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900-9918
Dermatophyte Test
• Fungal culture test, petri dish, DTM / ESA / SAB
®
Test para cultivo de hongos, placa de pedri, DTM/ESA/SAB
Test de Culture de Mycoses, boîte de Pétri, DTM/ESA/SAB
Dermatophyten Test für den Nachweis von Hautpilzen, Petrischale, DTM/ESA/SAB
Schimmel Test, petrischaal, DTM/ESA/SAB
SAB – White, sometimes yellow or gray undersurface view.
SAB – Superficie inferior de color marrón rojizo.
Trichophyton equinum
DTM – Red color change in media
ESA – Blue –green change in media. Cream to tan and velvety
SAB – Yellow to red-brown undersurface view.
Trichophyton rubrum
DTM – Cambio del color del medio a rojo.
ESA – Cambio del color del medio a azul verdoso. Aspecto plumoso y velloso.
SAB – Superficie inferior de color rojo oscuro.
LIMITATIONS: The complete classification of dermatophytes depends upon
microscopic observations of direct and slide culture preparations along with
PCR, physiological and serological tests.
Store Fungal Culture Test in an inverted position, lid side down
EN
Fungal Culture Test
In vitro test for veterinary use only
Introduction:
Dermatomycoses are common clinical infections of dogs, cats, cows, horses
and other animals. The causal dermatophytes are mycelial fungi, which possess keratolytic properties that allow them to invade skin, nails and hair.
DTM / ESA / SAB:
Fungal Culture Test consists of individually wrapped three-chambered petridishes with removable lids that allow for easy inoculation and collection of
samples for identification. Each Fungal Culture System contains a Dermatophyte Test Medium (DTM), an Enhanced Sporulation Agar (ESA) and a Sabouraud agar and is designed to diagnose the most relevant veterinary pathogenic
fungi – called dermatophytes – :Microsporum, Trichophyton and Epidermophyton spp.
DTM contains agents that suppress the growth of saprophytic fungi and contaminating bacteria, while allowing the growth of dermatophytic fungi. These
fungi will turn the color of DTM from orange to red. Like DTM, ESA contains
supplements to inhibit growth of bacteria and saprophytic fungi, but the color
change is from yellowish to blue-green. What makes ESA unique is that it enhances both pigmentation and sporulation of dermatophytes, thus allowing
for proper identification of the fungal isolates. Sabouraud is a non-selective,
transparent medium on which every fungus will grow.
Collection of the Specimen:
Samples are collected from the animal with a suspected dermatophyte infection. The collection site may be cleaned if contaminated, but should be dry
prior to collecting the sample. Using clean forceps and or scalpel collect the
infected hair, scales, skin and crusts from the periphery of the lesion(s), where
active growth is most likely occurring. When using a Wood’s lamp the fluorescing hairs and skin fragments are preferred samples and so are broken hair
shafts.
Procedure:
Plate(s) should be inoculated as soon as possible after sample collection. Remove the plate(s) required for testing from the packaging, remove the lid and
gently press the sample onto the media and push a second small portion of
the sample down into the agar. Repeat the procedure on the media in the other
chambers of the plate. Replace the lid on the plate and incubate at room temperature. Plates may be incubated in full light.
Interpretation:
48 - 72 Hours after inoculation daily examination of the plates should take
place and the DTM agar can start changing color to red between 3 - 6 days
after inoculation at room temperature indicative of that a dermatophyte has
grown. Most organisms will have appeared after maximally 7 - 10 days, however plates should be kept for 21 days. Other organisms capable of growing
on the agar cause no color change (so-called non-dermatophytes). Certain
strains of yeast (Candida albicans) are capable of converting the indicator to
red, but the yeasts can be identified by their white bacteria-like colonial appearance on both the DTM and ESA. Most dermatophytes will change the ESA
medium to a blue-green color in 3 - 7 days. If the culture grown on the Sabouraud agar is identical with the growth on DTM and ESA, the culture can be
examined from underneath through the Sabouraud.
Dermatophytes can be further determined by means of microscopic evaluation.
To do this a sample of the growth on the ESA side of the plate can be taken
using a piece of transparent tape. This tape with the sample stuck to it, can
then be attached to a microscopic slide in order to evaluate the sample under
the microscope. Coloring agents such as lactophenol cotton blue can be used
to improve visualizing the sample.
Common Dermatophytes
Please Note: Undersurface is view of growth from bottom of dish, through the
Sabouraud medium.
