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CONTROL BIOLÓGICO
ISSN: 2448-475X
EVALUACIÓN DE Trichoderma sp., COMO AGENTE DE CONTROL BIOLÓGICO
DE Dendroctonus spp. (CURCULIONIDAE: SCOLYTINAE) EN LA SIERRA GORDA
DE QUERÉTARO, MÉXICO
Víctor J. Arriola-Padilla1 , Janet Renteria-Bailon2, Adriana Rosalía Gijón-Hernández1, Lidia
Ramírez-Huerta1 y Martín Enrique Romero-Sánchez1
1
Centro Nacional de Investigación Disciplinaria en conservación y Mejoramiento de Ecosistemas Forestales - INIFAP.
Avenida Progreso 5, Colonia Barrio de Santa Catarina, Del. Coyoacán, Ciudad de México C. P. 04010.
2
Tecnológico de Estudios Superiores de Huixquilucan. Barrio el Río, s/n, La Magdalena Chichicaspa, municipio de
Huixquilucan, Estado de México C. P. 52773.
Autor de correspondencia: [email protected]
RESUMEN. El género Dendroctonus Erichson es una de las principales causas que afectan los bosques de pino en
México; las perdidas ecológicas que ocasiona afectan grandes superficies en espacios de tiempo muy cortos. De
acuerdo con la NOM-019–SEMARNAT-2006 las especies son controlas con el derribo o descortezado de los árboles
afectados y el empleo de insecticidas que pueden ser nocivos al ambiente. Por lo anterior el objetivo de la presente
investigación fue evaluar la efectividad del hongo Trichoderma sp., para el control de insectos descortezadores
Dendroctonus spp. Se aplicaron cinco tratamientos que consistieron en tres concentraciones de conidios/mililitro: alta
3.6x10−8 , media 9x10−7 , y baja 5x10−7 , un testigo a base de producto comercial con Metarhizium anisopliae
(5x10−9 ) y un testigo absoluto de agua. La aplicación se realizó por medio de aspersión en arboles de Pinus greggi del
predio “el Madroño” ubicado en la Reserva de la Biosfera Sierra Gorda, Querétaro. El experimento se llevó a cabo
durante septiembre de 2015. La variable evaluada fue la mortalidad de los descortezadores. Sobre los árboles infestados
se determinaron tres especies: Dendroctonus frontalis, D. mexicanus y D. valens. De acuerdo al análisis estadístico
empleado, no hubo diferencias significativas entre tratamientos. Para el caso de los testigos, los tratamientos utilizados
a base del conidio mostraron valores estadísticamente significativos para el porcentaje de mortalidad con respecto al
producto comercial y al testigo con agua. La concentración alta (3.6x10−8 ) fue la que tuvo el mayor porcentaje de
mortalidad; sin embargo, la dosis baja también presento altos porcentajes de mortalidad.
Palabras clave: Control biológico, descortezadores, hongos entomopatógenos, Pinus.
Evaluation of Trichoderma sp., as biological control agent Dendroctonus spp.
(Curculionidae: Scolytinae) in the Sierra Gorda de Querétaro, Mexico
ABSTRACT. The genus Dendroctonus Erichson is one of the leading causes affecting pine forests in Mexico; causing
ecological losses due to large forest areas in very short time spaces are affected. According to the NOM-019SEMARNAT-2006, Dendroctonus species are controlled with the demolition or debarking of affected trees, and use
of pesticides that can be harmful to the environment. Therefore, the aim of this research was to evaluate the
effectiveness of the fungus Trichoderma sp. to control bark beetles Dendroctonus spp, as an option for biological
control. Five treatments which consisted of three concentrations of conidia / ml were applied/ mL: high 3.6x10−8 ,
medium 9x10−7 , and low 5x10−7 , a witness based commercial product with Metarhizium anisopliae and an absolute
control of water. The application was made by spraying trees of Pinus greggi at the property known as "el Madroño"
located in the Biosphere Reserve Sierra Gorda, Queretaro. The experiment was conducted during september 2015.
