AGAR DE SOJA TRÍPTICO – TRYPTIC SOY AGAR (7100) Propósito de Uso El Agar de Soja Tríptico (TSA, Tryptic Soy Agar) es usado para el cultivo de una amplia variedad de microorganismos. El Agar de Soja Tríptico está conforme a los Requerimientos Armonizados de las Farmacopeas USP/EP/JP.1,2,3 Resumen y Explicación del Producto En 1955, Leavitt et al.4 descubrieron que el Agar de Soja Tríptico (Tryptic Soy Agar, TSA, por sus siglas en inglés) facilitaba el crecimiento vigoroso de microorganismos aerobios y anaerobios. El Agar de Soja Tríptico (TSA) es un medio para propósitos generales, comúnmente conocido como Agar de Digerido de Caseína de Soja USP (Soybean-Casein Digest Agar USP 23). El Agar de Soja Tríptico es una base nutritiva, al cual se le puede adicionar una variedad de suplementos para mejorarlo. La adición de un 5% de sangre estéril, desfibrinada de oveja, caballo o conejo proporciona un excelente medio no-selectivo, usado para determinar reacciones hemolíticas de las bacterias. El TSA suplementado con lecitina y Tween 80® es usado ampliamente en monitoreos ambientales.5 El TSA está recomendado para múltiples aplicaciones de aguas y aguas residuales,6 y numerosos métodos estándar para análisis de alimentos.7 Este medio cumple con los Requerimientos Armonizados de la Farmacopea de los Estados Unidos (United States Pharmacopoeia, USP), Farmacopea Europea (European Pharmacopoeia, EP) y la Farmacopea Japonesa (Japanese Pharmacopoeia, JP).1,2,3 Clínicamente, el TSA es utilizado en la diferenciación de las especies de Haemophilus (Los factores X y V son omitidos en este medio), empleado ampliamente para cultivos de sangre. El TSA es comúnmente utilizado como medio de mantenimiento para colecciones de cultivo y pruebas de contaminantes bacterianos en cosméticos.8 Principios del Procedimiento El Digerido Enzimático de Caseína y el Digerido Enzimático de Harina de Soja suministran nitrógeno, vitaminas y carbono en el TSA. El Cloruro de Sodio mantiene el balance osmótico del medio de cultivo. El Agar es el agente solidificante. Fórmula / Litro Digerido Enzimático de Caseína............................................. 15 g Digerido Enzimático de Harina de Soja .................................... 5 g Cloruro de Sodio ....................................................................... 5 g Agar ........................................................................................ 15 g pH Final 7,3 ± 0.2 a 25°C La fórmula puede ser ajustada y/o suplementada de acuerdo a los requerimientos para cumplir con las especificaciones de rendimiento o desempeño. Precauciones 1. Para uso en el laboratorio. 2. IRRITANTE. Irritante para los ojos, piel y sistema respiratorio. Procedimiento 1. Suspenda 40 g del medio en un litro de agua purificada. 2. Caliente manteniendo una agitación frecuente y permita que hierva por un minuto para disolver completamente el medio. 3. Autoclave a 121°C durante 15 minutos. 4. Opcional: Prepare 5 a 10% de Agar Sangre (blood agar), adicionando el volumen adecuado de sangre estéril desfibrinada al medio de agar estéril derretido, enfriado a 45–50°C. PI 7100, Rev 06 diciembre 2015 Especificaciones de Control de Calidad Apariencia del Deshidratado: Polvo suelto, homogéneo, color beige claro. Apariencia del Preparado: Si el medio es preparado sin enriquecimiento presenta una apariencia de trazas a levemente nublado y de color amarillo beige. Si es preparado en un medio con 5% de sangre de oveja el color es rojo y opaco. Respuesta Esperada del Cultivo y Pruebas Promotoras de Crecimiento de la USP/EP/JP: La respuesta esperada en el cultivo usando TSA a las temperaturas y durante los tiempos de incubación especificados de acuerdo a las Farmacopeas USP/EP/JP.1,2,3 Microorganismo Aspergillis niger ATCC 16404 Bacillus subtilis ATCC 6633 Candida albicans 10231 Pseudomonas aeruginosa ATCC® 9027 