Microsporum canis
DTM – Red color change in media
ESA – Blue-green color change in media. Fluffy white middle area; golden
yellow border
SAB – Yellow undersurface view.
Microsporum gypseum
DTM – Red color change of media
ESA – Blue-green color change of media. Light brown border, white rapidly
spreading mycelium
SAB – Cream to tan undersurface view
Microsporum nanum
DTM – Red color change of media
ESA – Blue-green color change of media. White to buff (yellowish-brown) with
a powdery appearance
SAB – Undersurface view is initially orange, later red-brown
Microsporum gallinae
DTM – Red color change of media
ESA – Blue-green color change of media. White to pink with a velvety appearance
SAB – Undersurface view of red pigment that diffuses into the media.
Epidermophyton floccosum
DTM – Red color change to media
ESA – Blue –green color change to media. Restricted growth, olive green to
pale yellow growth
SAB – Brownish undersurface
Trichophyton mentagrophytes
DTM – Red color change in media
ESA – Blue–green color change of media. Granular white sugar like appearance
SAB – Variable under surface color
Plates are stable at temperature between 2 - 20º C for up to the expiry date as
indicated on the packaging.
Discard the used plates in the correct way, avoiding the spread of organisms,
present on the plates.
Epidermophyton floccosum
DTM – Cambio del color del medio a rojo.
ESA – Cambio del color del medio a azul verdoso. Crecimiento limitado, de
color verde oliva a amarillo claro.
SAB – Superficie inferior marrón.
Trichophyton terrestre
DTM – Cambio del color del medio a rojo.
ESA – Cambio del color del medio a azul verdoso. Falso amarillo polvoriento,
puede parecerse a T. Mentagrophytes.
SAB – Superficie inferior de color beige pálido a beige claro.
Keep out of reach of children
ES
Sistema para cultivo de hongos
Sistema in vitro para uso veterinario
Introducción:
Las dermatomicosis son infecciones clínicas comunes de los perros, gatos,
vacas, caballos y otros animales. Los dermatofitos responsables de la infeccion
son hongos filamentosos que poseen propiedades queratolíticas que les permiten invadir la piel, las uñas y el pelo.
DTM / ESA / SAB:
El sistema está formado por un placa de Petri repartida en tres compartimentos, envasada individualmente y con tapas removibles, que permiten una fácil
inoculación y recogida de las muestras para su identificación. Cada sistema
contiene un compartimento con el medio de cultivo para Dermatofitos (DTM),
un con el agar de estimulación de la esporulación (ESA) mas un con el medio
de cultivo Sabouraud y su diseño permite diagnosticar los hongos patógenos
mas importantes en veterinaria - denominados dermatofitos - incluyendo Microsporum, Trichophyton y especies de Epidermophyton.
El medio DTM contiene principios activos que inhiben el crecimiento de hongos
saprofíticos y bacterias contaminantes, mientras que permiten el crecimiento
de hongos dermatofíticos. La presencia de estos hongos provoca un cambio
de color del medio DTM de naranja a rojo. Del mismo modo, el medio ESA
contiene suplementos que inhiben el crecimiento de bacterias y hongos saprofíticos, pero el cambio de color va del amarillo al azul verdoso. La característica única del medio ESA es que estimula tanto la pigmentación como la
esporulación de los dermatofitos, permitiendo así la correcta identificación de
los aislados fúngicos. Sabouraud es un medio de cultivo transparente, nonselectivo, en que crece todo hongo.
Recogida de muestras:
Las muestras se recogen del animal sospechoso de padecer una infección por
dermatofitos. La zona de muestreo puede limpiarse en caso de estar contaminada pero debe estar seca antes de recoger la muestra. Utilizando unas pinzas
limpias o un bisturí tomar la muestra de pelo, escamas, piel y costras de la
zona periférica de la lesión o lesiones, en donde tiene lugar con mayor probabilidad el crecimiento activo. Si se utiliza una lámpara de Wood son preferibles
las muestras de pelo y fragmentos de piel que muestren fluorescencia así
como los pelos rotos.
Procedimiento:
La(s) placa(s) debe(n) inocularse inmediatamente después de recoger la muestra. Extraer las placas necesarias de su envase, retirar la tapa y aplicar la muestra presionando suavemente sobre el medio de cultivo e introducir una
segunda pequeña porción de la muestra en el agar. Este procedimiento se repite en cada compartimento. Colocar de nuevo la tapa sobre la placa e incubar
a temperatura ambiente. Las placas pueden incubarse a plena luz.
