PUBLICACIÓN TRIMESTRAL DE IASA VOLUMEN 15 N° 30 PUBLICACIÓN TRIMESTRAL DE IASA VOLUMEN 15 N° 30 PUBLICACIÓN TRIMESTRAL DE IASA VOLUMEN 15 N° 30 Diagnóstico de Preñez en Bovinos E xisten diferentes recursos para el diagnóstico de vacas gestantes, los cuales se explican a continuación: 1) El primer recurso para identificar a las vacas vacías es el Retorno al Estro (18-24 días post servicio), es un método “rápido” para detectar preñeces, sin embargo, si se tiene una baja eficiencia en la detección de estros (que es frecuente), en ocasiones, un gran número de animales diagnosticados como vacíos llegaran como “gestantes” al diagnóstico de gestación por palpación. 2) La palpación rectal es la técnica más utilizada en el campo para diagnóstico de gestación (35-42 días post servicio) por ser una técnica económica, este método es muy útil y entre más práctica se tenga la detección será más temprana. Algunos autores consideran que la palpación en gestaciones tempranas pudieran incrementar el riesgo de muertes embrionarias (Abbitt et al., 1978; Franco et al., 1987; Paisley et al., 1978; Valliancourt et al., 1979; White et al., 1989), mientras que otros autores sugieren que este riesgo no es representativo (Studer, 1969; Thurmond and Picanso, 1993). Como no es posible distinguir de muertes embrionarias espontaneas o debidas a manipulación, tradicionalmente la palpación rectal se realiza después de los 30 días. 3) El ultrasonido es una técnica menos invasiva que la palpación rectal. Bajo condiciones normales en un establo, el diagnóstico de preñez se puede realizar de manera rápida y segura desde el día 26 post servicio (Filteau and DesCôteaux, 1998; Kastelic et al., 1991). Cuando se realiza entre el día 21 y 25 post servicio, la sensibilidad y la especificidad es de 44.8% y 82.3%, respectivamente, pero se incrementa al 97.7% y 87.7%, cuando se realiza entre los 26 y 33 días post servicio (Pieterse et al., 1990), es importante señalar que este método requiere de técnicos capacitados y la inversión de compra y mantenimiento es alta. 1 4) Existe también la determinación de los Niveles de Progesterona Sérica mediante la técnica de laboratorio, Radioinmunoensayo (RIA) desde los 18-24 días post servicio, tiene la desventaja de dar falsos positivos por la presencia de un quiste luteínico, piómetra, muerte embrionaria temprana, entre otras. 5) Medición de Glicoproteínas Asociadas a la Gestación (PAGs) mediante PCR, ELISA*. Recientemente se desarrolló un Ensayo-inmunoenzimático (ELISA) de campo que determina la presencia de PAGs. La Prueba de IDEXX® Visual Pregnancy, es una prueba de ELISA con un formato de captura de antígeno que detecta PAGs para diagnóstico de gestación a partir del día 28 post servicio y durante toda la gestación. Después del parto, las concentraciones de PAG decrecen constantemente a 499.60 ± 267.20 ng/ml, al día 14, 131.70 ± 77.90 ng/ml al día 30 y a 10.10 ± 7.80 ng/ml al día 60, con niveles indetectables a los 100 ± 20 al postparto (Zoli et al., 1992a). Esta prueba sólo necesita una muestra que puede ser suero o plasma, lo que es de utilidad ya que la misma muestra puede ser utilizada para la detección de otras enfermedades. Los resultados se obtienen rápidamente, pues la duración de la prueba es de aproximadamente dos horas; el diagnóstico de animales positivos o negativos se hace mediante el cambio de color en las placas, de transparente (negativo) hacia azul (positivo). Tiene una sensibilidad de 99.3% y una especificidad de 93.8 a 95.8%, lo que la hace una prueba confiable y segura que permite adelantar tratamientos