Tercera reunión Red Temática PROCESADO DE HORTALIZAS DE IV GAMA MATERIA PRIMA TÉCNICAS SANITIZANTES EMERGENTES Y RIESGO MICROBIOLÓGICO LAVADO PRODUCTO ENTERO LIMPIEZA-Eliminación fracción no comestible MÉTODOS FÍSICOS DE DESINFECCIÓN NO TRADICIONALES APLICABLES AL PROCESO DE ELABORACIÓN DE HORTALIZAS DE IV GAMA PELADO/CORTADO LAVADO E HIGIENIZACIÓN Concepción Sánchez-Moreno González ESCURRIDO Y CENTRIFUGADO Departamento de Caracterización, Calidad y Seguridad Instituto de Ciencia y Tecnología de Alimentos y Nutrición – ICTAN Consejo Superior de Investigaciones Científicas – CSIC ENVASADO en Atmósfera Modificada (MAP) ETIQUETADO Tel.: +34 915492300 – Fax: +34 915493627 E-mail: [email protected] ALMACENAMIENTO DISTRIBUCIÓN VENTA EN REFRIGERACIÓN VIDA ÚTIL: 7‐15 días REFRIGERACIÓN LAVADO E HIGIENIZACIÓN DE HORTALIZAS DE IV GAMA MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN TRATAMIENTOS QUÍMICOS USO DE AGENTES DESINFECTANTES Cloro y derivados Radiación UV‐C Radiación Gamma Dióxido de Cloro – ClO2 Luz Pulsada Hipoclorito Sódico – NaClO Ultrasonidos Hipoclorito Cálcico – Ca(ClO)2 Alta Presión Hidrostática Cloro Gas – Cl2 Pulsos Eléctricos Otros desinfectantes químicos Ozono – O3 Peróxido de Hidrógeno – H2O2 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN ALTA PRESIÓN HIDROSTÁTICA Plasma Frío Recubrimientos y Películas Comestibles Agua Electrolizada Ácido Peroxiacético (PAA) – C2H4O3 Ácidos Orgánicos: láctico, cítrico, acético Aceites esenciales de plantas: tomillo, romero, orégano, eucalipto MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN ALTA PRESIÓN HIDROSTÁTICA DEFINICIÓN DEL PROCESO • La tecnología consiste en la aplicación de elevados niveles de presión hidrostática (100‐1000 MPa) de forma continua durante tiempos relativamente cortos (de segundos a pocos minutos) en refrigeración o temperatura ambiente • El efecto de la APH sobre los alimentos es casi instantáneo y uniforme, además de ser independiente de la forma y tamaño del producto • La presión puede aplicarse directamente al alimento o éstos pueden estar envasados en recipientes flexibles. La forma del producto permanece invariable MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN ALTA PRESIÓN HIDROSTÁTICA ESQUEMA DE UN CICLO DE PRESIÓN – ETAPAS Se transmite de forma instantánea y homogénea No depende ni del tamaño, ni de la geometría del alimento Calor adiabático: incremento de la temperatura como consecuencia de la compresión de 3‐9 ºC/100 MPa Inactivación de microorganismos y enzimas (Hoover et al., 1989; Patterson et al., 2006) Conserva o retiene las características del producto fresco: propiedades sensoriales y nutricionales (nutrientes y compuestos bioactivos) (Rastogi et al., 2007; Barba et al., 2012) 1 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN ALTA PRESIÓN HIDROSTÁTICA EFECTO SOBRE PROTEÍNAS, ENZIMAS Y MICROORGANISMOS EFECTO SOBRE PROTEÍNAS, ENZIMAS Y MICROORGANISMOS PRESIÓN 1000 MPa 500 MPa 400 MPa 300 MPa 200 MPa 100 MPa EFECTOS Inactivación de Esporas Inactivación Irreversible de Enzimas Gelatinización del Almidón Desnaturalización de Proteínas MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN ALTA PRESIÓN HIDROSTÁTICA EFECTOS REDUCE DRÁSTICAMENTE LA FLORA MICROBIOLÓGICA CONTAMINANTE Y PATÓGENOS (Listeria, Salmonella, Escherichia coli, etc.) MEJORANDO LA SEGURIDAD DEL ALIMENTO INACTIVA O REDUCE LA ACTIVIDAD DE LAS ENZIMAS CAUSANTES DE LA PÉRDIDA DE CALIDA DE LOS ALIMENTOS Inactivación de Microorganismos Inactivación Reversible de Enzimas Disociación de Subunidades de Proteínas Desintegración de Células Efecto en la Cinética de las Enzimas APLICACIONES PROLONGAR LA VIDA ÚTIL DE LOS ALIMENTOS SIN MODIFICAR LAS CARACTERÍSTICAS SENSORIALES, NUTRICIONALES O PROPIEDADES BENEFICIOSAS PARA LA SALUD PREPARAR PRODUCTOS INNOVADORES 1. Desnaturalización de proteínas: productos con nuevas texturas 2. Gelificación de polisacáridos (sin aditivos) MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN ALTA PRESIÓN HIDROSTÁTICA MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN ALTA PRESIÓN HIDROSTÁTICA SISTEMAS SEMICONTINUOS Alimento líquido bombeado en un cilindro de acero Envasado posteriormente SISTEMAS DISCONTINUOS (Batch) Alimento envasado MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN ALTA PRESIÓN HIDROSTÁTICA MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN ALTA PRESIÓN HIDROSTÁTICA Alta Presió Alta Presión Hidrostá n Hidrostática‐ tica‐Uso‐ Uso‐Aplicaciones‐ Aplicaciones‐Coste Alta Presió Alta Presión Hidrostá n Hidrostática‐ tica‐Hortalizas IV Gama Eficaz en