III TALLER CONVERSATORIO INTERNACIONAL DE ACUACULTURA 2015 Año 7, Número 23. SLA. 2015 - Ecuador Enero - Febrero - Marzo Aislamiento y cultivo de Olisthodiscus luteus Carter Enterocytozoon Hepatopenaei (EHP) El papel del oxígeno en la producción de truchas LA RUTA DE LA SLA Desde el 1 de Agosto del 2005 a la fecha van algo de diez años, tiempos de renovacion, conocimiento e intercambio de experticias acuicolas sin dejar a un lado el mantenimiento de una busqueda permanente de alternativas acorde al tiempo y conocimiento que con lleven a mejorar nuestras producciones. En todo este tiempo nos dimos cuenta que para hacer acuicultura el dia de hoy no solo es cuestion de estar en el campo, ni de tener opiniones correctas o muy buenos deseos de colaboracion, es estar al dia y en practicas de nuevas tecnologias aplicadas, conocer de patologias, de etologia, de bioquimica de aguas, interrelacion suelo – agua, remediacion, genetica, etc. Esto nos obliga a estar en permanente realizacion de Curso y Talleres de corte eminentemente practicos y los resultados de este accionar ya son visibles, muchos de nuestros enunciados ya son vuestros y tenemos conceptos casi comunes en terminos de tecnologia. Todos nuestros asociados cuentan con el derecho de publicar sus experiencias en esta revista, no necesitamos entrar en competencia con nadie, mientras mas fuentes de informacion y conocimiento existan habra mayor disponibilidad . Hemos caminado algo y esto nos permite pensar en mas alla de nuestra ubicacion actual, logramos un posicion importante a nivel latinoamericano y se habla de nosotros en otros lados tambien, consientes de nuestro papel nos proyectamos a la creacion del Centro de Entrenamiento Latinoamericano de Acuicultura CELA, idea planteada y aceptada por lo que debemos ser muy objetivos en su proyeccion final. “La SLA seguira creciendo y haciendo nuevos caminos a su andar para beneficio de todos los actores de este sector” (+)Johnnie CastroMontealegre, Agosto 2008 Blgo. John Salazar Fiallo Presidente Fundación Sociedad Latinoamericana de Acuacultura Índice 5 8 12 Noticiero Acqua Asuntos legales Aislamiento y cultivo de Olisthodiscus luteus Carter en la bahía de Miraflores, Callao, Perú 20 El número de aerobios mesófilos como bioindicador de la vida útil del filete de tilapia (oreochromis spp.) Refrigerada 32 Enterocytozoon Hepatopenaei (EHP): An Emerging Problem for Shrimp Farmers. 34 El papel del oxígeno en la producción de truchas 38 III Taller Conversatorio Internacional de Acuacultura SLA 2015 40 Programa de conferencias del III Taller Conversatorio Internacional de Acuacultura SLA 2015 SLA en la Academia Expositores y resúmenes del III Taller Conversatorio Internacional SLA 2015 Fundación 41 Sociedad Latinoamericana de Acuacultura Blgo. Johnnie Castro Montealegre † Presidente Fundador Directorio Blgo. John Salazar Presidente SLA Ing. Alfredo Freire Coordinador Brasil Ing. Carlos Espejo Coordinador Colombia Phd. Marco Alvarez G. Coordinador Ecuador Ing. Jairo Azmequita Coordinador Honduras Dra. María Sol Morales Cobarrubia Coordinador México Dra. Gina Conroy Coordinador Venezuela Blgo. Alberto Bayas Coordinador Otros Países 4 Director Blgo. John Salazar Consejo Editorial Blgo. John Salazar PhD Marco Alvarez Blgo. Jorge Chávez R. Publicidad [email protected] Diseño e Impresión Nixon Gutiérrez Dupré Artes Gráficas Telf: 2365759 Portada: III Taller Conversatorio Internacional de Acuacultura 2015 Noticiero Acqua Enero - Febrero - Marzo 2015 Nuevo montaje del Transcriptoma del camarón blanco http://repository.tamu.edu/handle/1969.1/152151 Texas, EEUU.- Científicos publicaron un nuevo ensamblaje del transcriptoma del camarón blanco del Pacífico (Litopenaeus vannamei). Su anotación funcional es proveída libremente. El camarón blanco es la principal especie de crustáceo que se viene cultivando en todo el mundo, esto ha generado una demanda por herramientas genéticas en esta especie que puedan ser aplicadas a la nutrición, reproducción, desarrollo y resistencia a las enfermedades infecciosas. Existen varias RNA-Seq e informes de transcriptoma para el camarón blanco; sin embargo, un nuevo informe de científicos del Texas A&M AgriLife Research, de la Universidad Nacional Autónoma de México, del Texas A&M University, del Centro de Investigación en Alimentación y Desarrollo (CIAD) en México, del Centro de Investigación y de Estudios Avanzados del IPN en México, y del Pittsburgh Supercomputing Center, presenta el trabajo de descubrimiento genético más extenso en la especie a la fecha y el primero en poner a disposición de la comunidad científica una extensa anotación funcional. Los científicos emplearon Illumina Hiseq para experimentos de RNA-Seq en el hepatopáncreas, branquias, pleópodos y músculo abdominal de una camarón macho para producir un montaje robusto agrupado del transcriptoma para el L. vannamei usando el software Trinity. Referencia: Ghaffari, Noushin; Sanchez-Flores, Alejandro; Ryan, Doan; Garcia-Orozco, Karina D; Chen, Patricia L.; Ochoa-Leyva, Adrian; Lopez-Zavala, Alonso A.; Carrasco, J. Salvador; Hong, Chris; Brieba, Luis G.; Rudino-Pinera, Enrique; Blood, Philip D.; Jason A., Sawyer; Johnson, Charles D.; Dindot, Scott V.; Sotelo-Mundo, Rogerio R.; Criscitiello, Michael F. (2014). Novel transcriptome assembly and improved annotation of the whiteleg shrimp (Litopenaeus vannamei), a dominant crustacean in global seafood mariculture. Scientific Reports 4, Article number: 7081 doi:10.1038/srep07081. http://www.aquahoy. http://www.nature.com/srep/2014/141125/ srep07081/full/srep07081.html 5 Noticiero Acqua Enero - Febrero - Marzo 2015 Solubilidad del Oxígeno mg/L en el agua a diferentes temperaturas y salinidades, al n.m.m. (760 mm Hg) Temp °C Salinidad (ups) 0 5 10 15 20 25 30 35 40 10 11,28 10,92 10,58 10,25 9,93 9,62 9,32 9,03 8,75 11 11,02 10,67 10,34 10,02 9,71 9,41 9,12 8,83 8,56 12 10,77 10,43 10,11 9,80 9,50 9,21 8,92 8,65 8,38 13 10,52 10,20 9,89 9,59 9,29 9,01 8,73 8,47 8,21 14 10,29 9,98 9,68 9,38 9,10 8,82 8,55 8,29 8,04 15 10,07 9,77 9,47 9,19 8,91 8,64 8,38 8,13 7,88 16 9,86 9,56 9,28 9,00 8,73 8,47 8,21 7,97 7,73 17 9,65 9,36 9,09 8,82 8,55 8,30 8,05 7,81 7,58 18 9,45 9,17 8,90 8,64 8,38 8,14 7,90 7,66 7,44 19 9,26 8,99 8,73 8,47 8,22 7,98 7,75 7,52 7,30 20 9,08 8,81 8,56 8,31 8,06 7,83 7,60 7,38 7,17 21 8,90 8,64 8,39 8,15 7,91 7,68 7,46 7,25 7,04 22 8,73 8,48 8,23 8,00 7,77 7,54 7,33 7,12 6,91 23 8,56 8,32 8,08 7,85 7,63 7,41 7,20 6,99 6,79 24 8,40 8,16 7,93 7,71 7,49 7,28 7,07 6,87 6,68 25 8,24 8,01 7,79 7,57 7,36 7,15 6,95 6,75 6,56 26 8,09 7,87 7,65 7,44 7,23 7,03 6,83 6,64 6,46 27 7,95 7,73 7,51 7,31 7,10 6,91 6,72 6,53 6,35 28 7,81 7,59 7,38 7,18 6,98 6,79 6,61 6,42 6,25 29 7,67 7,46 7,26 7,06 6,87 6,68 6,50 6,32 6,15 30 7,54 7,33 7,14 6,94 6,75 6,57 6,39 6,22 6,05 31 7,41 7,21 7,02 6,83 6,64 6,47 6,29 6,12 5,96 32 7,29 7,09 6,90 6,72 6,54 6,36 6,19 6,03 5,87 33 7,17 6,98 6,79 6,61 6,43 6,26 6,10 5,94 5,78 34 7,05 6,86 6,68 6,51 6,33 6,17 6,01 5,85 5,69 35 6,93 6,75 6,58 6,40 6,24 6,07 5,91 5,76 5,61 36 6,82 6,65 6,47 6,31 6,14 5,98 5,83 5,68 5,53 37 6,72 6,54 6,37 6,21 6,05 5,89 5,74 5,59 5,45 38 6,61 6,44 6,28 6,12 5,96 5,81 5,66 5,51 5,37 39 6,51 6,34 6,18 6,02 5,87 5,72 5,58 5,44 5,30 40 6,41 6,25 6,09 5,94 5,79 5,64 5,50 5,36 5,22 * El Grado de saturación del agua por oxígeno disuelto se expresa en porcentaje de saturación. * La ecuación para estimar el porcentaje de saturación es: %Saturación =(Oxígeno disuelto en el agua)/(Oxígeno disuelto a saturación) X 100. Ejemplo: Si una masa de agua se encuentra a 28°C y tiene una salinidad de 30 ups y la concentración de oxígeno disuelto 5 mg/L. Cuál es el porcentaje de saturación? Fuente: C.E. Boyd, 2001 % Saturación=( 5mg/L)/6,61 X 100 75,6% =( 5mg/L)/6,61 X 100 *n.m.m: Nivel Medio del Mar. 6 Noticiero Acqua Enero - Febrero - Marzo 2015 ‘New’ disease has Indian shrimp farmers mulling return to black tiger Black tiger shrimp. Credit: Franklin Heijnen Neil Ramsden India’s production of vannamei shrimp is likely to drop in 2015, as farmers face disease issues and consider a shift to producing black tiger instead, the head of a farming association told Undercurrent News. ‘Running mortality syndrome’, or RMS, is a problem currently faced by producers across Tamil Nadu and Andhra Pradesh – regions which represent 20% and 60% of the country’s shrimp production respectively, said Durai Balasubramanian, secretary of the Pattukottai Shrimp Farmers Association (with 4,000 members). As a result, farmers are considering a reverse in the trend which has seen Indian shrimp production rocket in 2014 – the switch from black tiger to vannamei farming. “There is no cure for running mortality syndrome at the moment, but lots of consultants suggested to go for better farm management practices,” said Balasubramanian. “P. monodon [black tiger shrimp] can only be produced under low stocking densities, so production will definitely come down.” RMS has caused pond biomass to fall substantially for many farmers – mortality rates reaching 70% in most cases, according to a report by Mastan Vali, senior scientist with India›s MAAARC [Matrix-ANU Advanced Aquaculture Research Centre]. Since October 2014, Tamil Nadu at least has struggled with whitespot syndrome as well, and stocking of ponds has been delayed. Production costs for vannamei have risen, while selling prices have dipped of late, spurring a reconsideration of which product is in farmers› interests, said Balasubramanian. “In the current scenario, monodon is valued highly, it will help farmers to fetch high prices. Plus the amount of investment for monodon is lower than vannamei,” he said. 8 Sources from outside India have heard conflicting reports on the seriousness of the disease, with some confirming it seems to be bad, while others played down the impact. One shrimp trader in Asia confirmed farmers in India seem to be mulling the switch back to black tiger, though not necessarily for disease reasons. “Due to cool weather shrimp growth has been stunted, therefore many farmers have harvested their ponds earlier. Vannamei has not been so successful in this area [Tamil Nadu] this year, so some farmers are considering switching to black tiger.” A second source, a buyer in the US, was unsure the information coming out of India was entirely correct. He agreed to hearing reports of disease across Tamil Nadu and Andhra Pradesh, and agreed disease has been lowering survival rates and slowing growth, but believes the farmers will not see better margins from a switch. “Input costs [to farm vannamei] are actually slightly lower nowadays, but can go up due to diseases; slow growth, survival rates etc.,” he said. Rabobank›s prediction for farmed shrimp in 2015 was on the money, believes Balasubramanian. “Prices will be roller coaster; if the prices move up farmers might come back to vannamei, or if prices stay at these levels India might go for less production compared to 2014,” he said. “In future - March or April – if any new stocking is hit by viral outbreaks, then the situation will be worse, putting total production for the year down at least 30% from 2014.” “As Rabobank mentioned, India is still vulnerable in terms of production.” RMS hits India March 2011 + + Bioregulador Iónico ASUNTOS LEGALES GOBIERNO NACIONAL DE LA REPÚBLICA DEL ECUADOR 10 ASUNTOS LEGALES 11 AISLAMIENTO Y CULTIVO DE Olisthodiscus luteus Carter EN LA BAHÍA DE MIRAFLORES, CALLAO, PERÚ ISOLATION AND CULTURE OF Olisthodiscus luteus Carter IN MIRAFLORES BAY, CALLAO, PERÚ Resumen José García-Campodónico1, G. Vera2, J. Tam3 y H. Orrego4 Se aisló del ambiente natural y cultivó en laboratorio el flagelado Olisthodiscus luteus en la bahía de Miraflores, como especie productora de floraciones algales en el área del Callao. El aislamiento se efectuó a través de la técnica por sucesivas diluciones. La especie fue llevada a cultivos de 1 y 5 L con el medio de cultivo “f/2” modificado, obteniéndose curvas de crecimiento las cuales fueron ajustadas a un modelo de crecimiento poblacional logístico. O. luteus cultivado en 1 L logró una tasa de crecimiento de 0.6239 día-1 y una capacidad de carga de 155206.700 cel.mL-1; mientras que cultivado en 5 L alcanzó una tasa de crecimiento de 0.4933 día-1 y una capacidad de carga de 166612.967 cel.mL-1. Durante los cultivos se registraron parámetros fisicoquímicos tales como: oxígeno disuelto, pH, salinidad y temperatura. Palabras Clave: aislamiento, cultivo, tasa de crecimiento, capacidad de carga, parámetros fisicoquímicos, O. luteus, Perú. Abstract It was isolated of natural environment and cultured in laboratory the flagellate Olisthodiscus luteus in Miraflores Bay, like producing species of algal blooms in the Callao area. The isolation was with the technique by successive dilutions. The species was taken to cultures of 1 and 5 L with culture media “f/2” modified, obtaining itself curved from growth which were fit to a model of logistic population growth. O. luteus cultivated in 1 L obtained a rate of growth of 0,6239 day-1 and a charge capacity of 155206,700 cel.mL-1; whereas cultivated in 5 L it reached a rate of growth of 0,4933 day-1 and a charge capacity of 166612,967 of cel.mL-1. During the cultures physicschemical parameters were registered such as: dissolved oxygen, pH, salinity and temperature. Key Words: isolation, culture, rate of growth, charge capacity, physics-chemical parameters, O. luteus, Peru. 12 Figura 1. Area del Callao (12º S). Ubicación de zona de muestreo de O. luteus: (Fuente: Modificado de Sánchez y Delgado, 1996). Introducción Actualmente, las floraciones algales son motivo de preocupación por la evidente propagación a nivel mundial de eventos tóxicos (Hallegraeff, 1993). Estos fenómenos están considerados dentro de un contexto ecológico general, como una fase avanzada de la sucesión fitoplanctónica producida en situaciones en que coexisten, una baja turbulencia, relativa estabilidad en la columna de agua y concentraciones importantes de nutrientes (Estrada, 1993). Sin embargo, además de éstas características, han sido atribuidos otros factores que favorecerían su aparente aumento a nivel mundial como son los cambios ambientales locales y globales. Dentro de estos tenemos el enriquecimiento inusual de las aguas (eutroficación) por nutrientes utilizados en la actividad agrícola y en la acuicultura; y la contaminación por materia orgánica proveniente de desechos urbanos o industriales. En el Perú, el registro de floraciones algales se remonta a décadas pasadas, habiéndose registrado más de 100 casos a lo largo de todo el litoral; siendo todos ellos asociados a una flora fitoplanctónica constituida por 23 especies. Sin embargo, a partir de 1998 se vienen registrando especies que no son propias del mar peruano, muchas de ellas asociadas a la ocurrencia del fenómeno El Niño, y pertenecientes a géneros responsables de producir toxinas en otras partes del mundo. Figura 2. Técnica de aislamiento por sucesivas diluciones. En cada dilución debe utilizarse una pipeta estéril. (Fuente: Venkataraman, 1969). Olisthodiscus luteus Carter (1937), es una especie vinculada a la producción continua de floraciones algales en el área del Callao, formando parches fitoplanctónicos de gran extensión y de larga duración. En este sentido, el presente trabajo tuvo como objetivo aislar a esta especie del ambiente natural y cultivarla en condiciones controladas; a fin de contribuir a un mejor conocimiento de sus aspectos biológicos y su cinética de crecimiento poblacional. Materiales y Métodos Aislamiento El material biológico estuvo constituido por la especie de fitoplancton marino Olisthodiscus luteus, la cual fue factible de ser aislada y cultivada durante la ocurrencia de sus floraciones algales, entre los meses de Febrero a Diciembre de 2000 en la bahía de Miraflores (12° 04’ y 12° 07’ S), área del Callao (Figura 1). El muestreo se realizó mediante salidas al mar a bordo de una embarcación marisquera, empleándose para la colecta una red estándar de fitoplancton de 75 mm de apertura de poro y 13.5 cm de diámetro de boca, en arrastres superficiales durante 5 minutos a una velocidad de 2.5 nudos; registrándose detalles importantes tales como: lugar, fecha, hora, coloración, tiempo de duración, desplazamiento y condiciones ambientales (temperatura superficial del mar). Posteriormente, las muestras fueron trasladadas al Laboratorio de la Línea de Investigación en Ecotoxicología Acuática en la sede central del Instituto del Mar del Perú (IMARPE), donde una parte de ellas fueron utilizadas para la determinación taxonómica y cuantificación celular; mientras que el resto se empleó para el aislamiento y cultivo. Las muestras fueron observadas en un microscopio compuesto Nikon Eclipse E400 con ocular micrométrico, consultándose para la determinación taxonómica los trabajos de Schiller (1971a, b), Balech (1988) y Carmelo (1996). Una vez identificados los organismos, se procedió a su aislamiento mediante la técnica por sucesivas diluciones (Throndsen, 1995) (Figura 2). Está técnica es idónea cuando la especie fitoplanctónica que se desea aislar está en abundancia y al mismo tiempo tiene un tamaño inferior a 10 mm. El principio básico de esta técnica consistió en estimar la densidad poblacional en una muestra (conteo a través de microscopio) y efectuar las diluciones necesarias para reducir la densidad a una, o a pocas células. Generalmente, se tomó 1 mL de la muestra original y se agregó a un tubo de aislamiento conteniendo 5 mL del medio de cultivo, se homogenizó bien y luego se tomó 1 mL el cual se agregó al segundo tubo conteniendo también 5 mL del medio de cultivo, se homogenizó bien y así se continuó en forma sucesiva hasta completar 4 ó 5 tubos. El volumen de muestra que se obtuvo, así como el número de diluciones, dependió de la concentración de la especie. La técnica se aplicó empleándose tubos de aislamiento conteniendo el medio de cultivo “f/2” modificado de Guillard (1975), los cuales eran incubados en las condiciones que se describen para el mantenimiento de los cultivos. Para el seguimiento del aumento en número de células, se observaron detenidamente los tubos al microscopio los días 13 siguientes al aislamiento. Una vez alcanzado un crecimiento regular sin contaminación de otras especies (cultivos monoalgales) y con un número de células suficiente (un mínimo aproximado de 50–100 células), el siguiente paso fue la transferencia del cultivo a recipientes de mayor volumen, desde los cuales se realizaron las inoculaciones necesarias para el mantenimiento de las cepas. La aplicación de la técnica de aislamiento, así como el mantenimiento de los tubos, se realizó en una cámara isotérmica para cultivo de microalgas manteniéndose en todo momento estrictas condiciones de asepsia y esterilidad. Todas estas actividades se efectuaron en el Laboratorio de la Línea de Investigación en Ecotoxicología Acuática de IMARPE. Cultivo Se utilizó el medio de cultivo “f/2” modificado de Guillard (1975), excluyéndose el EDTA y los metales Cu, Zn y Mo; siendo la composición final la siguiente: El mantenimiento de los cultivos se efectuó principalmente en matraces de vidrio de 250 y 500 mL, pero paralelamente también se efectuaron cultivos de 1; 5 y 20 L. La manipulación del material, del medio y de los cultivos se realizó manteniendo en todo momento estrictas condiciones de asepsia. La temperatura de la cámara isotérmica se estableció teniendo en cuenta los requerimientos de todas las especies que se mantenían en la misma, para lo cual fue necesario buscar un consenso entre las temperaturas óptimas de mantenimiento de todas las cepas. Si bien el establecer ese punto no fue difícil debido a que casi todas las especies proceden de la misma zona, se observaron algunas diferencias en el mantenimiento de éstas en lo que concierne a la duración de las fases de crecimiento. Durante el mantenimiento de los cultivos resultó importante conocer las curvas de crecimiento de cada una de las especies, a fin de saber los días que tarda una cepa en alcanzar la última parte de la fase exponencial, la cual es la más idónea para realizar las transferencias a medio nuevo. En este sentido, los cultivos de 1 y 5 L permitieron establecer algunas diferencias en la duración de las distintas fases de crecimiento de las especies. Es así que se determinó que las cepas de O. luteus tienen una cinética de crecimiento rápida por lo cual era necesario realizar las transferencias de inóculos cada 9 días. Los cultivos de O. luteus se obtuvieron según la metodología descrita por Paniagua et al. (1989), utilizándose únicamente cultivos en su fase de declinamiento relativo del crecimiento, y evitar de esta manera cambios bruscos en la concentración del alimento; ya que los cultivos de 20 L serían los que se utilizarían para la alimentación de los mariscos durante la evaluación de la toxicidad. Finalmente, durante el mantenimiento de los cultivos también se realizó la