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C-0058
TRASPLANTE HAPLOIDÉNTICO CON ELIMINACIÓN DE LINFOCITOS T NAIVE
COMO ESTRATEGIA PARA EVITAR LA ENFERMEDAD INJERTO CONTRA
HUÉSPED Y CONSERVAR EL EFECTO ANTILEUCEMIA
Antonio Pérez-Martínez1, Ana Sastre Urgelles1, Rebeca Rodríguez Pena2, Mercedes Gasior Kabat3, Raquel de Paz Arias3.
de Hemato-Oncología Infantil. 2Unidad de Inmunología. 3Servicio de Hematología. Hospital Universitario La Paz. Madrid.
INTRODUCCIÓN Y OBJETIVOS
RESULTADOS
El purgado de linfocitos T exvivo en el trasplante de
progenitores hematopoyético (TPH) de donante alogénico
constituye una estrategia profiláctica de la enfermedad
injerto contra huésped (EICH). Sin embargo asocia
mayores tasas de fallo de injerto, recaídas e infecciones,
al lentificar la reconstitución inmune postrasplante. Está
descrito como la subpoblación de linfocitos T naive
CD45Ra+ originan EICH, por lo que el purgado selectivo
de esta población podría reducirla, mejorando la
reconstitución inmune al preservar los linfocitos T
CD45Ra-memoria.
La composición del inóculo se muestran en la siguiente figura de citometría y en la tabla. El primer día se infundieron 9x106
CD34+/kg, con 1x104 linfocitos T/kg. El siguiente día se infundieron trazas de linfocitos T naive CD45Ra+, NK y linfocitos B,
y más de 1x108 linfocitos T CD45Ra-memoria/kg.
MÉTODOS
FW
CD3
CÉLULAS NK
CD3
LEUCOCITOS
CÉLULAS NKT
CD45RO
CD45RO
LEUCOCITOS
CD45RO
LINFOCITOS T
CD45RO
LINFOCITOS T CD4
CD45RO
CD45RO
CD45RO
LINFOCITOS T CD8
LINFOCITOS T
CD45RO
CD45RO
CD45RO
CD45RO
LEUCOCITOS
LINFOCITOS T CD4CD8
LINFOCITOS T
CD45RO
CD45RO
CD3
LINFOCITOS B
CD45RO
CD45RO
Aféresis movilizada de sangre
periférica
Selección CD34
Fracción CD34+
CÉLULAS NKT
CD45RO
LINFOCITOS T CD4
CD45RO
CD45RO
LINFOCITOS T CD8
LINFOCITOS T CD4CD8
CD45RO
CD45RO
9 X 106/kg
CD3+
0.1 X 105/kg
CD45RACD45RO+
5 X 106/kg
10 X 108/kg
CD56+
CD20+
1.57 X 106/kg
5 X 106/kg
Como inmunosupresión farmacológica recibió micofenolato hasta el día +28. La
paciente alcanzó injerto mieloide el día +10, plaquetar el día +15 con quimera
completa en sangre periférica y médula ósea. Presentó EICH grado II cutáneo
que respondió a un ciclo corto de corticoides sistémicos. No presentó signos de
EICH digestivo ni hepático. Actualmente la paciente se encuentra en el día +60,
en remisión citológica, citométrica y citogenética. Es controlada de manera
ambulatoria, sin inmunosupresión, sin evidencia de reactivación viral, y con un
elevado número de linfocitos T memoria.
Reconsitución inmune
2000
Linfocitos
1800
LT
1600
CD4+
1400
CD8+
1200
LB
1000
NK
CD4 45RA+
800
CD4 45RO+
600
Trasplante
de
progenitores
hematopoyéticos
CD34+CD45RA- (tercer trasplante, 13/02/2015): El
paciente recibió acondicionamiento de intensidad reducida
con TLI (2Gyx4días, dosis total 8G), fludarabina
(25mg/m2x5 días), tiotepa (5 mg/kg x 2 dosis en 1 día) y
melfalán (70 mg/m2/d x 2 días. El donante haploidéntico
(padre) KIR 2DL3 mismatch fue movilizado con G-CSF 10
mcg/kg durante 4 días, realizándose posterioremente la
aféresis. La manipulación de la aféresis se realizó en dos
tiempos mediante la tecnología CliniMACS, en primer lugar
se realizó selección e infusión de progenitores
hematopoyéticos CD34+ y con la fracción CD34- al día
siguiente se realizó purgado de células CD45RA+ e
infusión.
