REDVET Rev. Electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet 2015 Volumen 16 Nº 8 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n080815.html REDVET - Revista electrónica de Veterinaria - ISSN 1695-7504 Evaluación de un biopreparado a base de Bacillussubtilys con actividad probiótica en cerdos de las categorías de cría y preceba - Evaluation of a bioproduct based on Bacillus subtilys with probiotics activity in the breeding and growing pigs Pérez Yoenier*; MiliánGrethel*; Galindo Juana**; DomínguezHanói*; Pérez Manuel*; PortillaYadileiny*; Rondón Ana J*. *Centro de Estudiosbiotecnológicos (CEBIO) **Universidad de Matanzas Camilo Cienfuegos **Instituto de Ciencia Animal. Cuba [email protected] Resumen El presente trabajo se realizó en una unidad de producción porcina, perteneciente a la Empresa Porcino de Matanzas, Cuba, en el período comprendido de noviembre del 2011 a enero del 2012. Con el objetivo de evaluar el efecto de la aplicación de un biopreparado a base de Bacillussubtilys en cerdos. Para ello se utilizaron 198 animales en la categoría de cría y preceba, dividido en dos grupo de 98 animales al grupo 1 se le suministro 4 ml del biopreparado/kg de alimento a consumir y grupo control con 100 animales al cual se suministró el equivalente en agua destilada a modo de placebo. A estos animales se les evalúo: Ganancia Media Diaria, Peso Final, Conversión, Morbilidad por diarreay Mortalidad. Mostrando diferencia significativa a favor del grupo tratado en los indicadores de ganancia media diaria, morbilidad por diarreas, conversión y peso final, no siendo así para el indicador mortalidad en el cual no hubo diferencia (P ≤ 0.05). Palabras claves: Probióticos, funcionales, Aditivos, Cerdos. Bacillussubtilys, Biopreparados, Alimentos Abstract This work was performed in a swine production unit, from November to January, 2012. With the objective of evaluating the effect of a bioproduct based on Bacillus subtilys in pigs.198 animals were used in the breeding and growing category, divided into two treatment groups with 98 animals which,were supply to the first one the bioproduct in 4 ml/kg of food and control group of 100 animals which supply distilled water equivalent as a placebo. These animals were evaluated: average daily gain, conversion, diarrhea morbidity, mortality and final weight. Showing significant difference in Evaluación de un biopreparado a base de Bacillussubtilys con actividad probiótica en cerdos de las categorías de cría y preceba http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n080815/081501.pdf 1 REDVET Rev. Electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet 2015 Volumen 16 Nº 8 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n080815.html favor of the treated group on indicators of average daily gain, diarrhea morbidity, conversion and final weight, not so for mortality indicator in which there was no difference (P ≤ 0.05). Key Words: Probiotics, Bacillus subtilys, Bioproducts, Functional foods, Pigs. Introducción En la producción intensiva de ganado porcino moderno, la presencia de enfermedades (clínica, subclínica o patógenos oportunistas) es probablemente la forma más difundida de productividad limitante de estrés. La severidad varía desde una pérdida de apetito simple y transitorio, una caída de pocos gramos de promedio en la ganancia diaria, hasta la muerte. A pesar de que casos graves se detectan fácilmente, no todas las veces se diagnostican adecuadamente, agresiones menores normalmente no se registran, en el mejor de los casos, se pueden notar como pérdidas en la uniformidad de la población. En las condiciones intensivas de producción del cerdo, y fundamentalmente tras el destete de los lechones, el riesgo de enfermedades clínicas y subclínicas es elevado dado a que el animal es sometido a nuevas condiciones de vida que resultan en situaciones estresantes con disminución de la capacidad reactiva del organismo. Entre estas figuran, por ejemplo, la separación de la madre, transporte, nuevas instalaciones, personal, alimentos y presencia de otros animales. En el caso de los lechones, al nacer quedan expuestos a los microorganismos del ambiente que les rodea, y además, entran en contacto con las