medición de parámetros fisicoquímicos tales como: oxígeno disuelto, pH, salinidad y temperatura. El medio de cultivo se elaboró con agua de mar filtrada (0.45 mm Millipore) y autoclavada, a la cual luego de enfriar se le añadió las soluciones stock. Esto conforme con lo recomendado por Keller y Guillard (1985) y McLachlan (1973) respecto a que las soluciones stock deben ser añadidas en el momento en que se vaya a utilizar el medio. El mantenimiento de las cepas se realizó mediante la transferencia sucesiva de inóculos de los cultivos a medio nuevo, e incubándose en condiciones adecuadas. En el Laboratorio de la Línea de Investigación en Ecotoxicología Acuática de IMARPE, el mantenimiento de los cultivos se realizó en una cámara isotérmica a 20º + 1ºC, luz fluorescente tipo blanco-industrial, intensidades luminosas de aproximadamente 70mE.s-1.m-2 y ciclos continuos de 24 horas de luz. 14 La abundancia celular se cuantificó mediante el conteo adecuado de las células de O. luteus, distribuidas al azar. Se empleo un hemocitómetro Spencer Bright–Line de 0.1 mm de profundidad y una regla de Neubauer, la cual estaba dividida en dos cámaras, cada una de las cuales constaba de nueve cuadrados de 1 mm de lado; a su vez cada cuadrado estaba subdividido en pequeños cuadrados de 0.25 mm de lado. El volumen de suspensión algal en el cuadrado de 1 mm de lado era de 0.1 mm3 (10-4 cc). Para los conteos celulares (cel.mL-1) de cada especie se tomaron 6 muestras diarias, 3 muestras correspondientes a los cultivos de 1 L (A, B y C) y 3 correspondientes a los cultivos de 5 L (A, B y C), realizándose 4 repeticiones de conteo por muestra tomada, esto con la finalidad de incrementar la precisión del método de la cámara de Neubauer. La fórmula empleada para contar la densidad celular por mililitro con la ayuda del hemocitómetro fue: D = N x 104 Donde: D = Densidad microalgal (cel.mL-1) N = Promedio de los conteos Se consideraron los datos de abundancia celular desde el día de inoculación hasta el día de máxima abundancia, ajustándolos a un modelo de crecimiento poblacional logístico (Rabinovich, 1978): Nt = K / ( 1 + e a – r t ) Donde: Nt = Abundancia de la población en tiempo t (cel. mL-1) t = Tiempo (día) K = Capacidad de carga (estimada: 1.01 x abundancia máxima)(cel.mL-1) r = Tasa de crecimiento poblacional (día-1) a = Constante Todas las actividades de cultivo y cuantificación celular se efectuaron en el Laboratorio de la Línea de Investigación en Ecotoxicología Acuática de IMARPE. Procesamiento de datos A partir de los promedios de los conteos celulares de O. luteus, se obtuvieron los valores de abundancia celular. Dichos valores fueron ajustados a un modelo de crecimiento poblacional logístico, lo cual permitió obtener los parámetros poblacionales de capacidad de carga (K) y tasa de crecimiento (r). Todos los datos y gráficos fueron procesados en una hoja de cálculo Microsoft Excel XP para Windows. Resultados y Discusión Aislamiento La muestra de O. luteus fue colectada a partir de un parche fitoplanctónico, color marrón rojizo, ocurrido en la playa La Arenilla, bahía de Miraflores, durante los días 07 y 08 de Marzo del 2000. Durante este evento O. luteus fue la especie dominante llegando a alcanzar una concentración celular de 39 x 106 cel.L-1, asociada a temperaturas superficiales del mar (TSM) que variaron de 22.1º–22.5ºC , Otras especies acompañantes a O. luteus durante este evento fueron: C. fusus v. fusus, A. sanguinea, P. micans, y P. gracile. Las diatomeas no tuvieron significancia cuantitativa, registrándose sólo algunos individuos de Skeletonema costatum, Nitzschia closterium, Schroderella delicatula y Thalassiosira subtilis. En relación a esto, Ochoa y Antonietti (1987) mencionan que en un estudio realizado por IMARPE en el área del Callao durante 4 años, se registró la presencia de O. luteus en forma continua, alternando en abundancia con la diatomea S. costatum. Esta alternancia está relacionada a sustancias de bajo peso molecular que O. luteus sintetiza y excreta, y que probablemente actúan como antibióticos algales que inhiben el crecimiento de las diatomeas (Verity, 1982). En este sentido, la casi ausencia de diatomeas en la floración algal en mención, reitera y corrobora esta información. Para el aislamiento se empleo la técnica por sucesivas diluciones, debido a que la especie estaba en abundancia, y al mismo tiempo tenía un tamaño inferior a 10 mm. O. luteus se diferencia de otras rafidofíceas marinas por su carácter bentónico, mientras que el resto de las especies son planctónicas. Las células de O. luteus se han adaptado a la vida bentónica adquiriendo una forma muy aplanada; el flagelo frontal arrastra a la célula hacia delante y el posterior se proyecta hacia atrás y se adhiere a las superficies sólidas, incluso al portaobjetos cuando se examinan ejemplares al microscopio óptico. La célula se desliza sin rotar a lo largo de la superficie. Las células que son similares en cierto modo a Heterosigma, son menos aplanadas y rotan alrededor del eje longitudinal mientras nadan. Las células de O. luteus presentaron forma ovoide y tamaño pequeño (longitud: 12–23 mm; ancho: 10–13 mm), éstas se desplazaban ayudadas por dos flagelos, en forma de látigos, los cuales surgían del interior de la célula, uno en dirección anterior y el otro en dirección opuesta. Las células de O. luteus no rotaban pero sí exhibían un nado hacia adelante el cual les permitía avanzar. Cada célula contenía 5–13 cloroplastos amarillentos con forma de disco, los cuales se encontraban localizados únicamente en la periferia, mientras que la zona ventral estaba desprovista de éstos. El pirenoide de cada célula se mostraba libre de tilakoides, pero se encontraba invaginado por estructuras tubulares; asimismo las células no presentaron vacuolas contráctiles, mucocistos, ni cuerpos lipídicos. O. luteus, al igual que todas las rafidofitas, no posee escamas superficiales y la identificación se basó principalmente en el tamaño y forma de la célula. Por desgracia, esta especie al igual que muchas otras pertenecientes a esta división, son excepcionalmente difíciles de fijar y explotan o cambian drásticamente de forma durante el intento (Moestrup, 2002); por este motivo, la identificación se debió hacer con células vivas, resultando aún así dificultosa. 15 Figura 3. Curvas de crecimiento poblacional de tres cultivos de 1 L de O. luteus (a, b y c) y la curva promedio según el modelo logístico (d). Cultivo Los parámetros de la curva de crecimiento poblacional obtenidos con los datos de abundancia celular de los tres cultivos de 1 L de O. luteus se presentan en la Tabla 1. Tabla 2. Tasa de crecimiento poblacional (r) y capacidad de carga (K) de tres cultivos de 5 L de O. luteus. Tabla 1. Tasa de crecimiento poblacional (r) y capacidad de carga (K) de tres cultivos de 1 L de O. luteus. En promedio, las curvas de crecimiento poblacional de O. luteus en 1 y 5 L están representadas según los siguientes modelos (Figura 3d y 4d): Los datos observados y simulados según el modelo de crecimiento logístico de los tres cultivos se muestran en la Figura 3. Los parámetros de la curva de crecimiento poblacional obtenidos con los datos de abundancia celular de los tres cultivos de 5 L de O. luteus se presentan en la Tabla 2. Los datos observados y simulados según el modelo de crecimiento logístico de los tres cultivos se muestran en la Figura 4. 16 En 1 L: Nt = 155 206.700 / ( 1 + e 3.1924 - 0.6239 t ) En 5 L: Nt = 166 612.967 / ( 1 + e 2.3827 - 0.4933 t ) La tasa de crecimiento poblacional (r) promedio de O. luteus en 1 L fue de 0.6239 día-1 y la capacidad de carga (K) promedio de 155206.7 cel.mL-1; mientras que respecto a los cultivos de 5 L, los valores promedio de tasa de crecimiento y capacidad de carga fueron 0.4933 día-1 y 166612.967 cel.mL-1, respectivamente. En este sentido, no hay información disponible en el Perú sobre abundancia celular de O. luteus a partir de cultivos de laboratorio, por lo cual se consideraría a este trabajo como el punto de partida en las investigaciones sobre cultivos de este fitoflagelado, en condiciones controladas. Los tres cultivos (A, B y C) de 1 L y de 5 L de O. luteus permitieron establecer que las transferencias de inóculos a medio nuevo se debían realizar cada 9 días, ya que esta especie tiene una cinética de crecimiento muy rápida, siendo este período de tiempo aproximado el que necesitan los cultivos, en ambos volúmenes (1 L y 5 L), para llegar a la última parte de la fase exponencial. Asimismo, para los tres cultivos de 1 L se emplearon inóculos de 20 mL con concentraciones iniciales de 1500–2000 cel. mL-1; mientras que para los tres cultivos de 5 L se emplearon también inóculos de igual volumen pero con concentraciones iniciales del orden de 7500– 10000 cel.mL-1; asegurándose de esta manera el inicio óptimo de todos los cultivos en ambos volúmenes. Los cultivos de O. luteus se caracterizaron por el hecho de que una vez alcanzada la fase estacionaria, estos decaen muy rápidamente y de manera brusca; debido a ello es que los cultivos de esta especie requirieron de muchos cuidados, ante lo cual fue también conveniente transferir los cultivos antes de alcanzar la fase estacionaria. Adicionalmente, tanto los cultivos de 1 L como los de 5 L se efectuaron con aireación, lo cual aseguró la óptima recirculación y aprovechamiento de los nutrientes del medio. En este sentido y a manera de comparación, es importante mencionar que en condiciones naturales los factores más importantes que determinan la proliferación de O. luteus son: la disminución de la salinidad, el incremento de la temperatura y la elevada concentración de nutrientes tales como fosfatos y nitratos (Ochoa y Antonietti, 1987). Los valores de oxígeno disuelto, pH, salinidad y temperatura obtenidos a partir de los cultivos de 1 y 5 L de O. luteus se muestran en las Figuras 5 y 6, respectivamente. Las concentraciones de oxígeno disuelto medidas en los cultivos de 1 L de O. luteus fluctuaron entre 6.08 y 6.50 mg.L-1; mientras que para los cultivos de 5 L el rango fluctuó entre 6.20 y 6.65 mg.L-1. En este sentido, la amplitud de rango en ambos volúmenes, fue pequeña debido a que la duración de los cultivos fue menor en número de días, a causa de la cinética de crecimiento de esta especie. Adicionalmente, el hecho de que los cultivos se desarrollaran con aireación constante permitió que los valores se mantuvieran estables y por encima de 6.0 mg.L-1 en ambos volúmenes. Los valores de pH medidos en los cultivos de 1 L de O. luteus oscilaron entre 7.98–9.48; mientras que para los cultivos de 5 L el rango fluctuó entre 7.95–9.38. En ambos volúmenes los valores se incrementaron conforme los cultivos crecían, alcanzando sus valores máximos al llegar a la fase de declinamiento relativo del crecimiento. Adicionalmente, al igual que en el caso de los valores de oxígeno disuelto, la amplitud de rango de los valores de pH en ambos volúmenes fue pequeña, esto a consecuencia también de que la duración de los cultivos fue menor. Cabe resaltar que en el caso de los cultivos de O. luteus, los valores de pH luego de la etapa de declinamiento relativo descienden gradualmente, ello debido a que los cultivos inician la fase de muerte, lo cual provoca la aparición de materia orgánica y por ende una ligera acidificación del medio. Figura 4. Curvas de crecimiento poblacional de tres cultivos de 5 L de O. luteus (a, b y c) y la curva promedio según el modelo logístico (d). 17 Figura 5. Curvas de oxígeno disuelto (a), pH (b), salinidad (c) y temperatura (d) de tres cultivos de 1 L de O. luteus. Las salinidades medidas en los cultivos de 1 L de O. luteus fluctuaron entre 34.8–36.2 o/oo, mientras que para los cultivos de 5 L el rango fluctuó entre 34.9–36.2 o/oo. En este sentido, los valores de salinidad se mantuvieron estables en el orden de 35.0 o/oo durante la mayoría de días de cultivo, en ambos volúmenes. Salinidades del orden de 36.0 o /oo en ambos volúmenes, estuvieron asociadas al final de la fase exponencial y al inicio de la fase de declinamiento relativo, debiéndose este incremento al desgaste propio del cultivo en las últimas etapas también (Fogg, 1965). Conclusiones Respecto a los valores de temperatura, éstos se mantuvieron prácticamente estables; para los cultivos de 1 L los valores oscilaron entre 20.2º–20.5ºC, mientras que para los cultivos de 5 L el rango fluctuó entre 20.2º–20.6ºC. Tal vez si el rango de temperatura fijo establecido (20º + 1ºC) para la cámara isotérmica hubiese sido más elevado, la cinética de crecimiento de O. luteus habría sido mayor, sin embargo, el mantenimiento de los cultivos en los rangos mencionados permitió que éstos se mantuvieran la mayor parte del tiempo en la fase exponencial, lográndose nuevamente cultivos más estables y cómodos de manejar. Agradecimientos Como se mencionó anteriormente, la salinidad y la temperatura son dos de los factores más importantes que gobiernan las poblaciones de O. luteus. En este sentido, el descenso de la salinidad en el mar a causa del drenaje del río Rímac, unido al aumento estacional de temperatura, crean un ambiente propicio para el desarrollo masivo de esta especie en el área del Callao. 18 - Las células de O. luteus se aislaron del ambiente natural a través del empleo de la técnica de aislamiento por sucesivas diluciones. - O. luteus cultivado a 1 L en laboratorio logró una tasa de crecimiento poblacional de 0.6239 día-1 y una capacidad de carga de 155206.700 cel.mL1 ; mientras que cultivado a 5 L alcanzó una tasa de crecimiento poblacional de 0.4933 día-1 y una capacidad de carga de 166612.967 cel.mL-1. Al Instituto del Mar del Perú por las facilidades brindadas, y a todas las personas que directa e indirectamente colaboraron en la ejecución de esta investigación. Literatura citada • Balech, E. 1988. Los dinoflagelados del Atlántico Sudoccidental. Pub. Esp. Inst. Esp. Oceanog. 1: 310 pp. • Carmelo, R. 1996. Identifying marine diatoms and dinoflagellates. Academic Press, Inc. New York: 598 pp. • Estrada, M. 1993. Sucesión fitoplanctónica y mareas rojas. En: Actas del aula de trabajo sobre purgas de mar y fitoplancton tóxico en la península Ibérica. Fraga, S. (ed.). Instituto Español de Oceanografía. Madrid, España. (144): 7. • Fogg, G. 1965. Algal cultures and phytoplankton ecology. Univ. Wisconsin Press: 126 pp. 6.70 9.60 9.40 6.60 9.20 6.55 9.00 6.50 Cult ivo A Cult ivo B Cult ivo C 6.45 6.40 6.35 pH Oxígeno disuelto (mg/L) 6.65 8.60 8.40 6.30 8.20 6.25 6.20 6.15 Cult ivo A Cult ivo B Cult ivo C 8.80 8.00 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 7.80 10 T iempo (días) 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 T iempo (días) a) Oxígeno disuelto b) pH 20.7 36.4 36.2 20.6 35.8 Temperatura (ºC) Salinidad (ppm) 36.0 Cult ivo A Cult ivo B Cult ivo C 35.6 35.4 20.5 Cult ivo A Cult ivo B Cult ivo C 20.4 20.3 35.2 20.2 35.0 34.8 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 20.1 10 T iempo (días) 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 T iempo (días) c) Salinidad d) Temperatura Figura 6. Curvas de oxígeno disuelto (a), pH (b), salinidad (c) y temperatura (d) de tres cultivos de 5 L de O. luteus. • Guillard, R. 1975. Culture of phytoplankton for feeding marine invertebrates. In: Culture of Marine Invertebrate Animals. W. L. Smith and M. H. Chanley (eds.). Plenum Press, Nueva York: 29–60. monographischer Behandlung. 2 Tell. In: KryptogamenFlora von Deutschland, Osterreich und der Schweiz. Rabenhorst, L. (ed.). Reprint by Johnson Repr. Corp. New York, 1971, Vol 10 Section 3, Parte 2: 589 pp. • Hallegraeff, G. 1993. A review of harmful algal blooms and their apparent global increase. Phycologia. 32 (2): 79–99. • Schiller, J. 1971b. Dinoflagellate (Peridinae) in monographischer Behandlung. 2 Tell. In: KryptogamenFlora von Deutschland, Osterreich und der Schweiz. Rabenhorst, L. (ed.). Reprint by Johnson Repr. Corp. New York, 1971, Vol 10 Section 3, Parte 1: 617 pp. • Keller, D.; Guillard, R. 1985. Factors significant to marine dinoflagellate cultura. En: Toxic Dinoflagellates. Proc. Third Int. Conf. on Toxic Dinoflagellates (8–12 de junio, 1985. St. Andrews, Canadá). D. M. Anderson et al. (eds.). Elsevier, Nueva Cork: 113–116. • McLachlan, J. 1973. Growth media–marine. En: Handbook of Phycological Methods. Cultura methods and growth measurements. J. R. Stein (ed.). Cambridge University Press. Londres y Nueva York: 25–51. • Throndsen, J. 1995. Estimating cell numbers In: Manual on Harmful Marine Microalgae. Hallegraeff, G.; Anderson, D.; Cembella, A. (eds.). IOC Manuals and Guides No 33. UNESCO 1995. Paris, France: 63–80. • Venkataraman, G. 1969. The cultivation of algae. Indian Council of Agricultural Research. New Delhi: 319 pp. • Moestrup, Ø. 2002. Fitoflagelados potencialmente toxígenos en el Cono Sur Americano. En: Floraciones Algales Nocivas en el Cono Sur Americano. Sar, E.; Ferrario, M.; Reguera, B. (eds.). Instituto Español de Oceanografía. Madrid, España: 157–166. • Verity, P. 1982. Effects of temperatura, irradiance and daylength on the marine diatom Leptocylindrus danicus Cleve. IV. Growth. J. exp. mar. Biol. Ecol., 60: 209–222. • Ochoa, N.; Antonietti, E. 1987. Exploración de mareas rojas en el área del Callao. Area de Fitoplancton y Producción Primaria. Inf. Int. Inst. Mar Perú. Callao, Perú. _______________________________ • Paniagua, J.; Buckle, L.; Granados, C.; Loya, D. 1989. Manual de metodologías y alternativas para el cultivo de microalgas. Inf. Especial. OC–89-01. México: 63 pp. • Rabinovich, J. 1978. Ecología de poblaciones animales. Colección de Monografías Científicas. Serie de biología Nº 21. Chesneau, E. (ed.). OEA. Washington, D. C.: 114 pp. • Sánchez, S.; Delgado, E. 1996. Mareas rojas en el área del Callao (12º S) 1980–1995. Inf. Progr. Inst. Mar Perú. Callao, Perú. 44: 19–37. • Schiller, J. 1971a. Dinoflagellate (Peridinae) in Maestría en Ecología Aplicada. Universidad Nacional Agraria La Molina. Av. La Molina s/n. La Molina. Lima, Perú. jmgcch@ hotmail.com 1 Maestría en Ecología y Gestión Ambiental. Universidad Ricardo Palma. Av. Benavides 5440. Santiago de Surco. Lima, Perú. Aptdo. Postal 1801. [email protected] 2 Centro de Investigaciones en Modelado Oceanográfico y Biológico Pesquero. Instituto del Mar del Perú. Esquina Gamarra y General Valle s/n. Chucuito. Callao, Perú. [email protected] 3 Area de Recursos y Medio Ambiente. Facultad de Pesquería. Universidad Nacional Agraria La Molina. Av. La Molina s/n. La Molina. Lima, Perú. [email protected] 4 19 El número de aerobios mesófilos como bioindicador de la vida útil del filete de tilapia (oreochromis spp.) Refrigerada *Dr. José Zamora Laborde * (Resumen de Tesis de Grado para la obtención del título de Magíster en Ciencias con Énfasis en Manejo Sustentable de Recursos Bioacuáticos y el Medio Ambiente) RESUMEN Las bacterias aerobias mesófilas son microorganismos muy comunes y su presencia caracteriza la salubridad de los alimentos, además del tiempo de vida útil del mismo. Existe la necesidad de definir la cantidad de aerobios que crecen en la faena de una tilapia y la cantidad que se reproducen durante el tiempo de proceso de dicho filete para poder determinar dicho tiempo de vida útil. La cantidad de aerobios mesófilos es determinada, de la acuerdo a la práctica internacional, hasta que llega al enfriamiento a -1ºC y el filete es empacado para su comercialización. En esta investigación se relaciona el número de aerobios mesófilos con el tiempo de vida útil de los filetes refrigerados de la Tilapia (0reochromis spp) a temperatura constante de 1-5 °C, con el propósito de determinar el tiempo de vida útil máximo para que el filete sea apto para el consumo humano. Los resultados obtenidos permiten asumir que el número de aerobios mesófilos es un indicador aceptable para la determinación del tiempo de vida útil, sin necesidad de realizar pruebas organolépticas ya que estas resultan inexactas. A los 15 días, es 20 decir, 2231 UFC/gramo como promedio, se inicia la descomposición, presentándose flaccidez en el músculo, olor característico de descomposición y cambio de color de blanco a pardo rojizo, lo que indica que la carne no está apta para ser consumida. Palabras Claves: Aerobios Mesófilos, Oreochromis spp, vida útil, filetes refrigerados. ABSTRACT Mesophilic aerobic bacteria are common microorganisms and their presence characterizes the safety of food in addition to the lifetime of it. There is a need to define the number of aerobes that grow at the site of a tilapia and how much time play during the fillet process to determine the lifetime. The number of aerobic mesophilic is determined, according to the international practice, until it reaches the cooling to -1 ° C and the filet is packaged for marketing. This research relates the number of aerobic mesophilic the lifetime of chilled fillets of Tilapia (Oreochromis spp) at constant temperature of 1-5 ° C, in order to determine the maximum lifetime for the steak is fit for human consumption. The results obtained allow assuming that the number of aerobic mesophilic bacteria is an acceptable indicator for determining the shelf life, without organoleptic testing because these are inaccurate. At 15 days, ie 2231 UFC / gram on average, decomposition is initiated, occurring in the muscle flaccidity, characteristic odor of decomposition and color change from white to reddish brown, indicating that the meat is not fit to be consumed. con el tiempo de vida útil de los filetes refrigerados de la Tilapia (Oreochromis spp) a temperatura constante de 1-5 °C? Specific words: Aerobic mesophilic, Oreochromis spp, shelf life, chilled fillets. OBJETIVOS ESPECÍFICOS 1.