la inactivación de células vegetativas Alta resistencia de esporas bacterianas Alta resistencia de algunas enzimas Conserva las características sensoriales y nutricionales Puede producir la modificación de la textura y de las propiedades reológicas Prolonga la vida útil Elevado coste de inversión Dificultad en el desarrollo de equipos continuos Tecnología respetuosa con el medioambiente Herramienta útil para la obtención de alimentos funcionales o nuevos alimentos La principal aplicación de la APH en el procesado de alimentos vegetales se ha centrado en alimentos líquidos, como “smoothies”, bebidas mixtas de leche y fruta, zumos de frutas y vegetales, purés de frutas y vegetales y sopas de vegetales (Cilla et al., 2012; Keenan et al., 2012; Espina et al., 2013; Chen et al., 2015). Sin embargo, su uso en frutas y hortalizas cortadas es más limitado, ya que se pueden producir problemas en la integridad de estos productos, debido a que los procesos de compresión y expansión durante el proceso de presurización pueden causar la ruptura de los tejidos vegetales (Palou et al., 2000; Rico et al., 2007) Tratamientos de APH de 400 MPa Reducción de 1.6 a >2.6 log CFU de bacterias, y de 3.5 a 5.3 log CFU de hongos en las tres hortalizas frescas cortadas Las zanahorias y los pepinos mostraron un ablandamiento La lechuga un pardeamiento El tratamiento de APH fue efectivo para la inactivación microbiológica, aunque causó un deterioro de la superficie de estas hortalizas frescas cortadas Wendakoon et al., 2010 2 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN ALTA PRESIÓN HIDROSTÁTICA MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN ALTA PRESIÓN HIDROSTÁTICA Alta Presió Alta Presión Hidrostá n Hidrostática‐ tica‐Hortalizas IV Gama Alta Presió Alta Presión Hidrostá n Hidrostática‐ tica‐Hortalizas IV Gama Mayor humedad Menor dureza Envasadas al vacío Nabo (Brassica napus var. napobrassica) RODAJAS – 15 mm Tratamientos Combinados de APH y Temperatura Tratamiento Térmico 200 MPa / 20 ºC / 5 min – 200 MPa / 40 ºC / 5 min 400 MPa / 20 ºC / 5 min – 400 MPa / 40 ºC / 5 min 600 MPa / 20 ºC / 5 min – 600 MPa / 40 ºC / 5 min versus 90 ºC – 30 min Clariana et al., 2014 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN ALTA PRESIÓN HIDROSTÁTICA Todos los tratamientos dieron lugar a la pérdida de la textura y de la capacidad de retención de agua, produciéndose el mayor ablandamiento con el tratamiento a 400 MPa, mientras que el tratamiento a 600 MPa fue el que mejor preservó estas propiedades de textura Clariana et al., 2014 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN ALTA PRESIÓN HIDROSTÁTICA Alta Presió Alta Presión Hidrostá n Hidrostática‐ tica‐Hortalizas IV Gama Se detectaron e identificaron 4 glucosinolatos: glucorafanina, progoitrina, glucobrasicanapina y glucobrasicina Calabaza (Cucurbita maxima Dutch.) Envasadas al vacío RODAJAS – 1,5 cm Tratamientos de APH Tratamiento Térmico 550 MPa / 20 ºC / 10 min 450 MPa / 20 ºC / 15 min versus 85 ºC – 5 min El contenido de glucobrasicanapina y glucobrasicina se redujo con todos los tratamientos estudiados. Los tratamientos con APH a 400 y 600 MPa indujeron un incremento en el contenido de progoitrina Los autores concluyen que en general, el tratamiento térmico (90 ºC/3 min) y el tratamiento de APH a 600 MPa/20 ºC fueron los tratamientos que mejor preservaron las propiedades sensoriales y nutricionales del nabo Clariana et al., 2014 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN ALTA PRESIÓN HIDROSTÁTICA Conservación 4 ºC 60 días Zhou et al., 2014 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN ALTA PRESIÓN HIDROSTÁTICA Inmediatamente después del tratamiento, el recuento de microorganismos totales se redujo a 1,61 y 1,52 log CFU/g a 450 MPa y 550 MPa, respectivamente 2,57 log CFU/g 1,69 log CFU/g Después de 45 días de conservación a 4 ºC, el recuento de microorganismos totales incrementó a 2,57 y 1,69 log CFU/g a 450 MPa y 550 MPa, respectivamente → Microorganismos no fueron completamente inactivados Después de 60 días de conservación a 4 ºC, el recuento de microorganismos totales fue de 5,12, 4,02 y 1,71 log CFU/g con el procesado térmico, el tratamiento a 450 MPa, y el tratamiento de 550 MPa, respectivamente CAMBIOS EN PARÁMETROS DE COLOR El crecimiento de los microorganismos a lo largo de la conservación produjo un aumento en ∆E Zhou et al., 2014 Zhou et al., 2014 3 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN ALTA PRESIÓN HIDROSTÁTICA MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN ALTA PRESIÓN HIDROSTÁTICA