Revista NOOS Volumen 7 (2015) Pág. 44 – 54 Derechos Reservados Facultad de Ciencias Exactas Y Naturales Radiaciones ionizantes en tejido biológico: Caso particular la radioterapia. Ionizing radiation in biological tissue: Special case Radiotherapy Nicolás David Duarte Benavides Departamento de Física y Química, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad Nacional de Colombia, Manizales, Colombia. ABSTRACT: Ionizing radiation has been much debate globally as to whether their application in biological tissue is an advantage or could bring irreparable consequences, in this article the topic of ionizing radiation will be studied in the clinical setting by analyzing the particular case of use in a disease called cancer, through a technique such as radiotherapy. The effect that happens in cells that are Article Info Article history: Received: 1 de Abril 2015 Received in revised: 4 de Marzo 2015 Accepted: 12 de Marzo de 2015 Available online: 16 Octubre de 2015 KEYWORDS: Ionizing radiation, Radioprotection, biological tissue radiotherapy generated by the radiation - matter interaction, in addition to this, also is analyzed the physical, chemical and biological phenomena’s that happens when using ionizing radiation in biological tissue and finally mention some measures will be analyzed like industrial safety adopted by the responsible to clinician applying to ionizing radiation; otherwise to measures. say it is radioprotection RESUMEN: Las radiaciones ionizantes han tenido mucha controversia a nivel mundial con respecto a si su aplicación en tejido biológico es una ventaja o podría traer consecuencias irremediables, en este trabajo se abordara el tema de las radiaciones ionizantes en el ámbito clínico analizando el caso particular de su utilidad en una enfermedad llamada cáncer; a través de una técnica conocida como la radioterapia. Se analizara el efecto que se presenta en las células que es generado por la interacción radiación-materia, adicional a esto se expondrán los fenómenos físicos, químicos y biológicos que se presentan al usar las radiaciones ionizantes en el tejido biológico y por último se mencionaran ciertas medidas de seguridad industrial adoptadas por el personal clínico responsable de aplicar las radiaciones ionizantes; dicho de otra manera medidas de radio protección. PALABRAS CLAVE: Radiaciones ionizantes, Radioterapia, Radio protección, tejido biológico. Revista NOOS, Vol. 7, No. 1, Abril de 2015. Universidad Nacional de Colombia Sede Manizales. ISSN 2346-2779 Revista NOOS Edición 1 (2015) Pág. 45 1. Introducción El estudio de las radiaciones ionizantes inicio a partir del descubrimiento de la radioactividad, en 1895 Wilhelm Rontgen realizo el experimento de rayos catódicos en cual se descubrió la presencia de los rayos x al indicar altos voltajes a un tubo de vacío o tubo de crookes (el nombre se debe a que el científico William Crookes ya había estudiado el fenómeno con anterioridad), este tubo está conectado a dos electrodos denominados Fig. 1 Imagen ilustrativa de Henri Becquerel cátodo y ánodo, se observó investigando las radiaciones emitidas por el que se emitían rayos que podían impregnarse en metales y uranio observar los huesos humanos en dichas placas, a estos rayos debido a la extrañes que se presentó en esa época se les La radiación es una denomino rayos X. En 1896 Henri 2. ¿Que son las radiaciones ionizantes? Becquerel estudio las manifestación de la propagación energética ; esta propagación radiaciones emitidas por el uranio las cuales de se impregnaban en placas fotográficas; en electrones de los átomos a los cuales se 1898 Pierre y Marie Curie con base en los hace incidir dicha radiación; esto quiere decir experimentos anteriormente que la radiación se propaga y al toparse con emitidas un medio interacciona con estudiaron las mencionados radiaciones por energía genera excitación en los sus electrones, diferentes elementos químicos, a partir de en algunos casos esta radiación es tan ello descubrieron dos elementos químicos a intensa que se puede generar la expulsión de los cuales denominaron radio y polonio. electrones Un científico reconocido de esta misma ionización y debido a que esta ionización es época llamado Nikola Tesla estudio estas producida por radiación entonces se le da el radiaciones emitidas con el fin de alertar a la nombre de