1. Food

IBNORCA
ESQUEMA DE NORMA BOLIVIANA
EQNB 38033
Azucares y derivados - Miel - Determinación de azúcares reductores - Método de Fehling
- Causse - Bonnans
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OBJETO Y CAMPO DE APLICACIÓN
Esta norma establece la metodología para la determinación del contenido de azúcares por el
método de Fehling - Causse - Bonnans.
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REFERENCIAS
Las normas bolivianas contienen disposiciones que al ser citadas en el texto, constituyen
requisitos de la norma. Como toda norma está sujeta a revisión, se recomienda, a aquellos
que realicen acuerdos en base a ellas, que analicen la conveniencia de usar las ediciones
más recientes de las normas bolivianas citadas.
EQNB 38024 Miel - Muestreo.
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PRINCIPIO
El método se basa en la reducción que ejercen los azúcares con grupos aldehídos y cetonas
libres, sobre un compuesto de Cu2+, en medio alcalino. Para obtener resultados reproducibles
es necesaria una rigurosa normalización.
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REACTIVOS
4.1
Solución de acetato dihidroxido de tetraplomo de 25 g / 100 ml
Se disuelven 25 g de acetato básico de plomo Pb(CH3COO)2 · Pb(OH)2 en agua, hasta
completar 100 ml.
4.2
Agua para análisis
4.3
Solución de azúcar invertido de 5 g / 1 000 ml
Se pesan 4,750 g de sacarosa pura, lavada en etanol y secada en estufa a aproximadamente
70 °C, hasta masa constante y se disuelven en 100 ml de agua. Se agregan 5 ml de ácido
clorhídrico y se deja en reposo durante 3 d a 20 °C o una (1) semana entre 12 °C y 18 °C.
Se neutraliza exactamente con solución de hidróxido de sodio 6 N, se agregan 2 g de fenol y
se lleva a 1 000 ml con agua.
4.4
Solución de azul de metileno de 1 g / 100 ml
4.5
Reactivo de Fehling - Causse - Bonnans
Se disuelven separadamente y con la menor cantidad de agua y luego se mezclan en el orden
siguiente:
130 g de tartrato de sodio y potasio, 110 g de hidróxido de sodio, 24 g de sulfato de cobre (II)
pentahidratado y 16.8 g de hexacianoferrato (II) de potasio trihidratado (ferrocianuro de potasio).
Se mezcla y se lleva la solución a 1 000 ml con agua.
1
4.6
Solución de acido clorhídrico 6 N
4.7
Solución de hidróxido de sodio 6 N
4.8
Solución de hidróxido de sodio 0,1 N
5
MATERIALES Y EQUIPOS
5.1
Tamiz de acero inoxidable de 500 µm
5.2
Balanza analítica
5.3
Erlenmeyer de 250 ml
5.4
Probeta graduada de 50 ml
5.5
Bureta de Fehling de 25 ml
5.6
Matraces aforados de 50 ml y 100 ml
5.7
Pipetas aforadas de 5 ml, 15 ml y 25 ml
5.8
Embudo
5.9
Papel filtro de velocidad de filtración rápida
5.10
Baño de agua, termostatizado
5.11
Tubos de ensayo
6
VALORACION DEL REACTIVO DE FEHLING - CAUSSE Y BONNANS
6.1
Se colocan en un erlenmeyer de 250 ml, 15,0 ml de reactivo, 50 ml de agua, 2 ó 3
trozos de porcelana porosa o perlas de vidrio y se calienta sobre tela metálica.
6.2
Cuando el líquido comienza a hervir, se agrega la solucion de azúcar invertido con una
bureta de Fehling a razón de tres gotas por segundo, cuidando de mantener una franca
ebullición.
6.3
Cuando se esta próximo al punto final, la solución adquiere una coloración verdosa
débil, se añaden dos gotas de la solución de azul de metileno y se continúa con la
adición de la solución de azúcar invertido a razón de una o dos gotas por vez, con
intervalo de algunos segundos entre cada agregado, hasta que el contenido del
erlenmeyer quede perfectamente límpido (desaparición de color azul), y de coloración
amarillenta, lo que indica el punto final de la valoración.
6.4
En la valoración descrita los 15,0 ml de reactivo de Fehling - Causse - Bonnans deben
ser reducidos exactamente por 8,2 ml de la solución de azúcar invertido; en caso
contrario será necesario agregar agua o sulfato de cobre al reactivo hasta que en dos
valoraciones sucesivas se consuman 8,2 ml de solucion de azúcar invertido.
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MUESTREO
La muestra se extrae según se indica en APNB 38024.