Percentage of dead organisms was the variable evaluated in this study. The species founded over infested trees were:
Dendroctonus frontalis, D. mexicanus and D. valens. According with the statistical analysis used, there were no
significant differences between treatments. In the case of controls, treatments based on the entomopathogenic fungi
showed statistically significant values for mortality rate compared to the commercial product and the witness with
water. The treatment with the highest percentage of mortality was elevated concentrations of Trichoderma (3.6x10−8 );
however, the low doses also present high mortality rates
Keywords: Bark beetles, biological control, entomopathogenic fungi, Pinus.
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Entomología mexicana, 3: 239−243 (2016)
INTRODUCCIÓN
La superficie afectada anualmente por plagas y enfermedades forestales es en promedio de
43,551 hectáreas; los insectos descortezadores representan alrededor de 39.8 % de afectación
(CONAFOR, 2013). Durante 2012 y 2013 las poblaciones de insectos descortezadores se han
incrementado en varios estados de la República Mexicana. El género Dendroctonus Erichson es de
gran importancia ya que presenta amplia distribución geográfica en Norte y Centro América y es
responsable de pérdidas económicas y cambios ecológicos irreversibles en bosques México
(Cibrián et al., 1995).
Querétaro es uno de los estados comprendidos en la región centro del país ubicado en la Franja
Volcánica Transmexicana donde se encuentran varias especies de Dendroctonus. Al noreste, en el
municipio de Landa de Matamoros, existe una zona de sobre posición por D. frontalis, D.
mexicanus, y D. valens en Pinus greggii Engelm a 1,800 msnm. (Zuñiga et al., 1999) y que ha sido
afectada en los últimos años por estos descortezadores.
La NOM-019-SEMARNAT-2006 (DOF, 2008) indica las medidas para el control de estos
insectos y sugiere el empleo de insecticidas; los cuales se han evaluado y recomendado en México
(Arriola et al., 2014; Cibrián et al. 2015; Gochez-López et al., 2015; Sánchez-Martínez et al., 2007;
Torres y Sánchez, 2005). Sin embargo, el empleo de alternativas menos contaminantes ofrecen una
opción para el monitoreo, control y manejo de descortezadores con el uso de semioquímicos
(Sánchez et al., 2008; Sánchez-Martínez et al., 2007) y entomopatógenos (Arriola et al., 2014;
Cibrián et al., 2015).
El empleo de entomopatógenos nativos es considerado como la opción viable. Algunas cepas
de hongos y nematodos han sido utilizadas como agentes de control biológico (ACB) (Cano, 2011).
Trichoderma se encuentra especialmente donde existe materia orgánica o desechos vegetales en
descomposición (Sivila y Álvarez, 2013). Jassim et al. (1990) muestra los efectos de Trichoderma
harzianum y T. polysporum sobre el quinto estadio de larvas de Scolytus multistriatus y S. scolytus
(Coleoptera: Scolytidae), criados en laboratorio en medio artificial, ya que al inocular a los insectos
con los hongos, la mortalidad aumento en 80 %. El hongo entomopatógeno Trichoderma se ha
utilizado para el control de descortezadores anteriormente y se ha probado su efectividad en
condiciones de laboratorio (Gijón-Hernández et al., 2015).
Dado que se ha probado la efectividad en condiciones de laboratorio y a la disponibilidad de
cepas aisladas de Trichoderma sp., el objetivo de este trabajo fue evaluar a este hongo en el control
de descortezadores (Dendroctonus spp.) en la Sierra Gorda de Querétaro.
