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AGAR CHOCOLATE SUPLEMENTADO
Medio Agar Chocolate Suplementado
INTRODUCCIÓN:
El medio de CHOCOLATE preparado por MEDIBAC LAB es un medio permite el crecimiento de
microorganismos exigentes en sus requerimientos nutricionales, por ejemplo especies de
Streptococcus, Haemophilus y Neisserias patógenas.
COMPONENTES
1. Funda por 10 unidades
2. Inserto
MATERIALES REQUERIDOS NO
SUMINISTRADOS:
1. Asas Bacteriológicas
2. Guantes Estériles
3. Tapa bocas
4. Estufa a 37°C
5. Mechero de Bunsen.
METODOLOGÍA:
Principio del método: El medio de cultivo es ampliamente nutritivo por la presencia de peptona, tripteína, extracto de
levadura, extracto de corazón y almidón. El agregado de sangre y suplemento VITOX con solvente aporta nutrientes,
vitaminas y minerales adicionales. El cloruro de sodio mantiene el balance osmótico y el agar es el agente solidificante.
El agar GC Base para agar CHOCOLATE se prepara a partir del medio de cultivo deshidratado, materia prima producida
por la casa OXOID y tiene la siguiente composición: g/ l
Special peptone............................................15.0
Corn starch.....................................................1.0 g
Sodium Chloride..............................................5.0 g
Di-potassium hydrigen phosphate...................4.0 g
Potassium hydrogen phosphate......................4.0 g
Agar...............................................................10.0 g
VITOX SUPPLEMENT (OXOID)
REHYDRATION FLUID
Distilled water……………….10.0ml
Glucose……………………….1.0g
VITOX
Vitamin B12…………………..0.1mg
Adenine SO4……………….10.0mg
L- glutamine………………..100.0mg
Guanine HCl…………………0.3mg
p- Aminobenzoic acid………0.13mg
L- cystine……………………..11.0mg
NAD (Coenzyme I)……………2.5mg
Cocarboxylase………………...1.0mg
Ferric nitrate……………………0.2mg
Thiamine HCl…………………0.03mg
Cysteine HCl…………………..259.0mg
PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS:
La placa de agar Chocolate suplementado, de viene lista para ser utilizada.
CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD DE LOS REACTIVOS:
Al recibir las placas, almacenarlas en un lugar oscuro, colocando las placas en posición invertida para evitar que el agua de
condensación pueda caer sobre la superficie del medio, envueltas en su envase original, hasta justo antes de usarlas. Las
placas pueden inocularse hasta su fecha de caducidad (ver la etiqueta en el paquete) e incubarse durante los períodos de
incubación recomendados.
Este producto debe manipularse con cuidado evitando movimientos bruscos o caídas que puedan resquebrajar la capa del
medio.
De acuerdo al estudio (Condiciones de Almacenamiento de los Medios) realizados por Medibac Lab. Los medios de cultivos
preparados para su transportación tienen una tolerancia de hasta 24 horas con una temperatura de 2 a 35°C, una vez
llegado a su destino final el mismo debe ser almacenado a una temperatura de 4 a 8°C.
Fecha: 06/04/2015 Rev.01
Nota: El producto debe evitar temperaturas inferiores a -0°C para evitar congelación del medio, lo que ocasionaría el
deterioro del mismo, y evitar temperaturas superiores a 35°C para que no produzca condensación interna en la placa lo que
podría afectar la fidelidad de los resultados.
Conservado en condiciones óptimas el medio es estable hasta la fecha de expiración señalada.
PROCEDIMIENTO:
Cualquier muestra clínica puede ser procesada en este medio
1- Con asa bacteriológica estéril trabajando siempre a la llama del mechero, tomar una mínima muestra.
2. Sembrar suavemente sobre la superficie tersa del medio por el procedimiento de agotamiento.
3. El tiempo, la temperatura, y la atmósfera de incubación, dependerán del microorganismo que se quiera recuperar.
En general se recomienda:
Bacterias de fácil crecimiento: en aerobiosis, a 35-37 º C durante 18 a 24 horas.
Bacterias exigentes en sus requerimientos nutricionales: en atmósfera con 5 % de Co2, a 35-37 ºC durante 18-48
horas.
4. Al término de horas de incubación examinar el cultivo y determinar los estudios a seguir según las características de las
colonias.
CONTROL DE CALIDAD:
El agar Chocolate suplementado tiene un estricto control de calidad a lo largo del proceso de producción. El producto final
tiene un cuidadoso control para asegurar que cada lote llene las especificaciones del medio: Color, consistencia, tersura,
esterilidad, pH.
ASPECTOS FISICOS DEL MEDIO
ESTADO
Medio solido de color marrón, envasado en placa de petri.
CUMPLE
Color del medio solido
Marron
CUMPLE
pH
7,0 a 7,5
7,2
La consistencia del medio debe ser ligeramente dura, para que permita la
siembra de muestras sin romperse.
CUMPLE
Apariencia
Consistencia
4 mm
Volumen del medio
18cc que deben dar con una capa de 4 - 5 mm de agar en placa de petri.
Tersura
El medio debe ser completamente liso, no debe presentar rugosidad ni
burbujas que dificulten la siembra.
CUMPLE
El medio antes de usarse debe encontrarse libre de cualquier crecimiento
microbiano
CUMPLE
Esterilidad
El desempeño del medio se controla mediante el cultivo de cepas control ATCC de:
Streptococcus pyogenes 19615
Streptococcus pneumoniae 6305
Haemophilus influenzae 19418
Neisseria gonorrhoeae 19424
VALOR DE REFERENCIA:
Este medio al usarse, debe ser estéril y permitir un desarrollo óptimo de las cepas de referencia.
PRECAUCIONES Y ADVERTENCIAS:
- Solamente para uso diagnóstico in vitro. uso profesional exclusivo.
- No utilizar el producto si al recibirlo su envase está abierto o dañado.
-No utilizar el producto si existen signos de contaminación o deterioro, así como tampoco si ha expirado su
fecha de vencimiento.
- Utilizar guantes y ropa protectora cuando se manipula el producto.
- Considerar las muestras como potencialmente infecciosas y manipularlas apropiadamente siguiendo las
normas de bioseguridad establecidas por el laboratorio.
- Las características del producto pueden alterarse si no se conserva apropiadamente.
- Descartar el producto que no ha sido utilizado y los desechos del mismo según reglamentaciones vigentes.
Laboratorio Fabricante: Medibac
Química Responsable: Dra. Juana Cedeño Vélez.
Fecha: 06/04/2015 Rev.01