Los tratamientos siguieron este orden creciente (550 MPa/10 min > 450 MPa/15 min > 85 °C/5 min) en cuanto a la retención de color, vitamina C y actividad antioxidante de las muestras tratadas, INMEDIATAMENTE DESPUÉS DEL TRATAMIENTO Los autores no encontraron diferencias significativas en el pH, el contenido de sólidos solubles, y los azúcares entre las muestras tratadas por APH (450 MPa/15 min, 550 MPa/10 min) y las tratadas térmicamente (85 ºC/5 min) Zhou et al., 2014 Zhou et al., 2014 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN ALTA PRESIÓN HIDROSTÁTICA MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN ALTA PRESIÓN HIDROSTÁTICA La actividad antioxidante, medida por los métodos del DPPH y FRAP, disminuyó A LO LARGO DE LA CONSERVACIÓN A 4 ºC, aunque en general, las muestras tratadas por APH mantuvieron mejor estos parámetros El contenido de vitamina C y fenoles totales disminuyó A LO LARGO DE LA CONSERVACIÓN A 4 ºC, aunque en general, las muestras tratadas por APH mantuvieron mejor estos parámetros Zhou et al., 2014 Zhou et al., 2014 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN ALTA PRESIÓN HIDROSTÁTICA Los autores concluyeron que el tratamiento de APH a 500 MPa/10 min fue el que mejor preservó la calidad sensorial y nutricional y la vida útil de la calabaza, por lo que podría ser una tecnología alternativa al tratamiento térmico para prolongar la vida útil de la calabaza, manteniendo el nivel de compuestos bioactivos, sin el daño producido por los tratamientos térmicos; convirtiéndose, por tanto, en una potencial aplicación comercial para el procesado industrial de calabaza fresca cortada Zhou et al., 2014 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PULSOS ELÉCTRICOS DEFINICIÓN DEL PROCESO • La tecnología consiste en la aplicación de un campo eléctrico de alto voltaje (10‐80 kV/cm) en forma de pulsos cortos (micro o milisegundos) sobre el alimento colocado entre dos electrodos • • • Voltaje: 10‐80 kV/cm Tiempo: 1‐10 µs Número de pulsos: 20‐100 4 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PULSOS ELÉCTRICOS MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PULSOS ELÉCTRICOS FUNDAMENTO PRINCIPIO FÍSICO Al aplicar una intensidad de campo eléctrico elevado sobre un microorganismo se produce una destrucción o deformación de la pared celular originada por la diferencia de potencial a cada lado de la membrana (potencial transmembrana) El alimento va a actuar como un material conductor que presenta una resistencia al paso de la corriente Propiedades eléctricas de los alimentos que presentan alta concentración de iones y son conductores eléctricos DEPENDE DE LAS PROPIEDADES ELÉ DEPENDE DE LAS PROPIEDADES ELÉCTRICAS DE LOS ALIMENTOS •RESISTIVIDAD: Resistencia al paso de la electricidad •CONDUCTIVIDAD: Aumenta con la fuerza iónica y la temperatura •PROPIEDADES DIELÉCTRICAS: Capacidad de almacenar energía, a mayor Constante Dieléctrica mayor capacidad de almacenar energía MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PULSOS ELÉCTRICOS MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PULSOS ELÉCTRICOS FUNDAMENTO Pulsos Elé Pulsos Eléctricos‐ ctricos‐Uso‐ Uso‐Aplicaciones‐ Aplicaciones‐Coste EQUIPAMIENTO SISTEMAS DE TRATAMIENTO POR LOTES O ESTÁTICOS: ‐Platos o electrodos en paralelo ‐Trabajo experimental en laboratorio ‐Se ajustan mejor los parámetros de tratamiento para escalar a nivel industrial La mayoría de los estudios realizados en laboratorios o a escala de planta piloto se han llevado a cabo en alimentos líquidos y semi‐líquidos, que pueden tolerar elevados campos eléctricos, tienen una conductividad eléctrica baja y no contienen o forman burbujas Entre los estudios en alimentos líquidos o semi‐líquidos destacan los llevados a cabo en leche (Sharma et al., 2014), yogurt (Gomes da Cruz et al., 2010), zumos de frutas (Sánchez‐Moreno et al., 2005; Buckow et al., 2013; Odriozola‐Serrano et al., 2013), zumos de vegetales (Odriozola‐Serrano et al., 2009, 2013), sopas (Vega‐Mercado et al., 1996; Sánchez‐Moreno et al., 2009), huevo líquido (Espina et al., 2014) y vino (Puértolas et al., 2010). SISTEMAS DE TRATAMIENTO DE FLUJO CONTINUO: CÁMARA DE PLATOS o ELECTRODOS PARALELOS CÁMARA COAXIAL CÁMARA COLINEAL ‐Platos o electrodos en paralelo, de forma coaxial o colineal ‐Empleadas a nivel industrial Sin embargo, la aplicación de los pulsos eléctricos en alimentos sólidos, como lo son las frutas y hortalizas cortadas es más limitada. Las principales aplicaciones de los pulsos eléctricos en alimentos sólidos han sido en procesos de extracción