MATERIALES Y MÉTODO
Se establecieron tres sitios en bosques de pino infestados por descortezadores localizados en el
predio “El Madroño” del municipio Landa de Matamoros en la Sierra Gorda de Querétaro (SGQ),
21° 16’ 11.4’’ N y 99° 09’ 38.0’’ O, con una altitud promedio de 1,652 msnm. La vegetación de
esta región está representada principalmente por Pinus gregii, P. patula, y Quercus sp; los climas
dominantes son del tipo semicálido subhúmedo con lluvias en verano de menor humedad (46.5 %),
templado subhúmedo con lluvias en verano de mayor humedad (28.6 %), semicálido subhúmedo
con lluvias en verano de mayor humedad (8.6 %), semicálido subhúmedo con lluvias en verano de
humedad media (7.9 %), templado húmedo con abundantes lluvias en verano (5.6 %), cálido
subhúmedo con lluvias en verano de menor humedad (1.9 %) y semiseco cálido (0.9 %) (INEGI,
2010).
Se seleccionaron árboles con nivel de ataque fase uno (Billings et al., 1990) en la que se observa
follaje verde, grumos blandos de resina en la corteza, nivel de infestación homogéneo y un diámetro
promedio de 25 cm a la altura del pecho (DAP) de 1.3 m.
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Arriola-Padilla et al.: Evaluación de Trichoderma sp., como agente de control biológico de Dendroctonus spp.
Se establecieron bloques al azar y se realizaron tres repeticiones por cada tratamiento: “alto”
(3.6x10−8), “medio” (9 x10−7) y “bajo” (5 x10−7) de cepas de Trichoderma sp. (Gijón-Hernández
et al., 2015), testigo (agua) y testigo producto comercial (Metarhizium, 5x10−9) (15 árboles). El
producto se preparó a razón de 2:1, utilizando 2 gr de formulación por un litro de agua. Para cada
preparación se utilizaron 10 l de agua potable, al cual se le agregó 20 gr de formulación y 4 ml de
Tween 20 como dispersante, homogenizando el producto por agitación.
La primera aplicación se realizó en septiembre de 2015 y la evaluación a los 20 días después y
consistió en tomar tres muestras de corteza 10 x 10 cm a tres diferentes alturas del árbol (0-2 m, 24 m y 4-6 m). Las muestras presentaron galerías y orificios de entrada y emergencia de
descortezadores. Las muestras se colocaron en bolsas de plástico, etiquetaron y resguardaron dentro
de una caja para su transportación al laboratorio de Sanidad forestal del CENID-COMEF para su
revisión. Posteriormente se repitió la aplicación a los 33 días y la segunda evaluación se realizó a
los 65 días.
Para el análisis estadístico, se evaluó el porcentaje de mortandad de adultos y larvas
Dendroctonus spp., mediante el programa estadístico libre “R” (www.r-project.org).
Los datos se analizaron en forma combinada, es decir del porcentaje de mortandad de los
insectos vivos y muertos de la primera y segunda evaluación. Los datos fueron transformados para
cumplir con los supuestos de normalidad. Se aplicó la prueba de normalidad de Shapiro-wilk y la
prueba de Levene (Levene test) para homogeneidad de varianzas en la variable respuesta.
Posteriormente se realizó un análisis de varianza (ANOVA) para determinar si las diferentes
concentraciones de Trichoderma sp., tuvieron entre ellas, un desempeño significativamente
diferente y con respecto a los testigos. Finalmente se realizó una comparación de medias de Tukey
HSD.
Para determinar si los escarabajos fueron afectados por el hongo Trichoderma sp., se colocaron
en cajas Petri con Papa Dextrosa Agar (PDA) en condiciones de temperatura y humedad
controladas. Los descortezadores recolectados fueron determinados por morfología externa
(Cibrián, et al., 1995; Nunes y Lenín, 2004) y extracción de genitalia (Perusquía, 1978; Cibrián et
al., 2015).
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
El porcentaje de mortandad de los tratamientos nos muestra que el mayor valor fue para el
tratamiento “alto” en el sitio 2, “bajo” y “alto” en el sitio 1 con valores de mortalidad de 100 %,
94,73 % y 84.3 %, respectivamente; mientras que, con el 0 % se presentó para el testigo absoluto
(Cuadro 1).