Interpretación:
48 - 72 horas después de la inoculación realizar una inspección diaria de las
placas, ya que el agar DTM puede empezar a cambiar de color a partir de los
3-6 días tras la inoculación a temperatura ambiente, indicando el crecimiento
de un dermatofito. La mayoría de los microorganismos habrán aparecido tras
un plazo máximo de 7-10 días, sin embargo las placas deben conservarse durante un plazo de 21 días. Otros microorganismos capaces de crecer en agar
no provocan un cambio de color (denominados no dermatofitos). Ciertas cepas
de levaduras (Candida albicans) son capaces de cambiar el indicador a rojo,
pero las levaduras pueden identificarse por su aspecto similar al de colonias
bacterianas de color blanco tanto en el medio DTM como en el ESA. La mayoría
de los dermatofitos cambian el medio ESA a un color azul verdoso en un plazo
de 3-7 días. Si el crecimiento en el compartimento con Sabouraud es idéntico
con el del DTM y ESA, se puede examinar el crecimiento por debajo a través
del Sabouraud.
Los dermatofitos se determinan definitivamente mediante una evaluación microscópica. La técnica consiste en coger una muestra del cultivo de la porción
ESA de la placa utilizando un trozo de cinta adhesiva transparente. La cinta
con la muestra se pega a un portaobjetos para su evaluación microscópica.
Pueden utilizarse agentes colorantes como el azul algodón lactofenol para facilitar la visualización de la muestra.
Dermatofitos comunes
Nota: La superficie inferior consiste en la vista del cultivo desde el fondo de la
placa a través del medio.
Microsporum canis
DTM – Cambio del color del medio a rojo.
ESA – Cambio del color del medio a azul verdoso. Área vellosa y blanca en el
centro; margen de color amarillo dorado.
SAB – Superficie inferior de color amarillo.
Microsporum gypseum
DTM – Cambio del color del medio a rojo.
ESA – Cambio del color del medio a azul verdoso. Margen marrón claro, filamentos blancos de rápida propagación.
SAB – Superficie inferior de color crema a marrón.
Trichophyton mentagrophytes
DTM – Cambio del color del medio a rojo.
ESA – Cambio del color del medio a azul verdoso. Aspecto granuloso como
azúcar.
SAB – Superficie inferior de color variable.
CONSERVACIÓN:
CONSERVAR LAS PLACAS EN SU ENVASE ORIGINAL EN POSICIÓN INVERTIDA, CON LA TAPA HACIA ABAJO, A UNA TEMPERATURA ENTRE 2º Y 20ºC
HASTA LA FECHA DE CADUCIDAD INDICADA EN EL ENVASE.
LIMITACIONES: La determinación definitiva de los dermatofitos se establece
con la observación microscópica de preparaciones directas del cultivo o en
un portaobjetos, junto con pruebas PCR, fisiológicas y serológicas.
Únicamente para uso veterinario
Conservar Sistema para cultivo de hongos en posición invertida, con la tapa
hacia abajo.
Eliminar las placas utilizadas de forma correcta evitando la propagación de
los microorganismos presentes en las placas.
Mantener fuera del alcance y la vista de los niños
FR
Système de Culture de Mycoses
Test in vitro à usage exclusivement vétérinaire.
Introduction:
Les Dermatomycoses (la teigne) sont des infections cliniques communes chez
les chiens, chats, chevaux, vaches et autres animaux. Les dermatophytes causaux sont des champignons mycéliens, qui possèdent des propriétés kératolytiques leur permettant d’envahir la peau, les ongles et les poils.
DTM / ESA / SAB:
Système de Culture de Mycoses DTM / ESA / SAB est une boîte de Pétri à trois
compartiments, emballée individuellement, avec un couvercle facilitant l’inoculation et le prélèvement d’échantillon pour l'identification. Chaque Système
de Culture de Mycoses contient un compartiment avec du Dermatophyte Test
Médium (DTM), un compartiment d'Agar de Sporulation Renforcée (ESA) et
un compartiment avec un milieu de Sabouraud et est conçu pour diagnostiquer
les plus importantes mycoses pathogènes vétérinaires - appelées dermatophytes - Microsporum, Trichophyton et Epidermophyton spp.