heces maternas que contienen bacterias que colonizan su tracto digestivo. Estas bacterias buscan un nicho adecuado, donde compiten e interaccionan entre sí, constituyendo finalmente una población relativamente estable y compleja que representa la Microflora intestinal normal del lechón. No obstante, esta estabilidad puede ser alterada por cambios dietéticos o ambientales importantes (Radecki y Yokohama, 1991; Conway, 1994; Jensen, 1998). Los problemas entéricos, especialmente en lechones, son una de las principales causas de pérdidas económicas en la industria porcina. La totalidad de las granjas porcinas utiliza antibióticos de manera terapéutica y subterapéutica para controlar estos problemas, pero se debe incidir en la búsqueda de otros aditivos, que ofrezcan mejores o similares beneficios que los antibióticos y que a su vez no sean perjudiciales para los animales ni el hombre (Close, 2000). En contraposición al empleo de antibióticos dirigidos a obtener mayores rendimientos productivos y mejor estado de salud en los animales, se ha desarrollado y extendido un nuevo grupo de aditivos alimentarios agrupados Evaluación de un biopreparado a base de Bacillussubtilys con actividad probiótica en cerdos de las categorías de cría y preceba http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n080815/081501.pdf 2 REDVET Rev. Electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet 2015 Volumen 16 Nº 8 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n080815.html bajo el nombre genérico de “probióticos” Según autores como Carro & Ranilla (2000); Dibner& Richards (2005) y Ojeda et al.(2008), los probióticos no tienen efecto de residualidad en los tejidos y productos de origen animal como los antibióticos, contribuyen al mantenimiento de la microflora intestinal beneficiosa, posibilita el intercambio normal de esta y no crean resistencia en las cepas patógenas. Brizuela et al., (2003) y Fuertes, (2000), han demostrado que con el empleo de los probióticos se logra un mejor aprovechamiento y digestibilidad de los alimentos con obtención de indicadores productivos y clínicos adecuados sin comprometer la fisiología animal y por consiguiente a la salud del hombre como consumidor final. Esta y otras características de los probióticos hacen que se establezcan como alternativa a las nuevas demandas y conceptos de vida de la población mundial. El Centro de Estudios Biotecnológicos localizado en la Universidad de Matanzas “Camilo Cienfuegos” (Cuba) consta en la actualidad con un selecto grupo de investigadores orientados a la búsqueda y evaluación de aditivos nutricionales con acción prebiótica. Uno de estos preparados a base de Bacillussubtilys(Milián, 2008), presenta un demostrado efecto inmunoestimulante y promotor del crecimiento, por lo que nos trazamos en esta investigación el objetivo deevaluar el efecto de un biopreparado a base de Bacillussubtilys en cerdos de las categorías de cría y preceba. Materiales y Métodos. El presente trabajo se desarrolló en la granja de producción porcina, perteneciente a la Empresa Porcino Matanzas, ubicada en el poblado de Hoyo Colorado, municipio Martí, Provincia Matanzas, en el periodo comprendido entre los meses de noviembre del 2011 a enero del 2012. Se seleccionaron las categorías de cría y preceba, se emplearon 198 animales, de cruce comercial F1: Yorkshire/Landrace x Landrace (YLL), a los cuales se le suministró el biopreparado desde el nacimiento, evaluándose por un periodo de 75 días. Se seleccionaron las cerdas paridas en los siguientes términos: número de pezones funcionales (12) y números de partos entre tres y cinco, buena constitución corporal, buen apetito. En todos los casos se le realizó un diagnóstico clínico valorándose la triada y el estado general. Se consideraron además: camadas entre 9 -12 crías, peso promedio de las camadas (1.5±0.3kg) y estado de salud de las mismas. La distribución de los corrales fue aleatoria a ambos lados de las naves con el objeto de minimizar el posible error por el efecto lateral de las naves. Una vez destetados las crías se agruparon en grupos de 16 animales por cubículo correspondientes cada uno a los diferentes tratamientos. Evaluación de un biopreparado a base de Bacillussubtilys