XXV Simposio Internacional de Estadística 2015 Armenia, Colombia 5, 6,7 y 8 de Agosto de 2015 EVALUACIÓN DEL ÁCIDO HIPOCLOROSO EN GEL PARA LA DESINFECCIÓN DE MANOS EVALUATION OF HYPOCHLOROUS ACID GEL FOR HAND ANTISEPTIC Beatriz Elena Guerra Sierra1a,, Adriana Sandoval1b, Liliana Torcoroma1c,Giampaolo Orlandoni Merli 1d 1 DEPARTAMENTO DE CIENCIAS EXACTAS FÍSICAS Y NATURALES. GRUPO DE INVESTIGACION EN BIOTECNOLOGIA AGROAMBIENTAL-MICROBIOTA, UNIVERSIDAD DE SANTANDER UDES. RESUMEN El contacto directo con las manos es el principal foco de trasmisión de las enfermedades más comúnmente conocidas, por consiguiente el uso de agentes químicos desinfectantes ha aumentado a través de los años; los geles a base de alcohol han sido una buena alternativa de uso para mejorar la higiene de las manos, sin embargo como efecto adverso al uso frecuente puede causar sequedad en la piel, a menos que se añadan emolientes, humectantes u otros agentes dermoprotectores. Una alternativa para la desinfección de manos está encaminada a la elaboración de geles que sustituyan parcial o totalmente el alcohol por otros compuestos que sean efectivos en la desinfección y no causen irritaciones o que no sean nocivos para la piel. En este trabajo evaluamos un gel a base de ácido hipocloroso (pH: 7,0, Cloro total: 0,18 ppm), que se desarrolló en el Laboratorio de investigación e innovación en Biotecnología Agroambiental de la Universidad de Santander. La acción desinfectante del gel se evaluó en las manos de 90 estudiantes universitarios de Ingeniería Civil, Microbiología y Medicina. Las muestras fueron tomadas en la mano antes y después de aplicar 2 ml del gel, y fueron cultivadas por triplicado en agares microbianos para el estudio de bacterias Mesófilas, Enterobacterias y Mohoslevaduras, mediante la técnica de hisopado. Las bacterias y mohos que crecieron antes y después de la aplicación del gel, fueron evaluadas mediante UFC (unidades formadoras de colonias), y el resultado se halló por comparación de medias para cada grupo en estudio- Los porcentajes de reducción para los tres grupos estuvo entre 60% y 84%. ABSTRACT Direct contact with hands is the main focus of transmission of disease more commonly known, therefore the use of chemical disinfectants has increased over the years; the alcoholbased gels have been a good alternative use to improve hygiene, but as a side effect of frequent use can cause dry skin, unless they are added emollients, humectants or other skinprotector agents. An alternative for hand disinfection is aimed at making gels that partially or completely replace alcohol with other compounds that are effective in disinfecting and do not cause irritation or that are not harmful to the skin. We evaluated a gel based on hypochlorous acid Profesora titular. E-mail: [email protected] . Microbióloga .E-mail: asandoval @udes.edu.co c. Profesora titular-.E-mail:[email protected] d. Profesor titular- t-E-mail:[email protected] a b XXV Simposio Internacional de Estadística 2015 Armenia, Colombia 5, 6,7 y 8 de Agosto de 2015 (pH: 7.0, Total Chlorine: 0.18 ppm), which was developed at the Research laboratory in Agroenviromental Biotechnology -University of Santander. The disinfectant action of the gel was evaluated in the hands of 90 college students of programs: Civil Engineering, Microbiology and Medicine. The samples were taken in hand before and after applying 2 ml of gel, and were cultured in triplicate in microbial agars for the study of M esophilic, Enterobacteriaceae bacteria, yeasts and Mohos- by swabbing technique. Bacteria and molds that grew before and after application of the gel were evaluated by CFU (colony forming units), and the result was found by comparison of means for each group in study-The reduction percentages