Le DTM contient des agents qui empêchent la croissance des mycètes saprophytiques et des bactéries contaminantes, tout en stimulant celle des mycètes
dermatophytiques. Ces mycètes vont changer la couleur du DTM de l’orange
au rouge. Tout comme le DTM,l' ESA contient également des suppléments inhibiteurs de croissance de bactéries ou mycètes saprophytiques, mais le changement de couleur se fait du jaune au bleu-vert. Ce qui rend l'ESA unique, c’est
qu’il stimule autant la pigmentation que la sporulation des dermatophytes, ce
qui permet d’identifier correctement les mycètes isolés. Sabouraud est un milieu non sélectif et transparent, stimulant la croissance de tout champignon.
Prélèvement d’un échantillon:
Les échantillons sont prélevés d’un animal soupçonné d’une mycose. Le site
de prélèvement doit être nettoyé s’il est contaminé, mais doit être sec avant le
prélèvement de l'échantillon. Utiliser des pinces propres et/ou un scalpel pour
prélever les poils, les squames, la peau et les croutes de la périphérie de la
(des) lésion(s), où la croissance est probablement la plus active. En utilisant
une lampe de Wood, les fragments de poil et de peau fluorescents sont des
échantillons préférentiels ainsi que les poils brisés.
Procédure:
Les boites de Pétri doivent être inoculées dès que possible après le prélèvement de l’échantillon. Retirer les boites nécessaires pour le test de leur emballage, enlever le couvercle et presser délicatement une partie de l’échantillon
sur le milieu et pousser une seconde partie de l’échantillon plus en profondeur
dans celui-ci. Répéter cette action dans les trois compartiments de la boîte
(DTM, ESA et Sabouraud). Replacer le couvercle sur la plaque et incuber à
température ambiante. Les boites peuvent être incubées à la lumière du jour.
Interprétation:
Dés 48 - 72 heures après inoculation une inspection journalière est recommandée. L’agar DTM peut commencer à changer de couleur entre 3 et 6 jours
après inoculation à température ambiante, indiquant qu’un dermatophyte est
présent. La plupart des organismes seront apparus au plus tard entre 7 et 10
jours, cependant il convient de garder les boites pendant 21 jours. D’autres
organismes peuvent pousser dans l’agar mais ne provoquent pas un changement de couleur (donc appelés non-dermatophytes). Certaines souches de levure (Candida albicans) sont capables de faire passer l’indicateur au rouge,
néanmoins ces levures peuvent être reconnues par leur aspect semblable à
des colonies blanches de bactéries, autant sur le DTM que sur l’ESA. La plupart
des dermatophytes changeront la couleur de l’ESA en bleu-vert entre 3 - 7
jours. Si la croissance sur le mileu de Sabouraud est identique à celle du DTM
et de l'ESA, le milieu de Sabouraud permet d'examiner la culture par en dessous.
Les dermatophytes peuvent être déterminés avec l’aide d’un microscope. Pour
échantillon, on peut prélever du côté de la partie ESA. Le prélèvement est fait
en utilisant un ruban adhésif transparent, qui sera ensuite fixé sur une lame
afin d'examiner l'échantillon sous microscope. Pour améliorer la visualisation
du prélèvement un colorant comme le bleu coton en solution de lactophénol
peut être appliqué.
Dermatophytes communes
Attention: la face inférieure est la vue de la base de la culture, à travers le milieu
de Sabouraud
Trichophyton rubrum
DTM – Red color change in media
ESA – Blue-green color change in media. White fluffy downy appearance
SAB – Dark red undersurface view
Microsporum nanum
DTM – Cambio del color del medio a rojo.
ESA – Cambio del color del medio a azul verdoso. Color entre blanco y marrón
amarillento con aspecto polvoriento.
SAB – Superficie inferior inicialmente de color naranja, posteriormente de color
marrón rojizo.
Microsporum canis
DTM – Changement de couleur du milieu en rouge
ESA – Changement de couleur du milieu en bleu-vert. Zone velue et blanche
au centre, bordure dorée
SAB – Vue de la face inférieure jaune.
Trichophyton verrucosum
DTM – Red color change to media
ESA – Blue-green color change in media. Velvety texture and heaped, smaller
colonies
Trichophyton tonsurans
DTM – Cambio del color del medio a rojo.
ESA – Cambio del color del medio a azul verdoso. Textura aterciopelada con
pliegues rugosos.