radiaciones ionizantes, el caso sociedad del riesgo biológico que se presenta contrario son las radiaciones no ionizantes en al trabajar con estas radiaciones, debido a los cuales la interacción no es suficiente para esto y a partir de investigaciones posteriores generar desprendimiento de electrones. se creó en 1928 la comisión internacional de (H Uribe 2007). a lo cual se le denomina radioprotección con el fin de usar estas radiaciones de manera controlada para el beneficio de la humanidad y evitando al máximo el riesgo biológico de las mismas. Revista NOOS, Vol. 7, No. 1, Abril de 2015. Universidad Nacional de Colombia Sede Manizales. ISSN 2346-2779 Revista NOOS Edición 1 (2015) Pág. 46 persona fume cigarrillo en cantidad excesiva ,esto solo son algunos ejemplos de ello. Las alteraciones genéticas surgen en el DNA (acido desoxirribonucleico) de una célula somática de la persona afectada, a causa de ello las células se multiplican afectando los tejidos sanos tumores también, malignos y que produciendo pueden causar ´´metástasis´´ es decir las células malignas Fig. 2 Imagen ilustrativa de la radiación se deprenden de su sitio original, ingresan a ionizante la circulación sanguínea y generan tumores secundarios, dicho en otras palabras el Las fuentes de radiación ionizante se pueden cáncer se expande por todo el cuerpo. encontrar de manera natural en los rayos Las células cancerígenas comparten ciertas cósmicos y propiedades que afectan a cualquier tejido penetran en la tierra, existen otros tipos de vivo, la primera de ellas es la pérdida de fuentes naturales que se encuentran en control de crecimiento(es decir crecimiento minerales como las rocas ígneas como por descontrolado), las células de tejido no ejemplo el 232( que proviene del uranio-238 ( , el potasio-40 ( universo ), el torio, entre otros. cancerígeno al ser investigadas laboratorios crecen en cultivo en debido a la A estos elementos químicos se les denomina insulina y factores epidérmicos que están isotopos radiactivos debido a el mismo presentes en una fracción de la sangre elemento químico puede tener denominada diferentes suero, pero las células diferente cancerígenas pueden crecer en ausencia de en su núcleo, el suero, otra propiedad importante son las ejemplo más común usado a nivel industrial alteraciones en el núcleo celular ya que las es el uranio él se puede encontrar en la células configuraciones en número de neutrones naturaleza como ( cuanto )o( a contienen complementos cromosómicos anormales es ). decir no mantienen cromosómico 3. Cáncer y Radioterapia: El cáncer es una enfermedad genética porque puede rastrearse dentro de genes específicos, a pesar de ello en muchos de sus casos se presenta por factores externos como por ejemplo que la persona se exponga al sol sin el uso de protector solar cancerígenas , que la diploide el que complemento regula su crecimiento, esto conduce a concluir que la principal diferencia de células cancerígenas y normales(no cancerígenas) radica en que las primeras presentan un comportamiento de crecimiento y reproducción descontrolado. (G.Karp. 2009) Revista NOOS, Vol. 7, No. 1, Abril de 2015. Universidad Nacional de Colombia Sede Manizales. ISSN 2346-2779 Revista NOOS Edición 1 (2015) Pág. 47 3.1 Radioterapia La radioterapia es una técnica convencional 4. en biológicos de las radiaciones ionizantes la cual se irradian las células Factores Físicos, Químicos y cancerígenas con radiaciones ionizantes, Las radiaciones ionizantes tienen efectos en buscando con esto la destrucción celular de tres áreas de la ciencia importantes células cancerígenas y la reducción de los tumores malignos; la radioterapia destruye el 4.1 Factores físicos: material genético de las células cancerígenas Uno de los factores físicos de mayor evitando que crezcan, se dividan y se incidencia en este tipo de radiaciones es la multipliquen en el cuerpo. La radioterapia se transferencia lineal de energía (LET) con la dividen La cual es posible determinar la cantidad de radioterapia externa o Teleterapia donde un energía radiada que atraviesa un medio; una acelerador de partículas (Linac) irradia la definición más apropiada para este fenómeno zona afectada con partículas como es el caso es la energía transferida por unidad de de los electrones o emite fotones es decir longitud. radiación electromagnética y