- INTRODUCCIÓN OBJETIVO GENERAL Evaluar la relación existente entre el número de aerobios mesófilos y el tiempo de vida útil de los filetes refrigerados de la Tilapia (Oreochromis spp) a temperatura constante de 1-5 °C. • Determinar el número de aerobios mesófilos a los 0, 5, 10, 15 días después de producido, de una muestra de filete de tilapia a temperatura constante de refrigeración de 1-5 °C. Las bacterias aerobias mesófilas son muy comunes y caracterizan la salubridad de los alimentos, además del tiempo de vida útil del mismo, por lo que es necesario definir la cantidad de aerobios que crecen en la faena de una tilapia y qué cantidad se reproducen durante el tiempo de proceso de dicho filete, hasta que llega al enfriamiento a -1ºC y es empacado para su comercialización. • Cuantificar el crecimiento bacteriano en relación con el tiempo de conservación del filete. En este medio el tiempo de vida útil que se le otorga a un producto fresco perecible es de aproximadamente tres días; en el estudio realizado se llegó hasta que este producto sea consumible en un tiempo mayor y que su vida útil sea superior, tomando en consideración a las especificaciones microbiológicas, entiéndase como el máximo número aceptable de microrganismos o de tipos específicos de microrganismos, determinado por los métodos precisos, en alimento comprado por una firma u organismo para su propio uso. • Diseñar un procedimiento para la determinación del tiempo de vida útil de los filetes refrigerados de la Tilapia (Oreochromis spp) a temperatura constante de 1-5 °C a partir del conteo de aerobios mesófilos. El motivo del estudio es lograr que los filetes de tilapia puedan ser consumidos en un lugar mucho más lejano del que se lo procesa, por lo que se necesita corroborar que tenga un tiempo de vida útil mucho más largo que el que exigen las leyes de salud; para ello, se emplearon técnicas microbiológicas descritas en el manual de la ICMSF (Microrganismos de los Alimentos –Técnicas de análisis microbiológicoVolumen 1), específicamente para la determinación cuantitativa de Aerobios Mesófilos. Se empleó el método de recuento en placas que es el más comúnmente utilizado en este tipo de determinaciones. Este método tiene especial aplicación en los alimentos importados porque en este caso el país importador no tiene la posibilidad de poder controlar el grado de limpieza y desinfección practicado en las industrias productoras de alimentos. PROBLEMA DE INVESTIGACIÓN ¿Cómo se relaciona el número de aerobios mesófilos • Comparar los resultados obtenidos con los estándares AOAC de crecimiento bacteriano para un alimento. • Determinar el tiempo de vida útil máximo para que el filete sea apto para el consumo humano. 2.- REVISION DE LA LITERATURA La Tilapia roja (Oreochromis mosssambicus spp.), también conocida como Mojarra roja, es un pez que taxonómicamente no responde a un solo nombre científico. Es un híbrido producto del cruce de cuatro especies de Tilapia: tres de ellas de origen africano y una cuarta israelí. Son peces con hábitos territoriales, agresivos en su territorio el cual defiende frente a cualquier otro pez, aunque en cuerpos de aguas grandes, típicos de cultivos comerciales, esa agresividad disminuye y se limita al entorno de su territorio. En cuanto al dimorfismo sexual de la especie, se ha mencionado que los machos son más grandes y poseen mayor brillo y color, que las hembras. La reproducción se caracteriza por ocurrir una incubación bucal, además de que se cuida la cría. Respecto a su alimentación, la tilapia roja, come todo tipo de alimentos vivos, frescos y congelados. Asimismo aceptan alimentos secos para peces, en particular pellets humectados previamente. Los machos de la tilapia crecen más rápidamente y alcanza un tamaño mayor que la hembra. En cultivo 21 comercial alcanzan dimensiones de hasta 39 cm, aunque en acuario un poco menos. (Jiménez, 2007). La tilapia o Mojarra Negra (Oreochromis niloticus), especie originaria de África. Su régimen alimentario en ambientes originarios es a base de fitoplancton y detritus orgánicos. Su rango óptimo de producción es con temperaturas de 25-30 °C. Son sensibles a bajas temperaturas, con un límite letal de cerca de los 9 a 13 °C. Es una de las especies más altamente cultivada en todo el mundo. (Jiménez, 2007). Los microrganismos son los agentes más importantes en la alteración del pescado fresco ya que son los que originan los sabores particularmente indeseables ligados a la alteración. Por tanto, el control de la alteración es en gran parte, el control de los microrganismos. (Connel, 1978). Los microrganismos se encuentran en la superficie externa y en las vísceras del animal pero durante la vida no invaden la carne estéril debido a que está protegido por las defensa naturales. (CORPEI, 2001) Guijarro (2007), estudia el desarrollo de un sistema de envase y embalaje para la exportación del filete de tilapia roja ecuatoriana hacia el mercado norteamericano. El autor analiza los factores que influyen dentro de la producción del filete de tilapia roja y las alternativas de los diferentes tipos de envases que sirvan para la exportación de este producto. Adicionalmente se analiza todas las normas exigidas por el Gobierno Federal Norteamericano para la importación de productos alimenticios; y la normas exigidas por el gobierno Ecuatoriano para la exportación de productos alimenticios. El estudio concluye acotando que si se utiliza un sistema de envase y embalaje adecuado para la exportación del filete de tilapia roja, este no tendrá ningún inconveniente en poder ingresar al mercado norteamericano. Finalmente se propone un sistema de envase para la exportación del filete del tilapia roja Ecuatoriana. Fiallos (2010), indica que el uso de una atmósfera modificada en el empaque de productos alimenticios es un método poco difundido en el Ecuador, convirtiéndose en un área interesante para la investigación y el desarrollo de nuevos productos los cuales permitirían a la industria alimenticia ecuatoriana incursionar en nuevos mercados. El objetivo del trabajo fue determinar que tanto se puede alargar el tiempo de vida útil de la tilapia fresca sin afectar la línea de sangre, teniendo en cuenta que el pescado es un producto altamente perecedero debido a las condiciones óptimas que presenta para 22 el crecimiento de microrganismos y la facilidad de descomponerse tanto por reacciones enzimáticas como bioquímicas. La principal ventaja del uso de EAM es el de poder extender el tiempo de vida útil de un producto sin alterar sus propiedades físicas, químicas y organolépticas permitiendo llevar un producto más fresco al consumidor final. Otra ventaja importante es la eliminación total de aditivos y preservantes, usados tradicionalmente en las industrias alimenticias, los cuales aumentan la desconfianza del consumidor optando por productos más naturales. De acuerdo a Suárez (2010), mediante la hidrólisis enzimática de proteínas hasta péptida o aminoácidos, por la acción de enzimas proteolíticas se obtienen hidrolizados con una composición final que los hace aplicables en la tecnología alimentaria por sus propiedades nutricionales o funcionales. Además del proceso de hidrólisis, la autora plantea que existen una serie de factores que necesitan considerarse, como la naturaleza y calidad de la materia prima, la enzima escogida y las condiciones de reacción. Usando como sustrato de proteína filetes de tilapia roja y evaluando sobre éstos diferentes concentraciones de enzimas, se obtuvieron hidrolizados con diferentes valores de actividad emulsionante y de solubilidad. Fue posible además proponer un diseño conceptual para la obtención de hidrolizados comprendiendo las variables y condiciones de reacción. Según Álvarez et al. (2004), el uso indiscriminado de los antimicrobianos ejerce fuerte presión selectiva en las bacterias, lo que causa el surgimiento y diseminación de genes de resistencia a ellos. Los autores evaluaron la resistencia bacteriana en tilapias silvestres y cultivadas y determinaron la concentración inhibitoria mínima para los antimicrobianos seleccionados. La sensibilidad fue evaluada utilizando dos métodos: uno semi cuantitativo de difusión a partir del disco en agar Mueller-Hinton y uno cuantitativo determinando la concentración inhibitoria mínima (CIM). Se registraron variaciones en las diferentes especies, detectándose multi-resistencia en todas las bacterias, con una mayor resistencia en ambiente de cultivo (8-12 compuestos) que en ambiente natural. El ácido oxolínico, compuesto ampliamente usado en la acuicultura y que carece de importancia en salud pública, parece ser el más útil en inhibir el desarrollo de estas bacterias, con una CIM en el rango de 0,5–10 μg/ml. La elevada resistencia y los valores amplios de CIM detectados destacan el hecho de que el uso de los antimicrobianos debe realizarse en forma responsable, con un estudio previo de la resistencia in vitro, para evitar la selección de cepas bacterianas resistentes. Morales et al. (2004), evaluaron la flora normal y patógena asociada a la tilapia (Oreochromis niloticus). Con este propósito, determinó el Recuento Total Aerobio (RT), el número de Coliformes totales (CT) y Coliformes fecales (CF), Enterococcus spp., Aeromona spp., bacterias lácticas y la presencia de Listeria spp y Salmonella spp. a partir de la superficie externa de la tilapia. Los resultados obtenidos confirman, desde el punto de vista microbiológico, la frescura de las tilapias al momento de su análisis, sin embargo, los niveles de coliformes encontrados fueron inaceptables para el consumo humano. Los autores no lograron aislar Listeria spp., pero el aislamiento de Salmonella spp confirmó la contaminación fecal de las aguas de crianza de la tilapia, aparte de su importancia a nivel de salud pública. También se encontró que la tilapia presenta un número elevado de Aeromona spp como parte de su flora normal, por lo que se recomienda incluir este género dentro de las normas de calidad para pescado fresco. Según los datos obtenidos, no existe diferencia significativa (95% de confianza) entre el RT, los niveles de CT y CF, Enterococcus spp y Aeromona spp a partir de la tilapia proveniente de criaderos. (Morales et al. 2004) Morales et al. (2004), compararon los resultados de recuento total aerobio con los parámetros establecidos por al ICMSF (International Comission for the Microbiological Examination of Foods, 1998) para pescado crudo (10); se encontró que únicamente 12% de las muestras presentan una aceptación marginal y ninguna sobrepasa el límite de 107 UFC/g, lo cual refleja la frescura del producto en el momento del análisis. Un segundo parámetro contemplado por la ICMSF para pescado crudo establece un límite máximo de 5,0 x 102 UFC/g para Coliformes fecales; 58% de las muestras evaluadas presentaron valores superiores y por lo tanto inaceptables. Tome et al.(2009), evalúan el impacto de tres temperaturas de almacenamiento en el rigor mortis y en la estabilidad de la tilapia (O. mossambicus x O. urolepis hormorum x O. niloticus x O. aureus) durante su almacenamiento. Para la determinación del índice del rigor (IR) de las tilapias sometidas a tres temperaturas de almacenamiento se utilizó el método de desplazamiento horizontal. Las concentraciones individuales de los nucleótidos se determinaron usando cromatografía líquida de alta resolución (HPLC). Los cambios sensoriales fueron evaluados durante 21 días de almacenamiento refrigerado, mediante una escala descriptiva. También se hicieron mediciones del pH muscular y del Nitrógeno Básico Volátil Total (NBV-T). El rigor mortis ocurrió más tempranamente en el pescado almacenado a 0° C (24 h) en comparación con el pescado almacenado a 10° C (48 h) y a 27° C (no se alcanzó 100% de IR). El pH cayó más rápidamente (P<0.05) en el pescado almacenado a 10° C. Al final del almacenamiento, el NBV-T no superó los 30 mg N/100 g permitidos en productos pesqueros. Para cada condición de temperatura, la tilapia parece acumular hipoxantina (Hx) junto con pequeñas cantidades de inosina (INO) paralelamente con la degradación de inosina monofosfato (IMP). La evaluación sensorial indicó una vida útil de 21 días para las tilapias almacenadas a 0° C en comparación con 9 días para las tilapias almacenadas a 10° C Suárez et al. (2007), estudian la conformación e importancia del tejido conectivo de la carne de los peces. Los investigadores plantean que ablandamiento post mortem en los peces es un factor de calidad directamente influenciado por las características de los colágenos presentes en cada especie. La degradación del colágeno está relacionada con los fenómenos que acontecen durante el almacenamiento en frío o congelamiento. Varias investigaciones han demostrado a través de análisis bioquímicos y, principalmente, a través de microscopia electrónica de barrido y transmisión, que la pérdida de la textura en la carne de los peces es uno de los efectos ocasionados por la degradación del tejido conectivo peri celular y no por el tejido conectivo intersticial. En la actualidad son propuestas algunas prácticas pos cosecha para disminuir este fenómeno. De acuerdo a los autores anteriormente citados, generalmente el término “calidad” se refiere a la apariencia estética y frescura, o al grado de deterioro que ha sufrido el pescado. También puede involucrar aspectos de seguridad como: ausencia de bacterias peligrosas, parásitos o compuestos químicos. Es importante recordar que “calidad” implica algo diferente para cada persona y es un término que debe ser definido en asociación con un único tipo de producto. Por ejemplo, generalmente se piensa que la mejor calidad se encuentra en el pescado que se consume dentro de las primeras horas post mortem. Sin embargo, el pescado muy fresco que se encuentra en rigor mortis es difícil de filetear y desollar, y generalmente no resulta apropiado para ahumar. Así, para el procesador, el pescado de tiempo ligeramente mayor que ha pasado a través del proceso de rigor es más deseable. (Suárez et. al. 2007) De acuerdo a Huss (1999), los métodos para la 23 evaluación de la calidad del pescado fresco pueden ser convenientemente divididos en dos categorías: sensorial e instrumental. Dado que el consumidor es el último juez de la calidad, la mayoría de los métodos químicos o instrumentales deben ser correlacionados con la evaluación sensorial antes de ser empleados en el laboratorio. Sin embargo, los métodos sensoriales deben ser realizados científicamente; bajo condiciones cuidadosamente controlados para que los efectos del ambiente y prejuicios personales, entre otros, puedan ser reducidos. La evaluación sensorial es definida como una disciplina científica, empleada para evocar, medir, analizar e interpretar reacciones características del alimento, percibidas a través de los sentidos de la vista, olfato, gusto, tacto y audición. La mayoría de las características sensoriales sólo pueden ser medidas significativamente por humanos. Sin embargo, se han efectuado avances en el desarrollo de instrumentos que pueden medir cambios individuales de la calidad. Los instrumentos capaces de medir parámetros incluidos en el perfil sensorial son: el Instron y el Reómetro de Bohlin, para medir la textura y otras propiedades geológicas. Métodos microscópicos, combinados con el análisis de imágenes, son usados para determinar cambios estructurales y la “nariz artificial” permite evaluar el perfil de olor (Nanto et al., 1993). HIPÓTESIS El número de aerobios mesófilos determina el tiempo de vida útil de los filetes refrigerados de la Tilapia (Oreochromis spp) a temperatura constante de 1-5 °C. 3.- MATERIALES Y MÉTODOS Se estudiaron filetes de tilapia Oreochromis spp desarrolladas en piscinas de crecimiento de acuicultura del sector de Taura, Guayas. Las tilapias fueron transportadas vivas entre 18-22 °C en camiones-cápsula, degolladas, desangradas y descamadas; de cada tilapia se obtuvieron dos filetes, de lomo y de panza. El filete ya procesado se empacó en la empresa en cajas de poli estireno expandido de cinco libras de capacidad. Se tomó una caja de cada lote de muestra; se retiró un filete, se cortó y macero con agua de peptona 0.1%. Se prepararon tres diluciones de 1/10, 1/100 y 1/1000. Cada dilución se sembró en agar PCA para el conteo de aerobios totales a 35 °C durante 48 horas. Asimismo, se sembró para la determinación de coliformes totales, fecales y Escherichia coli, con la técnica del Numero Más Probable (NMP). Se utilizó 24 la técnica bioquímica del IMViC para la identificación de E. coli. Los medios de cultivo se esterilizaron en una autoclave vertical All American, Modelo NO 25X. Todo el material de vidrio que fue empleado, se esterilizo en equipos Memmert de 3 bandejas, modelo U 10 y AESCULAP Modelo ISO 400. Las muestras de tilapia fueron pesadas en una balanza analítica Mettler H31AR y posteriormente incubadas en estufas de cultura Memmert, modelo INB 200, Fanem Modelo 002CB y BLUE M Modelo G1008-Q. Los reactivos preparados se mantuvieron en un refrigerador Indurama Multiflow. Las contra muestras se guardaron en un Congelador SMC vertical Las muestras se incubaron en un Termostaic Bath, DSB 100, previo a la identificación de E. coli. METODOLOGÍA Se siguió la metodología establecida por The International Commission (1996). • Preparar la muestra de Filetes de Tilapia troceándola o cortándola en trozos medianos y dejándola macerar con agua de peptona 0,1 %. • Pipetear por duplicado en placas de petri, alícuotas de 1 ml de las diluciones 1/10, 1/100, 1/1000, 1/10000, y 1/100000, se aconseja esta serie de diluciones en aquellos casos en que se desconoce el número aproximado de microrganismos presentes en la muestra, de todos modo debe sembrase tres diluciones seguidas. • Fundir el agar PCA utilizando vapor o agua hirviente, templar el medio a 44 – 46 °C y controlar cuidadosamente su temperatura, verter inmediatamente en las placas de Petri 10 – 15 ml de medio fundido y templado. • Acto seguido, mezclar el inoculo con el medio fundido, de la forma siguiente: (a) imprimir a la placa movimientos de vaivén 5 veces en una dirección, (b) hacerla girar 5 veces en sentido de las agujas del reloj, (c) volver a imprimir movimientos de vaivén en una dirección que forme ángulo recto con la primera y (d) hacerla girar 5 veces en sentido contrario a las agujas del reloj. • Una vez solidificado el agar, invertir las placas e incubarlas a 35 °C +- 1 °C durante 48 horas. • Para el cálculo del recuento en placa elegir las dos placas, que presenten entre 30 y 300 UFC. Contar todas las colonias de cada placa, hallar la media aritmética de los dos valores y multiplicarla por el factor de dilución (la inversa de la dilución cuyas placas han sido seleccionadas). Dar el valor obtenido como el recuento en placa. • Para el cálculo y presentación de los resultados, deben utilizarse únicamente dos cifras significativas, que corresponden a los dígitos primero y segundo de la media de las colonias halladas. Los dígitos restantes tienen que ser sustituidos por ceros. LA MUESTRA: De la producción se muestreo una caja diaria de 10 libras, seleccionada de forma aleatoria. Cada muestra fue conservada en refrigeración durante los quince días de la investigación. RECOLECCIÓN DE DATOS: Los resultados se ingresaron a una base de datos en Excel. La información introducida en la base de datos fue obtenida a partir del tercer día después de la siembra microbiológica. IMPACTO ECOLÓGICO: El proceso productivo de los filetes de tilapia en la planta en donde se realizó la investigación de vida útil cuenta con programas y técnicas de producción acordes al medio ambiente, la tilapia procesada provino de fincas en las que no se utiliza productos químicos que puedan dañar el medio ambiente, así mismo en la planta se utilizan productos biodegradables y amigables al medio ambiente. 4.- RESULTADOS Cuadros similares del 1 al 24 TABLA 1. 1 Muestra 1 Figura # 1 Curva de crecimiento de Aerobios totales a 0, 5, 10, 15 días. 25 Variable Dependiente: W1 Método: Mínimo Cuadrados Ordinarios para realizar las regresiones, en donde la varianza de error es mínima, Incluye Observaciones del primer (0), quinto (5), decimo (10) y decimo quinto (15) día de análisis; Datos de la primera quincena. FORMULA: W1 = 265Z1 + 595 + Ut En donde Ut = Variable Aleatoria. 