Microsporum gypseum
DTM – Changement de couleur du milieu en rouge
ESA – Changement de couleur du milieu en bleu-vert. Bordure marron claire,
rapide propagation du mycelium blanc
SAB – Face inférieure crème à marron clair.
erleichtern die Differenzierung der Makrokonidien.
Microsporum nanum
DTM – Changement de couleur du milieu en rouge
ESA – Changement de couleur du milieu en bleu-vert. Un aspect poudreux de
blanc à ocre
SAB – Face inférieure initialement orange évoluant vers brun-rouge.
Microsporum gallinae
DTM – Changement de couleur du milieu en rouge
ESA – Changement de couleur du milieu en bleu-vert. Un aspect velours blanc
à rose
SAB – Face inférieure rouge qui diffuse dans le milieu.
Epidermophyton floccosum
DTM – Changement de couleur du milieu en rouge
ESA – Changement de couleur du milieu en bleu-vert. Croissance limitée, de
couleur vert-olive à jaune
SAB – Face inférieure de couleur marron.
Trichophyton mentagrophytes
DTM – Changement de couleur du milieu en rouge
ESA – Changement de couleur du milieu en bleu-vert. Apparition de granules
en forme de sucre blanc
SAB – Face inférieure de couleur variable
Trichophyton rubrum
DTM – Changement de couleur du milieu en rouge
ESA – Changement de couleur du milieu en bleu-vert. Aspect plumeux et duveteux
SAB – Face inférieure de couleur rouge foncé
Trichophyton verrucosum
DTM – Changement de couleur du milieu en rouge
ESA – Changement de couleur du milieu en bleu-vert. Texture veloutée et des
petites colonies bulbeuses.
SAB – Face inférieure de couleur blanche parfois jaune ou gris.
Trichophyton equinum
DTM – Changement de couleur du milieu en rouge
ESA – Changement de couleur du milieu en bleu-vert. Aspect velours de couleur crème à marron clair
SAB – Face inférieure jaune à brun rouge.
LIMITATIONS: La classification complète des dermatophytes se fait par observation microscopique de préparations directes ou sur lamelles, combinée avec
des tests PCR, physiologiques et sérologiques.
Stocker les boites telles qu’elles sont transportées en position inverse, face
supérieure vers le bas.
A conserver à une température comprise entre de 2º et 20º jusqu'à la date de
péremption indiquée sur l’emballage.
Eliminer les plaques utilisées de façon correcte, afin d' empêcher que les organismes présents sur la plaque ne se propagent pas.
Wichtigste Dermatophyten beim Tieren:
Microsporum canis
DTM - Rote Farbe des Mediums
ESA - Blau-grüne Farbe des Mediums
Kultur flauschig, weißes Zentrum, gold-gelbe Ränder; gelbe Unterseite.
Microsporum gypseum
DTM - Rote Farbe des Mediums
ESA - Blau-grüne Farbe des Mediums
Kultur hellbrauner Rand, weiße, sich schnell ausbreitende Myzelien
SAB – creme-farbige bis hellbraune Unterseite.
Microsporum nanum
DTM - Rote Farbe des Mediums
ESA - Blau- grüne Farbe des Mediums
Kultur weiß bis gelbbraun, puderig
SAB – Unterseite anfangs orange, später rotbraun
Microsporum gallinae
DTM - Rote Farbe des Mediums
ESA - Blau- grüne Farbe des Mediums
Kultur weiß bis pink, samtig
SAB – Unterseite rotes Pigment diffundiert ins Medium
Trichophyton mentagrophytes
DTM - Rote Farbe des Mediums
ESA - Blau-grüne Farbe des Mediums.
Kultur körnig, weiß, zuckerartige Morphologie
SAB – Unterschiedlich gefärbte Unterseite
Trichophyton verrucosum
DTM - Rote Farbe des Mediums
ESA - Blau-grüne Farbe des Mediums
Kultur weiß, manchmal gelb oder grau, samtig
SAB – Weiße, manchmal gelbe Unterseite
Trichophyton rubrum (selten bei Tieren)
DTM - Rote Farbe des Mediums
ESA - Blau-grüne Farbe des Mediums
Kultur weiß, flaumig
SAB – Dunkelroter Unterseite
Epidermophyton floccosum (selten bei Tieren)
DTM - Rote Farbe des Mediums
ESA - Blau-grüne Farbe des Mediums
Kultur Langsamer Wuchs, olivgrüne bis blassgelbe Kolonie
SAB – Bräunlicher Unterseite
Trichophyton equinum
DTM - Rote Farbe des Mediums
ESA - Blau-grüne Farbe des Mediums
Kultur Creme bis braun und samtig
SAB – Gelbe bis braune Unterseite
Tenir hors de portée des enfants
DE Duo Kultur – Nachweis von Hautpilzen
Lagerung:
Bestückte Platten mit dem Deckel nach unten lagern. Ungeöffnete Platten bei
2 – 20º C aufbewahren.