la radioterapia El LET se divide en dos clases dependiendo interna o Braquiterapia en la cuales la de su radiación que son: el haz de radiación radiación se inyecta a través de unos alta LET en el cual se hace incidir radiación pequeños tubos o cavidades que irradian la de partículas alfa en un medio , la energía se zona afectada de manera más concentrada y deposita rápidamente en regiones pequeñas esta última técnica tiene gran utilidad para el lo que hace que no atraviese grosores cáncer de seno , estas dos técnicas son grandes, la segunda clase que es el haz de usadas el radiación baja LET en la que la energía se tratamiento de tumores malignos y el uso de deposita lentamente por esto la radiación que la una o la otra depende del volumen del presenta el medio no es alta , pero puede tumor , el sitio del atravesar en en dos el clases ámbito que son: clínico para cuerpo donde se grosores más grandes en encuentre e tumor , entre otros factores. comparación con la radiación alta LET, en Debido a los avances tecnológicos como el este tipo de radiación se emiten fotones es TAC (tomografía axial computarizada), el decir radiación electromagnética o radiación PET (tomografía por emisión de positrones) gamma. se puede obtener imágenes muy precisas de cuerpo humano, generando con esto un proceso de radioterapia simulación y que hace previa que a la este procedimiento sea más seguro y se irradie dentro de lo posible solo las zonas afectadas. Revista NOOS, Vol. 7, No 1, Abril de 2015. Universidad Nacional de Colombia Sede Manizales. ISSN 2346-2779 Revista NOOS Edición 1 (2015) Pág. 48 4.3 Factores Biológicos: Los principales efectos generados a través de el uso de radiaciones ionizantes son los biológicos ya que se irradia directamente a la célula lo cual tiene consecuencias en algunos casos irreversibles por ello es necesario toda un área del conocimiento que estudiara estos fenómenos, por tal razón surgió la Fig. 3 Imagen ilustrativa de LET para Radiobiología que es la ciencia que estudia diferentes partículas y fotones (Gama). los fenómenos debidos al uso de radiaciones ionizantes en seres vivos. 4.2 Factores Químicos: Dentro de los factores La radiación ionizante incide directamente químicos a la el núcleo celular exposición de las radiaciones ionizantes, uno diferentes efectos en de los más relevantes es la privación o desoxirribonucleico).El ADN es una molécula carencia de oxigeno que presenta la persona con una doble cadena en forma de hélice que con un tumor cancerígeno , esto dicho en contiene términos clínicos se denomina hipoxia , la vía monosacárido(estructura más simple de los de señalización azucares) que regula la relación sobre en su llamado ocasionando el ADN(ácido estructura desoxirribosa, un grupos oxigeno- respuesta en el ciclo celular (HIF) fosfato y cuatro bases nitrogenadas llamadas inhibe un gran número de genes que citosina, controlan funciones celulares tales como la organizado angiogénesis(formación vasos cromosomas que contienen la información sanguíneos a partir de vasos ya pre- genética de los seres vivos, el uso de existentes) , metástasis donde el tumor radiaciones en la estructura del ADN puede principal se fracciona el tumores de menor causar escisiones en su cadena es decir tamaño pero letales y apoptosis ( tiempo de daños o rupturas de la misma , entre supervivencia celular), para este último caso cruzamientos entre se realiza un modelo computacional en el perdida de bases nitrogenadas, de adenina,timina,guanina;está en estructuras cadenas llamadas de ADN o cual se grafica la supervivencia celular que presenta una fracción de la misma célula con los dos primeros daños respecto a la reversibles en los cuales el mecanismo SOS dosis absorbida.(C.Brahimi- son procesos Horn .J Pouysségur 2006) del ADN identifica el daño presentado y se Sin embargo de esto se hablara con mayor genera un ciclo celular para su reparación; detenimiento en los factores biológicos en el sin embargo el ultimo daño es decir la uso de radiaciones ionizantes. perdida de bases nitrogenadas, para este no Revista NOOS, Vol. 7, No. 1, Abril de 2015. Universidad Nacional de Colombia Sede Manizales. ISSN 2346-2779 Revista NOOS Edición 1 (2015) Pág. 49 es tan sencilla su reparación por ello se en su capa de valencia) que son OH y el H pueden presentar mutaciones genéticas a para este caso, después de la formación de nivel molecular . radicales Dentro del tipo de rupturas que puede causar descomposición molecular del H2O causando el uso de radiaciones ionizantes en la cadena con ello un fenómeno muy similar a cuando de ADN se distinguen dos principales que la radiación incide directamente en el núcleo son una ruptura sencilla o una ruptura doble, celular.