correctivos para inseminar nuevamente a los animales. Esta prueba no requiere de personal técnico especializado para la toma y lectura de los resultados de las muestras. Respecto al manejo de las vacas que resultaron negativas a la prueba, se trabajará el protocolo que sea más conveniente para la explotación siendo los más utilizados los siguientes: PUBLICACIÓN TRIMESTRAL DE IASA VOLUMEN 15 N° 30 • Separar a las vacas vacías, palparlas para identificar si existen problemas anatómicos y/o determinar el tratamiento hormonal que el MVZ considere más adecuado para inseminar a la vaca en el menor tiempo posible. • Para el caso de las explotaciones que trabajan con protocolos de sincronización para inseminación a tiempo fijo como el OvSynch, se puede manejar la siguiente estrategia: - Día 21 después de la inseminación: Aplicación de GnRH. - Día 28 después de la inseminación: Diagnóstico de Gestación ELISA Visual • A las vacas negativas a la prueba se les aplica PGF2α (mismo día 28) - Día 30 después de la inseminación: Aplicación de GnRH. - Día 31 después de la inseminación: Inseminación (IATF) BIBLIOGRAFÍA DISPONIBLE CON LOS AUTORES MVZ. Mariana Serrano Asesor Técnico Reactivos Diagnósticos [email protected] 2 PUBLICACIÓN TRIMESTRAL DE IASA VOLUMEN 15 N° 30 Monitoreo del virus de PRRS a trav Estudio piloto en una granja C. Gomez1, C. Goodell1, C. Díaz Rayo2, 1 IDEXX Laboratories, Inc., Westbrook, ME; 2 Diagnosticos Integrales en Patologia Anima Introducción E l PRRS es una de las enfermedades con mayor impacto económico en las granjas de cerdos. Debido a que este virus es endémico en la mayoría de las regiones de producción porcina, el control de esta enfermedad es fundamental para mantener la salud y la productividad. Sin embargo y debido a que no existe una estrategia de control perfecta y efectiva, el control del PRRS debe estar basado y continuamente ajustado a la situación de cada granja. El objetivo a largo plazo de este estudio (actualmente en proceso) es la evaluación basada en los niveles de anticuerpos monitoreados en una granja mediante muestras de fluidos orales. En el presente trabajo se muestran los resultados de un primer muestreo realizado en las áreas de maternidad y finalización. Las muestras de fluidos orales fueron colectadas mediante cuerdas de algodón que fueron suspendidas por 30 minutos en los corrales. Las muestras fueron analizadas mediante el kit comercial IDEXX PRRS Oral Fluids Ab Test. La muestras con valor S/P ≥ 0.4, se consideraron positivas. Resultados Los resultados por nave se muestran en las siguientes tablas. Radios S/P ELISA PRRS Fluidos Orales 8.16 5.79 0.66 5.03 4.53 4.27 1.38 0.25 4 5 6 7 8 9 semanas semanas semanas semanas semanas semanas 1 2 3 4 5 16 17 18 19 20 21 22 23 semanas semanas semanas semanas semanas semanas semanas semanas 6 7 8 9 10 11 12 13 14 Edad en semanas y nave El estudio se llevó a cabo en una granja con 950 vientres en el estado de Sonora en México. La granja tuvo un brote de PRRS seis meses antes de la realización de este estudio. La vacunación con un intervalo de doce semanas (vacuna Ingelvac PRRS© MLV) además de la utilización de InmunoPRRS (inmunoglobulinas de origen aviar; Investigación Aplicada S.A. de C.V.) lograron estabilizar el virus de PRRS en el pie de cría. Corral 1 2 3 Promedio 3 6.29 6.06 5.92 2.99 0.96 Material y métodos 5.16 Nave 1 Corral 1 2 3 4 5 Promedio Edad en semanas Nave 3 Nave 4 Nave 2 Nave 5 Nave 6 4 semanas 5 semanas 6 semanas 7 semanas 8 semanas 9 semanas 8.39 8.45 7.92 7.81 8.23 8.16 3.91 1.78 4.33 2.79 2.13 2.99 0.35 1.62 0.39 1.59 0.84 0.96 0.54 