o deshidratación asistida por pulsos eléctricos, para mejorar dichos procesos (Cerón‐Carrillo et al., 2010; Janositz et al., 2011a; Maskooki y Eshtiaghi, 2012). MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PULSOS ELÉCTRICOS Un reciente estudio, aplicó pulsos eléctricos para inactivar la lipasa en el arroz, factor limitante en su conservación Optimización de parámetros como el voltaje, la frecuencia, la anchura de pulso y el tiempo de tratamiento, para lograr una inactivación significativa de la actividad de la lipasa Permitiría la conservación de los granos de arroz durante periodos de tiempo más largos Qian et al., 2014 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PULSOS ELÉCTRICOS Los estudios referidos al empleo de los pulsos eléctricos como método de desinfección o higienización de productos de la IV gama son escasos MANZANA FRESCA CORTADA Tratamiento de Pulsos Eléctricos 1,5 kV/cm, 100 pulsos, 4 Hz Tratamiento de APH 600 MPa / 2 min Tratamiento Térmico Convencional: 90 ºC / 60 s Conservación 5 ºC 60 días Shayanfar et al., 2014 5 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PULSOS ELÉCTRICOS MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PULSOS ELÉCTRICOS Los autores concluyeron que la combinación de diferentes tecnologías inhibió completamente el crecimiento microbiano: microorganismos aerobios mesófilos, mohos, levaduras y coliformes totales En términos de color y textura, las manzanas tratadas con pulsos eléctricos, seguidas de las tratadas térmicamente, obtuvieron mejores valores comparados con las tratadas por APH Shayanfar et al., 2014 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PULSOS ELÉCTRICOS Shayanfar et al., 2014 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PULSOS ELÉCTRICOS Investigar los efectos del tratamiento con pulsos eléctricos como método de pre‐ tratamiento previo a los tratamientos térmicos habituales, o como alternativa al procesado térmico en la producción de espárragos Espárrago blanco Asparagus officinalis Output voltage: 15,000 V Electrode gap: d=3 cm Electric field strength: E=5 kV/cm Pulse number: n=20 Pulse duration: τ=400 μs Frequency: ƒ=2 Hz Contenido en azúcares: D‐glucosa, D‐fructosa Integridad celular Parámetros de color Contenido en agua – Peso seco Lignina Mayor evaporación de agua en los espárragos tratados por pulsos eléctricos Janositz et al., 2011 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PULSOS ELÉCTRICOS El peso seco de los espárragos sin tratar se mantuvo constante durante los 6 días de almacenamiento, mientras que en los espárragos tratados por pulsos eléctricos disminuyó 1,23% Janositz et al., 2011 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PULSOS ELÉCTRICOS Inmediatamente después del tratamiento por pulsos eléctricos, no hubo ningún cambio en los niveles de glucosa y fructosa Después de 4 días de almacenamiento se produjo una reducción del 3% en los niveles de glucosa de los espárragos tratados por pulsos eléctricos comparando con los no tratados Posiblemente debido a los procesos de respiración o a la liberación de enzimas endógenas por la disgregación celular producida por los pulsos eléctricos Janositz et al., 2011 Se observó un mayor pardeamiento de los espárragos tratados por pulsos eléctricos comparando con los no tratados, lo que se refleja en menores valores de L Posiblemente debido a la liberación de la polifenoloxidasa después de la permeabilización de la membrana celular por el tratamiento por pulsos eléctricos Janositz et al., 2011 6 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PULSOS ELÉCTRICOS MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PULSOS ELÉCTRICOS Los autores sugirieron que la aplicación de pulsos eléctricos en espárragos blancos fue un tratamiento útil para mejorar las características macroscópicas de las puntas de los espárragos, produciéndose una mayor pérdida de humedad en los espárragos tratados durante la conservación postcosecha, unido a una reducción del contenido de lignina La cantidad de lignina disminuyó del 12,6 % (±0,08) en los espárragos no tratados al 10,2% (±0,34) en los espárragos tratados La aplicación de los pulsos eléctricos es posible que haya sido efectivo para romper los enlaces inter‐ e intramoleculares entre la celulosa, la hemicelulosa y la lignina Esto podría ser útil para conseguir espárragos con una textura más suave, que podría ser interesante para la industria del procesado de espárragos, como método previo al tratamiento térmico, especialmente para la producción de espárragos tostados o fritos Janositz