Respecto a las pruebas estadísticas aplicadas, en todos los casos hubo normalidad de acuerdo al
test usado (p < 0.05). En el caso de homocedasticidad, los porcentajes de sobrevivencia mostraron
valores significativos (F < 0.05, p < 0.05). Se utilizó un nivel de significancia (α) con valor de 0.05
para el análisis de varianza (ANOVA) (Cuadro 2).
De acuerdo con el análisis de varianza, hubo diferencias significativas entre los tratamientos.
Por esta razón, se aplicó la prueba de Tukey HSD para evaluar cuál de los tratamientos tuvo el
mejor desempeño. El resultado fue que las dosis altas y bajas fueron las que presentaron mejor
desempeño (p = 0.01 y 0.02, respectivamente).
Durante el aislamiento de los insectos se determinó que en el predio “El Madroño” se
presentaron los siguientes descortezadores: Dendroctonus frontalis, D. mexicanus y D. valens,
mismos que indica Zuñiga et al. (1999) para esa zona. Se confirmó la presencia de Trichoderma
sp., en las tres especies durante la identificación taxonómica y análisis de laboratorio.
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Entomología mexicana, 3: 239−243 (2016)
Cuadro 1. Porcentaje de mortandad de los tratamientos sobre Dendroctonus spp.
Sitio
1
1
1
1
1
2
2
2
2
2
3
3
3
3
3
Tratamiento
TrA
TrM
TrB
TA
TC
TrA
TrM
TrB
TA
TC
TrA
TrM
TrB
TA
TC
Vivos
10
24
2
21
5
0
5
15
12
2
8
3
3
20
7
Muertos
54
12
36
10
8
13
18
13
0
6
8
3
16
0
25
Mortandad (%)
84.37 %
33.33 %
94.73 %
32.25 %
61.53 %
100 %
78.26 %
46.42 %
0%
75 %
50 %
50 %
84.21 %
0%
78.12 %
TrA: alta, TrM: media, TrB: baja, TA: testigo absoluto, TC: testigo comercial.
Cuadro 2. Análisis de varianza de los porcentajes de mortandad (ANOVA).
Dosis
Alto
Medio
Bajo
Producto
Testigo
% sobrevivencia*
Error estándar
0.102
0.153
0.153
0.153
0.153
Valor T
-0.374
-0.374
-1.434
-0.676
-4.044
P
0.716
0.716
0.182
0.514
0.002
*F = 5.24, p = 0.015
CONCLUSIÓN
Las aplicaciones de Trichoderma sp., mostraron efecto en la mortandad del insecto. No se
encontraron diferencias estadísticamente significativas entre los tratamientos “alto”, “medio” y
“bajo”, pero si en comparación a los dos testigos utilizados. Debido al efecto y a la concentración
de los tratamientos con Thricoderma sp., se sugiere que concentraciones bajas (5 x10−7) tienen
buen desempeño en el control de descortezadores.
Agradecimientos
Al Instituto de Investigaciones Forestales, Agrícolas y Pecuarias (INIFAP) por el
financiamiento otorgado para la realización de esta investigación con No. de Proyecto SIGI
16433532511: “Generación de nuevas estrategias de monitoreo y control de los insectos
descortezadores Dendroctonus mexicanus, Dendroctonus frontalis e Ips lecontei, mediante el uso
de semioquímicos y entomopatógenos” (2014-2016).
Literatura Citada
Arriola-Padilla, V. J., Camacho, A. D., Reséndiz, J. F. M. y A. R. H. Gijón. 2014. Manual sobre alternativas
para el manejo de descortezadores y muérdago enano en áreas naturales protegidas en el Eje
Neovolcánico Transversal. Manual Técnico Num. 13. CENID-COMEF, INIFAP. México, D.F.,
México. 44 p.
242
Arriola-Padilla et al.: Evaluación de Trichoderma sp., como agente de control biológico de Dendroctonus spp.
Billings, R. F., Pase III H. A. y J. L. Flores. 1990. Los escarabajos descortezadores del pino, con énfasis en
Dendroctonus frontalis: Guía de campo para la inspección terrestre. Texas Forest Service
Publication 146. 19 p.