0.42 1.06 0.4 0.89 0.66 1.6 1.58 2.55 0.3 0.86 1.38 0.14 0.44 0.34 0.13 0.19 0.25 Edad en semanas Nave 7 Nave 8 Nave 9 Nave 10 Nave 11 Nave 12 Nave 13 Nave 14 16 17 18 19 20 21 22 23 7.16 4.37 5.84 5.79 5.24 5.3 4.95 5.16 3.48 6.37 7.92 5.92 1.67 5.82 6.1 4.53 5.78 6.21 6.2 6.06 7.82 3.64 3.63 5.03 8.49 3.3 1.03 4.27 7.15 5.15 6.56 6.29 PUBLICACIÓN TRIMESTRAL DE IASA VOLUMEN 15 N° 30 vés de anticuerpos en fluidos orales: comercial de Sonora, México. A.Bedoy2, M. Serrano3, S. Zimmerman1 al-ITSON, Mexico, 3 Investigacion Aplicada S.A. de C.V, México. [email protected] Discusión y conclusiones En el presente estudio, la evaluación de las muestras de fluidos orales mediante la técnica de ELISA proporcionó vasta información a un bajo costo. En un estudio previo realizado en 12 laboratorios, se encontró que el análisis de anticuerpos mediante fluidos orales con la técnica de ELISA contaba con una alta repetibilidad –dichos laboratorios fueron capaces de reproducir sus propios resultados- y reproducibilidad –los resultados de los laboratorios concordaban entre sí-. La prueba tiene amplitud y valores S/P de 12 que no resultan poco comunes. Los rangos tan amplios en los valores S/P proveen más información y facilitan las comparaciones dentro y entre cada unos de los corrales. Los datos presentados sólo reflejan un instante del pasado, pero el virus de PRRS continúa circulando en la granja. Cada programa de control de PRRS debe contar con un proceso continuo de evaluación y ajustes. El monitoreo a partir de fluidos orales a intervalos de dos semanas cubre esta necesidad al crear una perspectiva panorámica de la circulación del virus en la granja. Lo anterior permite el desarrollo de técnicas racionales y eficientes a partir de los datos obtenidos para el control del PRRS en las piaras. MVZ. Gabriela Gutiérrez Gerente Reactivos Diagnósticos [email protected] En este estudio los valores S/P variaron de un 0.13 (nave 6, corral 4) a un 8.49 (nave 13, corral 1). Los datos muestran una clara disminución de los anticuerpos maternos en la nave 6 (cerdos de 9 semanas de edad), con circulación viral a partir de entonces. Esta información sirve como guía para la toma de decisiones de manejo, por ejemplo respecto a la frecuencia de vacunación o qué muestras deberán ser enviadas para RT-PCR o secuenciación. Por ejemplo, las muestras que son candidatas para un análisis molecular son aquéllas de naves en las cuales ya exista seroconversión. 4 PUBLICACIÓN TRIMESTRAL DE IASA VOLUMEN 15 N° 30 Influenza aviar subtipo H7N3, resultados serológicos de campo Guadarrama A. Cascante R. L os virus de Influenza Aviar tipo A, se dividen en subtipos basados en las relaciones antigénicas de sus glicoproteínas de superficie, la hemaglutinina (HA) y la neuraminidasa (NA). Un total de 17 subtipos de HA (H1-H17) y 9 diferentes NA (N1-N9) han sido identificadas1 2. Sólo los virus de los subtipos H5 y H7 son los causantes de la Influenza Aviar de alta patogenicidad en especies susceptibles2. IASA ha elaborado una vacuna que además de cumplir con los estándares que piden las autoridades mexicanas, se le han realizado mejoras que brindan una mejor respuesta inmune y una mejor protección a nivel de campo (Gráficos 1 y 2). 