Weitere Hinweise für den sicheren Gebrauch:
Duo Kultur – System für den Nachweis von Hautpilzen
In-vitro-Diagnostikum für den tierärztlichen Gebrauch
Einleitung:
Dermatomykosen können bei Hunden, Katzen, kleinen Heimtieren, Kühen, Pferden und zahlreichen anderen Tierarten vorkommen.
Dermatophyten sind Pilze mit Myzelien. Durch ihre keratolytischen Eigenschaften können sie in Haut, Krallen und Haare eindringen.
DTM / ESA / SAB Petrischalen:
Das Duo Kultur – System besteht aus einzeln verpackten Petrischalen mit drei
Fächern und abnehmbarem Deckel. Damit sind sowohl Probenauftrag sowie
die Entnahme von Pilzkulturen zur mikroskopischen Bestimmung sehr einfach.
Jedes Kultur-System für Hautpilze enthält ein Fach mit Dermatophyten Test
Medium (DTM), eins mit Enhanced Sporulation Agar (ESA) und eins mit Sabouraud. Dieser Test ist geeignet um die wichtigsten pathogenen Dermatophyten wie Microsporum, Trichophyton and Epidermophyton spp. zu
diagnostizieren. DTM beinhaltet Agenten, die das Wachstum von Saprophyten
und Bakterien hemmen, während die Entwicklung von Dermatophyten gefördert wird. Dermatophyten färben den DTM–Agar von Orange nach Rot. Auch
der ESA-Nährboden enthält Zusätze zur Hemmung von Bakterien und Saprophyten. Dermatophyten bewirken einen Farbumschlag von Gelb nach GrünBlau. Der ESA-Nährboden bewirkt eine stärkere Pigmentierung und
Sporulierung der Dermatophyten zur besseren Bestimmung der Pilzisolate.
Sabouraud ist ein nicht-selektiver, transparenter Nährboden, worauf jeder Pilz
wachsen kann.
Probennahme:
Die Stelle der Probennahme darf bei Verschmutzung gereinigt werden. Sie
sollte aber vor Probennahme trocken sein. Mit Hilfe einer sauberen Zange,
einer Pinzette oder eines Skalpells Haar, Schuppen und Hautgeschabsel am
Rand der verdächtigen Stelle entnehmen. Bei Verwendung einer Woodschen
Lampe sollten bevorzugt fluoreszierende Haare, Haut und gebrochene Haarschäfte als Probe genommen werden. Auch mit einer kleinen Bürste (Zahnbürste) gewonnene Haar und Hautschuppen-Proben sind für den Test
verwendbar, insbesondere bei generalisierten Haut- und Haarveränderungen.
Testdurchführung:
Die Platten sollten so schnell wie möglich nach der Probennahme auf beiden
Seiten bestückt werden. Hierzu wird der Deckel der Platte entfernt und Probenteile sanft auf beide Testmedien gedrückt. Die Platte wird dann mit dem
Deckel geschlossen und bei Raumtemperatur aufbewahrt.
Interpretation:
Die Beobachtung der Platte sollte zwei bis drei Tage nach dem Probenauftrag
beginnen. Bei einem Vorhandensein von Dermatophyten wird sich der DTMNährboden bei Zimmertemperatur innerhalb von drei bis sechs Tagen von
Orange nach Rot verfärben. Die meisten Dermatophyten-Kolonien werden innerhalb von maximal sieben bis zehn Tagen sichtbar. Dennoch sollten die Platten 21 Tage aufbewahrt werden. Andere auf dem Nährboden wachsende
Organismen wie Saprophyten bewirken keinen oder einen sehr späten Farbumschlag des Mediums. Saprophyten und Hefen wie Candida albicans, die
ebenfalls einen roten Farbumschlag bewirken, unterscheiden sich durch die
weiße bakterienähnliche Morphologie der Kolonien auf dem DTM und ESANährboden. Die meisten Dermatophyten ändern innerhalb von drei bis sieben
Tagen die Farbe des ESA-Mediums von Gelb nach Grün-Blau. Wenn das
Wachstum auf Sabouraud dem von DTM und ESA entsprecht, kann die Unterseite des Sabouraud-Wachstums untersucht werden.