(M Plazas 2013) a continuación se evidenciara una imagen Para cualquiera de los dos casos el uso de ilustrativa: radiaciones libres se presenta ionizantes en una células cancerígenas tiene dos fines, el primero es la muerte reproductiva celular es decir evitar que las células infectadas con cáncer se reproduzcan, el segundo fin es causar el retraso mitótico, es decir al aplicar la radiación si las dosis aplicada no es lo suficientemente alta las células que se encontraban en proceso de mitosis se recuperan e inician de nuevo el proceso de división celular pero con el tejido sano. Fig. 4 Rupturas de la cadena de ADN Tomado de radiaciones Efectos biológicos de las ionizantes. M Plazas (2013).Universidad Nacional de Colombia – Radiobiología estudia también la supervivencia celular al irradiar las células con radiaciones ionizantes, a continuación se mostrara una gráfica de ello: sede Bogotá Para el primer caso con la ruptura de la primera cadena el proceso puede ser reversible pero la ruptura de las dos cadenas es un proceso más complejo y lo más probable para este caso es que cause muerte celular. Otra manera en la cual la radiación ionizante puede afectar a la célula es a través de un proceso llamado Radiolisis en el cual la radiación no influye directamente en el núcleo celular, lo que sucede es que la radiación incide sobre el H2O de la célula obteniendo con esto dos radicales libre(moléculas con un electrón no apareado Fig. 5 Surviving Fraction vs Radiation Dose Tomado de “Estudio in vitro de la supervivencia en células tumorales irradiadas con un acelerador lineal de uso clínico” P Revista NOOS, Vol. 7, No. 1, Abril de 2015. Universidad Nacional de Colombia Sede Manizales. ISSN 2346-2779 Revista NOOS Edición 1 (2015) Pág. 50 .Quintero, tesis maestría Física médica. actualmente se han implementado como Universidad estudio en ratones y también en tumores Nacional de Colombia-sede Bogotá .pág. 36 cerebrales en niños con el objetivo de algún día implementar la técnica en el ámbito Es posible observar que cuando la dosis de clínico. (P. Symonds, D. Jones .2013). radiación aumenta, la supervivencia celular disminuye a tal punto de hacer cero es decir Por otra parte la utilización de radiofármacos cuando se genera muerte celular. en el tratamiento del cáncer ha tomado gran fuerza en la última década, tumores malignos 5. Avances clínicos en la radiobiología como los linfomas se tratan con esta técnica A medida que se ha implementado la en la que se inyecta vía intravenosa o se radioterapia en el ámbito clínico se ha tenido ingiere vía oral algún isotopo radiactivo como objetivo reducir el riesgo biológico e según sea el caso y la radiación del isotopo irradiar solo las zonas afectadas por células irradia el tumor o los tumores que presente el cancerígenas, técnicas como la radioterapia cuerpo, el gran problema que presenta esta de intensidad modulada(IMRT), radioterapia técnica es que como se inyecta a la sangre , guidada por imágenes(IGRT) reducen la el isotopo radiactivo se dispersa por todo el posibilidad de daño del tejido sano y cuerpo irradiando también las zonas de tejido aumentan la probabilidad de localización de no cancerígeno y para evitar este problema la zona afectada, adicional a esto se le suministra al paciente bajas dosis del con la IGRT es posible conocer el volumen de la isotopo. zona a irradiar disminuyendo con esto la La radiobiología es una ciencia en la cual posibilidad de irradiar tejido sano. queda mucho por investigar, es indudable La presencia de óxido nítrico en las células reconocer el profundo avance que ha tenido irradiadas en condiciones de hipoxia conduce desde el desarrollo de el primer acelerador al rompimiento de la cadena sencilla y la lineal en 1953 y la implementación clínica de cadena doble del ADN lo cual puede causar la radioterapia conformada en 3D en 1980, a la muerte celular por eso investigaciones pesar de ello es una campo de estudio actuales evalúan la posibilidad de controlar