con actividad probiótica en cerdos de las categorías de cría y preceba http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n080815/081501.pdf 3 REDVET Rev. Electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet 2015 Volumen 16 Nº 8 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n080815.html Tratamientos Empleados. Al grupo o tratamiento 1,desde el nacimiento de los cerdos, se le suministrouna dosis de un mililitro por animal el primer y tercer día de nacido (coincidiendo con las actividades de manejo planificadas en la unidad: descolmille, aplicación de dextrana con hierro y castración). A partir del séptimo día la dosis empleada fue de cuatro mililitro delbiopreparado a base de Bacillussubtilysa razón de 109 ufc / ml obtenido mediante la metodología de (Milián, 2008)por kg de alimento. Durante todo el experimento al tratamiento 2 o Grupo Control se le suministró a modo de placebo, la cantidad equivalente de agua (agua destilada), con el objetivo de homogenizar la humedad del alimento e igualar las condiciones de consumo por este concepto. En todos los casos la vía de aplicación fue la oral, mezclándose con el alimento de forma homogénea por aspersión. Se midieron los índices de consumo diario en cada caso. Pesajes. Se efectuó 1 pesaje al inicio del experimento, al destete, 2 pesajes en la etapa de pre ceba y uno al final de la etapa experimental. Indicadores Calculados. Se determinaron los principales indicadores productivos y epizootiológicos teniendo en cuenta el peso al inicio del experimento: Ganancia Media Diaria, Peso Final, Conversión, Morbilidad por diarrea y Mortalidad. Análisis Estadístico. Se utilizó un diseño Completamente Aleatorizado.Para el análisis estadístico se realizó un análisis de ANOVA simple para los estadígrafos descriptivos y un test de Duncan (1955) para establecer las diferencias entre muestras, utilizando el programa estadístico Statgraphic plus v 5.1. Análisis Económico. Se empleó para el análisis económico los datos obtenidos sobre costos de producción por el Centro de Estudios Biotecnológicos y Grupo de Producción Porcina (GRUPOR). Resultados y Discusión. En la Figura1 se muestra el comportamiento del peso vivo promedio de los animales en cada grupo experimental. En el caso de los pesos al nacimiento y al destete no hubo diferencias significativas. Observándose una diferencia Evaluación de un biopreparado a base de Bacillussubtilys con actividad probiótica en cerdos de las categorías de cría y preceba http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n080815/081501.pdf 4 REDVET Rev. Electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet 2015 Volumen 16 Nº 8 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n080815.html solamente en el pesaje final de 700g por animal como promedio, al compararse el grupo tratado con respecto al grupo control. ab Medias con letras no comunes en los superíndices entre columnas difieren para P<0.05* (Duncan, 1955) Figura 1. Comportamiento de los pesajes realizados a los animales del experimento. Estos resultados coinciden con los de Bacterias Ácido Lácticas (BAL) cerdos jóvenes con la adición de similares en cuanto al incremento consumido el probiótico. obtenidos por Brzoska (1999)con mezclas en pollos broilersyGarciaet al. (2007) en cepas de BAL, donde observaron efectos del peso final en los animales que habían Resultados similares fueron observados por Continoet al. (2008) en precebas tratadas con probiótico Sorbial® en una frecuencia diaria, donde se obtuvo una mejora significativa (p<0.05) del incremento de peso vivo y la ganancia media diaria (GMD) con respecto al grupo control. En este sentido, resultados similares alcanzaron Madrigal et al. (1997), en estudios donde suministraron 4 ml de un cultivo de L. acidophilus a cerditos, durante los 30 días posteriores al destete. Obtuvieron mejoras significativas en el peso final, incremento de peso, GMD y conversión alimentaría. Por su parte,Garciaet al. (2007),alcanzaron resultados positivos en estos indicadores pero al emplear L. rhamnosusy Brizuela (2003), en cerdos de 35 días de edad mediante la inclusión de PROBICID. Sin embargo, los resultados obtenidos difieren a los alcanzados por Hale y Newton (1979), al