et al., 2011 Janositz et al., 2011 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PULSOS ELÉCTRICOS MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PULSOS ELÉCTRICOS Radiación UV 10 kJ/m2, 1 h Cámara flujo laminar Tratamiento de Pulsos Eléctricos 10000 V/cm, 10 s, 50 Hz Vigna radiata L. Wilczek Inmersión Agua Caliente 50 ºC / 20 min Brotes Vapores Etanol 1 h 25 ± 1 °C – Toma de muestra cada 24 h hasta 72 h 7 ± 1 °C – Toma de muestra cada 24 h hasta 120 h BOD incubator Envasados Parámetros Físico‐ Químicos No hubo diferencia significativa en el recuento de microorganismos totales entre los diferentes tratamientos El recuento fue de 3,32 a 4,08 log cfu/mL durante el periodo de conservavion de 48 h a temperatura ambiente (25 ºC) y de 3,56 a 3,99 log cfu/mL durante el periodo de conservación de 120 h a temperatura baja (7 ºC) Análisis Microbiológicos Goyal y Siddiqui, 2014 Goyal y Siddiqui, 2014 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PULSOS ELÉCTRICOS Los autores concluyeron que, entre todos los tratamientos estudiados, los vapores de etanol y la inmersión en agua caliente fueron los tratamientos más efectivos incrementando la vida útil de los brotes, MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PLASMA FRÍO Finalmente entre los métodos físicos más recientes para mejorar la seguridad y prolongar la vida útil de productos frescos cortados, se encuentra el plasma frío, como una tecnología no térmica de gran potencial suprimiendo el crecimiento de la longitud y el peso de los brotes El etanol redujo el pardeamiento no enzimático, mientras que la inmersión en agua caliente incrementó los sólidos solubles y la acidez El plasma es un estado de la materia similar al gas en el que una cierta porción de las partículas se ionizan Sin embargo, los pulsos eléctricos y la radiación UV no afectaron significativamente a la longitud de los brotes, sólidos solubles, pardeamiento no enzimático o calidad sensorial de los brotes El plasma es un gas ionizado por electricidad cuyas moléculas constituyentes se disgregan y liberan electrones, radicales, iones positivos y negativos y cuantos de radiación electromagnética, si bien algunas moléculas pueden permanecer neutras Goyal y Siddiqui, 2014 7 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PLASMA FRÍO MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PLASMA FRÍO ÁREAS DE ACCIÓN DEL PLASMA FRÍO EN TECNOLOGÍA DE ALIMENTOS El plasma frío se puede usar para la inactivación de microorganismos que se localizan externamente, en la superficie de los alimentos CONCEPTOS BÁSICOS Hay varias clases de plasma, según las condiciones en las que se genere: plasma térmico y plasma frío Esta tecnología utiliza electricidad y un gas portador (aire, oxígeno, nitrógeno, argón, helio) El principal modo de acción de esta tecnología se debe a los productos de reacción resultantes del proceso de ionización del plasma Los diferentes sistemas pueden operar a presión atmosférica o en cámaras de tratamiento de baja presión La composición de los agentes activos microbicidas va a depender de la fuente de plasma, de los parámetros del proceso para generar el plasma, y del tipo de gas usado A diferencia de la luz UV, el plasma fluye alrededor de los objetos/alimentos por lo que los “efectos de sombra” no ocurren asegurando que todas las partes de un producto son tratadas Para productos como hortalizas cortadas o carne fresca, no existe una tecnología que proporcione una descontaminación leve de la superficie en la actualidad; el plasma frío podría ser utilizado para este propósito El plasma frío también puede ser utilizado para la desinfección de superficies antes de su envasado o incluido como parte del proceso de envasado Ehlbeck et al., 2011 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PLASMA FRÍO MECANISMO DE ACCIÓN ANTIMICROBIANO Bombardeo de iones Efecto térmico Ruptura de las membranas celulares de las bacterias Desnaturalización de proteínas Producción de radicales libres Niemira, 2012 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PLASMA FRÍO Los estudios más recientes sobre la aplicación de plasma frío en hortalizas de IV gama combinan el estudio del efecto antimicrobiano con la evaluación de parámetros relacionados con la calidad Evaluación del efecto de la aplicación de plasma frío a presión atmosférica sobre rodajas de pepino, zanahoria y pera con Salmonella inoculada PEPINO ZANAHORIA Daños en el ADN bacteriano PERA Plasma microjet (PMJ) device Compressed air 30 mA, 500 V ACTIVACIÓN Y FUNCIONALIZACIÓN DE ENVASES Incorporación