5.- DISCUSIÓN 5. I.-Determinación del Número de aerobios mesófilos a los 0, 5, 10, 15 días después de producido, de una muestra de filete de tilapia a temperatura constante de refrigeración de 1-5 °C. El cuadro 1 muestra el promedio de los resultados de las mediciones realizadas durante 24 quincenas. Aparecen los valores promedio en UFC (Unidades Formadoras de Colonias), por gramo de muestra, medidos a intervalos de cinco días, siendo el cero el día de producción del filete. En el cuadro 2 aparece el promedio de las mediciones quincenales anteriormente descritas; se observa un aumento de los valores de UFC/g hasta 2231. Las pruebas organolépticas realizadas en cada etapa indicaron que, a los 15 días, es decir, 2231UFC/g como promedio, se iniciaba la descomposición, presentándose flacidez en el músculo, olor característico de descomposición y cambio de color de blanco a pardo rojizo, lo que indicaba que la carne no estaba apta para ser consumida. TABLA 1. 25 Promedio de las muestras 26 PROMEDIO DE LA INVESTIGACION Figura # 25 Curva de crecimiento de Aerobios totales a 0, 5, 10, 15 días. 5. II.- Crecimiento bacteriano en relación con el tiempo de conservación del filete. 27 En este cuadro se observa que el crecimiento bacteriano casi no varió con respecto al inicio de la siembra o sea al día cero; el promedio fue de 1037 UFC/Gramo de muestra. Si se compara el valor mínimo 880, obtenido en uno de los análisis realizados y el valor máximo de 1200, se aprecia que son valores muy cercanos. Se refleja lo mismo para los siguientes días en que se lleva el análisis a los 5, 10 y 15 días después. El estudio demuestra un crecimiento casi acelerado y una curva casi puntual en el crecimiento de las bacterias al pasar el tiempo de cero a 15 días. 5. III.- Comparación del número de aerobios mesófilos con los estándares AOAC de crecimiento bacteriano para un alimento. Según el Departamento de Pesca de la FAO en su título de Aseguramiento de la Calidad de los productos pesqueros en el Cuadro 1 se propone un plan de muestreo y limites microbiológicos recomendados para productos pesqueros (ICMSF 1986). De forma general se establece en el Ecuador el APC tenga los siguientes valores: m = 50.000, M = 500.000 (n = 5, c = 2) A pesar que los limites solicitados por el Departamento de Pesca de la FAO, en el título de Aseguramiento de la calidad de los productos pesqueros, en donde con técnicas iguales aplicadas en esta investigación como es la ICMSF 1986, se tiene que los valores son mucho menores e inclusive por los solicitados por los compradores en el exterior, como se observa en el cuadro 4.2. Según Connel, (1978), los microorganismos son los agentes más importantes en la alteración del pescado fresco ya que son los que originan los sabores particularmente indeseables ligados a la alteración. Por tanto, el control de la alteración es en gran parte, el control de los microorganismos. 5. IV.Determinación del tiempo de vida útil máximo para que el filete sea apto para el consumo humano. Según el razonamiento anterior podemos apreciar que esta curva en donde se controla el crecimiento bacteriano contra los días de siembra, la cantidad de microrganismos sobrepasa las 2000 UFC/Gramo a partir del día 15 de conservación, manifestándose en este momento, de acuerdo a las pruebas TABLA 1. 27 FAO *APC: AEROBIC PLATE COUNT TABLA 1. 28: Resultados Obtenidos Figura # 26 Promedios de análisis realizados 28 organolépticas realizadas, signos evidentes de la descomposición del músculo del filete lo que lo hace no apto para el consumo humano. Se puede deducir que existe un aumento del crecimiento bacteriano. De acuerdo a Huss (1999), los métodos para la evaluación de la calidad del pescado fresco pueden ser divididos en dos categorías: sensorial e instrumental. El consumidor es quien da la pauta para detectar la calidad de filete fresco, sobre todo con respecto a lo sensorial. Es él quien define si se consume o no se consume, y por lo tanto es en esta parte donde se puede decir si está apto para el consumo humano o no. COMPROBACIÓN DE LA HIPÓTESIS La hipótesis de este trabajo es: “el número de aerobios mesófilos determina el tiempo de vida útil de los filetes refrigerados de la Tilapia (Oreochromis spp) a temperatura constante de 1-5 °C”. La evidencia recopilada al ddeterminar el Número de aerobios mesófilos a los 0, 5, 10, 15 días después de producido, indica que, a los 15 días, es decir, 2231UFC/g como promedio, se iniciaba la descomposición, presentándose flaccidez en el músculo, olor característico de descomposición y cambio de color de blanco a pardo rojizo. Así mismo el crecimiento bacteriano casi no varió con respecto al inicio de la siembra o sea al día cero; el promedio fue de 1037 UFC/Gramo. Si se compara el valor mínimo 880, obtenido en uno de los análisis realizados y el valor máximo de 1200, se aprecia que son valores muy cercanos. Se refleja lo mismo para los siguientes días en que se lleva el análisis a los 5, 10 y 15 días después. El estudio demuestra un crecimiento casi acelerado y una curva casi puntual en el crecimiento de las bacterias al pasar el tiempo de cero a 15 días. La evidencia anteriormente expuesta le permite al autor de esta investigación aceptar la hipótesis como comprobada y proponer a la comunidad científica una técnica para emplear el número de aerobios mesófilos como indicador del tiempo de vida útil del filete de tilapia. 6.- CONCLUSIONES 1. Se determinó el número de aerobios mesófilos a los 0, 5, 10, 15 días después de producido, de una muestra de filete de tilapia a temperatura constante de refrigeración de 1-5 °C. los resultados indican que a los 15 días, es decir, 2231UFC/g como promedio, se iniciaba la descomposición. Además se considera que la ecuación estadística utilizada, dentro de las probabilidades es inferior al 10 %, como lo demuestran cada uno de los cálculos realizados, e inclusive en el análisis promedio realizado el que da para ZP de 1,32 %, para la variable WP. 2. El crecimiento bacteriano en relación con el tiempo de conservación del filete casi no varió con respecto al inicio de la siembra o sea al día cero; el promedio fue de 1037 UFC/Gramo de muestra. Se observó un crecimiento casi acelerado y una curva casi puntual en el crecimiento de las bacterias al pasar el tiempo de cero a 15 días. 3. Los resultados obtenidos se compararon con los estándares AOAC de crecimiento bacteriano para un alimento. De acuerdo a la FAO el limite por gramo para que el musculo del filete sea apto para el consumo humano debe estar entre 5 × 105 y 1 x 107 UFC/ Gramo; en este trabajo los límites fueron 1 × 103 y 1 x 104 UFC/Gramo. 4. La determinación del tiempo de vida útil máximo para que el filete sea apto para el consumo humano se basó en el número de aerobio mesófilos, este tiempo es de 15 días. 7.- RECOMENDACIONES “Procedimiento para la determinación del tiempo de vida útil de los filetes refrigerados de la Tilapia (Oreochromis spp) a temperatura constante de 1-5 °C a partir del conteo de aerobios mesófilos.” Los resultados obtenidos permiten asumir que el número de aerobios mesofilos es un bío indicador aceptable para la determinación del tiempo de vida útil, sin necesidad de realizar pruebas organolépticas ya que estas resultan inexactas. A continuación aparece la técnica sugerida por el autor, a partir de la empleada por The International Commission (1996), que está fundamentada en la ICMSF (1986). 1. Se prepara la muestra de Filetes de Tilapia troceándola o cortándola en trozos medianos y dejándola macerar con agua de peptona 0,1 %. 2. Se pipetea por duplicado en placas de Petri, alícuotas de 1 ml de las diluciones 1/10, 1/100, 1/1000, 1/10000, y 1/100000, se aconseja esta serie de diluciones en aquellos casos en que se desconoce el número aproximado de microrganismos presentes en la muestra, de todos modo debe sembrase tres diluciones seguidas, para nuestro caso es de conocer que el filete de tilapia viva no contiene un alto porcentaje de bacterias, ya que la carne al momento de filetear es estéril, según (CORPEI, 2001) los microrganismos se encuentran en la superficie externa y en las vísceras del animal pero durante la vida no invaden la carne estéril debido a que está prote- 29 gido por las defensa naturales. Se funde el agar PCA utilizando vapor o agua hirviente, templando el medio PCA a 44 – 46 °C y se controla cuidadosamente su temperatura, verter inmediatamente en las placas de Petri 10 – 15 ml de medio fundido y templado. 3. Mezclar el inoculo con el medio fundido, de la forma siguiente: (a) Imprimir a la placa movimientos de vaivén 5 veces en una dirección. (b) hacerla girar 5 veces en sentido de las agujas del reloj. (c) volver a imprimir movimientos de vaivén en una dirección que forme ángulo recto con la primera, y (d) hacerla girar 5 veces en sentido contrario a las agujas del reloj. 4. Una vez solidificado el agar, invertir las placas e incubarlas a 35 °C +- 1 °C durante 48 horas. 5. Para el cálculo del recuento en placa elegir las dos placas, que presenten entre 30 y 300 UFC. Contar todas las colonias de cada placa, hallar la media aritmética de los dos valores y multiplicarla por el factor de dilución (la inversa de la dilución cuyas placas han sido seleccionadas). Dan el valor obtenido como el recuento en placa. 6. Para el cálculo y presentación de los resultados, deben utilizarse únicamente dos cifras significativas, que corresponden a los dígitos primero y segundo de la media de las colonias halladas. Los dígitos restantes tienen que ser sustituidos por ceros. 8.- GLOSARIO 1. ADITIVOS: Sustancias que se agregan a otras para darles cualidades de que carecen o para mejorar las que poseen. 2. AEROBIOS: Que tiene necesidad para vivir, de oxigeno gaseoso libre. 3. ANTIMICROBIANO: Se dice de las sustancias químicas elaboradas por bacterias o mohos, que impiden el crecimiento, proliferación y actividad de otros microrganismos. 4. BACTERIAS: Ser vivo unicelular, procariota (sin núcleo individualizado). 5. CONTAMINACION: Alteración de la pureza de alguna cosa. 30 6. CONTAMINACION FECAL: Alterar la pureza de algo con heces fecales. 7. COLAGENOS: Sustancias albuminoides que existe en el tejido conjuntivo, en los cartílagos y en los huesos y que se transforma en gelatina por efecto de la cocción. 8. CALIDAD: Propiedad o conjunto de propiedades inherente a una cosa, que permiten apreciarla como igual, mejor o peor que las restantes de su especie. 9. DESINFECCION: Acción y efecto de desinfectar, quitar a una cosa u objeto la infección destruyendo los gérmenes nocivos. 10. DIMORFISMO: Propiedad de una especie animal de presentar entre uno y otro sexo caracteres morfológicos diferentes no relacionados directamente con la reproducción. 11. HIBRIDO: Se aplica al animal o al vegetal procreado por dos individuos de distinta especie. 12. MICRORGANISMO: Organismo microscópico y que solo puede verse a través de un microscopio. 13. NORMAS DE CALIDAD: Regla que se debe seguir para obtener calidad de alguna cosa. 14. NUCLEOTIDOS: Unidad elemental de los ácidos nucleicos formada por la unión de un azúcar, un acido orto fosfórico y una base púrica o pirimidica. 15. PRESERVANTES: Acción y efecto de preservar o preservarse. 16. PARAMETRO: Letra que designa en una ecuación una magnitud dada a la que se pueden atribuir valores diferentes. 17. SALUBRIDAD: Calidad de salubre, bueno para la salud, saludable. 18. SENSIBLIDAD: Mecanismo inmunológico que el organismo da como respuesta a la presencia de un antígeno o de una sustancia sensibilizadora. 19. SENSORIAL: Relativo a los sentidos o a sus órganos correspondientes. 20. TILAPIA: Pez que taxonómicamente no responde a un solo nombre científico, híbrido producto del cruce de cuatro especies de Tilapia: tres de ellas de origen africano y una cuarta israelí. 21. TEXTURA: Disposición que tienen entre si las partículas de un cuerpo. ABREVIATURAS HPLC: Cromatografía Liquida de alta resolución. NBVT: Nitrógeno Básico volátil Total. INO: Inosina. IMP: Inosina mono Fosfato. IR: Índice de Rigor. RM: Rigor Mortis. Ut: Variable Aleatoria. ICMSF: Comisión Internacional de Especificaciones microbiológicas de alimentos. AOAC: Association of Official Analytical Chemists. FAO: Food and Agriculture Organization. APC, PCA: Agar Plate Count, Contaje de Aerobio en Placas UFC: Unidades Formadoras de Colonias. CIM: Concentración Inhibidora Mínima. EAM: Empaque en Atmosfera Modificada. CT: Coliformes Totales. CF: Coliformes Fecales. RT: Recuento Total de Aerobios. 9.- BIBLIOGRAFÍA • Álvarez Julia, Claudia P. Agurto, Ana M. Álvarez y José Obregón. .(2004).Resistencia antimicrobiana en bacterias aisladas de tilapias, agua y sedimento en Venezuela. Revista Científica, fcv-luz / vol. Xiv, nº 6, 491 – 499. • Connell,J, Control de la calidad del pescado. Editorial Acribia, Zaragoza. España, 1978. • Corpei-Cbi Project, Tilapia: Perfil del Producto. Septiembre 2001. Conservación de Pescado y Barcos. http://www.atexport.com/pagesp/info/ pescado.htm • Fiallos Cárdenas, Cesar Eduardo. (2010). Estudio comparativo de la influencia del empaque, en la tilapia fresca, almacenado a temperaturas de refrigeración. http://www.dspace.espol.edu.ec/ handle/123456789/13798 • Guijarro Revelo, José Vicente. (2007). Desarrollo de un sistema de envase y embalaje para la exportación del filete de tilapia roja ecuatoriana hacia el mercado norteamericano. http://bibdigital. epn.edu.ec/handle/15000/256 • Huss, HH (Ed.), Boerresen, T., Dalgaard, P.,Gram, L.,Jensen, B. Corporate Authors, FAO, (1999). El Pescado Fresco: Su Calidad y Cambios de su Calidad. Documento Técnico De Pesca 348. Laboratorio Tecnológico .Ministerio de Pesca. Dinamarca. • Jiménez, Roberto. (2007). Enfermedades de Tilapia en Cultivo. Editorial Universidad de Guayaquil. Facultad de Ciencias Naturales. Guayaquil. Ecuador. • Morales, Graciela, Blanco, Laura, Arias, María. (2004).Evaluación de la calidad bacteriológica de tilapia fresca (Oreochromisniloticus) proveniente de la Zona Norte de Costa Rica. ALÁN, dic. 2004, vol.54, no.4, p.433-437. ISSN 0004-0622 • Nanto, H., H. Sokooshi and T. Kawai (1993). Aluminium-doped ZnO thin film gas sensor capable of detecting freshness of sea foods. Sensors an actuators 13-14. http://www.fao.org/DOCREP/ V7180S/v7180s0c.htm#bibliografia Enterocytozoon Hepatopenaei (EHP): An Emerging Problem for Shrimp Farmers. Scientists from Mahidol University are making an urgent appeal to control the spread of the shrimp microsporidian parasite Enterocytozoon hepatopenaei (EHP), 28 November 2014 What is EHP? Enterocytozoon hepatopenaei (EHP) is a microsporidian parasite that was first characterized and named from the giant or black tiger shrimp Penaeus monodon from Thailand in 2009 (Tourtip et al. 2009. J. Invertebr. Pathol. 102: 21-29). It was discovered in slow growing shrimp but was not statistically associated with slow growth at that time. EHP is confined to the shrimp hepatopancreas (HP) and morphologically resembles an unnamed microsporidian previously reported in the HP of Penaeus japonicas from Australia in 2001. it kills shrimp before the negative effects of EHP on growth are apparent. They also feared that solution of the EMS/AHPND problem would probably lead to succeeding widespread problems with slow growth. Indeed, this seems to have happened in the past year or so. Scientists now have information indicating that EHP outbreaks are occurring widely in China, Indonesia, Malaysia, Vietnam and Thailand. Very recently, they have also received samples PCR-positive for EHP from slow growing shrimp in India. Thus, EHP is an emerging problem that is under urgent need of control. Together, these studies suggest that EHP is not an exotic pathogen but that it is endemic to Australasia. Later, it was found that EHP could also infect exotic Penaeus vannamei imported for cultivation in Asia and that it could be transmitted directly from shrimp to shrimp by the oral route (Tangprasittipap et al. 2013. BMC Vet Res. 9:139). How to control international spread of EHP This differed from the most common microsporidian previously reported from cotton shrimp, where transmission required an intermediate fish host, allowing disruption of transmission by exclusion of fish from the production system. The pathogen can also be detected by light microscopy using a 100 times objective with stained HP tissue sections or HP smears, but this is based on finding the characteristic spores that are extremely small (less than one micron in length) and are sometimes produced only in small numbers, even in heavily infected specimens. Thus, the PCR detection method is preferred. Why is EHP important? Although EHP does not appear to cause mortality, information from shrimp farmers indicates that it is associated with severe growth retardation in P. vannamei. Thus, we began to warn Asian farmers and hatchery operators after 2009 to monitor P. vannamei and P. mondon for EHP in broodstock and post larvae (PL). A nested PCR detection method and a LAMP method are available to check feces of broodstock and to check whole PL for the presence of EHP (Tangprasittipap et al. 2013. BMC Vet Res. 9:139; Suebsing et al. 2013. J Appl Microbiol 114: 1254-1263). Scientists have data indicating that most SPF stocks of P. vannamei imported to Thailand are negative for EHP but that they often become contaminated in recipient maturation facilities and hatcheries because of poor biosecurity. However, the warnings were not heeded because of the overwhelming focus on early mortality syndrome (EMS) or acute hepatopancreatic necrosis disease (AHPND). One serious fault in biosecurity is the widespread practice of using live animals (e.g., polychaetes, clams etc.) from local sources or as imports to feed broodstock shrimp, despite our constant warnings against the practice. Scientists feared that lack of interest in EHP would lead to its build up in production systems and that its spread would be masked by EMS/AHPND because Scientists have firm data that some live polychaetes from local and imported sources in Asia can give positive PCR test results for both AHPND bacteria and 32 EHP. However, there is also a possibility that some imported stocks of P. vannamei labeled SPF may also be positive for EHP, since it is not on the OIE list that is used by many SPF suppliers or quarantine agencies responsible for confirming SPF status. This problem could be rectified by adding EHP to the SPF list of both suppliers and quarantine agencies. The feces of the broodstock can be tested for the presence of EHP by nested PCR. The best approach for maturation and hatchery facilities to avoid EHP is to never use live animals (e.g., live polychaetes, clams, oysters, etc.) as feeds for broodstock. If this advice is ignored, at the very minimum, such feeds should be frozen before use since this would at least kill AHPND bacteria and EHP. Better would be pasteurization (heating at 70oC for 10 minutes) since it would also kill major shrimp viruses (which freezing would not). Another alternative would be to use gamma irradiation with frozen feeds. How to control EHP in hatcheries EHP and AHPND bacteria have both been found in broodstock from China, Viet Nam and Thailand. Both have also been reported from living polychaete samples used to feed broodstock shrimp. EHP can be suspected if post larvae from any hatchery grow slower than would be expected. Therefore, the first issue is to ensure that broodstock maturation facilities and hatchery facilities are CLEAN! To achieve this goal, all shrimp must be removed from the hatchery and it should be washed followed by cleaning using 2.5 per cent sodium hydroxide solution (25 gms NaOH/L fresh water) with the solution left on and washed off after three hours contact time. This treatment should include all equipment, filters, reservoirs and pipes. After washing to remove the NaOH, the hatchery should be dried for seven days. Then it should be rinsed down with acidified chlorine (200 ppm chlorine solution at pH <4. 