Dermatophyten können weiterhin durch die mikroskopische Bestimmung der
Makrokonidien differenziert werden. Hierzu werden auf dem ESA-Boden gewachsene Kolonieteile vorsichtig mit einem transparentem Klebeband abgenommen. Anschließend diesen Klebestreifen auf den Objektträger legen und
mikroskopisch untersuchen. Farbstoffe wie etwa Lactophenol-Baumwollblau
Nur für den tierärztlichen Gebrauch.
Bei kühler Lagerung können sich durch Niederschlag kleine rote oder braune
Tropfen auf der Oberfläche des Agars zeigen. Das ist keine Kontamination und
hat keine Auswirkung auf die Funktion des Produktes.
Tests mit potenziell infektiösen und pathogenen Mikroorga-nismen nur in
einem dafür vorgesehenen und entsprechend ausgerüsteten Laborraum
durchführen.
Gebrauchtes Testmaterial und die verwendeten Testkomponenten sind als potenziell infektiös anzusehen und müssen deswegen ausreichend desinfiziert
bzw. sterilisiert werden und können dann, da unschädlich, anschließend z.B.
in einem dichten, geschlossenen Kunststoffbeutel entsorgt werden.
Für Kinder unzugänglich aufbewahren.
NL
Schimmel Kweeksysteem
In vitro test uitsluitend voor veterinair gebruik
Introductie:
Dermatomycoses zijn alledaagse, klinische infecties van honden, katten, runderen, paarden en andere dieren.
De causale dermatofyten zijn myceliale schimmels, die keratolytische eigenschappen bezitten, waardoor zij huid, nagels en haar kunnen binnendringen.
DTM / ESA / SAB Plaat:
Schimmel Kweeksysteem is een individueel verpakte petrischaal met drie
compartimenten, waarvan de deksel verwijderd kan worden voor een gemakkelijke inoculatie en monstername na groei ter identificatie.
Elk Schimmel Kweeksysteem bevat één compartiment met Dermatofyte Test
Medium (DTM), één met Versterkt Sporulatie Agar (ESA) en één compartiment
met Sabouraud en is ontworpen om de meest relevante veterinaire pathogene
schimmels te diagnosticeren - dermatofyten genaamd -: Microsporum, Trichophyton en Epidermophyton spp.
DTM bevat agentia, die de groei van saprofytische schimmels en contaminerende bacteriën remt, terwijl de groei van dermatofytische schimmels mogelijk
gemaakt wordt. Deze schimmels veranderen de kleur van DTM van oranje naar
rood. Net als DTM, bevat ESA supplementen om groei van bacteriën en saprofytische schimmels te remmen, maar de kleurverandering is van geel naar
blauw-groen. Wat uniek is van ESA is dat het de pigmentatie en sporulatie van
dermatofyten versterkt, waardoor het mogelijk wordt de juiste determinatie
van een geïsoleerde schimmel te doen. Sabouraud is een niet selectief transparant medium, waarop alle schimmels kunnen groeien.
monster zachtjes op het medium en duw een tweede portie de agar in. Herhaal
dit op de andere compartimenten van de plaat. Plaats de deksel weer terug en
incubeer bij kamertemperatuur. Platen mogen geïncubeerd worden in vol licht.
Interpretatie:
Vanaf 48 - 72 uur na inoculatie dient een dagelijkse inspectie van de platen
plaats te vinden en de DTM agar kan al rood verkleuren tussen 3 - 6 dagen na
inoculatie bij kamertemperatuur, indicatief dat er een dermatofyte gegroeid is.
De meeste organismes zullen verschijnen na maximaal 7 - 10 dagen, maar de
platen dienen 21 dagen bewaard te blijven. Andere organismes die in staat zijn
op de plaat te groeien laten geen kleurverandering zien (zg. non-dermatofyten).
Bepaalde gisten (Candida albicans) zijn in staat de indicator rood te kleuren,
maar deze gisten kunnen onderscheiden worden door hun witte, bacterie-achtige kolonievorming op zowel DTM als ESA.