de grupos funcionales a los envases de alimentos para mejorar las características de éstos, mejorar diferentes características de los polímeros, por ejemplo, mejora de la imprimibilidad, depósitos de revestimientos de barrera y barreras de permeación MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PLASMA FRÍO Inactivación microbiológica Contenido en agua Parámetros de color Contenido nutricional Wang et al., 2012 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PLASMA FRÍO Sin embargo, hubo diferencias notables en la supervivencia de Salmonella en periodos cortos del tratamiento: Después de 0,5 s de tratamiento, el 90% de Salmonella fue inactivado en la zanahoria, el 60% en el pepino, y menos del 40% en la pera Después de 1 s de tratamiento, el 80% de Salmonella fue inactivado en el pepino y la pera Las curvas de inactivación mostraron una tendencia similar para los 3 productos Después de 4 s de tratamiento, el 100% de Salmonella fue inactivado en la zanahoria, sin embargo un 10% permaneció sin inactivar en el pepino y la pera Wang et al., 2012 El contenido en humedad se vio ligeramente afectado por el tratamiento: Se observó una pérdida inferior al 5% para los 3 productos después de 8 min de tratamiento, lo cual no tuvo una influencia en la textura del tejido, considerando esta pérdida de agua aceptable Wang et al., 2012 8 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PLASMA FRÍO MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PLASMA FRÍO El contenido de Vitamina C se vio muy ligeramente afectado por el tratamiento: El ∆E para en las rodajas de zanahorias se vio ligeramente incrementado comparado con las rodajas de pepino y pera, quizá debido a la oxidación del caroteno de la superficie En las rodajas de pepino se observó la reducción más elevada: 3,6%; en las rodajas de zanahoria fue del 3,2% y en las rodajas de pera del 2,8% Sin embargo, estas diferencias no fueron detectadas visualmente Wang et al., 2012 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PLASMA FRÍO Wang et al., 2012 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PLASMA FRÍO Evaluación del efecto antimicrobiano del plasma de Argón en “Dutch Broad Leaved corn salad” (Valerianella olitoria Poll.) Atmospheric Pressure Plasma Jet (APPJ) Argon (99.999%) Argon with 0.1% oxygen added 8 W, 220 V, 50/60 Hz 10 kV, 20 kHz Las especies reactivas de oxígeno – principales agentes bactericidas en el plasma frío– fueron detectadas por Espectroscopía de resonancia de espín electrónico y Espectroscopía de emisión óptica Wang et al., 2012 Actividad fotosintética y temperatura de las hojas Color Eficiencia antibacteriana: hojas de Valerianella olitoria Poll., manzanas, pepinos y tomates cherry Baier et al., 2014 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PLASMA FRÍO MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PLASMA FRÍO Evaluación del efecto antimicrobiano del plasma de Argón en “Dutch Broad Leaved corn salad” (Valerianella olitoria Poll.) Evaluación del efecto antimicrobiano del plasma de Argón en “Dutch Broad Leaved corn salad” (Valerianella olitoria Poll.) El tratamiento con plasma de argón con 0,1% oxígeno, a una distancia de 17 mm, fue el que tuvo menor impacto en la eficiencia fotosintética y en la temperatura de la superficie de las hojas Baier et al., 2014 El tratamiento con plasma de argón con 0,1% oxígeno, a una distancia de 17 mm, fue el que tuvo menor impacto en el color de las hojas Baier et al., 2014 9 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PLASMA FRÍO MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PLASMA FRÍO Evaluación del efecto antimicrobiano del plasma de Argón en “Dutch Broad Leaved corn salad” (Valerianella olitoria Poll.) Evaluación de la inactivación de Salmonella enterica serovar Thyphimorium inoculada sobre lechuga, fresa y patata Independientemente del producto, el tratamiento a una distancia de 17 mm de la superficie, resultó de forma general en una rápida y prácticamente completa inactivación de E. coli y L. innocua inoculada, hasta 4 log CFU en los 20 s iniciales de tratamiento Food discs FASE DE CRECIMIENTO TEMPERATURA La inactivación más eficiente se produjo en la superficie lisa de las manzanas Además estos tratamientos cortos también produjeron una mejor retención de la calidad sensorial Baier et al., 2014 RÉGIMEN QUÍMICO Nitrogen Plasma Jet (APPJ) 1 W, 1 kHz Fernández et al., 2013 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PLASMA FRÍO MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PLASMA FRÍO Evaluación de la