5 Emulmax® H7 (registro SAGARPA B-4579-054) tiene características que la hacen la vacuna en su tipo con mejores resultados en campo: ➢ Contiene 30% de masa antigénica obtenida de embriones SPF. ➢ Certificado lote a lote que contiene mínimo 512 Unidades Hemaglutinantes. ➢ Contiene un nuevo adyuvante importado que permite obtener hasta 1 logaritmo más en títulos de anticuerpos HI respecto a adyuvantes tradicionales. PUBLICACIÓN TRIMESTRAL DE IASA VOLUMEN 15 N° 30 En gallinas de postura comercial con 2 a 4 aplicaciones en etapa de crianza y desarrollo, Emulmax® H7 es capaz de generar una respuesta serológica con títulos de anticuerpos HI desde 6 hasta 10 Log2, lo que asegura una adecuada protección ante un desafío de campo, disminuyendo el impacto del virus de alta patogenicidad sobre el porcentaje de producción de huevo y sobre la mortalidad. En el pasado Simposium Internacional de Influenza Aviar organizado en León Guanajuato por SAGARPASENASICA y ANECA, se hizo mucho hincapié en la necesidad de la actualización de la semilla vacunal ante la observación por parte de las autoridades de diversidad genética de aislamientos de campo recientes. IASA ha insistido en la necesidad de este cambio de semilla, lo que aunado al mayor contenido antigénico y el uso de un adyuvante de alta calidad supondrán la obtención de biológicos altamente efectivos para el control y la posible erradicación de la Influenza Aviar H7N3 de alta patogenicidad. MVZ. Alberto Guadarrama Asesor Técnico Avícola [email protected] BIBLIOGRAFÍA: 1. Fouchier R.A., Munster V., Wallensten A., Bestebroer T.M., Herfst S., Smith D. et al Characterization of a novel Influenza A virus hemagglutinin subtype (H16) obtained from black-headed gulls. J.Virol 2005; 79:2814-22 2. Tong S. et al. A distinct lineage of influenza A virus from bats. Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 2012. 109:4269-4274. Actualidades sobre la Diarrea Epidémica Porcina y Estrategias de Control Munguía-Rosas J., González-Rodríguez W. RESUMEN En mayo del 2013, se confirmó de forma oficial la presencia en Estados Unidos del virus de la Diarrea Epidémica Porcina (PEDv). Para el caso México, el primer diagnóstico positivo por la técnica de Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) se dio en Agosto del 2013, sin embargo los casos positivos fueron reconocidos en Mayo del 2014. En Perú, las primeras descripciones se dieron en Octubre del 2013. La enfermedad ha seguido su diseminación, reportándose en Febrero del 2014 en Canadá, en Marzo en República Dominica y en Mayo en Colombia. KEY WORDS: Diarrea Epidémica Porcina, Epidemiología, México, Estrategias de Control, Feedback, Inmunoglobulinas. CLASIFICACIÓN Los Coronavirus pertenecen a la subfamilia Coronavirinae de la familia Coronaviridae del orden de los Nidovirales. Actualmente la subfamilia Coronavirinae está dividida en 4 géneros, incluyendo Alphacoronavirus, Betacoronavirus, Gammacoronavirus y Deltacoronavirus (Song y Park, 2012). El virus de la 6 PUBLICACIÓN TRIMESTRAL DE IASA VOLUMEN 15 N° 30 Diarrea Epidémica Porcina está clasificado como un Alphacoronavirus, adicionalmente en Estados Unidos, se identificó en Febrero del 2014 un Deltacoronavirus, también involucrado en casos de diarreas en lechones, sin embargo, en México se desconoce la presencia de dicho virus al igual que en otros países de América (Li et al., 2014; Wang et al., 2014). ESCENARIOS CLÍNICOS Los problemas en granja se han observado muy variados, sin existir un patrón definido, se han identificado presentación de un solo evento clínico de alta mortalidad y posterior retorno a los parámetros normales, también se ha observado la circulación persistente por varias semanas del virus en maternidades, con tasas de morbilidad y mortalidad variables (10 a 30%) y los “rebrotes” de enfermedad, en donde ocurre una reinfección del virus con un nuevo episodio clínico y elevación de la mortalidad en la etapa de lactancia (Quintero, 