suministrar un producto de fermentación de Lactobacillus en diferentes dosis a cerdos en preceba pues no observaron diferencias en la GMD aunque si se redujo la morbilidad por diarrea con todas las dosis y Stuart et al. (2007), al incluir Sorbial®, pero en terneros destetados, no hallaron efecto por parte del probiótico en el incremento del peso vivo. En la tabla 1, se muestran los resultados obtenidos en la ganancia media diaria de ambos grupos donde a partir de la tercera y cuarta observación se aprecia un incremento de 14g y 28g respectivamente a favor del grupo tratado con Evaluación de un biopreparado a base de Bacillussubtilys con actividad probiótica en cerdos de las categorías de cría y preceba http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n080815/081501.pdf 5 REDVET Rev. Electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet 2015 Volumen 16 Nº 8 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n080815.html respecto al grupo anteriormente. Pesaje 1 2 3 4 control, coincidiendo con los Tabla 1. Resultados de la GMD. GMD GMD Tratamiento Control a 148 145a 100a 100a 257a 243b 578a 550b resultados expuestos Diferencia 3g 0 14g 28g ab Medias con letras no comunes en los superíndices entre columnas difieren para P<0.05* (Duncan, 1955) El efecto positivo de los probióticos en el tracto gastrointestinal hace que disminuya el desarrollo de las bacterias patógenas, lo que contribuye al balance de los microorganismos intestinales. Este hecho mejora los procesos digestivos del hospedero, lo que se evidencia en el incremento de la ganancia de peso vivo y la disminución de la conversión alimentaria de los animales que consumen estos preparados (Simon et al. 2003 y Nazef et al. 2008). La evaluación de la ganancia media diaria obtenida en investigaciones realizadas por Rondón et al. (2013) demostró el efecto probiótico del biopreparado empleado en la presente investigación, ya que se encontraron diferencias (P < 0.05) entre el grupo control y el tratado en cerditos en la categoría de crías. Estos resultados demuestran el efecto de los aditivos en la fisiología digestiva de los animales, ya que es evidente un mejor aprovechamiento de los nutrientes de la dieta. Gianget al. (2011) refrieron que al suministrar a los cerditos un complejo de probióticos en el concentrado (E. faecium, 3 x1011 ufc/kg, L. acidophilus, 4x109 ufc/kg y L. plantarum, 2 x109 ufc/kg) obtuvieron mejores resultados en la ganancia diaria de peso y una mejor conversión durante la primera y segunda semana después del destete. En Cuba, Brizuela (2003), González (2005) y Rondón (2009) elaboraron biopreparados con Lactobacillus y lograron efectos positivos en los indicadores productivos de cerdos y aves. Se conoce que los lactobacilos liberan enzimas que mejoran la capacidad digestiva de los animales, inactivan eficazmente los metabolitos tóxicos de la biota perjudicial y hacen que se incremente el proceso de absorción, por un mejor estado celular de las vellosidades. Además, provocan mayor síntesis de vitaminas e inhiben los enteropatógenos por aumento de la secreción de sustancias bacteriostáticas y bactericidas, como las bacteriocinas (Rondón et al., 2013) Estos resultados en los indicadores productivos hace que se visualice lo argumentado por Bernardeau(2001), quien plantea que uno de los mecanismos de beneficio de los probióticos es la síntesis de compuestos que pudiese ser deficiente en la dieta animal, entre estos figuran las vitaminas del complejo B, aminoácidos esenciales, enzimas digestivas, minerales, acetatos y otras sustancias necesarias en el buen crecimiento y desarrollo de los Evaluación de un biopreparado a base de Bacillussubtilys con actividad probiótica en cerdos de las categorías de cría y preceba http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n080815/081501.pdf 6 REDVET Rev. Electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet 2015 Volumen 16 Nº 8 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n080815.html animales. Unido a ello está el efecto de mejora sobre la palatabilidad a los alimentos, lo que aumenta el consumo de los mismos. En la Figura 2 se puede observar los valores obtenidos de la conversión de los diferentes grupos, presentando