inactivación de Salmonella enterica serovar Thyphimorium inoculada sobre lechuga, fresa y patata Evaluación de la inactivación de Salmonella enterica serovar Thyphimorium inoculada sobre lechuga, fresa y patata Los resultados mostraron una reducción bacteriana muy significativa de 2.72, 1.76, y 0.94 log CFU en lechuga, fresa y patata, respectivamente después de 15 min lechuga fresa Las imágenes tomadas con Microscopía Electrónica de Barrido, mostraron como las diferentes matrices, con diferentes estructuras, pueden ocultar a las células de Salmonella y/o crear barreras físicas que las protejan de la inactivación por el tratamiento con plasma frío patata Fernández et al., 2013 Fernández et al., 2013 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PLASMA FRÍO MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PLASMA FRÍO Evaluación de la inactivación de Escherichia coli inoculada sobre lechuga (Lactuca sativa L. var. longifolia), zanahoria (Daucus carota L.) y tomate (Lycopersicon lycopersicum) Evaluación de la inactivación de Escherichia coli inoculada sobre lechuga (Lactuca sativa L. var. longifolia), zanahoria (Daucus carota L.) y tomate (Lycopersicon lycopersicum) Atmospheric Pressure Cold Plasma (APCP) Argon 3.95‐12.93 kV, 60 kHz 30 s to 10 min Leafy vegetable Porous vegetable Smooth surface vegetable Bermúdez‐Aguirre et al., 2013 En este estudio se obtuvieron resultados muy similares a los obtenidos por Fernández et al. (2013), produciéndose una reducción de 1.6 log CFU después del tratamiento de mayor voltaje y de más duración (10 min), en lechuga y tomate Bermúdez‐Aguirre et al., 2013 10 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PLASMA FRÍO MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PLASMA FRÍO Evaluación de la inactivación de Escherichia coli inoculada sobre lechuga (Lactuca sativa L. var. longifolia), zanahoria (Daucus carota L.) y tomate (Lycopersicon lycopersicum) Evaluación de la inactivación de Escherichia coli inoculada sobre lechuga (Lactuca sativa L. var. longifolia), zanahoria (Daucus carota L.) y tomate (Lycopersicon lycopersicum) En este estudio se obtuvieron mejores resultados de inactivación en el tomate, seguido de la lechuga, y de la zanahoria, probablemente debido a las diferencias de la superficie de los diferentes vegetales No se observaron cambios significativos en la estructura de la lechuga tratada con el Plasma Frío Atmosférico, sin embargo… Bermúdez‐Aguirre et al., 2013 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PLASMA FRÍO MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PLASMA FRÍO Evaluación de la inactivación de Escherichia coli inoculada sobre lechuga (Lactuca sativa L. var. longifolia), zanahoria (Daucus carota L.) y tomate (Lycopersicon lycopersicum) Leafy vegetable Porous vegetable …La estructura de las células de E. coli después del tratamiento de mayor voltaje (12.83 kV) y de más duración (10 min) mostraron una superficie totalmente dañada, un alto grado de electroporación, fusión entre células, disrupción de la membrana celular, y cambio en la forma de las células Bermúdez‐Aguirre et al., 2013 Evaluación del efecto antimicrobiano y del efecto sobre parámetros de calidad del plasma de aire sobre manzanas Granny Smith, pepinos, tomates y zanahorias Smooth surface vegetable Los autores concluyeron que la mezcla adecuada de argón/oxígeno, el voltaje, el tiempo de exposición, así como la superficie del producto, y la carga inicial de microorganismos; son factores muy importantes que combinados adecuadamente podrían incrementar el grado de inactivación microbiológica alcanzado Bermúdez‐Aguirre et al., 2013 Plasma Processed Air (PPA) 1.20 kV 2.5 min, 5 min, 10 min Parámetros de color Textura Eficiencia fotosintética Recuento de microorganismos aerobios mesófilos Inactivación de E coli inoculada Baier et al., 2015 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PLASMA FRÍO MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PLASMA FRÍO Evaluación del efecto antimicrobiano y del efecto sobre parámetros de calidad del plasma de aire sobre manzanas Granny Smith, pepinos, tomates y zanahorias Evaluación del efecto antimicrobiano y del efecto sobre parámetros de calidad del plasma de aire sobre manzanas Granny Smith, pepinos, tomates y zanahorias A B Los tomates y las zanahorias mostraron cambios significativos en el color A. Después de 5 min de aplicación del plasma, el recuento de microorganismos aerobios mesófilos totales se redujo 3.4±0.4 (□), 1.2±0.5 (∆), 5.2±0.5 (○), y 3.3±0.5 (◊) log CFU en