2
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PREPARACIÓN DE LA MUESTRA
8.1
Miel líquida o cristalizada sin impurezas
La muestra de laboratorio se homogeneiza suficientemente, mediante agitación por lo menos 3
min evitando la incorporación de aire.
8.2
Miel líquida o cristalizada con impurezas
Luego de quitar las impurezas de mayor tamaño, se agita a temperatura ambiente hasta que
sea homogénea y se pasa por el tamiz 500 µm. Si se trata de miel cristalizada se pasa por el
mismo tamiz con ayuda de una espátula.
8.3
Miel en panales
En el caso de estar cerrados aun los panales, se desoperculan. Luego, con ayuda del tamiz, se
separa la miel de los panales sin calentamiento.
8.4
Preparación de la solución de la muestra
8.4.1
Se pesan, 1,0 g de muestra asegurando el 1 mg, perfectamente homogeneizada y se
trasvasa cuantitativamente a un matraz aforado de 100 ml.
8.4.2
Se agregan 5 ml de la solución de acetato básico de plomo y se diluye con agua hasta
volumen. Luego se filtra por papel filtro de velocidad de filtración rápida (solución
concentrada).
8.4.3
Se pipetean 25 ml de la solución obtenida a un matraz aforado de 50 ml, se lleva a
volumen con agua y se mezcla (solución A).
8.4.4
Se transfieren 50 ml de la solución concentrada de la miel obtenida según 8.4.2 a un
matraz aforado de 100 ml y se invierte con 3 ml de solución de acido clorhídrico 6 N
durante 15 min en un baño de agua mantenida entre 65 °C y 70 °C. Se neutraliza al
tornasol con 2 ml de solución de hidróxido de sodio 6 N y luego con hidróxido de sodio
0,1 N gota a gota, y se lleva a volumen con agua (Solución B).
9
PROCEDIMIENTO
9.1
Azúcares reductores directos
9.1.1
Determinación
Se realiza empleando la técnica indicada para la valoración del reactivo de Fehling - Causse Bonnans descrita de 6.1 a 6.3, pero empleando la solución A de la muestra, en lugar de la
solución de azúcar invertido, de modo que el volumen utilizado en la valoración esté
comprendido entre 8 ml y 11 ml. En caso contrario deberá modificarse la concentración de la
solucion de azucares.
9.1.2
Cálculo
C
4,1  200
m1 V1
3
donde:
C
4,1
m1
V1
el contenido de azúcar invertido en gramos por 100 gramos de miel
el factor del reactivo de Fehling - Causse - Bonnans
la masa de la muestra de miel, en gramos
el volumen de la solución (A) empleado en la valoración, en mililitros
9.1.3
Expresión de los resultados
El contenido de azúcar invertido se expresa como porcentaje (m/m), con dos cifras decimales.
9.2
Azúcares reductores previa inversión
9.2.1
Determinación
Se procede como se indica con la solucion (A) pero empleando la solucion (B).
9.2.2
Cálculo
C1 
4,1  200
m1 V2
Siendo:
C1
4,1
m1
V2
el contenido de azúcares reductores previa inversión, en gramos por 100 gramos
el factor del reactivo de Fehling - Causse - Bonnans
la masa de la muestra en gramos
el volumen de la solución B empleado en la valoración, en mililitros
9.2.3
Expresión de los resultados
El contenido de azúcares reductores previa inversión se expresa como porcentaje (m/m), con
dos cifras decimales.
9.3
Sacarosa aparente
9.3.1
Determinación y cálculo
Se determina con la formula siguiente:
S A  C1  C  0,95
Siendo:
SA
C1
C
0,95
el contenido de sacarosa aparente
el contenido de azúcares reductores previa inversión, en gramos por 100 gramos
el contenido de azúcares reductores directos, en gramos por cien gramos
el factor de conversión de azúcar invertido a sacarosa
9.3.2
Expresión de los resultados
El contenido de sacarosa aparente se expresa como porcentaje (m/m), con dos cifras
decimales.
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10
INFORME DEL ENSAYO
El informe del ensayo debe incluir mínimante:





11
el número o identificación de la muestra
la identificación del método: “NB 38033 Miel - Determinación de azúcares reductores Método de Fehling - Causse - Bonnans”
los resultados obtenidos
la fecha del ensayo
toda modificación introducida en el método
BIBLIOGRAFIA
INSTITUTO ARGENTINO DE NORMALIZACION - Norma IRAM 15934 Miel - Determinación
de azúcares - Metodo de Fehling Causse - Bonnans
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