5=”” p=””>. The next issue is the broodstock. As indicated above some SPF shrimp broodstock gave positive PCR test results for EHP but none for AHPND bacteria. Thus, purported SPF broodstock should also be checked for EHP while in quarantine and before being admitted to a cleaned maturation and hatchery facility. The scientists work in Thailand revealed that locally pond-reared broodstock derived from imported SPF stocks initially free of EHP showed very high levels of prevalence for EHP infection. As stated above, broodstock feces may be checked for EHP by nested PCR using DNA extracts from feces as the template. Confirmation should be conducted on HP tissue after the usefulness of the broodstock has expired. How to control EHP in farms For farmers, there are two main issues to contend with. The first issue is to insure that the PL used to stock ponds are not infected with EHP. This can be done most easily by PCR testing. If DNA has already been extracted from the PL to check for AHPND bacteria by PCR, a portion of the same DNA extract can be used to test for EHP. A farmer should not use batches of PL positive for either of these pathogens for stocking ponds. The second issue for farmer concerns appropriate preparation of ponds between cultivation cycles, especially when a cultivation pond has previously been affected by EHP. The spores of EHP have thick walls and are not easy to inactivate. Even high levels of chlorine alone are not effective. In addition, potential environmental carriers are currently unknown. Both may remain in a pond after harvest and it is important that both be inactivated before the next cultivation cycle. To disinfect earthen ponds of EHP spores, apply CaO (quickl ime, burnt lime, unslaked lime or hot lime) at 6 ton/ha. Plow the CaO into the dry pond sediment (10-12 cm) and then moisten the sediment to activate the lime. Then leave for one week before drying or filling. After application of CaO, the soil pH should rise to 12 or more for a couple of days and then fall back to the normal range as it absorbs carbon dioxide and becomes CaCO3. A special warning for Mexico There are rumors that the outbreaks of AHPND in Mexico originated from contaminated broodstock of P. vannamei illegally imported to Mexico from Asia for production of PL to stock rearing ponds. If these rumors are true, given the high prevalence of EHP in Asia, it is quite probable that the imported shrimp would also have been infected with EHP. Thus, it is urgent that the Mexican quarantine authorities check their current and archived DNA samples used to monitor for AHPND bacteria by PCR to also check for the presence of EHP target DNA by PCR. If they find it, it would support the hypothesis that AHPND bacteria were imported from Asia. It is also possible that timely preventative measures or continued surveillance of imported, living shrimp stocks could prevent the unfortunate introduction and establishment of what is probably an exotic parasite to Mexico and the rest of the Americas. __._,_.___ 33 El papel del oxígeno en la producción de truchas Gustavo A. Alvis H. - David Ulloa SOLLA S.A. - Colombia En el medio de cultivo artificial para peces, el oxígeno necesario para el consumo del pez no está asegurado, los niveles requeridos por las especies de cultivo dependerán de variables como las cargas, especie, tasa de alimentación, temperatura del agua, cantidad de agua, variaciones diarias y las fluctuaciones estacionales entre otras. En los estanques de cultivo, los niveles y fluctuaciones de oxígeno son mucho más drásticos, ya que sólo hay una cantidad limitada de agua que debe cubrir las necesidades de un cierto número de peces que se encuentran en continuo estrés, de ahí la importancia de su monitoreo, balance y suministro en caso de ser necesario. En el caso práctico de las jaulas, lo que en definitiva es clave, es la relación entre la oferta de Oxígeno y la demanda de los peces confinados en cautiverio, cuando esta relación no está balanceada, y hay déficit es necesario inyectar Oxígeno desde un suministro. Cuando se compara peces de aguas “frías” por ejemplo Salmon con la Tilapia “aguas cálidas” , ambos tienen rangos de tolerancia específicos a la concentración de Oxígeno disuelto (mg/l), sin embargo, en ambos casos es más importante analizar la saturación , si decimos que se requiere un 70% (algunos autores apuntan 65% como mínimo de saturación para que se realicen los procesos metabólicos) para un salmón 34 que está en un agua (mar) con niveles de 9 mg/l , si la saturación es de 70% a lo menos esa agua debería estar en niveles de 6,3 mg/l para que exista un intercambio efectivo, en cambio. En cambio una tilapia cultivada a 30° C con un nivel de oxígeno disuelto de 6 mg/l, y una saturación del 70% representa 4,2 mg/l, en resumen para ambos es más importante que el valor solo de la concentración en mg/l, la saturación mínima exigida para que exista este intercambio gaseoso a nivel branquial y se pueda dar todos los procesos donde este interviene como por ejemplo la absorción de nutrientes. Uno de los factores más importantes que influye en la saturación de oxígeno en el agua es la temperatura del agua, a continuación se da un ejemplo de diferentes valores expresados en ppm o mg/l para una saturación de 100 % de oxígeno en el agua a diferentes temperaturas. Para entender la dinámica del transporte de oxígeno en el interior de los peces, es importante conocer el papel de la hemoglobina presente en la sangre. Esta es una proteína presente en las células rojas de la sangre (eritrocitos), que toma el oxígeno del agua a través de las branquias y los transporta al cuerpo del pez. Este transporte de oxígeno puede ser dividido en fases como lo muestra la figura a continuación 1. Difusión del oxígeno del agua a la sangre a través de las branquias. 2. Transporte de oxígeno al interior del cuerpo del pez a través del sistema circulatorio. 3. Difusión de oxígeno de sangre a los órganos o tejidos. Sin embargo, todos los procesos bioquímicos que regulan el metabolismo pueden verse alterados, influyendo sobre el desarrollo normal del animal, afectando el factor de conversión, velocidad de crecimiento y reproducción entre otros. Los peces tienen diferentes necesidades de oxígeno. Por ejemplo, las tilapias son muy tolerantes a los niveles bajos de oxígeno a diferencia de las truchas que requieren condiciones de oxígeno muy buenas y estables por medio del suministro de agua corriente. Un ejemplo de cómo influye el nivel de oxígeno en los peces se muestra en esta grafica donde de manera práctica se ha determinado el porcentaje de asimilación de alimento versus el porcentaje de saturación de oxigeno presente en el agua. (Este ejemplo es para Trucha a 16% °C, en etapa de ceba con una carga mayores de 50 kg/m3) Solla S.A usa estos valores de necesidades de oxígeno para hacer los cálculos de capacidad de carga y consumo de alimento. El pez puede usar uno o varios mecanismos para contrarrestar los niveles bajos de oxígeno en el agua, algunos de estos mecanismos son: Un ejemplo graficado de estos valores de consumo de oxígeno para el caso de trucha es: 1. El aumento de la ventilación de los opérculos: más agua es bombeada por el pez a través de sus branquias, con el fin de aumentar la captura de oxígeno del medio. En cierta medida, los peces son capaces de adaptarse a un nivel más bajo de oxígeno sin que esto necesariamente conduzca a una gran mortalidad. 2. El aumento del flujo de sangre: se presenta Presión de Oxígeno en sangre es de 122 mm Hg Convección Difusion Difusion Convección Presión de Oxígeno en el agua es de 157 mm Hg Presión de Oxígeno en organos y tejidos es de 35 mm Hg 35 un incremento en la circulación de la sangre, con un mayor nivel de oxígeno por volumen a órganos o tejidos y que algunas veces termina en una microcitosis (reducción del tamaño de eritrocitos y disminución de la eficiencia en el transporte de oxígeno). 3. Reducción del nivel de actividad con el fin de reducir las necesidades de oxígeno. Todos estos mecanismos están orientados a la sobrevivencia del animal, ante una baja de oxígeno. El estrés generado durante este periodo, empieza a tornarse acumulativo afectando el estado de salud del pez, hasta que el nivel de oxígeno en el agua llega a su punto más crítico. A partir de ahí, los peces simplemente deben sobrevivir. Cuando el contenido de oxígeno disminuye en el agua, el pez comienza a ahorrar aún más y más energía, presentando una anaerobiosis en su metabolismo. Así, un “déficit de oxígeno”, terminará en una oxidación incompleta de los nutrientes. Estos nutrientes oxidados de manera incompleta, son tóxicos para el pez. Si la situación no mejora, los peces no serán capaces de restablecer un metabolismo basado en oxígeno y deberán “pagar” este “déficit de oxígeno”, teniendo como resultado la asfixia. Un nivel bajo de oxígeno aunque no sea mortal, también tiene efectos secundarios. En este contexto es muy importante saber que de la toxicidad de la mayoría de los metabolitos, como el caso del amonio, es mayor a niveles bajos de oxígeno. En este caso, el pez debe bombear más agua a través de las branquias, para poder tomar una cantidad suficiente de oxígeno. De esta manera, la cantidad de metabolitos tóxicos incrementan su contacto con las branquias, aumentando la posibilidad de que ingresen nuevamente al pez y lo intoxiquen de manera crónica. Además de una cantidad suficiente de oxígeno al día para satisfacer sus necesidades en términos de movimiento y metabolismo, los peces también 36 necesitan un nivel mínimo de oxígeno en el agua para ser capaces de tomarlo. El transporte de oxígeno del agua a la sangre se realiza a través de la difusión de las lamelas branquiales. Este es controlado por la diferencia entre el nivel de oxígeno en el agua y el nivel de oxígeno en la sangre (llamada la presión parcial), si la presión de oxígeno en el agua es menor que la del interior del pez, este físicamente no podrá tomarlo. Ya a nivel productivo y de forma práctica en campo, Brons 1986, determino en un cultivo de truchas a 15 °C con una carga promedio de 50 kg/m3 y evaluando en diferentes etapas del año donde fluctúan de manera marcada los caudales y niveles de oxígeno, una curva con la influencia de la saturación sobre la conversión con el siguiente comportamiento (ver figura). En esta figura se analizan la concentración y saturación de oxígeno para el mejor resultado económico y para una mayor eficiencia en la utilización del alimento en truchas, a diferentes temperaturas. El 70% de saturación de oxígeno, con 6.7 ppm a una temperatura de 15.5°C, es la cifra óptima para la máxima saturación de oxígeno en la sangre. La línea roja en la figura, muestra la cantidad de oxígeno disponible en el agua en mg / l, al 100% de saturación de oxígeno en diferentes temperaturas. La línea verde muestra el oxígeno disponible a diferentes temperaturas equivalentes a un 70% de la línea roja, que es el valor que le apunta al nivel máximo de saturación de oxígeno en la sangre. La línea amarilla, es la que correlaciona los diferentes niveles de oxígeno a las diferentes temperaturas para obtener la máxima eficiencia en el uso del alimento y el mejor resultado económico de la granja. Del cruce de la línea amarilla y la línea verde de saturación, resulta el valor del 70% de saturación o 6.7 mg./L, que para el caso de la trucha, es lo que requiere a temperaturas por encima de los 15°C, PARA OBTENER LA MÁXIMA EFICIENCIA EN EL USO DEL ALIMENTO Y EL MEJOR RESULTADO ECONÓMICO DE LA GRANJA. Curva ideal de saturación de oxígeno en agua dulce para trucha Determinación de saturación y concentración de oxígeno óptimas 8 Oxígeno a 100% de Saturación de Oxígeno a diferentes tem partauras Oxígeno en el agua mg/l 7.5 7 Oxígeno a 70% de Saturación de Oxígeno a diferentes tem partauras 6.5 6 5.5 5 4.5 Concentración de Oxigeno optim a y econom ica para el m ejor crecim iento 70% o 6.7 ppm 4 3.5 20 Temperatura 17 15 13 11 7 5 En el verano, la falta de agua es un fenómeno común que ocurre en muchas granjas piscícolas de truchas. La temperatura del agua aumenta y el contenido de oxígeno en el agua disminuye. Entonces el pez muestra signos de falta de oxígeno y aunque este se suplemente mediante algún mecanismo, muchas veces los peces no mejoran. por lo tanto, los peces mantienen un número bajo de glóbulos rojos. La causa de esta hipoxia en el pez, es la falta de glóbulos rojos. Las células rojas de la sangre transportan el oxígeno y otros gases a través del organismo y la capacidad de transporte depende del número de glóbulos rojos. Heces, animales muertos, Durante la época de invierno, las temperaturas son bajas y normalmente hay un buen caudal, por lo tanto, el agua contiene mucho oxígeno. Tanto la alimentación y la actividad física de los peces han sido estables y confortables. Con todo esto, no ha habido necesidad de una gran cantidad de oxígeno, Entre los factores que disminuyen el nivel de oxígeno tenemos: Descomposición de materia orgánica Alimento no consumido, Aumento de la tasa metabólica por incremento en la temperatura. (Variación de la temperatura del día con respecto a la noche). Disminución en los recambios de cada uno de los estanques., Desgasificación: salida de oxígeno del agua hacia la atmósfera, Densidad de siembra o biomasa sembrada en cada uno de los estanques, Aumento de sólidos en suspensión y residuos de barro en el agua. 37 Cómo se controla? • Con una entrada continua de la fuente para mantener niveles de oxígeno adecuado. • con limpieza y remoción de toda materia orgánica, • con un número de peces adecuado en todos los estanques dependiendo del flujo. • Con suministro de oxígeno gaseoso. • Con caídas de agua entre uno y otro estanque mayores a 50 cm y con un ángulo mayor de 45° • Con un suministro adecuado de alimento en función, del tamaño, la temperatura, el recambio de agua y la calidad nutricional del mismo. EN CONCLUSIÓN, DE LA CONCENTRACIÓN DE OXÍGENO Y SU MONITOREO DIARIO EN LA FUENTE Y SALIDAS DE ESTANQUES, DEPENDER EN BUENA MEDIDA, LA ASIMILACIÓN DEL ALIMENTO Y LOS RESULTADOS ZOOTÉCNICOS Y ECONÓMICOS DE SU FINCA. Recuerde también que la eficiencia del alimento además de su calidad nutricional, puede estar influenciada por: • La Calidad de la semilla. • La densidad de siembra. • Manejo hídrico del estanque (% de recambio). • Cada estanque (todos los estanques se comportan como unidades individuales de producción). “Los peces no se mueren, los mata el desconocimiento de quien los cultiva” III TALLER CONVERSATORIO INTERNACIONAL DE ACUACULTURA 2015 40 “Expositores del III Taller Conversatorio Internacional SLA” D. Allen Davis, Ph.D. School of Fisheries, Aquaculture and Aquatic Sciences, 203 Swingle Hall; Auburn University, Auburn, Al. 36849-5419, Phone: 334-844-9312 Fax: 334-844-9208, E-mail: [email protected] Education Ph.D. 1990, Wildlife and Fisheries Sciences, Texas A&M University M.S. 1986, Wildlife and Fisheries Sciences, Texas A&M University B.S. 1983, Biology and Chemistry, Northern Arizona University Professional Experience Professor, August 2010 - present. Auburn University, School of Fisheries, Aquaculture and Aquatic Sciences (SFAAS); Associate Professor SFAAS February 2004 - August, 2010; Assistant Professor, SFAAS, January 2000 - January 2004; Research Scientist, The University of Texas at Austin, Marine Science Institute (MSI), 1999; Research Associate, MSI 1996-1998; Research Scientist Associate, MSI, 1994-1995 USSEC Consultant. Scientific and Professional Organizations World Aquaculture Society; American Fisheries Society L. A. Roy 2013. Studies of the thermal and haline influences on growth and survival of penaeid shrimp. Journal of the World Aquaculture Society. 44 (2): 229-238 Tema de su conversatorio # 1 “Avances en la nutrición del camarón, compensación con minerales esenciales” RESUMEN: There are many studies on mineral requirements for crustaceans which clearly demonstrate the importance of minerals in the diet and that some mineral can be absorbed from the water. In general dietary levels of phosphorus (P), magnesium (Mg), copper (Cu), iron (Fe), manganese (Mn), selenium (Se) and Zinc (Zn) often require supplementation. Mineral that may be absorbed from the water to partially or completely meet nutrient requirements include calcium (Ca), Mg, sodium (Na), potassium (K), Fe and Zn. In general, feeding a practical diet without mineral supplementation does not seem to provide good performance of crustaceans even in pond culture conditions, where natural productivity can contribute to the requirement. Select Publications (128 journal, 10 book chapters, 58 contributed articles) Hence, albeit some mineral will be obtained from the water and some from natural foods they are not adequate to meet all mineral requirements. • Jirsa, D., D. A. Davis, G. P. Salze, M. Drawbridge, and M. Rhodes. 2014. Taurine requirement for juvenile white seabass (Atractoscion nobilis) fed soy-based diets. Aquaculture. 422-423:36-41. When considering the need for dietary mineral supplements one must consider possible uptake from the water, biological availability from dietary components and possible inhibitors the may be present in the diet. • Jirsa, D., D. A. Davis, F. T. Barrows, L. A. Roy, and M. Drawbridge. 2013 Response of white seabass to practical diets with varying levels of protein. North American Journal of Aquaculture. 76:24-27. A further consideration is that shrimp feed relatively slowly and externally masticate the feed; hence, leaching of minerals from the diet must also be considered. Because of the complexity of delivering minerals to shrimp as well as the difficulty in working with mineral nutrition in general, specific recommendations on minimal dietary mineral requirements for some minerals are difficult to make. • Jirsa, D., G. P. Salze, F. T. Barrows, D. A. Davis and M Drawbridge. 2013. First-limiting amino acids in Soybean-based diets for white seabass Atractoscion nobilis. Aquaculture. 414-415: 167-172. • Hastey, R., R. Phelps, D. A. Davis and K. Cummins. 2013. Augmentation of free amino acids in eggs of red snapper, Lutjanus campechanus, as part of induced spawning protocol. Aquaculture Research. 2013: 1-8. DOI10.111/area.12184. • Sookying, D., D. A. Davis and F. S. D. Silva. 2013. A review of the development and application of soybean based diets for Pacific white shrimp Litopenaeus vannamei”. Aquaculture Nutrition. 19:441-448. • Zhu X, Davis DA, Samocha TM, Lazo JP, Roy LA. 2013. Response of the Pacific white shrimp (Litopenaeus vannamei) to three sources of solvent extracted soybean meal. Journal of the World Aquaculture Society. 44 (3):396-404. • Hu B, L. A. Roy, D. A. Davis. 2013. Correlations of xanthophylls in catfish fillets, plankton, shad and snails in catfish production ponds in west Alabama. Aquaculture. 402-403:46-49. • Perez-Velazquez, M., D. A. Davis, X. Zhu, M. L. González-Félix, This presentation will summarize current thoughts, summarize recent studies and provide reasonable guidance for mineral requirements. Tema de su conversatorio # 2 FEED MANAGEMENT: MAKING THE MOST OF YOUR SHRIMP FEED. Feed cost is generally considered the largest component of variable costs in semi-intensive and intensive farming. From both an economic and environmental perspectives, feed management is critical to any operation. Yet there is relatively little scientific information regarding feed management and it’s influence on production and economic returns. It is interesting to note that most management practices result in an increase in feed input irrespective of the need for more feed. For example, if shrimp are not growing we often add more feed, what if they are growing better than expected, we add more feed! It is very seldom that managers restrict feed inputs as they view this as a possible reduction in production. Not only are management choices often geared towards increasing feed inputs, shared revenue 41 system (bonus payments) are often geared towards increased production not increased revenue. Given the reality that the unit cost of agriculture inputs (Feed, Fuel, labor etc) required for • Oceaninvest S.A. Proveedor de camarón desde 2001 hasta 2003 involucrado en control de calidad y supervisión del manejo del producto en planta. • Octubre 1996 hasta Junio 2002 Presidente de Belere S.A 120 Has de producción camaronera Machala Ecuador. operating an agricultural operation will continue to increase, the only way to ensure viability of a business is to improve efficiency. The evolution of the first plane built by the Wright brothers to a modern Boeing 787 Dream Liner or the model T assembly lines evolving into a computer automated Toyota assembly plant did not occur without a systematic approach of selfimprovement and critical review. Unlike modern industries, self-evaluations and continual improvement strategies are seldom employed in Aquaculture. • Junio 1998 – Agosto 2000. Miembro del Consejo Científico de la Fundación Cenaim-Espol. This presentation, seeks to present relevant information regarding the scientific and philosophical concepts behind proper feed management, demonstrate the concepts of feed distribution and provide examples of self-evaluation and improved feed management at our facility. • Octubre 1993 - Diciembre 1993: Comercialización de postlarvas de camarón Belere S.A. • Junio 1995 – Enero 2000. Gerente de Producción; Pesquera Industrial Bravito 550 Has de piscinas de producción. • Agosto 1994 - Mayo 1995: M.N.E. Asistente en el área de Oceanografía, y Maricultura, en el proyecto de Desarrollo Experimental de Maricultura de Mar Abierto, Golfo de México. Texas A&M Corpus Christi, Texas U.S.A. • Diciembre 1990 - Agosto 1993: Supervisor de campo de Penaeid Tecnología Internacional (PENTEC). GERENTE TÉCNICO DE LAS SIGUIENTES GRANJAS CAMARONERAS: • Pesquera Bravito Prov. de El Oro, Noviembre 1991 - Agosto 1993. • Capaiso Prov. de El Oro, Junio 1991 - Octubre 1991. ASISTENTE TÉCNICO CAMARONERAS: DE LAS SIGUIENTES GRANJAS • Mardelsa, Golfo de Guayaquil, Diciembre 1990 • Cafirsa, Golfo de Guayaquil, Enero 1991 • Lebama, Golfo de Guayaquil, Febrero 1991 - Junio 1991, • Biólogo de laboratorio y campo en Pescarsa, Golfo de Guayaquil. Octubre 1989 - Noviembre 1990. JORGE LUIS CORDOVA SORIA EDUCACIÓN Candidato a Magister en Economía y Dirección de Empresas ESPOL Facultad de Ciencias Humanísticas y Económicas. Noviembre de 1997. Master en Ciencias Maricultura Universidad de Texas A&M.Corpus Christi Texas. Octubre 1989. Titulo de Biólogo Especialización Marina, Universidad de Guayaquil, Guayaquil Ecuador. Enero de 1984. Título de Bachiller Colegio Cristóbal Colon, Guayaquil, Ecuador. EXPERIENCIA TECNICA • Naturisa. Gerente de Producción (3.000 Hectáreas Isla Josefina, Guayaquil Ecuador). Agosto 2008 hasta la fecha. • Prácticas profesionales INOCAR, y Participación en cuatro cruceros oceanográficos a bordo del buque de investigaciones marinas “Orion” del Instituto Oceanográfico de la Armada. En el Pacifico Oriental Tropical, y las Islas Galápagos: 1986 - 1989. • Participación en la Primera Expedición Ecuatoriana a la Antártica, como asistente de las investigaciones en el área de Oceanografía Biológica: Diciembre 1987 - Marzo 1988: CRUCEROS OCEANOGRAFICOS • 1986 (Ecuador); 1987(Ecuador); 1988 (Antártica); 1988 (Ecuador); 1988 (Ecuador), 1989 (Ecuador). CONFERENCIAS DICTADAS • Producción de juveniles de camarón en tanques tipo raceways: Taller sobre producción de juveniles en sistemas de Bio-flocs Octubre 2014 • Técnicas de Manejo Integral de granjas camaroneras en Ecuador: XV Congreso Ecuatoriano de Acuacultura y Aquaexpo, Octubre 2013 • Productor camaronero desde Oct. 1996 hasta 2012, 30 Has Provincia de El Oro. • Fertilización y Manejo de Suelos en estanques de Acuacultura: Fundación Sociedad Latinoamericana de Acuacultura SLA, Junio 2008 • Aquafarm S.A. Gerente Nacional de Ventas Investigacion y Desarrollo Enero 2008. • Buenas Practicas de manejo en fincas camaroneras: Cámara Nacional de Acuacultura-CENAIM Julio 2008 • Campac S.A. y Campac Seafood LLC Venta, Comercialización y Desarrollo de Mercado de camarón, encargado de la operación en USA, años 2006- 2007 . • Efectos de dietas suplementadas con astaxantina sobre el crecimiento y la supervivencia de Penaeus vannamei en condiciones comerciales de cultivo en Ecuador: Primer Seminario Roche de Acuacultura Octubre 1996. • Efecto de la calidad ambiental sobre la producción comercial de camarón: Hacia una Acuacultura sustentable, ciclo de conferencias organizado por la Cámara Nacional de Acuacultura. Junio 1997. Aquaexpo, Octubre de 1998. • Presidente Cámara Nacional de Acuacultura Capitulo El Oro desde Enero 2003 Enero 2005. • Consorcio Camaronero Orense, miembro año 2003 asistencia a Boston Seafood Show 2003. 