Cano, M. A. 2011. Interacción de microorganismos benéficos en plantas: Micorrizas, Trichoderma spp., y
Pseudomonas spp. Revista Fitosanidad, 14(2): 15−31.
Cibrián, T. D., Méndez, D, J., Campos, B. M., Yates, R. H. O. y J. L. Flores. 1995. Insectos Forestales de
México/Forest Insects of México. Universidad Autónoma Chapingo. México. 453 p.
Cibrián, T. D., Quiñones, S. A. F., Quiñones, S. B., Olivo M. J. A., Robles, S. U., Hernández, L. V. E. A.,
Gamboa, S. J. L y V. Aguilar. 2015. Manual para la identificación, manejo y monitoreo de insectos
descortezadores de pino. Comisión Nacional Forestal. Universidad Autónoma Chapingo. 62 p.
Diario Oficial de la Federación (DOF). 2008. Norma Oficial Mexicana NOM-019-SEMARNAT-2006. Que
establece los lineamientos técnicos de los métodos para el combate y control de insectos
descortezadores. México. 16 p.
Gijón-Hernández, A. R. Trejo-Sandoval, Z., López-Guzmán, C. M., Ramírez-Huerta, L., Arriola- Padilla,
V. J. y I. M. Pérez-Gálvez. 2015. Caracterización y efectividad de Trichoderma spp., sobre insectos
descortezadores de pino. Entomología mexicana, 2: 293−299.
Gochez-López, E, Arriola-Padilla, V. J., Perea-Alcalá, A., Reséndiz-Martínez, J. F. y A. D. Camacho. 2015.
Insecticidas sistémicos para el control de Dendroctonus adjunctus Blandford, 1897 en el Nevado de
Toluca. Revista Mexicana de Ciencias Forestales, 6(27): 50−63.
Instituto Nacional de Estadística y geografía (INEGI). 2010. Prontuario de información geográfica
municipal de los Estados Unidos Mexicanos Landa de Matamoros, Querétaro. Clave geoestadística
22010 México.
Jassim, H. K., Foster, H. A., Fairhurst, C. P. 1990. Biological control of Dutch elm disease: Larvicidal
activity of Trichoderma harzianum, T. polysporum and Scytalidium lignicola in Scolytus scolytus and
S. multistriatus reared in artificial culture. Annals of Applied Biology, 117: 187–196.
Nunes, Z. C. y D. A. M. Lenín. 2004. Guía para la identificación de gorgojos descortezadores del pino e
insectos asociados. Primera edición. Universidad Católica Agropecuaria del Trópico Seco. Proyecto
Manejo Integrado del Descortezador del Pino, EAGE-FAITAN. Nicaragua. 33 p.
Sánchez-Martínez, G., Narváez-Flores, R. y J. A. Olivo-Martínez. 2008. Ciclo biológico y patrón de
dispersión estacional del Descortezador de las alturas (Dendroctonus adjunctus Blandford) en la
Sierra la Raspadura, Chihuahua. Folleto Técnico. INIFAP, CIRNOC. 31 p.
Torres, E. L. M. y J. A. S. Sánchez. 2005. Manejo integrado del escarabajo descortezador Dendroctonus
adjunctus Blandford en los bosques de Pinus rudis en el estado de Coahuila. Instituto Nacional de
Investigaciones Forestales, Agrícolas y Pecuarias. Centro de Investigación Regional de Noreste.
Campo Experimental Saltillo. México. Folleto Técnico Núm. 12. 34 p.
Zúñiga, G., Mendoza, G., Cisneros, R. y Y. Salinas-Moreno. 1999. Zonas de sobreposición en las áreas de
distribución geográfica de las especies mexicanas de Dendroctonus Erichson (Coleóptera:
Scolytidae) y sus implicaciones Ecológico-Evolutivas. Acta Zoológica Mexicana (n. s.), 77: 1−22.
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