Staphylococcus aureus ATCC ® 6538 Inóculo Aproximado (UFC) 10 – 100 10 – 100 10 – 100 10 – 100 10 – 100 Resultados Esperados Crecimiento Crecimiento Crecimiento Crecimiento Crecimiento Crecimiento El Agar de Soja Tríptico fue preparado de acuerdo con las instrucciones descritas en la etiqueta con un 5% de sangre de oveja (sheep blood) e inoculado. Los cultivos fueron incubados a 30–35°C bajo una atmósfera adecuada y examinado para determinar crecimiento a las 18–24 horas. Microorganismo Inóculo Aproximado (UFC) Escherichia coli ATCC® 25922 10 - 100 Staphylococcus aureus ATCC® 25923 10 - 100 Streptococcus pneumoniae ATCC® 6305 10 - 100 10 - 100 Streptococcus pyogenes ATCC 19615 Resultados Esperados Crecimiento Hemólisis Bueno a excelente Beta hemólisis Bueno a excelente Beta hemólisis Regular a excelente Alfa hemólisis Regular a excelente Beta hemólisis Los organismos listados son los mínimos que deben ser evaluados para propósitos de análisis y pruebas de control de calidad. Procedimiento de la Prueba Consulte las referencias adecuadas para los procedimientos específicos al utilizar el Agar de Soja Tríptica.1,2,4-7 Resultados Consulte las referencias y procedimientos adecuados para obtener resultados confiables. Almacenamiento Almacene el envase conteniendo el medio de cultivo deshidratado sellado firmemente y a una temperatura entre 2–30°C. Una vez abierto y cerrado nuevamente, coloque el envase en un ambiente con baja humedad a la misma temperatura de almacenamiento. Proteja el producto de los efectos de la humedad y de la luz manteniendo el envase firmemente cerrado. Expiración Referirse a la fecha de expiración estampada en el envase. El medio de cultivo deshidratado debe ser desechado si no fluye libremente, o si su apariencia ha cambiado a partir del color original. La expiración aplica para el medio de cultivo que haya sido almacenado en su recipiente intacto, original y bajo las condiciones indicadas. PI 7100, Rev 06 diciembre 2015 Limitaciones del Procedimiento Debido a variaciones nutricionales algunas cepas pueden tener un pobre crecimiento o ausencia de crecimiento en este medio. Empaque Agar de Soja Tríptico – Tryptic Soy Agar Código No. 7100A 7100B 7100C 500 g 2 kg 10 kg Referencias 1. United States Pharmacopeial Convention. 2007. The United States pharmacopeia, 31st ed., Amended Chapters 61, 62, 111. The United States Pharmacopeial Convention, Rockville, MD. 2. Directorate for the Quality of Medicines of the Council of Europe (EDQM). 2007. The European Pharmacopoeia, Amended Chapters 2.6.12, 2.6.13, 5.1.4, Council of Europe, 67075 Strasbourg Cedex, France. 3. Japanese Pharmacopoeia. 2007. Society of Japanese Pharmacopoeia. Amended Chapters 35.1, 35.2, 7. The Minister of Health, Labor, and Welfare. 4. Leavitt, J. M., I. J. Naidorf and P. Shugaevsky. 1955. The undetected anaerobe in endodontics: a sensitive medium for detection of both aerobes and anaerobes. The NY J. Dentist. 25:377-382. 5. Orth, D. S. 1993. Handbook of cosmetic microbiology. Marcel Dekker, Inc., New York, NY. 6. Greenberg, A. E., L. S. Clesceri, and A. D. Eaton (eds.). 1995. Standard methods for the examination of water and wastewater, 19th ed. American Public Health Association, Washington, D.C. 7. U.S. Food and Drug Administration. Bacteriological analytical manual, 8th ed., AOAC International, Gaithersburg, MD. 8. Curry, A. S., G. G. Joyce, and G. N. McEwen, Jr. 1993. CTFA Microbiology guidelines. The Cosmetic, Toiletry, and Fragrance Association, Inc. Washington, D.C Información Técnica Para preguntas relacionadas con la preparación o el rendimiento de los medios de cultivo deshidratados o para contactar al Departamento de Servicios Técnicos, comuníquese con Acumedia Manufacturers, Inc. al teléfono (517) 372-9200 o al fax (517) 3722006. PI 7100, Rev 06 diciembre 2015
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