abierto este fenómeno. Existen investigaciones en nanotecnología se auguran técnicas más radiobiología como la realizada por el especializadas, más exactas que reducirán el científico Ann Coulter en la que se irradian riesgo biológico que se genera con el uso de rayos X o fotones a los que se les adiciona las radiaciones ionizantes y con el nuevo auge de la nano partículas de oro o gadolinio las cuales favorecen el tratamiento clínico de los 6. Radioprotección tratamientos cancerígenos, en especial para Debido al peligro evidente que generan las los tumores cerebrales, por dicha razón radiaciones ionizantes, es necesario Revista NOOS, Vol. 7, No. 1, Abril de 2015. Universidad Nacional de Colombia Sede Manizales. ISSN 2346-2779 la Revista NOOS Edición 1 (2015) Pág. 51 implementación de un sistema de seguridad 6.2 Equipamiento personal: Dentro del industrial que proteja no solo a los pacientes equipamiento personal existen trajes rellenos a los que se les practica la radioterapia, sino de plomo ya sean uniformes, guantes y gafas también al personal operario expuesto es plomadas, pantallas con blindajes de plomo decir a los tecnólogos en radioterapia, para uso práctico de fuentes, se usa el plomo médicos –oncólogos, físicos médicos ya que partículas como y a las alfa, beta , todos aquellos que puedan estar expuestos gamma o la radiación electromagnética que e inclusive el personal de aseo también contiene fotones no puede sobrepasar una puede ser expuesto, por ello se hace barrera solido de plomo, otro material que necesario la implementación de manuales de también se puede utilizar es el concreto , sin protección por embargo no se usa debido a que es muy expertos no solo en el ámbito clínico sino pesado y poco práctico para el trabajador- también operario que emite la radiación ionizante. radiológica en la diseñados seguridad industrial de procesos como la radio farmacia, plantas de energía nuclear donde usan elementos radiactivos, entre otros. Las medidas de radioprotección básicas por el personal expuesto pueden ser: 6.1 Áreas de restricción: A través de este Fig. 7 Imagen ilustrativa del equipo plomado medio se restringe el paso a personal no autorizado y que no cuenta con el conocimiento ni el equipamiento adecuado a la exposición de radiaciones ionizantes 6.3 Dosímetro personal. La dosimetría es el área que estudia el cálculo de la dosis de radiación ionizante absorbida por los tejidos biológicos y la materia, por lo tanto cada trabajador debe de tener su dosímetro el cual es de uso personal, la dosis para tejido biológico se reporta en sieverts (Sv) o Greys (Gy) y la expresión matemática para la radiación absorbida es Fig. 6 Imagen de peligro radiactivo Un tipo de radiación es la radiación Se interpreta como la energía depositada en ionizantes por tanto también aplica para este una porción de masa y su unidad de medida caso es el sieverts (Sv) o Greys (Gy) tiene las Revista NOOS, Vol. 7, No. 1, Abril de 2015. Universidad Nacional de Colombia Sede Manizales. ISSN 2346-2779 Revista NOOS Edición 1 (2015) Pág. 52 dos la misma que es decir Joules por unidad de equivale a kilogramo. unidad de medida Para el caso de la dosis equivalente se tiene la expresión matemática que es calidad para la relación energética de la dosis equivalente, se mide también en (Sv) o (Gy). (J.E. Amaro 2006). obstante se han mencionado las más relevantes. 7. Manejo de las radiaciones ionizantes en el eje cafetero parámetros internacionales recomendados para el uso de radiaciones ionizantes irradiadas en piel en términos de dosis equivalentes dosis equivalente son: (mili en la ciudad de Manizales se tomara como fuente especifica la institución de la salud Oncólogos del Occidente S.A la cual tiene sedes en las ciudades de Armenia ,Pereira y Manizales, . 