De meeste dermatofyten zullen het ESA medium in 3 - 7 dagen blauwgroen
verkleuren. Als de groei op Sabouraud overeenkomt met die op ESA en DTM
kan de onderkant van de cultuur door het Sabouraud medium heen beoordeeld
worden. Dermatofyten kunnen vervolgens gedetermineerd worden door bestudering onder de microscoop. Hiertoe kan een monster dienen, dat van de
ESA zijde van de plaat met behulp van doorzichtige tape afgenomen dient te
worden. De tape met het monster eraan vast kan op een voorwerpglaasje geplakt worden zodat dit onder de microscoop bekeken kan worden. Kleurstoffen
zoals Lactofenol Katoen Blauw kunnen dienen om de visualisatie van het monster te verbeteren.
Algemene Dermatofyten
Nota bene: Onderaanzicht is het aanzicht van de kweek vanaf de bodem van
het plaatje door het Sabouraud medium heen.
Microsporum canis
DTM – Rood verkleuring van het medium
ESA – Blauw-groene kleurverandering in het medium. Wollig, wit middengebied; goudgele rand
SAB – Geel onderaanzicht
Microsporum gypseum
DTM – Rood verkleuring van het medium
ESA – Blauw-groene kleurverandering van het medium. Lichtbruine rand; wit,
snel spreidend mycelium
SAB – Crème tot lichtbruin onderaanzicht
Microsporum nanum
DTM – Rood verkleuring van het medium
ESA – Blauw-groene kleurverandering van het medium. Wit naar oker (geelbruin) poederige verschijning
SAB – Onderaanzicht is aanvankelijk oranje, later roodbruin
Microsporum gallinae
DTM – Rood verkleuring van het medium
ESA – Blauw-groene kleurverandering van het medium. Witte tot roze, fluwelen
verschijning
SAB – Onderaanzicht van rood pigment dat diffundeert in het medium
Epidermophyton floccosum
DTM – Rood verkleuring van het medium
ESA – Blauw-groene kleurverandering van het medium. Beperkte groei,
olijfgroen tot vaalgele groei
SAB – Bruin onderaanzicht
Trichophyton mentagrophytes
DTM – Rood verkleuring van het medium
ESA – Blauw-groene kleurverandering in het medium. Korrelige, witte suikerachtige verschijning
SAB – Variabel onderaanzicht
Trichophyton rubrum
DTM – Rood verkleuring van het medium
ESA – Blauw-groene kleurverandering van het medium. Witte, wollige, donzige
verschijning
SAB – Donkerrood onderaanzicht
Trichophyton verrucosum
DTM – Rood verkleuring van het medium
ESA – Blauw-groene kleurverandering van het medium. Fluwelen consistentie
en bolvormige, kleine kolonies
SAB – Wit, soms geel of grijs onderaanzicht
Trichophyton equinum
DTM – Rood verkleuring van het medium
ESA – Blauw-groene kleurverandering van het medium. Crème tot lichtbruin
en fluweelachtig
SAB – Geel tot roodbruin onderaanzicht
BEPERKINGEN: De volledige determinatie van dermatofyten wordt gedaan door
middel van microscopische waarnemingen direct van de cultuur of door middel
van een preparaat op een voorwerpglaasje; dit tezamen met PCR, fysiologische
en serologische testen.
Bewaar Schimmel Kweeksysteem in omgekeerde positie, deksel naar onder
Platen zijn stabiel bij een temperatuur tussen 2º en 20ºC tot de op de verpakking
aangegeven houdbaarheidsdatum
Gooi de gebruikte Platen op de juiste wijze weg, met voorkoming van verspreiding van de organismen, die gegroeid zijn.
Buiten bereik van kinderen houden
20°C
2°C
Het nemen van een monster:
Monsters worden genomen van een dier, dat verdacht is van een infectie met
dermatofyten. Ter plaatse kan het gebied schoongemaakt worden indien dit
verontreinigd is, maar de locatie dient wel droog te zijn voordat het monster
genomen wordt. Met een schone pincet en of scalpel worden geïnfecteerde
haren, schilfers, huid en korsten van de periferie van de laesie(s) afgenomen,
waar de groei meestal het meest actief is. Indien een Wood’se lamp wordt gebruikt, hebben fluorescerende haren en huid fragmenten de voorkeur evenals
gebroken haarschachten.
Procedure:
De pla(a)t(en) dien(t)en zo spoedig mogelijk geïnoculeerd te worden na monstername. Haal de pla(a)t(en) uit de verpakking, verwijder de deksel, druk het
Rev. 2014/06