envase. El medio de cultivo deshidratado debe ser
desechado si no fluye libremente, o si su apariencia ha cambiado a partir del color original. La expiración
aplica para el medio de cultivo que haya sido almacenado en su recipiente intacto, original y bajo las
condiciones indicadas.
Limitaciones del Procedimiento
1. Debido a variaciones nutricionales algunas cepas pueden tener un pobre crecimiento o presentar
ausencia de crecimiento en este medio.
2. Listeria spp., que no sea Listeria monocytogenes, pueden crecer en medios de aislamiento. La
identificación de Listeria monocytogenes debe ser confirmada a través de análisis bioquímicos y pruebas
serológicas.8
PI 7398 Rev 4 diciembre 2015
Empaque
Caldo de Enriquecimiento para Listeria –
Listeria Enrichment Broth
Código No.
7398A 500 g
7398B 2 kg
7398C 10 kg
Referencias
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
Murray, E. G. D., R. A. Webb, and M. B. R. Swann. 1926. A disease of rabbits characterized by large mononuclear leucocytosis
caused by ahitherto undescribed bacillus Bacterium monocytogenes. J. Path. Bact. 29:407-439.
Monk, J. D., R. S. Clavero, L. R. Beuchat, M. P. Doyle, and R. E. Brackett. 1994. Irradiation inactivation of Listeria
monocytogenes and Staphylococcus aureus in low and high fat, frozen refrigerated ground beef. J. Food Prot. 57:969-974.
Bremer, P. J., and C. M. Osborne. 1995. Thermal-death times of Listeria monocytogenes in green shell mussels prepared for hot
smoking. J. Food Prot. 58:604-608.
Grau, F. H., and P. B. Vanderlinde. 1992. Occurrence, numbers, and growth of Listeria monocytogenes on some vacuumpackaged processed meats. J. Food Prot. 55:4-7.
Patel, J. R., C. A. Hwang, L. R. Beuchat, M. P. Doyle, and R. E. Brackett. 1995. Comparison of oxygen scavengers for their
ability to enhance resuscitation of heat-injured Listeria monocytogenes. J. Food Prot. 58:244-250.
Lovette, J., D. W. Frances, and J. M. Hunt. 1987. Listeria monocytogenes In raw milk: detection, incidence and pathogenicity. J.
Food Prot. 50:188-192.
Vanderzant, C., and D. F. Splittstoesser (eds.). 1992. Compendium of methods for the microbiological examination of foods, 3rd
ed. American Public Health Association, Washington, D.C.
Murray, P. R., E. J. Baron, M. A. Pfaller, F. C. Tenover, and R. H. Yolken (eds.). 1995. Manual of clinical microbiology, 6th ed.
American Society for Microbiology, Washington, D.C.
Información Técnica
Para preguntas relacionadas con la preparación o el rendimiento de los medios de cultivo deshidratados o para contactar al
Departamento de Servicios Técnicos, comuníquese con Acumedia Manufacturers, Inc. al teléfono (517) 372-9200 o al fax (517) 3722006.
PI 7398 Rev 4 diciembre 2015