manzanas, pepinos, zanahorias, y tomates, respectivamente B. Después de 10 min de tratamiento, se produjo una reducción de E. coli inoculada de 4.6±2.0 (□) y 6.0±0.8 (○) log CFU en manzanas y zanahorias, respectivamente Baier et al., 2015 Baier et al., 2015 11 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PLASMA FRÍO MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PLASMA FRÍO Evaluación del efecto antimicrobiano y del efecto sobre parámetros de calidad del plasma de aire sobre manzanas Granny Smith, pepinos, tomates y zanahorias Evaluación del efecto antimicrobiano y del efecto sobre parámetros de calidad del plasma de aire sobre manzanas Granny Smith, pepinos, tomates y zanahorias Los pepinos mostraron cambios significativos relacionados con la eficiencia fotosintética Los autores concluyeron que este tratamiento fue más adecuado para las manzanas, que fue el producto más estable después del tratamiento. Si bien, en las zanahorias se obtuvo una inactivación microbiológica muy elevada, el tratamiento produjo efectos indeseables en la superficie. Por tanto, para la aplicación de este tipo de tratamiento, se hace necesario un estudio exhaustivo caso por caso Los zanahorias mostraron cambios significativos en la t t Baier et al., 2015 Baier et al., 2015 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PLASMA FRÍO Una aplicación muy importante del plasma frío es su aplicación en productos envasados Panjak et al. (2014) han trabajado activamente en las aplicaciones del plasma frío para la modificación y descontaminación de la superficie de polímeros de gran importancia en el envasado de alimentos: MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PLASMA FRÍO En este sentido, se ha probado su eficacia en reducir notablemente la carga microbiana en tomates cherry (Misra et al., 2014a) y fresas (Misra et al., 2014b) dentro de un envase Polietileno (PE‐polyethylene) Polipropileno (PP‐polypropylene) Siendo también esta tecnología objeto de estudio del proyecto SAFEBAG: Utilización de plasma frío para descontaminar frutas y verduras cortadas y tereftalato de polietileno (PET‐polyethylene terephtalate) Séptimo Programa Marco de la Unión Europea El equipo de investigación ha construido un prototipo en fase precompetitiva basado en plasma frío que ya está listo para ensayarse en instalaciones industriales para determinar su efectividad a la hora de descontaminar frutas y verduras frescas envasadas en bolsas Panjak et al., 2014 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PLASMA FRÍO Proyecto UE – SAFEBAG Misra et al., 2014a Misra et al., 2014b MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PLASMA FRÍO TOMATES CHERRY ENVASADOS TOMATES CHERRY ENVASADOS Cold plasma generated in Air 60 kV, 50 Hz 30 s, 60 s, 180 s, 300 s Proyecto UE – SAFEBAG Misra et al., 2014a El tratamiento con plasma frío de los tomates cherry envasados no afectó de forma adversa a parámetros relacionados con la calidad como el color, la firmeza, el pH y la pérdida de peso Proyecto UE – SAFEBAG Misra et al., 2014a 12 MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PLASMA FRÍO MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PLASMA FRÍO FRESAS ENVASADAS FRESAS ENVASADAS El tratamiento con plasma frío de los fresas envasadas durante 5 min alcanzó reducciones de 2.4 y 3.3 log CFU/g de microorganismos mesófilos totales, y mohos La Tasa de Respiración disminuyó y levaduras, respectivamente con el tiempo tanto en las muestras control como en las tratadas Cold plasma generated in Air 60 kV, 50 Hz 30 s, 60 s, 180 s, 300 s Proyecto UE – SAFEBAG Misra et al., 2014b MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN PLASMA FRÍO Proyecto UE – SAFEBAG Misra et al., 2014b MÉTODOS FÍSICOS DE HIGIENIZACIÓN FRESAS ENVASADAS Los avances en nuevas tecnologías han aportado interesantes alternativas en sistemas de desinfección que permiten hacer más sólido y sostenido el crecimiento de los productos de IV gama en general, y de hortalizas en particular Concepción Sánchez-Moreno González El tratamiento con plasma frío de los fresas envasadas redujo la microflora presente en las fresas sin inducir un estrés fisiológico significativo ni afectar adversamente a parámetros como el color o la firmeza Proyecto UE – SAFEBAG Misra et al., 2014b Departamento de Caracterización, Calidad y Seguridad Instituto de Ciencia y Tecnología de Alimentos y Nutrición – ICTAN Consejo Superior de Investigaciones Científicas – CSIC Tel.: 91 5492300 – Fax: 91 5493627 E-mail: [email protected] 13
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