for the three groups was between 60% and 84%. KEYWORDS : Antibacterial gel , hypochlorous acid,molds and yeasts, hypochlorous acid 1. Introducción En la actualidad los patógenos se transmiten por varias vías, a través de las cuales pueden diseminarse, siendo la transmisión por contacto persona a persona la más frecuente. Según Pittet (2000), la higiene de la piel, específicamente de las manos, es aceptada como uno de los principales mecanismos para el control de la propagación de enfermedades infecciosas; sin embargo el rango de microorganismos puede cambiar de persona a persona y depende de su ocupación; estos pueden ser factores laborales que impliquen mayores riesgos (Katz, 2004). Por lo tanto el uso de agentes químicos desinfectantes ha aumentado a través de los años. Los geles a base de alcohol han sido postulados como una buena alternativa de uso para mejorar la higiene de las manos, dado que han mostrado tener una buena eficiencia antimicrobiana; pero como efecto adverso al uso frecuente de las soluciones alcohólicas para la asepsia de las manos puede causar sequedad en la piel a menos que se añadan emolientes, humectantes u otros agentes dermoprotectores. Por otro lado, el ácido hipocloroso (HClO) actúa como desinfectante bactericida pues penetra fácilmente la célula bacteriana a través de la membrana citoplasmática, actúa sobre proteínas y ácidos nucleicos de los microorganismos; oxida grupos sulfhídrilos (-SH) y ataca grupos aminos, indoles y al hidroxifenol de la tirosina (Ingram et al, 2004). En este contexto en este trabajó se evaluó la actividad antimicrobiana de un gel a base de ácido hipocloroso, que fue preparado en el Laboratorio de investigación e innovación en Biotecnología de la Universidad de Santander. El ensayo se llevó a cabo en muestras tomadas al azar en 90 estudiantes Universitarios antes y después de la aplicación del gel. Los sujetos en estudio manifestaron sensación emoliente y suavizante en las manos una vez aplicado el gel y los resultados mostraron que el gel a base de ácido hipocloroso es capaz de reducir bacterias mesófilas, enterobacterias, así como mohos y levaduras. 2. Metodología Un total de 90 estudiantes de tres programas universitarios, Ingenierias, Medicina y Microbiología, participaron en el estudio. Las muestras en manos fueron tomadas al azar en cada grupo, teniendo en cuenta que las manos no estuvieran visiblemente sucias o sometidas a un proceso de limpieza. La mano derecha se consideró como control (es decir, se muestreó antes de aplicar el gel) y la mano izquierda o prueba, la que se lavó rigurosamente con agua destilada estéril, sirvió para esparcir el gel en la mano sucia o control. Se procedió a pasar un Profesora titular. E-mail: [email protected] . Microbióloga .E-mail: asandoval @udes.edu.co c. Profesora titular-.E-mail:[email protected] d. Profesor titular- t-E-mail:[email protected] a b XXV Simposio Internacional de Estadística 2015 Armenia, Colombia 5, 6,7 y 8 de Agosto de 2015 hisopo estéril humedecido en 10 ml de agua peptonada (RediSwab™) en la mano derecha de cada estudiante, en donde se hizo énfasis en palma, espacios interdigitales y el dorso de la mano; luego el analista procedió a lavar la mano izquierda de cada estudiante con agua estéril, haciendo énfasis en todas las áreas de contacto antes muestreadas, se permitió que la mano izquierda se secará por 2 minutos, seguidamente se aplicaron 2ml de un gel a base de ácido hipocloroso (pH:7,0, Cloro total: 0,18 ppm) sobre la mano derecha, dosificado con una jeringa; el sujeto en estudio, frotó el gel por ambas manos con énfasis en palma, espacios interdigitales y el dorso por un tiempo de 20 segundos; posteriormente el gel se dejó actuar durante otros 20 segundos y se tomaron muestras