diferencia de 0.18 kilogramos a favor del grupo tratado con respecto al grupo control, lo que representa que el grupo tratado con el biopreparado mejoró la conversión en un 8.78%. ab Medias con letras no comunes en los superíndices entre columnas difieren para P<0.01** (Duncan, 1955) Figura 2. Evaluación de la conversión en los animales bajo experimento. Los resultados obtenidos concuerdan con lo referido por Cajarvilleet al. (2011), quienes refieren que la aplicación de los probióticos en las explotaciones porcinas contribuye a la reducción considerable de trastornos gastrointestinales, menor gasto de medicamentos (especialmente antibióticos), disminución de la mortalidad debido a diarreas, mejor conversión alimentaria y disminución del período de engorda. En un estudio donde se suministraron a pollos de ceba un probiótico con cepa de Saccharomycescerevisiae, se observó una mejora en la conversión alimentaria de 2.25% y 2.75% (Kumprechtovaet al, 2000). Los resultados de este trabajo coinciden también con los obtenidos por Pérez (2000) al emplear un hidrolizado de levadura Saccharomycescerevisiaeen pollos de ceba con dosis de 50, 75 y 100 ml / kg de concentrado, este autor obtuvo una respuesta creciente y significativa en el incremento de peso de los pollos así como una mejora en la conversión alimenticia con respecto al grupo control cuando trabajó con estas dosis del hidrolizado. En la figura 3, se aprecia que el mayor número de animales afectados con enteritis fue en la semana 2, momento en que el organismo animal se está adaptando aún al medio externo y su carga microbiana, esto coincidetambién con la incorporación en la dieta de raciones sólidas. En las semanas 5 y 6 se puede observar un nuevo incremento en la presentación de diarreas, pudiendo deberse al efecto predisponente del estrés Evaluación de un biopreparado a base de Bacillussubtilys con actividad probiótica en cerdos de las categorías de cría y preceba http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n080815/081501.pdf 7 REDVET Rev. Electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet 2015 Volumen 16 Nº 8 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n080815.html en el destete. En ambos casos en el grupo tratado con el biopreparado a base de Bacillussubtilys mostro los menores índices de morbilidad. ab Medias con letras no comunes en los superíndices entre columnas difieren para P<0.01** (Duncan, 1955) Figura 3. Resultado de la morbilidad semanal. Resultados similares fueron observados por Garciaet al. (2007) tras la inclusión de un probiótico a base de BAL en cerdos jóvenes donde la duración y la incidencia de diarreas disminuyeron, así como Wenk (1990), quien encontró una disminución de la incidencia de diarreas en cerditos de preceba con el empleo de BAL. En las investigaciones realizadas por Rondón et al. (2013) se obtuvieron resultados similares a los observados en el presente ensayo ya que desde la primera hasta la quinta semana en el grupo tratado con L. salivarius se encontró una disminución del número de diarreas (P < 0.05). Este presentó cerditos enfermos, fundamentalmente durante los primeros siete días, momento en el que aún no habían comenzado a consumir el biopreparado, mientras que el grupo control mostró mayor número de cerditos con diarreas, de manera repetitiva durante los primeros 28 d. En la tabla 2 se puede observar la diferencia que existió entre la cantidad de animales que enfermaron del grupo control con respecto al grupo tratado durante el tiempo de experimento, observándose una alta significación en los resultados (99%). Tabla 2 Morbilidad alcanzada por el grupo control y el grupo tratamiento durante el periodo evaluado. Grupo control Tratamiento Promedio 6 6 Desvest 0,44 0,57 ab Medias con letras no comunes en los superíndices entre columnas difieren para P<0.01** (Duncan, 1955) Evaluación de un biopreparado a base de Bacillussubtilys con actividad probiótica en cerdos de las categorías de cría y preceba http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n080815/081501.pdf 8 REDVET Rev. Electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet 2015 Volumen 16 Nº 8 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n080815.html