Extracción de ADN.pdf - cenpat

¿Cómo puedo extraer
ADN en casa?
Laboratorio de
Microbiología Ambiental
CENPAT-CONICET
¿qué es el ADN?
☺ El ADN es una molécula de
longitud gigantesca que está
presente en cada célula viva
☺ Contiene las instrucciones
para construir distintos
componentes de las células
☺ Los segmentos de ADN que
llevan esta información
genética se llaman genes
¿qué forma tiene?
☺ Está formada por dos cadenas
dispuestas de forma antiparalela
☺ Estas dos cadenas toman una
forma de doble hélice
☺ La información está contenida en
el interior de la molécula
☺ Es muy finita y larga
☺ ¡Hay 1.000.000 de nanometros en
1 milímetro!
2 nanometros
¿quién descubrió su
forma?
☺ En abril de 1953
Watson y Crick
propusieron la
estructura
molecular del ADN
☺ Ganaron el Premio
Nobel de Medicina
o Fisiología en
1962
¿y dónde está el ADN?
☺ Dentro del núcleo
de las células, el
ADN está
organizado en
estructuras
llamadas
cromosomas
☺ El ADN está muy
pero muy
compactado
☺ ¡Si no lo estuviera,
tendría casi 2
metros de largo!
Nuestros cromosomas
¿Estos cromosomas, son de un hombre o de una mujer?
Hoy purificaremos ADN
a partir de banana
El plátano es uno de los
cultivos más antiguos
Bananas, bananas y
más bananas
☺ Es una hierba perenne gigante
☺ Originaria del sureste de Asia (Malasia,
Indonesia o Filipinas)
☺ Su nombre científico es Musa acuminata
☺ Contiene potasio, magnesio, fósforo,
calcio, hierro, y vitaminas A, B6 y C
☺ Beneficiosas para la prevención del
cáncer y de enfermedades cardíacas
Y sí… ¡las bananas
también tienen ADN!
☺ Su genoma
haploide tiene 11
cromosomas
☺ Generalmente
tienen tres copias
de cada cromosoma
☺ Son plantas
estériles: no
producen semillas
Para este experimento
necesitamos:
☺ Licuadora o multiprocesadora
☺ Agua desmineralizada
☺ Sal de mesa
☺ Bicarbonato de sodio
☺ Jabón líquido para la ropa
☺ Filtro para café
☺ Bananas
Primer paso:
preparamos el buffer
☺ Volcar en un vaso limpio:
☺ 120 mililitros de agua
desmineralizada
☺ 1,5 g (1/2 cucharadita de te al ras) de
sal de mesa
☺ 5 g (1 cucharadita bien colmada) de
bicarbonato de sodio
☺ 5 ml (1 cucharada sopera) de jabón
líquido para la ropa o shampoo
☺ Mezclar muy bien
☺ ¡Enfriar!
Segundo paso:
hacemos puré de
banana
☺ Cortamos en trocitos una
banana
☺ La colocamos en la
licuadora
☺ Le agregamos un chorrito
de agua desmineralizada
☺ Licuamos en períodos
breves de 10 segundos
Tercer paso:
agregamos nuestro
buffer
☺ Agregamos buffer bien frío
al vaso de la licuadora (el
doble del volumen que
tenemos de puré de
banana)
☺ Licuamos en pulsos cortos
durante 2 minutos
☺ La licuadora y el
detergente ayudan a
romper las células y
liberar la sopa de
moléculas de su interior
Cuarto paso:
filtramos nuestra
sopa
☺ Usando un embudo y
filtros de café, filtramos
nuestra sopa molecular
☺ Durante todo el tiempo
mantenemos el filtrado
bien frío
☺ ¡Enzimas de nuestra sopa
de moléculas pueden
romper el ADN en
pedacitos!
Quinto paso:
emborrachamos
nuestra sopa
☺ Con mucho cuidado,
agregamos etanol 96º bien
frío sobre nuestra sopa de
moléculas
☺ No deben mezclarse
☺ En la interfase entre los
dos líquidos veremos un
material gelatinoso
☺ ¡Es el ADN!
ADN
Sexto paso:
pescamos el ADN
☺ Con cuidado, insertamos
una varilla o palillo e
intentamos enroscar el
ADN
☺ Pasamos el ADN de banana
a un tubo con etanol 70º
☺ ¡Si lo guardamos bien
cerrado durará mucho
tiempo!
Podés repetir este
experimento en casa con tu
fruta o vegetal favorito
¡O hacer otro experimento!