500mSV no Para el manejo de las radiaciones ionizantes Donde D representa la dosis y Q el factor de Los radioproteccion, Sieverts) para personal ocupacional expuesto al año y 50mSv para dicha institución usa las radiaciones ionizantes para la cura de diferentes tumores cancerígenos ; la máquina de mayor uso para ese fin es un acelerador lineal eleckta Infinity el cual suministra la radiación ionizante ya sea con un haz de electrones o con un haz de fotones. personal o público en general que no está expuesto a las radiaciones frecuentemente(M.Plazas. L ionizantes Agulles 2013).Sin embargo también se encuentran expuestos en menor medida debido a la radiación producida por los rayos cósmicos. Fig. 9 Acelerador lineal Elekta Infinity. Este se usa en el ámbito de la radioterapia Fig. 8 Imagen Ilustrativa de un dosímetro externa o telerapia; en las tres ciudades, para Los manuales de protección radiológica contienen muchos otros parámetros y otras medidas de seguridad para la el caso de la radioterapia interna o braquiterapia en la ciudad de Pereira se cuenta con un dispositivo de braquiterapia de Revista NOOS, Vol. 7, No. 1, Abril de 2015. Universidad Nacional de Colombia Sede Manizales. ISSN 2346-2779 Revista NOOS Edición 1 (2015) Pág. 53 alta tasa de dosis el cual se evidencia en la la efectividad del tratamiento clínico de las siguiente imagen. radiaciones ionizantes, en especial en zona complejas de irradiación como lo son los tumores cerebrales. - Es importe reconocer que las radiaciones ionizantes alteran de la estructura del ADN, por ello es relevante realizar un proceso de radioterapia eficaz o de lo contrario la doble cadena de ADN podría perder sus bases nitrógenos causando con esto mutaciones que puedan traer consecuencias en las futuras generaciones de la persona que fue expuesta a la radiación ionizante, la supervivencia celular al ser irradiada una Fig. 10 Braquiterapia de alta dosis célula es inversamente proporcional a la En las cavidades o agujeros que se evidencian en la figura se insertan unos tubos especiales de uso clínico los cuales finalmente se inyectan al cuerpo humano, más específicamente al tejido afectado con el tumor maligno y finalmente estos depositan dosis radiada, esto se evidencio en la Fig. 4. -El personal operario que maneja las radiaciones ionizantes debe portar un traje y diferentes elementos fabricados con plomo y un dosímetro de uso personal para evitar el riesgo biológico que producen las radiaciones ionizantes. la dosis. -Durante este trabajo se abordó el tema de También se utiliza la quimioterapia vía oral en el cual le ingiere un radiofármaco que ataca el tumor maligno, a pesar de ello esta técnica es altamente invasiva para el tejido biológico sano , por tal razón las dos tenis mencionadas anteriormente se usan con las radiaciones caso lector que investigue acerca del uso de las radiaciones ionizantes en radiodiagnóstico y medicina nuclear, es decir en la detección de enfermedades a través de equipos de alta Tomografía por emisión de Positrones (PET), entre otras. Este puede ser 7. Conclusiones: La radiobiología es un campo de estudio al mucho el particular de la radioterapia, se sugiere al Nuclear, queda en tecnología como la Resonancia Magnética mayor frecuencia . cual ionizantes por investigar, con un tema de estudio interesante para la redacción de un nuevo artículo. investigaciones actuales como la realizada 8 Agradecimientos con nano partículas de oro y las nuevas El estudiante de Ingeniería Física técnicas de radioterapia se está garantizando NicolásDavid Duarte y autor del presente artículo Revista NOOS, Vol. 7, No. 1, Abril de 2015. Universidad Nacional de Colombia Sede Manizales. ISSN 2346-2779 Revista NOOS Edición 1 (2015) Pág. 54 agradece por la aclaración de dudas y por las discusiones académicas realizadas al Msc [6] Instituto Nacional del cáncer. Radioterapia Andres Giraldo, quien labora como Físico para Medico en la institución de Oncólogos del (2008).Disponible Occidente S.A en la ciudad de Manizales. http://www.cancer.gov/espanol/recursos/hoja cáncer: preguntas y respuestas en s-informativas/tratamiento/tratamientoradioterapia. Consultado Nov 21.2014. 9. Referencias [1] M.Plazas. (2013) Efectos biológicos de [7]C. Brahimi-Horn .J Pouysségur. The role of las radiaciones ionizantes. Curso protección the hypoxia-inducible factor radiológica en aplicaciones industriales, pp. metabolism 9-20. (2006).Abstracts. Bull Cancer. (8) 73 p. growth and in tumor invasion. [2] P. Quintero (2012).Estudio in vitro de la supervivencia en células tumorales irradiadas [8] H Uribe. (2007). La física de las con un acelerador lineal de uso clínico. Tesis radiaciones y la dosimetría.Cinvestav (38), maestría pp.1-2. en Física médica. Bogotá. Universidad Nacional de Colombia, pp. 3637. [9] J.E. Amaro (2006) Dosis absorbida, Dosis [3] M.Plazas. 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