42 • Análisis de Algunos factores de Producción en 2 granjas camaroneras ecuatorianas: Octubre 1999, en V Congreso Ecuatoriano de Acuacultura. • Evolución de la situación del virus de la mancha blanca en Ecuador: Marzo 2000, en Seminario de Actualización sobre mancha blanca y cabeza amarilla. CNA, Fundación Cenaim Espol. La presentación a efectuar muestra varios aspectos de la experiencia práctica obtenida en la implementación de la tecnología disponible y su aplicación a la producción en granjas camaroneras, considerando el concepto de re utilizar el agua como un aspecto contingente básico de bioseguridad ante amenazas de patologías bacterianas ya desarrollándose en otras industrias de producción de camarón en el mundo. PUBLICACIONES Cabe destacar que la siembra de juveniles en piscinas es también un elemento que ha contribuido positivamente al incremento de la productividad en la industria ecuatoriana durante los últimos años, al aumentar la rotación anual del uso de la infraestructura disponible. Distribución de la clorofila “a” con relación al frente ecuatorial durante Agosto de 1988: Acta Oceanográfica del Pacifico. INOCAR, Ecuador 1989. Distribución de la clorofila “a” en el Estrecho de Bransfield (Antártica) durante el verano austral 1987-1988: Acta Antártica Ecuatoriana INOCAR, Ecuador. Efecto de dietas suplementadas con Astaxantina sobre el crecimiento y la supervivencia de Penaeus vannamei en condiciones comerciales de cultivo en Ecuador: Tesis de Grado Texas A&M University Corpus Christi Noviembre 1997. Análisis de Algunos factores de Producción en 2 granjas camaroneras ecuatorianas: Acuacultura del Ecuador Edición # 34 Noviembre Diciembre 1999 Guayaquil Ecuador. Evolución de la situación del virus de la mancha blanca en Ecuador: Acuacultura del Ecuador Edición # 38 marzo Abril 2000 Guayaquil Ecuador. Raceway nursery production increases shrimp survival and yields in Ecuador: Global Aquaculture Advocate 3 (6) 66-68, Samocha, T.M. Blacher,T. Cordova, J. and De Wind,A. 2000. Temas de su conversatorio: “SISTEMA INTENSIVO DE PRODUCCIÓN DE JUVENILES EN RACEWAYS, BAJO EL ESQUEMA DE RECIRCULACIÓN”. RESUMEN A partir de la llegada del virus de la mancha blanca, a Ecuador (1999), se observó en granjas camaroneras orenses que la siembra de juveniles durante la temporada de mayores temperaturas del año, permitía lograr producciones significativamente superiores, hecho reportado en (Samocha et. al. 2000). Instalándose en la provincia de El Oro desde esta época los primeros tanques para la producción de juveniles (Pesquera Bravito) con el objetivo de efectuar siembras de juveniles hacia piscinas de engorde buscando incrementar los niveles de producción en piscinas, muy venidos a menos en esos días debido al impacto del virus de mancha blanca, un segundo objetivo alcanzado en aquellos días con la siembra de juveniles consistía en acortar los días del ciclo de producción e incrementar la productividad, al comparar la siembra de juveniles con las siembras directas. Con el paso de los años y con el desarrollo, implementación y entendimiento de varios procesos y conceptos relacionados a la producción intensiva de biomasa en tanques, usando conceptos relacionados a la generación de flóculos bacterianos, bío seguridad, salud, sistemas de aireación y circulación, a partir de trabajos de diferentes investigadores ( Samocha, Avnimelech, Rodriguez, Ebeling, Hargreaves, Browdy, y mas ), hoy disponemos en las fincas de producción de camarón de una herramienta de trabajo que permite efectuar siembras de juveniles más sanos, mejor nutridos y con mayor potencial de generar una mayor productividad. JAIME ALEJANDRO YOCKTENG FUENZALIDA ESTUDIOS - Biólogo, egresado de la Universidad Ricardo Palma - Lima-Perú (1979). - Acuicultor. - Buzo científico, instructor (1980). - Salvavidas (1980), e Instructor certificado de CPR (USA, 1994). - Surfer (desde 1967). EXPERIENCIA ANTERIOR: Prácticas profesionales en el IMARPE (1977-1979). Inicia actividad profesional en la década de los 80 como Jefe de la Unidad de Maricultura en el Ministerio de Pesquería del Perú- Supervisor especial del plan de racionalización de la Sardina (1981-1982), Publica la “Realidad marisquera en el Perú” - “El cultivo de conchas de abanico en la bahía de Paracas” y, -” La actividad langostinera en el Perú” (Revistas documenta 1981, 1982). Organiza la primera prospección submarina en la Bahía de la Independencia, IcaPerú , con el Dr. Wolff Arntz y Juan Tarazona (1981). Pionero en larvicultura de camarón en el Perú “Broodstock S.A.” en Tumbes, Perú (1984). Investigador particular de la producción de conchas de abanico en Paracas con el Dr. Mattias Wolff (1984), sus investigaciones advierten el grave problema de la mala práctica de las “granjas” en la bahía de Paracas. Gerente de Producción de las empresas “COEX” Y “LARPESA” entre 1987 y 1992. Experiencia en manejo de camaroneras en cultivos extensivos, intensivos y super intensivos. Primeras producciones en Tumbes de “langostinos” con sistemas de aireación (Proyecto Culmarex, 1989, record). Pionero con el sistema de comederos para camarones. Asesor de varias empresas camaroneras en Perú , Ecuador, Brasil y Panamá. Gerente de Producción del Grupo “Santa Priscila” de Ecuador entre 1997 – 2000. Fundador y Gerente de Producción en la Primera Empresa de Producción y Enriquecimiento de Biomasa de Artemia en Latinoamérica “Artemia del Pacífico” (Piura, Perú), en la década de los 90; y Bioartemia Cía. Ldta., en Salinas, Ecuador fundada en el año 2000 (Ecuartemia), hasta la fecha. 43 Participación en múltiples simposium›s y congresos de acuicultura en Perú, Ecuador, USA y centro América, en calidad de participante y expositor, con varias publicaciones de la especialidad en revistas de la SLA (Cultivo comercial de caballito de mar H.innges) y CNA (cultivo y producción de biomasa de Artemia en Ecuador). Pionero en la selección basal en el Ecuador (1997-1999). Productor a nivel comercial de caballitos de mar del género Hippocampus ingens (2008) y experto en sistemas de agua y recirculación. Actualmente lleva el proyecto de producción super intensiva de microalgas comerciales por sistemas de biorreactores (DG) y cultivo de alimentos vivos alternativos. Tema de su conversatorio: PRODUCCIÓN SÚPER INTENSIVA DE MICROALGAS MARINAS PARA ACUICULTURA. “BIOTECNOLOGÍA DE LOS BIORREACTORES”. RESUMEN: Las microalgas constituyen la base de la cadena trófica marina. En acuicultura, específicamente en el cultivo de Penaeus vannamei, las microalgas constituyen también la base para un desarrollo larvario de calidad y sobrevivencia, aportando un alto contenido nutricional. Existe abundante información sobre el problema de calidad de las microalgas que son utilizadas como insumo en las dietas para una gran variedad de organismos sujetas a cultivo. En Ecuador se mencionaba el “efecto buffer” de las microalgas en toda la corrida de larvas; diversos síndromes; problemas de bioseguridad, entre otros, también están relacionadas al manejo y utilización de microalgas comerciales. Sin embargo, es también conocido que la composición nutricional de las microalgas es muy variable pues depende de las técnicas de producción, edad de cultivo, parámetros físico-químicos, entre otros aspectos característicos de los diversos laboratorios que las producen. La producción controlada de microalgas se remonta algunas décadas atrás. Más recientemente se ha dado el desarrollo de la tecnología de biorreactores para producción de grandes volúmenes de biomasa microalgal, como por ejemplo la tecnología generada en Tailandia (Dr. David Garriques), ha demostrado ser una valiosa herramienta para obtener en gran cantidad y sobre todo excelente calidad de microalgas, que entre otras virtudes ha permitido mejoras en bioseguridad contra el EMS (com.personal D. Garriques). Con el objetivo de contribuir con la actividad acuícola de nuestra región, proporcionando mejores insumos para la nutrición a través de la producción de biomasa de microalgas de alta calidad, la empresa Bioartemia Cía.Ltda., inicia en el año 2014 la implementación de los primeros sistemas de biorreactores en Ecuador, para uso acuícola. En el presente trabajo se mostrará los primeros resultados obtenidos de la producción súper intensiva de la micro alga Talassiosira sp., que ya ha superado hasta en 40 veces el volumen y concentración de las producciones actuales de diversos laboratorios de la zona, bajo sistemas convencionales de producción algal. Así mismo, se mostrará la efectividad de la calidad del producto obtenido, a través de los ensayos realizados en un laboratorio de producción de larvas de camarón en Santa Elena, durante tres ciclos (corridas) seguidos. Finalmente se presentarán las futuras aplicaciones de los productos de los bioreactores para la producción intensiva de alimento vivo enriquecido, alternativos para el uso en larvicultura de camarones principalmente (Rotíferos, Copépodos, metanauplius de Artemia). Dr. ARTURO ROJAS C. AVIMEX SA. MÉXICO. Tema de su conversatorio: TERAPEUTICA ACUICOLA USO PRUDENTE Y RESPONSABLE Resumen En el año 2003 como respuesta a la recomendación formulada por el Comité Ejecutivo de la Comisión del Codex Alimentarius ( 2001 ) de que se debatiera sobre cuestiones relacionadas con el uso de antimicrobianos en la agricultura y la medicina veterinaria (incluida la acuicultura) y tomando en consideración la función común que desempeñan los antimicrobianos en cuanto a medicamentos humanos y veterinarios esenciales se realizo una reunión conjunta de expertos de la FAO, OMS y OIE en antimicrobianos de Importancia Critica. En Marzo del 2013 en la Conferencia Global de la OIE realizada en Paris, Francia, se establecieron los lineamientos para el Uso Prudente y Responsable de los Agentes Antimicrobianos para los animales. De acuerdo a la OIE los Agentes Antimicrobianos son Herramientas esenciales para la protección de la salud de los animales. Ellos también contribuyen a satisfacer la creciente demanda de alimentos seguros. La eficacia de los agentes antimicrobianos debe ser preservada a través del uso prudente y responsable. La OIE ha clasificado los agentes antimicrobianos veterinarios en tres grupos: 1. Importancia crítica, 2. Importancia elevada. 3. Importancia para la sanidad animal. La OMS ha clasificado los agentes antimicrobianos humanos en tres grupos: de importancia crítica, de importancia elevada o de importancia para la medicina humana. La mayor parte de las clases de antimicrobianos han sido clasificadas tanto por la OIE como por la OMS en sus listas. CLASIFICACION DE LOS ANITIMICROBIANOS POR LA OIE Aún con los mejores y más avanzados estándares de manejo los animales pueden entrar en contacto con enfermedades infecciosas. Los esfuerzos van dirigidos a reducir la incidencia de las enfermedades infecciosas pero aún no somos capaces de erradicarlas. El uso de los antibióticos resulta ser necesario de tiempo en tiempo pero debemos aprender a usarlos en una forma optima en el momento correcto, usando la droga correcta a la dosis y tiempo correcto. Para esto se debe contar con: • Las herramientas diagnósticas que deben ser fácilmente accesibles a los granjeros y veterinarios. • Contar con productos registrados ante las autoridades de cada País para un uso específico de cada especie a usar. • Contar con un Veterinario responsable que asegure el uso adecuado en tiempo y forma de los antimicrobianos (Receta Médica). Recientemente se ha realizado pruebas de sensibilidad y Concentraciones Mínimas Inhibitorias de diversos antibióticos contra cepas de Vibrio parahaemolitycus causantes de EMS en México y los resultados podemos observarlos en el cuadro II donde podemos observar que existen fuertes sensibilidades a los antibióticos pero también a algunos como la Oxitetraciclina hay resistencia. MARÍA SOLEDAD MORALES COVARRUBIAS Estudios Superiores Doctorado en: Ciencias Área Acuicultura (Patología y fisiología de crustáceos). Centro de Investigación en Alimentación y Desarrollo, A.C. Mazatlán, Sinaloa. 2006 Maestría en: En ciencias. Área Acuicultura (Patología de crustáceos). Centro de Investigación en Alimentación y Desarrollo, A.C. Hermosillo, Sonora. 1996. Licenciatura en: Biología Pesquera. Facultad de Ciencias del Mar/ UAS. Mazatlán, Sinaloa. México. 1987. Tema de su conversatorio: Situación Actual del EMS en la producción acuícola de México Líneas de Investigación • Sanidad de organismos acuáticos: Sus principales trabajos de investigación están enfocados a histopatología, virología, fisiología y clonación de genes de crustáceos; imparte cursos, conferencias, capacitación y consultorías en sanidad acuícola. Colabora en proyectos de investigación de patología de crustáceos y en programas de transferencia tecnológica con universidades y centros de investigación de América Latina. Es responsable de los diagnósticos e implementación de técnicas de histopatología y análisis en fresco en el CIAD, es autora de numerosos artículos científicos, manuales y libros de enfermedades del camarón. Proyectos Recientes • Identificación, Prevalencia e Incidencia de Agentes Patógenos en Litopenaeus vannamei Cultivado en Ambiente Dulceacuícola en el Estado de Colima México. • Caracterización molecular de Streptococcus aislado de Litopenaeus vannamei. • Detección de patologías causadas por productos extracelulares de Streptococcus sp y Micrococcus sp aislados de camarón blanco(Litopenaeus vannamei). • Detección de patologías causadas por cianobacterias en camarón blanco(Litopenaeus vannamei). Publicaciones Recientes: Libros • Morales-Covarrubias, María Soledad. 2010. Enfermedades del camarón. Detección mediante análisis en fresco e histopatología. Editorial Trillas, SA de CV., Av. Río Churubusco 385, Col. Pedro María Anaya, México, D.F. Segunda edición. ISBN:907-607*17-0436-8. Pp. 1-130. Capítulos en Libros • Morales-Covarrubias, María Soledad.2012. CHAPTER 2.2.4. NECROTISING HEPATOPANCREATITIS. Diagnostic Manual for Aquatic Animal Diseases. 7th Edition. Office International des Epizooties (OIE), Paris, Francia. Pp. 1-48. En prensa. • Morales-Covarrubias, María Soledad y Gómez-Gil Bruno 2012. Enfermedades bacterianas. En Patología e Inmunología de Camarones”. Editores Vielka Morales y Jorge CuellarAngel. 2012. En prensa. 45 • Acuacultores del Quinto Día La experiencia 2013”. Tercera mesa de análisis sobre acuacultura. Diciembre de 2013. • Sistemas de cultivo bajo invernaderos una opción ante las enfermedades atípicas”. Tercer foro Económico de Pesca y Acuacultura. Noviembre de 2013. • Modelos de pre-engorda de Juveniles de Camarón para disminuir riesgos sanitarios y optimizar la producción”. Séptimo foro internacional de acuicultura. Septiembre de 2012. • La relevancia de la investigación Científica en la camaronicultura”. Los avatares de la industria Camaronícola. Julio de 2012 • Protocolo Sanitario para Raceways”. Taller de manejo de maternidades. Mayo de 2012. SAÚL ALBERTO SOTO PÉREZ ESTUDIOS: Licenciatura en Biología por el Instituto Tecnológico de los Mochis, Sinaloa, México. EXPERIENCIA: 1. GRUPO AHOME ACUÍCOLA. 1994-2004 • Practicante-Operador-Técnico. • Supervisor- Jefe de Producción. • Gerente de Producción. • Empacadora: Logística de Descabece, Clasificación y Almacenaje de producto preclasificado. • Supervisión del proceso productivo (recepción, descabece, clasificación, empaque, IQF, embalaje, bodegas). • Granja: Manejo de cultivo: Maternidades, Semiintensivos, Intensivos. 2. GRUPO CAMARONERO DEL QUINTO DIA. 2004- 2015. • • Director de Producción. Granja: Manejo de cultivos semiintensivos y maternidades. • Uso de probióticos y biorremediadores, Bioflóc, Balance Iónico. 3. PRESIDENTE DEL CONSEJO DE ADMINISTRACIÓN DEL COMITÉ ESTATAL DE SANIDAD ACUÍCOLA DE SINALOA. CESASIN 2011-2013. 