Por su parte resultados similares alcanzaron Vaseeharan y Ramasamy (2003), quienes informaron sobre el efecto de B. subtilisBt-23 contra varios patógenos en el camarón tigre (Penaeusmonodon), el cual mostró una reducción del 90% en el acumulado mortalidad, estudios similares fueron reportados por Keysamiet al. (2007). Además de la supervivencia y el crecimiento también tuvo efectos positivos sobre la respuesta inmune y resistencia a las enfermedades (Rengpipatet al., 2000). En la tabla 3 se observa el número de muertes que hubo durante el experimento, en todos los casos las muertes registradas fueron por deshidratación debido a diarreas profusas. Tabla 3 Mortalidad acumulada durante el periodo evaluado en el experimento de ambos grupos. Grupo control Tratamiento Promedio 6 6 Desvest 0,44 0,57 Estos resultados no coinciden con Brizuela (2003) quien demostró que con el empleo de Probicid lograba una disminución significativa en la mortalidad y el desecho. Por su parte Garciaet al. (2007) encontró resultados similares a los nuestros con la adición de BAL en la dieta de cerdos jóvenes. Hansen, (2007) señala que con la implementación de un producto a base de BAL (BioPlus 2B) se reduce la mortalidad de lechones lactantes de un 10%13% a tan sólo un 7%. Sin embargo nuestros resultados no coinciden con estos. Resultados similares al nuestro encontraron Danek y Novak, (1992), los cuales al suministrar un probiótico a base de Lactobacilluscasei CC 4160 (2 x 109 u.f.c/cerdito), a las 3 horas después del nacimiento y subsecuentemente al otro día, a la edad de 3, 12 y 28 días de nacido, encontraron que este probiótico no logró una mejora de la mortalidad. Análisis Económico. Según el análisis de costo en producción del biopreparado a base de BasillusSutillys a nivel de laboratorio realizado por Millián (2008)se obtuvo el precio de 1 litro de biopreparado que costó $ 2.34 y teniendo en cuenta la cantidad que seempleó en el experimento, 4ml x kilogramos de alimento animales durante 75 días es igual a 9404 ml, equivalente a $22.00 MN. Si tenemos en cuenta que la diferencia entre el grupo control y el grupo tratado fue de 720g como promedio por animal a favor de este último, podemos inferir que se ganó 70.56 pesos en los 98 animales que conformaron Evaluación de un biopreparado a base de Bacillussubtilys con actividad probiótica en cerdos de las categorías de cría y preceba http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n080815/081501.pdf 9 REDVET Rev. Electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet 2015 Volumen 16 Nº 8 - http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n080815.html el grupo, vendiéndose a $3.65 el kilogramo en esta categoría representa $257,54 de ganancia neta y de utilidades $235,54. Siendo esto significativo, comparado además con los ahorros intangibles en concepto de gasto de medicamento. Conclusiones • El uso del biopreparado a base de BasillusSutillys con actividad probiótica mejoró el indicador de peso vivo en los animales tratados así como la Ganancia Media Diaria y la conversión alimentaria. • Se encontró una disminución de la morbilidad en el grupo que consumió el biopreparado a base de BasillusSutillys con respecto al grupo control • El empleo del biopreparado a base de BasillusSutillys es económico y rentable. Recomendaciones. • Extender el uso del biopreparado a base de BasillusSutillys para la prevención de diarreas en cerdos de cría y preceba. • Implementar el uso de biopreparado a base de BasillusSutillys como estimulador de crecimiento en estas categorías. BIBLIOGRAFÍA. • • • • • • Bernardeau, M. 2001. Probiotics properties of two Lactobacillus strains in vitro. Milchwissenschaft,. 56(12): 663-667 p. Brizuela, M. A. 2003. Selección de cepas de bacterias ácido lácticas para la obtención de un preparado con propiedades probióticas y su evaluación en cerdos. Tesis Dr. C. Veterinarias. Instituto de Ciencia Animal. La Habana, Cuba. 102p. Brzoska, F. Grzybowski, R. Stecka, K. Pieszka, M. 1999. Nutritive efficiency of selected Probiotics microorganisms in chicken broilers. RocznikiNaukoweZootechniki, 26(4):291-301. Cajarville, C., Brambillasca, S. &Zunino, P. 2011. 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