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Producción de Bioinsumos:
Reproducción de hongos benéficos
para la agricultura
Lic. Adriana Ramos
PAI IVIC
Extracción de Hongos de muestras de
suelo
Extracción del suelo
10 g de suelo sin piedras en 60 ml
de agua destilada en un beaker
Agitar por 2 horas
Hacer diluciones seriadas (10-2 y
10-3)
Preparación de Medios
Preparación de
medio
PDA (Potato Dextrosa
Agar): 39 gr de PDA en 1 L
de agua destilada
ó
APA (Agua de Papa Agar):
250 g de papa pelada, cocida
en 1 L de agua por 30’ y
filtrada + 10 g azúcar + 18 g
de agar
1
Inmersión
en Plato
Agar (IPA)
2
Dilución en
Plato Agar
(DPA)
Crecimiento en placas
3
Placa de
Petri con
PDA
Dejar en
cámara de
crecimiento
por dos días
3 gotas de
solución
de suelo
Extracción
de hongos
de Tejido
vegetal
Placa de
petri
Tubo de
IDENTIFICACIÓN DE HONGOS
24 h
Metodología
1
2
Placa de petri
con porción del
microorganismo
4
Tapar con papel
aluminio
Dejar crecer 48 horas más en
cámara de crecimiento
3
Voltear
IDENTIFICACIÓN DE
TRICHODERMA
Observar en el
microscopio
Técnica de la cinta
pegante
IDENTIFICACIÓN DE TRICHODERMA
Trichoderma virens
Colonia en
PDA
Gliocladium sp.
Colonia en
PDA
Trichoderma longibranchiatum
Trichoderma harzianum
Pruebas de contraste
2
1
Placa de petri
con medio PDA
Porción del
patógeno
Porción de
Trichoderma sp.
(antagonista)
3
Dejar en crecimiento por 5 días
4
Medir el crecimiento (cm) de cada
microorganismo diariamente
Pruebas de contraste
5to
día
Vs Fusarium sp. Rhizoctonia
sp.
Macrophomin
a sp.
Trich 209
6,4 / 2,6
5,8 / 3,2
6,7 / 2,3
Trich 202
6,6 / 2,3
5,8 / 3,2
5,5 / 3,5
Trich Tabay
7,1 / 1,9
5,7 / 3,3
6,0 / 3,0
Trich 202
Macrophomina sp.
Rhizoctonia sp.
Fusarium sp.
Trich Tabay
Macrophomina sp.
Rhizoctonia sp.
Fusarium sp.
Trich 209
Macrophomina sp.
Rhizoctonia sp.
Fusarium sp.
Trich Tabay Vs/
Fusarium
Microparasitismo
Trich Tabay Vs/
Macrophomina
Microparasitismo
Producción por Fermentación Sólida
Botellas pequeñas:
20 g arroz
10 ml agua
Olla de presión por 1 hora
Producción por Fermentación Líquida
Fuentes
nutricionales
Procedimiento
Sales
(constantes)
1. Arroz
200 g arroz entero cocido en 1 L de agua
destilada por 30’. Luego Filtrado
1 g/L de MgSO4
7H2O
2. Papa
100 g de papa sin concha picada, cocida en 1
L de agua destilada por 30’. Luego filtrada
0,002 g/L de
KHPO4
3. Plátano
100 g de plátano maduro con concha picado,
cocido en 1 L de agua destilada por 30’. Luego
filtrada
4. Maíz
100 g de harina de maíz precocida disuelta en
1 L de agua destilada. Luego Filtrada
5. Levadura
10 g de levadura disuelta en 1 L de agua
destilada
6. Úrea
3 g de úrea disuelta en 1 L de agua destilada
Procedimiento
1
3
2
4
Fermentadores: Botellas comunes
Esterilización
Inoculación
Tratamientos en
Fermentación Estática
Duración: 7 días
ÚREA LEVADURA MAÍZ
PAPA
PLÁTANO
ARROZ
Resultados
140000000
120000000
100000000
80000000
UFC/ml
60000000
Con Azúcar
Sin Azúcar
40000000
20000000
0
Plátano
Arroz
Papa
Tratamiento
Maíz
Levadura
Plátano
Arroz
Papa
Maíz
¡Muchas Gracias!
Adriana Ramos
PAI IVIC
Laboratorio de Ecología de Suelos
02125041462/04265183595
[email protected]