4. MIEMBRO COORDINADOR DE LA FUNDACIÓN SOCIEDAD LATINOAMERICANA DE ACUACULTURA «SLA», CAPITULO MÉXICO. Desde el 2006 a la fecha. EXPERIENCIA ACTUAL • Diseño y Manejo de pre crías intensivas para la producción de juveniles. • Manejo de sistemas de Biofloc. • Bio-remediación, calidad de agua y manejo de fondos. • Diseño e implementación de protocolos para maternidades y estanquería ante las “enfermedades atípicas” en México. CONFERENCIAS DICTADAS • 46 EMS en México”. XI Simposio Internacional Actualización Científica en Acuacultura. Febrero de 2014. Tema de su conversatorio: “Estrategias de manejo exitoso, ante las criticas condiciones ambientales de México” RESUMEN La industria mundial del cultivo de camarón ha sufrido efectos devastadores por la aparición constante y frecuente de enfermedades infecciosas. Se ha estimado que tan sólo, en el periodo 1990-2005, la producción global del cultivo de camarón alcanzó pérdidas económicas cercanas a los 15 mil millones de dólares y, de acuerdo con datos proporcionados por la Alianza Global de Acuacultura, aproximadamente 60% de dichas pérdidas puede ser atribuido a enfermedades virales, 20% a enfermedades bacterianas, y el restante 20% a una variedad de otros agentes patógenos. Nuestro país (México) no se ha visto libre de estos padecimientos y, como en los casos anteriores, las pérdidas han sido cuantiosas. Ya tocó el turno al Virus de la Necrosis Hipodérmica y Hematopoyética Infecciosa, identificado en México en 1989, y al Síndrome de Taura, que llegó en 1994. El virus del síndrome de manchas blancas (WSSV, por sus siglas en inglés) ha causado muy serios problemas a la industria del cultivo de camarón en México. A principios de 2013, una patología diferente cimbró la industria acuícola en México, se le nombró “enfermedades atípicas”, los productores nos vimos rebasados por el problema al igual que la academia y las instituciones de gobierno, pero lo que hace más preocupante la situación es que, en su momento, cada vez que se ha presentado una epizootia, la información sobre su presencia, avance e impacto se ha manejado a “cuentagotas” dejando que la “rumorología” juegue su pernicioso papel, lo que ha impedido la toma oportuna y eficiente de decisiones. La información “filtrada” por los centros de investigación (CIAD), indican la presencia de EMS en México. En agosto de 2013, el doctor Donald Lightner confirmó, en la “Sexta Reunión del Comité Interamericano de Sanidad de los Animales Acuáticos”, llevada a cabo en Yucatán, la presencia de EMS en nuestro país. Dada la frecuencia con la que se ha presentado este tipo de situaciones causantes de graves afecciones a la industria camaronera en los últimos años, es de esperar la aparición de nuevos patógenos en un futuro próximo. Por tanto, se considera muy importante mantener acciones por parte del Gobierno de vigilancia epidemiológica, las cuales, instituciones, como los Comités de Sanidad Acuícola en los Estados productores de camarón, han llevado a cabo desde hace varios años en nuestro país, además ayudaría bastante la coordinación y apoyo con los centros de investigación. Por parte de la Academia, el desarrollo de proyectos de investigación que permitan entender el proceso infeccioso y epidemiológico, serán las acciones necesarias a desarrollar y aplicar estrategias de intervención y/o tratamientos que eviten la transmisión y dispersión de las enfermedades infecciosas en cultivos de camarón en nuestro país. Por otra parte, los productores también deben implementar acciones que colaboren a minimizar el efecto de cada patología, sin menospreciar el logro que se tenga en investigación y gobierno, y en colaboración con los mismos, ya que al menos en las últimas dos patologías presentes en nuestro país, ha sido la determinación de algunos cuantos productores haciendo experimentación, con diferentes alimentos, líneas genéticas, diferentes protocolos de cultivo y adopción de estrategias usadas en otras áreas productivas adaptadas a la acuacultura. El sustento del párrafo que antecede, es que los productores hemos tenido que cambiar nuestra mentalidad y abrirnos a nuevas y diferentes estrategias de cultivo que incrementan la certeza en la producción, tales como: Elección de post larvas más tolerantes a enfermedades, manejo de maternidades, mayor talla de siembra, uso de alimentos de mejor calidad, mejores protocolos de manejo de estanquería, mucho mayor monitoreo y observación de los organismos en todas sus fases. Adopción de los sistemas de maternidades, las cuales además de brindar la ventaja de llegar a mercado en menor tiempo y accediendo a mejores precios, hacen una diferencia marcada en los parámetros productivos. Este éxito es sustentado por una serie de procedimientos y técnicas extraídas de otras áreas del conocimiento, tales como: Calidad de agua, desinfección, inóculo, balance iónico, equilibrio C:N, nutrición-Aditivos, probióticos, biofloc, monitoreo y Observación. En estanques también se han tenido que implementar protocolos más estrictos en aspectos sanitarios, tales como: certificación de post larvas libres de patógenos, periodos de secado sanitario, implementación de excluidores de fauna de acompañamiento, sistema de filtrado más estrictos. También se han adoptado protocolos de siembra por bombeo, con el cual se minimiza el stress, se están sembrando tallas mayores demostrando mejores resultados, el aprovechamiento del crecimiento compensatorio, el uso de probióticos y biorremediadores sumado al balance iónico, nos han permitido salir adelante ante las diferentes patologías. Henry Álvarez Estudios: Acuicultor, graduado en la Universidad Nacional de Ciencia y Tecnología de Taiwán. Diplomado en Procesos de desarrollo, Facultad de Ingeniería Marítima y Ciencias del Mar. ESPOL. Experiencia: Ejerció su profesión en la docencia universitaria, la investigación aplicada y la asesoría técnica para el sector acuícola por más de 25 años. Actualmente colabora en Balnova, como asesor técnico para el sector camaronero. Tema del conversatorio: ACTIVIDAD ENZIMÁTICA, RITMO CIRCADIANO Y SU RELACIÓN CON LA ALIMENTACIÓN Resumen La histología de los túbulos del hepatopáncreas reflejan la complejidad del proceso digestivo en el camarón. En esta glándula ocurre gran parte de la síntesis, secreción enzimática y absorción de los nutrientes que ingresan con la alimentación. Pero además, hay dos fenómenos que intervienen en la fisiología digestiva del camarón: Los ritmos circadianos y el ciclo de muda. Los ritmos circadianos son oscilaciones de las variables biológicas en intervalos regulares de tiempo, y toda variación fisiológica (ej. tasa metabólica) suele estar asociada con un cambio ambiental, que también es rítmico. Estos ritmos persisten en condiciones de laboratorio aun sin estímulos externos. En los crustáceos decápodos se han encontrado ciclos circadianos en eventos como los ritmos bioquímicos relacionados con la concentración de proteínas, liberación de enzimas digestivas, aminoácidos libres, ácidos grasos y pigmentos. También presentan ritmos relacionados con las migraciones diurnas y nocturnas. Ritmos en la conducta alimentaria y la exuviación. Cadena y Molina (2009), en su trabajo “Relación entre el ciclo de muda y la actividad de las enzimas digestivas, y su efecto en la tasa de alimentación y crecimiento del juvenil P. vannamei” sostienen que hay una conección de la ecdisis con el ciclo lunar en cuarto menguante (CM), con aproximadamente el 50% de la población mudada, alcanzando el pico máximo en luna nueva (LN) con el 80%. Partiendo de los resultados encontrados en ensayos con diversos camarones peneidos, se llegó a sostener que el ajuste de los horarios de alimentación, considerando el ritmo de producción de enzimas digestivas, favorecerá la digestión del alimento, teniendo un efecto positivo sobre el factor de conversión alimenticia. El problema actual, entre otros aspectos, es la ausencia de una sincronización de muda en la población que no permite resolver dicha hipótesis. 47 • • Expositor en varios Talleres Conversatorios SLA-Guayaquil. Expositor en el Congreso WAS/1987 (World Aquaculture Society) tema: “Sistema modular trifásico de producción” Guayaquil-Ecuador. PUBLICACIONES: Varios artículos publicados en revistas de acuacultura de Ecuador, Venezuela, Brasil, desde el año 1984 hasta la fecha. Tema de su conversatorio: “Producción intensiva de juveniles de 2,0 gramos de L. vannamei, en sistema modular” JORGE IVÁN CERECEDA JALIL ESTUDIOS Postgrado en Acuacultura, Centro de investigación para la Acuacultura, CERLA-FAO, Pirassununga, Brasil. 1983 (2da promoción). Ingeniero Agrónomo. Escuela Agrícola Panamericana, El Zamorano Honduras 1981. Bachiller Químico-Biólogo: Colegio Javier - Guayaquil, 1977. EXPERIENCIA ACTUAL. • Diseño y manejo de Pre-crías intensivas modulares, para producción de juveniles en altas biomasas. • Diseño e implementación de sistemas de recirculación, con manejo de herramientas biotecnológicas. • Experto en el diseño, desarrollo y manejo de tecnologías para producción de camarones, en todas sus fases: Laboratorio de Larvas, Maduraciones, Camaroneras Semi-intensivas, Intensivas y Modulares en: Ecuador, Egipto, Brasil, Venezuela y Guatemala. EXPERIENCIA LABORAL • Diseño, manejo y asesorías a más de 60 grupos camaroneros en Ecuador desde el año 1983 hasta la fecha. • Diseño, desarrollo y manejo de precrias intensivas para las camaroneras Fafra, Rocormin, Limasol, Margarita y Sol Capital en las provincias del Guayas y El Oro, 2012-2015. • Diseño, desarrollo y manejo de 14 precrias intensivas, con producción de hasta 12 millones de animales en tanques de 850 toneladas. Grupo Oro del Pacifico, Ixtapa, Guatemala, año 2013-2015. • Manejo del laboratorio Inmarlaca, Estado de Falcón, Venezuela, 2007-2008. • Diseño, desarrollo y manejo de la camaronera Camalago, sistema trifásico modular (Raceways, precría intensiva y engorde) en el Estado de Zulia, Maracaibo, Venezuela año 2004 al 2008. • Diseño, desarrollo y manejo del laboratorio de larvas (maduración y larvicultura) Atlantic lab, en la isla margarita, cubriendo el 80% de las necesidades de larvas en el Estado de Zulia, Maracaibo, Venezuela, año 2003 al 2008. • Diseño, desarrollo y manejo de la camaronera Sinaí - Shirmp, SS-21 en el canal de Suez, Egipto, proyecto integrado de laboratorio de larvas, maduración y camaronera de 500 hectáreas con Pennaeus semisulcatus. Año 1994-2000. • Manejo y asesoría a la camaronera Tecnarao en Natal, Brasil. Año 1998. EXPOSITOR EN: • Expositor de varios congresos y Simposios en Ecuador, Brasil, Venezuela. 48 RESUMEN Ecuador, ha sido el país pionero en el desarrollo de la industria camaronera en el Hemisferio Occidental. Desde el inicio de las primeras producciones a finales de los años 60, hasta la actualidad se ha caracterizado por su innovación y desarrollo. En los años 80, la implementación de precrias de tierra para producir juveniles entre 1 a 3 gramos, fue una herramienta que ayudo a dinamizar la industria. Posteriormente en los años 90, la presencia de enfermedades como el mal de la Gaviota (producido por una septicemia bacteriana), el virus del Taura, las intracelulares (NHP) y finalmente el virus de la Mancha blanca, hicieron que el uso de precrias de tierra perdiera interés. A partir del año 2004, se volvieron a utilizar las precrias de tierra en algunas camaroneras, para producir juveniles de no más de 3 semanas ó de 0.3 gramos de peso promedio, debido a la presencia de enfermedades. Sí comparamos la producción de juveniles en los años 80, con las precrias actuales de tierra, resulta en un arranque menor de los cultivos por la diferencia del peso promedio inicial, reduciendo la rentabilidad. A mediados de los años 90, se implementó en los laboratorios de larvas de Ecuador el uso de los llamados raceways, con la finalidad de reducir el número de días en los cultivos y aumentar la producción mensual de los laboratorios. Esta técnica, fue importada a las camaroneras y se ha convertido hasta la actualidad en una excelente herramienta de producción. La diferencia de los raceways en camaroneras comparada con las precrias de tierra, es que sacan animales de menor tamaño (10 a 50 juveniles x gramo), resultando en una menor ganancia (tiempo y dinero). Precrias intensivas modulares Viendo esto, y buscando volver a producciones de juveniles de más de 1 gramo de peso, que permita reducir los días de cultivo con animales saludables, me he dedicado en los últimos 3 años a desarrollar lo que llamo Precrias intensivas en sistema modular. La experiencia ganada en mis años de productor como de asesor en laboratorios de larvas y camaroneras, me ayudó a implementar esta técnica, buscando producir animales de buen porte y saludables, minimizando el ataque de patógenos (bacteriano y viral), que merman las producciones tanto en precrias de tierra como en raceways. Esta tecnología, se basa en buen manejo de calidad de agua, el uso adecuado de herramientas biotecnológicas y el diseño de un sistema modular, de fondos de linner e invernadero, donde divido la producción, siendo más eficiente y reduciendo riesgos en el cultivo. He logrado producir con esta técnica, sobre 4 kilos de biomasa por metro cubico de agua, con animales entre 0.3 hasta 2 gramos de peso promedio en ciclos de cultivo que van desde 21 hasta 44 días sin presentar problemas de enfermedades, con supervivencias que oscilan entre 85 al 95% final. Los animales que ya han sido transferidos a piscinas de engorde bajo esta tecnología, han presentado un aumento de supervivencia entre el 15 al 20% comparados con siembras directas, y una reducción en días de cultivo de 20 a 45 días comparado con siembras directas y animales de raceways. • • Presented 120 oral contributions at Scientific Meetings and other professional gatherings Was the Sole Lecturer of a full week’s Course/Workshop on Shrimp Genetic Improvement prepared by and for the Iranian Fisheries Research Organization, Bushehr, Iran, January 2013. Tema de su conversatorio: SOBRE ALGUNAS EXPERIENCIAS INTERNACIONALES EN EL MEJORAMIENTO GENÉTICO DE CAMARÓN: BRASIL, ECUADOR, INDONESIA JOÃO L. ROCHA Born 1961, Portugal. ESTUDIOS SUPERORES Ph.D. (Animal Breeding and Genetics) – 1994 – Texas A&M University, USA M.Sc. (Animal Breeding and Genetics) – 1990 – Texas A&M University, USA D.V.M. – 1984 – Lisbon School of Veterinary Medicine, Portugal. EXPERIENCIA • Independent Breeding, Genetics, and Statistics Consultant – Iowa Genetics (headquartered in Brazil) – August 2010-present • Shrimp Breeding Program Director – CAMACO (Panama), since August 2013; Songa/Expalsa (Ecuador), since December 2012; PrimaGen (Indonesia), since April 2011; and Texcumar (Ecuador), since January 2011 • Shrimp Breeding Program Geneticist– Aquatec/Genearch (Brazil)– 2006-present • Shrimp Breeding Program Genetics Consultant – Short-term consultancies: with • Shrimp breeding companies in the Philippines (FeedMix); • Panama (CAMACO); the United States (Primo Broodstock); • And Ecuador (Songa/Expalsa); and with the Federal University of S. Carlos, S.P., Brazil. • Long-term consultancy: Integrated Aquaculture International (IAI – Brunei and Kona Bay, Hawaii, U.S.A.) – 2006-2010. • Shrimp Breeding Program Geneticist – Sygen/SyAqua (Hawaii, Mexico, Brazil, and Thailand) – 2002-2006. • Experiences with beef and dairy cattle, and hybrid corn genetic improvement programs, mouse genetics, and genetic marker applications in breeding programs – 19882002 • Private Veterinarian practice and Public Animal Health Control in Cattle National Breed Association (Arouquesa) – Portugal – 1997-1999 • State Veterinarian – Transkei, Republic of South Africa – 1984-1986 PUBLICACIONES: • Authored or co-authored 20 peer-reviewed manuscripts, 1 key-note address, 3 book-chapters, 47 Conference papers, abstracts and posters, 26 non-peer-reviewed manuscripts, and 77 corporate technical reports 50 RESUMEN En Brasil, con la empresa Genearch Aquacultura, iniciamos en 2007 un Programa de Mejoramiento Genético con un número de Líneas SPF importadas desde los Estados Unidos en el año de 2006. El Programa se desarrolló en el Centro de Mejoramiento Genético de la empresa, con status sanitario SPF, con base en un sistema de bioflocos a densidades de siembra entre 100-150 animales/m2. En las primeras pruebas de desempeño conducidas en los años de 2007-2008, en la primera generación del Programa, se registraron tasas medias de crecimiento de 1,237 g/semana (crecimiento entre 2 y 18 g) con una sobrevivencia media de 94%. Siete generaciones de mejoramiento genético después, ejecutando un programa familiar (240 familias/año) con identificación por elastómero, con selección familiar para crecimiento y sobrevivencia y selección intra-familiar para crecimiento, el último Batch Genético de 2014 registró una tasa de crecimiento de 2,331 g/semana (entre 2 y 18 g) con sobrevivencia de 94,7%. Esto significa una mejora fenotípica de 88% en las tasas de crecimiento (13% de mejora fenotípica/ generación). Con recurso a técnicas estadísticas BLUP, basadas en análisis de pedigrís, las últimas estimaciones indicaron que 55% de la mejora fenotípica fue de naturaleza genética. El gráfico abajo documenta la evolución de las tasas de crecimiento de nuestras pruebas genéticas de desempeño (bajo un sistema de bioflocos a 100-150/m2) al largo de las generaciones en el Programa de Genearch en Brasil: Con Texcumar en Ecuador, iniciamos desde 2010 un Programa Genético de estructura lineal, sin familias y con selección estrictamente masal. El Programa conforma una asociación entre la Maduración (Texcumar) y un grupo de productores de El Oro. El enfoque único del Programa es la mejora de las tasas de crecimiento en las fincas de los Asociados, con el respectivo manejo de la consanguinidad con base en monitoreos regulares por marcadores moleculares y esquemas de cruces entre líneas. Para manejar el tema de las Interacciones Genotipo x Ambiente (GxE) se han desarrollado productos específicos para los diferentes Asociados, con diferentes códigos de nauplios procedentes de reproductores seleccionados para crecimiento directamente de las fincas de los diferentes Asociados. La Maduración funciona como un centro de servicios para los Asociados, con salas de maduración (total de 12) específicas asignadas a la producción de códigos de nauplios diferentes y específicos de cada Asociado, con reproductores seleccionados originarios de las fincas de ese Asociado. Por criterio definido pelos productores Asociados, las hembras en producción son rastreadas para IHHNV por PCR, y las hembras positivas rechazadas. Tres de las fincas (dos bajo un sistema trifásico “Madre-HijaNieta” y una de siembra directa, dos en Isla una en Continente) de uno de nuestros Asociados están bajo permanente monitoreo para documentar la evolución del Programa Genético. En el año de 2011 (primeras cosechas de códigos seleccionados solo a partir de Septiembre) la tasa de crecimiento promedio de estas tres fincas fue de 1,178 g/semana (crecimiento comercial desde PL10) con 54,5% de sobrevivencia a 12 camarones/m2. En el año de 2014, tres años de mejoramiento genético después, se registró en estas tres fincas una tasa media de crecimiento de 1,452 g/semana (desde PL10) con 55,3% de sobrevivencia a 12,5 camarones/m2. Esto representa una mejora fenotípica de 23,3% en tres años de mejoramiento genético (7,8% de mejora fenotípica/año). Con un sistema masal, sin líneas control, no hay como determinar que parte de esta mejora es de naturaleza genética. Los gráficos abajo documentan la evolución de las tasas de crecimiento en las tres fincas referidas: En Indonesia, con el Grupo Hatchery Consultants International, asumimos la dirección de un Programa Genético con status sanitario SPF desde 2011. Programa muy similar al de Genearch en Brasil, de estructura familiar (160 familias/año), con identificación por elastómero y selección familiar para crecimiento y sobrevivencia en pruebas de desempeño con jaulas en fincas comerciales (100/m2), y intensa selección intra-familiar para crecimiento en el Núcleo Genético SPF. En el año de 2011, en las primeras pruebas de desempeño con jaulas en fincas comerciales, registramos una tasa media de crecimiento de 1,864 g/ semana (crecimiento entre 2 y 18 g) con 78,7% de sobrevivencia media. En el año de 2015, seis generaciones de mejoramiento genético después, en las últimas pruebas de desempeño genéticas recién realizadas con jaulas en fincas comerciales, se registró una tasa media de crecimiento de 2,767 g/semana (entre 2 y 18 g) con una media de sobrevivencia de 76,4%. Esto representa una mejora fenotípica de 48,4% en cuatro años (12,1% de mejora fenotípica/año; ~ 8,1%/generación), de la cual se estima con base en métodos estadísticos BLUP que circa de 50% es de naturaleza genética. El gráfico abajo documenta la evolución de las tasas de crecimiento registradas en las pruebas de desempeño genéticas (con jaulas en piscinas comerciales a 100/m2) al largo de los años, en nuestro Programa de Indonesia: Estos resultados demuestran que mientras se pueda “fijar” el ambiente y el sistema de manejo, como un mismo blanco año después de año, con relativo control y estandarización de los principales parámetros de cultivo, el mejoramiento genético permite lograr de forma más o menos estable y predictible mejoras en las tasas de crecimiento. Con la excepción de los resultados presentados para Ecuador (conjunto de tres fincas comerciales bajo un manejo de excepcional calidad y estabilidad), los demás resultados presentados para Brasil e Indonesia son relativos a la evolución registrada en las pruebas genéticas de desempeño, bajo condiciones relativamente controladas. Transferir estas tendencias positivas arriba documentadas al universo de los resultados comerciales, sobre todo bajo condiciones extensivas o semiintensivas, con amplia variabilidad de parámetros ambientales y de enfermedades de finca para finca, de región para región, de ciclo para ciclo, o mismo de una piscina a la siguiente en una misma finca, no es tan fácil (interacciones GxE). El simples monitoreo y documentación confiable de resultados comerciales no es tarea fácil, por mucho que siempre se afirme que “sí tenemos todos los datos.” También, como sabemos bien, ni todo es genética, la larvicultura suele tener efectos tan importantes como la genética, el manejo de reproductores en las maduraciones y los criterios de selecciones de nauplios tendrán también sus efectos, y del manejo en finca ni hablar. Avances importantes solo se podrán lograr cuando todos estos factores, genética, larvicultura, reproductores, nauplios, manejo de fincas, estén todos encadenados por criterios y desempeños de calidad en cada sector del sistema. Desafortunadamente, también, con presencia de enfermedades y bajo condiciones de manejo deficiente, la tendencia es siempre para una dicotomía negativa entre crecimiento y sobrevivencia/ robustez general del animal. Los Programas Genéticos tienen que cuidar estos dos objetivos, y con la evolución de la camaronicultura de forma gradual otros objetivos genéticos se volverán de forma gradual también importantes en los programas genéticos del futuro, sobre todo quizás características del producto final, como porcentajes de rendimiento de cola y del producto procesado, y características organolépticas del camarón desde el punto de vista del consumidor. Cuantos más objetivos simultáneos tenga un programa genético, menos se podrá avanzar en lo que respecta a las ganancias genéticas que se pueden lograr para cada una de las características individuales. Las tasas de mejora fenotípica y genética arriba referidas (7-13%/año o generación), son valores excepcionalmente altos y que se logran por un enfoque más agresivo en las tasas de crecimiento en este momento inicial de la camaronicultura. Pero es probable que los programas genéticos del futuro tengan el enfoque en un múltiplo equilibrado de diferentes objetivos genéticos, haciendo más difícil de obtener tasas de ganancia genéticas y fenotípicas tan altas como las reportadas arriba. El tema de las enfermedades es un tema siempre muy difícil en acuacultura y camaronicultura. Todo que los patógenos necesitan es agua y nutrientes, exactamente el mismo que las especies acuícolas, y cuanto más altas las densidades de cultivo, peor. La evidencia histórica en las especies pecuarias terrestres desafortunadamente no nos permite, desde mi punto de vista, mucha esperanza en los aportes de la Genética para solucionar el tema enfermedades en camaronicultura. Es un tema que va permanecer. La dinámica entre oportunidades de mercado, precios, necesidades humanas básicas, naturaleza humana, situaciones sociales, políticas, ambientales, va a ser una dinámica cada vez más terrible en el futuro, dejando muy poco espacio para previsiones estables o que puedan ser exageradamente optimistas. Solo los políticos piensan o dicen que los ciclos de crecimiento pueden o deben de ser sostenidos de forma indefinida. Para nosotros que trabajamos con biología sabemos que eso no existe en la realidad biológica, es una quimera. El crecimiento de las poblaciones humanas a su ritmo actual conlleva un futuro de tensiones políticas sociales y ambientales muy complicadas. En estos contextos humanos complicados estarán la acuacultura y la camaronicultura del futuro y este desde mi punto de vista no es predictible. Habrá ciclos de años buenos y ciclos de años malos. Lo que es bueno para unos será malo para otros. En los ciclos buenos habrá que prepararnos para los ciclos malos, y en los ciclos malos estarán las oportunidades para nuevos ciclos buenos, desde que las sepamos imaginar y construir. Gael Leclercq Nacionalidad: Francés Formación académica 2008- presente Universidad “La Sorbonne”, EPHE, Francia. Maestría en ciencias de la tierra y de la vida. Especialización en virología, genética e biología molecular. 