CÉLULAS NK
Selección CD34 Purgado CD45RA
CD34 +
células mcL
Enfermedad actual:
Paciente de 4 años y tres meses de edad diagnosticada de
LMA secundaria a síndrome mielodisplásico (LMMJ) en
situación de tercera remisión citológica, con enfermedad
mínima residual 0.15% y persistencia en citogenética de 1
metafase de 20 con pérdida de señal en el cromosoma 18
que ingresa para un tercer trasplante alogénico de donante
haploidéntico (padre) 2DL3 KIR mismatch con selección de
CD34+ e infusión de producto celular 45Ra-.
Antecedentes previos:
• Síndrome mielodisplásico/mieloproliferativo tipo LMMJ
con mutación en PTPN11 exon 3 (c.218 C>T; p.73 T>I)
(12/06/2013).
• Trasplante de progenitores hematopoyéticos de médula
ósea
de
donante
no
emparentado
HLA-idéntico
(27/09/2013).
Acondicionamiento
Bu-Cy-Mel-ATG.
Quimera completa y remisión completa de su enfermedad
de base.
• Recaída precoz postrasplante (24/01/2014),
• Segundo trasplante de progenitores hematopoyéticos de
sangre periférica de donante haploidéntico KIR2DL3
mismatch (madre) con purgado de linfocitos T
(10/04/2014).
Acondicionamiento
con
irradiación
ganglionar (8Gy), fludarabina (150 mg/m2), melfalán 140
mg/m2 y tiotepa 10 mg/kg. Quimera Completa. Fin
inmunosupresión: 09/05/14 (micofenolato)
EICH II. (Afectación cutánea grado II). Buena
respuesta a corticoides (fin: 02/05/2014)
Recaída como Leucemia Aguda Mieloblástica subgrupo
I clasificacion EGIL secundaria a LMMJ. (24/09/2014)
Quimioterapia para LAM (AIE 1 ciclo; Mito-Flu-AraC 2
ciclos) y terapia celular (Ensayo LANK-2)
Rescate de la aplasia con infusión de progenitores
hematopoyéticos alogénicos criopreservados (depleción de
linfos T) (23/12/14).
LINFOCITOS B
CD45RA
Presentamos nuestra primera experiencia con TPH de
donante haploidéntico con purgado de linfocitos T naive
CD45Ra+.
FW
CD3
LINFOCITOS T
CD45RA
LEUCOCITOS
Fracción CD45RA- negativa
CD56
CD20
CD56
CD20
SSC
Fracción CD34- negativa
SSC
1Unidad
CD8 45RA+
400
CD8 45RO+
200
CD3DR+
0
30
60
Día postrasplante
CONCLUSIONES
El TPH alogénico con purgado de linfocitos T naive CD45Ra+ permite la infusión de más de 100 millones/kg de
linfocitos T haploidénticos sin complicaciones relevantes, permitiendo el efecto antileucemia. Este primer
procedimiento realizado en una paciente con una leucemia de muy alto riesgo, intensamente tratada previamente, y
con alto riesgo de desarrollar complicaciones postrasplante, resulta prometedor.
Fracción CD34Purgado de CD45RA
(>2.5 logaritmos) y
<5x103CD3CD45RA+/kg
Infusión CD34 + (día 0)
Infusión CD45RA- (día +1)
BIBLIOGRAFÍA
1. Shook DR et al. Haploidentical stem cell transplantation augmented by CD45RA negative lymphocytes provides
rapid engraftment and excellent tolerability. Pediatr Blood Cancer. 2015;62:666-73.
2. Triplett BM et al. Rapid memory T-cell reconstitution recapitulating CD45RA-depleted haploidentical transplant
graft content in patients with hematologic malignancies. Bone Marrow Transplant. 2015.
3. Bleakley M et al. Engineering human peripheral blood stem cell grafts that are depleted of naïve T cells and
retain functional pathogen-specific memory T cells. Biol Blood Marrow Transplant. 2014;20:705-16.
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