por hisopado de igual forma que las muestras iniciales. Los hisopos se llevaron a los tubos conteniendo 10 ml de agua peptonada buferada estéril. Posteriormente, se tomó 0.1 ml de muestra y se sembró en forma masiva por triplicado en medios de cultivo agar EMB, agar Rosa de Bengala y agar Plate Count, se incubaron a 35° C de 18 a 24 horas para aerobios mesófilos, enterobacterias y a temperatura ambiente por un tiempo de 72 para mohos y levaduras. Transcurrido este tiempo se realizó el conteo de UFC y se realizó la respectiva tabulación de los datos obtenidos. Mediante análisis de varianza se hicieron pruebas estadísticas para comparar los UFC promedios de Mesófilos, Enterobacterias y Mohos-Levaduras, antes y después de aplicar el gel. Luego se hicieron pruebas posteriores de comparaciones múltiples Tukey HSD. Se compararon los porcentajes de reducción microbiana en los tres grupos de estudio, acompañados con intervalos Tukey HSD. Los resultados reflejan diferencias significativas (p<0.01) entre los diferentes grupos, en cuanto a la reducción porcentual microbiana, como se refleja en la Fig 1 y Tabla 1. Figura1. Comparación de las UFC Medias de Mesófilos, Enterobacterias y MohosLevaduras, hallados en los tres grupos de estudiantes, antes y después de la aplicación del gel (HOCL) Profesora titular. E-mail: [email protected] . Microbióloga .E-mail: asandoval @udes.edu.co c. Profesora titular-.E-mail:[email protected] d. Profesor titular- t-E-mail:[email protected] a b XXV Simposio Internacional de Estadística 2015 Armenia, Colombia 5, 6,7 y 8 de Agosto de 2015 Tabla 1.Comparación del Porcentaje de reducción Microbiana en los tres grupos de estudio 3. Conclusiones Las bacterias Mesófilas, fueron en proporción, las más comunes en las manos de los tres grupos de estudiantes sometidos al estudio, en un rango de 39,2% a 90,4%; en oposición, los hongos (mohos y levaduras) fueron el grupo microbiano más escaso. Se observaron diferencias significativas en la reducción de microorganismos entre los tres grupos de estudiantes muestreados, y también al comparar antes y después de aplicar el gel (p<0,01). El porcentaje promedio de reducción para los tres grupos microbianos, independiente del grupo muestreado en estudio, estuvo por encima del 50%. En la actualidad no se reportan estudios anteriores con los cuales se pudiera realizar una comparación de la efectividad de la reducción microbiana por efectos del gel a base de ácido hipocloroso en manos. De acuerdo a Nicéa et al. (2008) los estudios realizados en la reducción de la carga microbiana por el alcohol líquido o geles a base de alcohol, reportan efectividades en el primero del 70 %, y para el gel- alcohol efectividades por debajo de este porcentaje. Bibliografía Ingram, PR, Homer NZ. (2003). The interaction of sodium chlorite with phospholipids and glutathione: a comparison of effects in vitro, in mammalian and microbial cells. Arch Bioch Bioph; 410(1):121-133. Kohno, H.(1996) Agricultural practice using super-electrolyzed water., Rural Culture Association (Nobunkyo), Japan. Katz J. (2004). Hand washing and hand disinfection: more than your mother taught you. Anesthesiology Clinics of North America. Vol 22: 457 – 471. Nicéa M, Sarto V, (2008) .Comparison of 3 alcohol gels and 70% ethyl alcohol for hand hygiene. Infect Control Hosp Epidemiol, 29:960-962 Pittet D, Hugonnet S. (2000). Effectiveness of a hospital-wide programme to improve compliance with hand hygiene. Infection Control Programme. Lancet. Vol 356: 1307-1312. Profesora titular. E-mail: [email protected] . Microbióloga .E-mail: asandoval @udes.edu.co c. Profesora titular-.E-mail:[email protected] d. Profesor titular- t-E-mail:[email protected] a b
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