2003- 2004 Universidad Estatal de Guayaquil, Ecuador. Curso de especialización en Biología molecular e ingeniaría genética. 51 1994-1995 SDSU (San Diego State University). Cursos en Oceanografía, economía de los recursos del océano y Bellas Artes. Science and Technology.Yellow Sea Fish. Res. Inst., China. Acad. Fish. Sci.. Weihai, China. 1991-1993 Maestría en Administración empresarial (Institut Supérieur du Commerce), Paris. Leclercq, G., (2012). Avanços no Melhoramento genetico do P. vannamei no Brasil para a Resistencia ao IMNV e crescimento. In: Fenacam 2012: IX Simposio Internacional de Carcinicultura e VI Simposio Internacional de Aquicultura, 2012/06/11-14, Natal, Brazil. Experiencia Professional • 2000-Presente CONCEPTO AZUL / Gerente General / Socio fundador, Empresa privada especializada en biotecnología, patología, genética e inmunología aplicadas en acuacultura. Implantación en Ecuador, Brasil, Francia y Perú. • Programas de prevención de enfermedades e mejoramiento genético de camarones: resistencia a patógenos e factores de stress y crecimiento: Brasil: Queiroz Galvão Alimentos (POTIPORA) desde 2004 Maris - COMPESCAL desde 2012 Estaleirinho/ACCC 2007 a 2011 Maricultura NETUNO 2003 a 2006 Panamá: Grupo CAMACO 2001 a 2011 Peru: Marinazul SA 2008 a 2012 Ásia: Global Gen / Indonésia 2010 a 2011 África: LGA-OSO / Madagascar desde 2007; Aquapesca / Mozambique desde 2014 • 1997-2000 Carrera Internacional Cia. Ltda. (Ecuador) / Presidente Empresa especializada en biotecnología e diagnóstico molecular de enfermedades de camarón. • 1996-1997 CENAIM-ESPOL (Ecuador) Coordinador del proyecto CSA (Centro de servicios para la acuacultura) con financiamiento de la Unión Europea (Euros 1’000.000). Publicaciones y presentaciones en congresos Mello, C., Leclercq, G., Serrano, X., Montaño, J., Diringer, B., Motte, E., Cedeño, V., and Mialhe, E. (2014). Programa de melhoramento genético do camarão Litopenaeus vannamei para resistência a doenças no Brasil: Estratégia, resultados e perspectivas. In: 9th International Aquaculture Forum and LACQUA14, 2014/11/05-07, Guadalajara, México. Leclercq, G. (2013). Avanços do melhoramento genético para a resistencia ao IMNV e crescimento do L. vannamei no Brasil. In: Fenacam 2013: X Simposio Internacional de Carcinicultura e VII Simposio Internacional de Aquicultura, 2013/06/10-13, Natal, Brazil. Leclercq, G., Motte, E., Cedeño, V., Serrano, X., Montaño, J., Mello, C., Diringer, B., and Mialhe, E. (2013). Shrimp disease prevention and genetic selection programs for resistance against pathogens in South America: Strategy, results and perspectives. In: Abstract Book.- World Aquaculture Society International Meeting, 2013/02/21-25, Nashville, Tennessee, USA, p. 621. Diringer, B., Leclercq, G., Serrani, X., Montaño, J., Cedeño, V., Motte, E., Mialhe, E., and Mello, C. (2011). Prevención de enfermedades y mejoramiento genético del camarón Litopennaeus vannamei. Revista electrónica de Ingeniería en Producción acuícola, Universidad de Nariño, Colombia, 5(5), 1-7. Leclercq, G., Lima, S., Pimentel, R., Montaño, J., and Serrano, X. (2011). Program of selection for resistance to IMNV and growth in Litopenaeus vannamei in Brazil. In: Abstract Book. World Aquaculture Society Annual International Conference and Exposition and FENACAM 2011, 2011/06/6-11, Natal, Brazil, p. 616. Mello, C., Constantino, A., Leclercq, G., Rey, P., Serrano, X., Montaño, J., Poli, M., Accorsi, G., Mello, G., Farias, A., and Petersen, R. (2011). Disease prevention and genetic improvement program for the shrimp Litopenaeus vannamei in southern Brazil. In: Abstract Book.World Aquaculture Society Annual International Conference and Exposition and FENACAM 2011, 2011/06/6-11, Natal, Brazil, p. 730. Leclercq, G., Motte, E., Morey, G., Pinto, P., Mauri, Y., Santana, M., Valdez, M., Medina, J., Vera, T., Cayra, E., Curray, C., Diringer, B., Cornejo, S., Mello, C. and Mialhe, E. (2010). Domesticação de microorganismos úteis para o cultivo de camarões Probióticos (gnotobiologia), perifiton e bioflocos. In: Fenacam 2010: VII Simposio Internacional de Carcinicultura e IV Simposio Internacional de Aquicultura, 2010/06/07-10, Natal, Brazil. Leclercq, G., Lima, S., and Pimentel, R. (2009). Program of disease prevention and genetic selection for resistance to IMNV for the white shrimp Litopenaeus vannamei in Brazil. In: World Aquaculture Society Meeting, 2009/09/25-27, Veracruz, Mexico, 481. Leclercq, G., Lima, S., and Pimentel, R. (2009). Program of disease prevention and genetic selection for resistance to IMNV for the white shrimp Litopenaeus vannamei in Brazil. In: Asia Pacific Aquaculture Conference and Trade Show Conference, 2009/11/03-06, Kuala Lumpur, Malaysia. Leclercq, G., Mialhe, E., Zambrano, D., Escobar, A., Cedeño, V., Motte, E., Boulo, V., Chamorro, R., Martinez, G., Visuetti, J., Arevalo, M., Camargo, R., Correa, E., and Moreno, E. (2004). Analytical epidemiology and prevention of NHP (necrotizing hepatopancreatitis) in intensive and extensive shrimp farms in Panama, Peru and Ecuador. In: Aquaculture-An Ecologically, Sustainable and Profitable Venture.- Abstract Book.- World Aquaculture Society International Meeting, 2004/03/1-5, Honolulu, Hawaii, USA. Lima, S., Pimentel, R., Serrano, X., Montaño, J., and Leclercq, G. (2013). Brazilian shrimp farm performs genetic selection for IMNV resistance, growth. Global Aquaculture Advocate, MayJun, 18-21. Leclercq, G., Zambrano, D., Escobar, A., Cedeño, V., Motte, E., Boulo, V., Mialhe, E., Chamorro, R., Martinez, G., Visuetti, J., Arevalo, M., Camargo, R., Correa, E., and Moreno, E. (2004). Analysis, prevention of NHP in Panama, Ecuador, Peru shrimp farms. Global Aquaculture Advocate, 86-87. Mialhe, E., Motte, E., Cedeño, V., Diringer, B., Serrano, X., Montaño, J., Mello, C., and Leclercq, G. (2013). Disease prevention and genetic selection for resistance and growth in P. vannamei: Strategy, results and perspectives. In: Scientific and Technological Innovation in Aqua-Breeding and sustainable Development of Aquaculture. 150th Forum of China Engineering Leclercq, G., Mialhe, E., Cedeño, V., Motte, E., Boulo, V., Zambrano, D., and Chamorro, R. (2004). Prevention of IHHNV in intensive and extensive shrimp farms in Panama, Peru and Ecuador through broodstock certification by nested PCR. In: Aquaculture-An Ecologically, Sustainable and Profitable Venture.- 52 Abstract Book.- World Aquaculture Society International Meeting, 2004/03/1-5, Honolulu, Hawaii, USA. Motte, E., Yugcha, E., Luzardo, J., Castro, F., Leclercq, G., Rodriguez, J., Miranda, P., Borja, O., Serrano, J., Terreros, M., Montalvo, K., Narvaez, A., Tenorio, N., Cedeño, V., Mialhe, E., and Boulo, V. (2003). Prevention of IHHNV vertical transmission in the white shrimp Litopenaeus vannamei. Aquaculture, 219(1-4), 57-70. Tema de su conversatorio: PREVENCION DE ENFERMEDADES Y MEJORAMIENTO GENETICO: ESTRATEGIA, RESULTADOS Y PERSPECTIVAS RESUMEN: Desde 1999, Concepto Azul ha diseñado y manejado importantes Programas de prevención de enfermedades y Mejoramiento genético enfocados a la resistencia, crecimiento y fecundidad, tanto en América Latina con P.vannamei (Ecuador, Panamá, Perú, Brasil), Asia (Vietnam, Indonesia) y África con P. monodon (Madagascar, Mozambique). Los objetivos de estos programas consisten en seleccionar reproductores para la producción de nauplios y postlarvas resistentes a enfermedades y factores de estrés, además libres de los patógenos de mayor impacto. La selección multi-criterio de los reproductores es a la vez individual y familiar. Los cruces son definidos y evaluados con el objetivo de potencializar la heredabilidad de los caracteres de resistencia, crecimiento y fecundidad. Los principales criterios de selección incluyen la resistencia combinada a patógenos como WSSV, IMNV o bacterias patógenas y factores de estrés abióticos tales como variaciones de temperatura, salinidad, alcalinidad, oxígeno en condiciones experimentales de alta densidad. Los individuos sobrevivientes a tales desafíos son subsecuentemente seleccionados por su superioridad en términos de crecimiento en condiciones de cultivo en fincas. La prevención de enfermedades virales y bacterianas está basada en la exclusión en cuarentena de reproductores infectados para evitar la transmisión vertical. Todos los reproductores provenientes de ambientes contaminados son analizados individualmente por técnicas sensibles y rápidas de PCR, LAMP o Real time PCR. La implementación eficaz de estas estrategias ha permitido alcanzar resultados significativos tanto a nivel experimental como en condiciones de producción comercial, inclusive superar niveles de producción antes de la aparición de epidemias. En complemento, Concepto Azul ha implementado nuevas tecnologías de análisis: metagenómica de comunidades bacterianas complejas, caracterización genética de microorganismos, cuantificación de la expresión de genes para su aplicación en condiciones controladas de bioensayos y ambientes abiertos. Estas herramientas modernas permiten seleccionar microorganismos beneficiosos adecuados para lograr un mejor control de la microbiota del camarón así como del agua y suelos, favoreciendo el control de los patógenos y el crecimiento en todos los estadios de cultivo. Carlos Espejo G. Director comercial ITALCOL ECUADOR, COLOMBIA, PANAMA Tema de su conversatorio: TRABAJOS DE CAMPO PRODUCIENDO ALEVINOS DE TILAPIA EN BIOFLOC. La producción en Colombia de tilapias ha rebasado todos los estimativos elaborados por los estamentos del estado y por las pocas organizaciones de la industria. Colombia hoy consume 3.87 kilos persona/año ( 212 gramos de camarón y 3.66 kilos de pescado ), es decir, 15.03 kilos per càpita menos que el promedio mundial. Toda política en torno a la acuicultura del país, debe ser encaminada a mejorar este índice de consumo personal, así se consolidara el mercado interno. Se ha identificado entonces en Colombia y en el mundo que la acuicultura crece en su demanda , lo que obliga a este sector de la producción pecuaria a crecer en tecnología , aplicando los conceptos identificados en los centros de investigación nacionales y de países adelantados como Chile, Vietnam, Estados Unidos etc. La acuicultura en Colombia se ubica en el sector ganador , con hechos como que para exportar hacia los Estados Unidos los productos pesqueros colombianos no tienen arancel , mientras que países como China , que es su principal proveedor, si los tiene. En Colombia es necesario diferencia los dos sectores productivos de la acuicultura, los crustáceos y los peces, mientras que con los primeros entre los años 2002 al 2007 se presento una tasa de crecimiento del 13%, entre los años 2008 y 2013 la tasa anual de crecimiento fue del -20 %. No así en el sector piscícola en donde la tasa de crecimiento es permanente. Respecto al tema de la piscicultura, y particularmente con respecto a las especies, estima el Ministerio de Agricultura de Colombia que entre 1985 y 2013, la tilapicultura ha crecido un 26 % , mientras que el cultivo de la cachama un 24 % y la trucha un 12 % . Producción de alevinos de tilapia en Colombia Con el incremento en la producción de carne de tilapia en el país se aumento abruptamente la necesidad de alevinos de las especies trabajadas-tilapia roja y chitralada- con ello , los productores hicieron acopio de las sencillas experiencias de campo o de técnicas como las de recolección de larvas en las orillas de los estanques donde previamente habían sido colocados los reproductores, al cabo de 8 a 12 días los animales eran buscados usando telas de ojo pequeño para aprovechar el comportamiento natural de estar en cardumen. Estos peces pequeños eran llevados a estanques pequeños para ser sometidos durante 28 días a la reversión sexual con el andrógeno 17 alfa metil testosterona. Al cabo de este tratamiento con hormona los peces ya revertidos eran clasificados y llevados a estanques de levante para lograr obtener los 20 o 30 gramos. Todo este trabajo se veía truncado al establecer la sobrevivencia del animal, encontrándose que solo era del 30 % desde la obtención de la larva. A partir del año 2000 algunos piscicultores que pudieron conocer los trabajos de Yoram Avnimelech y Gerard Cuzon , iniciaron los cultivos de las larvas de las tilapias pos incubación artificial, es de tener en cuenta que este tipo de pez que nace de esta manera, se desarrolla mas lentamente, pareciese que falta la nutrición de los padres. Es de recordar que los huevos son obtenidos de la boca de la hembra ya embrionados , de esta manera son llevados a las incubadoras y desde ese mismo momento dependen solo de 53 su saco vitelino, esto desde el punto de vista nutricional; en la laboratorio de incubación se controlan las variables como temperatura, amoniaco, pH, dureza, alcalinidad etc. Ver foto. Esas larvas que eclosionan en el laboratorio son llevadas a estanques pequeños en algunos casos y relativamente grandes en otros ( 500 m2 ). Los estanques se preparaban previamente adicionándoles fertilizantes químicos como el triple 15, triple 16 o triple 18, en dosis de 10 gramos/m2 , tres días antes de ser sembradas las larvas. En estos estanques se hacían siembras de hasta 640 larvas por metro cuadrado, al cabo de 28 días se cosechaban los peces y las sobrevivencias no excedían en el mejor de los casos el 40-45 %, con un desarrollo en peso no superior a 0.4 gramos por larva al cabo del ciclo, es decir, la ganancia diaria era de 0,0137 gramos día. Hasta los años 2000-2005, los productores de alevinos de las tilapias experimentaron sobrevivencias muy variables que en algunos casos , no pocos, hicieron pensar en los cierres de las granjas productoras de “ semilla” . Biofloc y recirculación en la producción de alevinos Analizando varios trabajos de investigadores internacionales se hicieron las adecuaciones en los tanques de geomembrana y se incursiono en el uso de sistemas de aireación permanente que garantizaran oxígenos mas estables. Se tomo entonces la determinación de incursionar en el tema de uso de probioticos. Estos trabajos de campo se iniciaron en estanques de cemento de 16 metros cuadrados ( ver foto ), con profundidades que no excedían los 0,4 metros, a ellos se hacia llegar aguas de una fuente corriente con temperaturas de 20 a 24 grados centígrados, pH entre 7 y 8, oxígenos cambiantes alrededor de 4 ppm. Es de resaltar que esta fuente de agua presenta una DBO de 2ppm y una dureza de 153 mg de carbonato de calcio, la anterior característica asegura una productividad primaria rápida. A estos estanques se les garantizo una aireación mediante manguera aerotubo de ¾ de pulgada, impulsada por un sistema de blower de 1 hp conectado a una corriente de energía trifásica. Los estanques se llenaron hasta los 0.4 metros y se fertilizaron con triple 15-16 o 18, esto como fuente de aporte de nitrógeno, amen de fosforo y potasio. Desde el mismo momento de la fertilización se inicio la aireación a un flujo de 6 litros por minuto de aire con el blower ya referido. Al cabo de tres días los estanques ya iban tomando el color característico de presencia de organismos autótrofos tipo algas clorofíceas. Ver foto. En ese momento se inicia la adición de una fuente de carbono como la melaza que se obtiene de los ingenios azucareros cercanos, esta materia prima contiene un 46 % de carbono, además contiene por su puesto los hidratos de carbono , vitaminas del grupo B , minerales como hierro, cobre y magnesio. En estos estanques se ha podido sembrar hasta 938 larvas por metro cuadrado con sobrevivencias que frecuentemente se obtienen en 80%. Con la adición de la melaza se busca cultivar el agua para que allí tengamos los elementos constitutivos de la proteína, CHON, es decir, carbono, hidrogeno, oxigeno y nitrógeno. La adición de melaza igualmente nos ha proporcionado un control 54 adecuado de los amoniacos TAN, esto es claro en la curva que reporta Avnimelech 1999. Changes in TAN concentration in a suspensión of pond bottom soil ( 2% dry soil ) following the addition of glucose ( TAN / glucose ratio of 1/20 ) Cálculos para producir el biofloc Atendiendo a la definición de biofloc de Avnimelech 1999, es un conglomerado de partículas microscópicas que incluyen bacterias, algas, zooplacton etc. Ese floculo requiere que en el medio vivo participen elementos como los ya mencionados nitrógeno, hidrogeno, carbono, y oxigeno , sin olvidar el no menos importante fosforo y los minerales magnesio, hierro y cobre. Con base en la anterior definición se requiere fertilizar las aguas previamente como ya se indico mediante el aporte de un elemento químico que contiene 15 % de nitrógeno, 15 % de fosforo y 15 % potasio. Una vez establecida la población de algas ( autótrofas ) se procede a darle el equilibrio con el carbono mediante el aporte de la melaza. En estos cálculos se debe tener en cuenta el aporte de nitrógeno por parte del alimento; esto lo hacemos así: Si se suministran 100 kilos de alimento por día al estanque y ese alimento contiene 30 % de proteína, ese alimento le esta entregando al sistema 30 kilos de proteína. Se estima que del alimento suministrado al estanque , el 50 % se convierte en heces, es decir, solo el 50% en convertido en carne. Ese 50 % es el que queda en el cuerpo de agua, produce fuentes de nitrógeno que deben ser estabilizado mediante la adición de la melaza. Es decir, de los 30 kilos de proteína, 15 kilos están en el agua, esto se traduce en 2,4 kilos de nitrógeno. Revisando los trabajos de Cuson se puede trabajar con relaciones carbono/nitrógeno de hasta 20:1; en el caso de este trabajo de campo se hizo con relaciones de 5:1 ( 5 partes de carbono, 1 parte de nitrógeno ). Esto quiere decir, que se requieren 12 kilos de carbono, representado en la melaza, se conoce que la melaza en Colombia posee 46 % de carbono, luego se requieren entonces 26 kilos por día de melaza para cuando se alimenta con 100 kilos de alimento balanceado de 30 % de proteína. Es de aclarar que este tipo de sistema requiere aireación de 24 horas, con motores que garanticen mover el 100 % del agua del tanque, permitir sitios muertos o sin movimiento del agua es permitir aguas cargadas de amoniaco como lo reporta Avnimelech 1999.
© Copyright 2024