2014). IMPACTO ECONÓMICO El estimado de pérdidas anuales netas para la economía de los Estados Unidos por efecto del virus PED asciende de 900 a 1800 millones de dólares (Paarlberg, 2014). ASPECTO INMUNOLÓGICOS La estrategia más comúnmente usada para mitigar el impacto negativo de la enfermedad ha sido el uso de Feedback a partir de contenido intestinal y heces de animales sacrificados, sin embargo el uso de dicha estrategia ha proporcionado resultados poco satisfactorios en algunos casos. Estudios realizados de forma experimental utilizando cantidades constantes de virus purificado y aplicado a cerdas de 80 días de gestación por vía oral, durante una semana con y sin inoculación 3 semanas posteriores, concluyen que no existen diferencias significativas entre grupos tratados con una segunda inoculación, en las cerdas se observó que entre 6 y 8 semanas después de la inoculación, los anticuerpos volvieron a niveles basales, mientras que en las camadas los anticuerpos fueron detectables hasta los 10 días de edad, por lo que los autores concluyen que la infección con el virus de PED aún en cantidades constantes induce una respuesta inmune que puede ser de corta duración y no provee una sólida protección a los lechones (Murtaugh et al., 2014), dicha aseveración nos invita a seguir buscando opciones para el manejo inmunológico de la enfermedad. La inmunidad pasiva protege a los lechones durante 4 a 14 días de edad (Song y Park, 2012). Algunos estudios revelan que altos títulos de IgA secretora en la leche están correlacionados con protección de los lechones lactantes contra el virus de la gastroenteritis transmisible (Bohl et al., 1972; Saif et al., 1972), y el virus PED (Ha et al., 2010), en tanto que los anticuerpos de tipo IgG en la leche proveen poca protección a los lechones lactantes y la presencia de anticuerpos neutralizantes en el suero de la cerda no están correlacionados con la protección de los lechones recién nacidos (Ha et al., 2010), dada la información anterior podemos considerar a la inmunidad pasiva como una opción para el manejo de la enfermedad. ALTERNATIVAS PARA DISMINUIR EL IMPACTO ECONÓMICO Dado que el desarrollo de vacunas y su efectividad aún no es 100% efectivo, se ha propuesto al uso de anticuerpos de origen aviar como una alternativa para el control de la enfermedad (Kweon et al., 2000; Mavromichalis et al., 2014). En México se ha evaluado el desempeño de una formulación a base de Inmunoglobulinas de origen aviar, generada a partir de aislamientos realizados en México, en una granja en brote agudo se observó un efecto de disminución de la mortalidad desde el primer momento de la aplicación y una reducción en el tiempo de duración del brote, en otra granja con circulación constante del virus se logró regresar a los parámetros normales de la granja, posterior al establecimiento del programa a base de IgY en los lechones, en otra granja con baja mortalidad pero con un alto índice de cerdos de segunda al destete, se logró mejorar la eficiencia productiva de los lechones, incrementando el peso al destete e incrementando la homogeneidad, actualmente se está trabajando con una concentración mayor de anticuerpos en el producto y en la selección de las cepas virales de acuerdo a sus características de inmunogenicidad, aún queda mucho trabajo por hacer, sin embargo los resultados al momento son alentadores y muestran una opción para el manejo de la enfermedad. BIBLIOGRAFÍA DISPONIBLE CON LOS AUTORES MVZ. Jesús Munguía / Gerente División Cerdos [email protected]
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