1. Ingeniería

MODULO AYUDAS DIAGNOSTICAS
LABORATORIO CLINICO
DOCENTE
ADRIANA TORRES RANGEL
BACTERIOLOGA
ESP. GERENCIA DE LA CALIDAD Y AUDITORIA
EN SALUD
LABORANDO
HOSPITAL LOCAL DEL NORTE
SECRETARIA DE SALUD DEPARTAMENTAL
DESARROLLO DE LA CLASE
1. PRESENTACION DEL TEMA TUBERCULOSIS Y
LEPRA
2. MONTAJE DE BACILOSCOPIA - COLORACION
ZN
3. ACTIVIDAD LUDICA
TUBERCULOSIS Y BACILOSCOPIA
GLOSARIO
Tuberculosis: enfermedad infecto-contagiosa bacteriana producida por las
micobacterias del complejo tuberculosis, con diversas manifestaciones
clínicas.
Baciloscopia: búsqueda microscópica mediante la coloración de Ziehl
Neelsen de bacilos ácido-alcohol resistentes en cualquier espécimen
clínico.
Bacilos Ácido Alcohol Resistentes (BAAR): bacilos que contienen en su
pared celular ácidos micólicos, péptidos y glicolípidos capaces de retener la
fucsina, posterior a la decoloración con alcohol ácido.
Microorganismos ácido alcohol sensibles: que se colorea con el azul de
metileno, durante la coloración de ZN.
GLOSARIO

Coloración de Ziehl Neelsen (ZN): coloración específica para
bacilos ácido alcohol resistentes. Se realiza en 3 tiempos: tinción
(fucsina), decoloración (alcohol-ácido) y contraste (azul de
metileno).

Mycobacterium tuberculosis: micobacteria perteneciente al
Complejo Mycobacterium tuberculosis, causante de tuberculosis.

Sintomático Respiratorio (SR): según el Programa Nacional de
Control de Tuberculosis (PNCT), define: persona con tos y
expectoración por más de quince días.

Complejo Mycobacterium tuberculosis: está conformado por
Mycobacterium
tuberculosis,
Mycobacterium
africanum,
Mycobacterium bovis, Mycobacterium microti, Mycobacterium
caprae y Mycobacterium pinnipedii. Causante de tuberculosis.
TUBERCULOSIS

OMS
cada segundo se produce en el mundo una nueva infección por
el bacilo de tuberculosis y que una tercera parte de la población mundial
está actualmente infectada por el bacilo de tuberculosis.

Afecta
grupos de edad económicamente activa (15-50 años) principalmente en
los países en desarrollo

Se han identificado factores que influyen en la morbilidad por tuberculosis en el
mundo como son; la pobreza, negligencia en el diagnóstico así como en el tratamiento
y la pandemia de VIH/SIDA.

Para el año 2011 Colombia reporto una incidencia de 25,4 casos por 100.000
habitantes.
TUBERCULOSIS

La TB es una enfermedad infecciosa crónica causada por el complejo Mycobacterium
tuberculosis, el cual puede afectar cualquier órgano o tejido, sin embargo, la forma
más común de la enfermedad es la Pulmonar
Principal Síntoma

Tos con expectoración mucoide o mucopurulenta por más de 15 días, “Sintomático
Respiratorio”

Hemoptisis

Fiebre

Sudoración nocturna

Malestar

Dolor torácico

Astenia

Anorexia

Pérdida de peso
Tuberculosis extrapulmonar : Pleural, ganglionar
Grave: meningitis tuberculosa
TUBERCULOSIS
TUBERCULOSIS
Clasificación de caso Condición de
ingreso
Nuevo

Paciente que nunca recibió tratamiento - menos de cuatro semanas.
Recaída

Paciente tratado que ha sido declarado y es diagnosticado nuevamente con
tuberculosis bacteriológicamente positiva (baciloscopia o cultivo).
Fracaso

Paciente con baciloscopia o cultivo inicial positivo que siguió positivo al cuarto
mes o más de haber comenzado el tratamiento.

En casos MDR se considera como fracaso al paciente con dos o más cultivos
positivos tomados con por lo menos un mes de diferencia en los últimos 12
meses de tratamiento, o si uno o más de los tres cultivos tomados al final del
tratamiento son positivos.
Abandono

Todo paciente que regresa al tratamiento después de haberlo interrumpido un
mes o más sin indicación médica
Diagnóstico Bacteriológico de Tuberculosis y
Micobacteriosis
“BACILOSCOPIA”
LA BACILOSCOPIA tiene varias utilidades:

Diagnóstico: para la detección de todo sintomático respiratorio con una
baciloscopia positiva de diagnóstico, debe ingresar al programa.

Control de tratamiento: se debe realizar baciloscopia, al 2º- 4º- 6º mes o al
término del tratamiento.

Si la baciloscopia al 2°, mes de tratamiento, es positiva (sospecha de fracaso) se
debe realizar cultivo, si es positivo se realiza identificación y pruebas de
sensibilidad de Mycobacterium tuberculosisa los fármacos antituberculosos.

Si la baciloscopia al 4°, 6° mes ó al termino del tratamiento, es positivas
(fracaso) se debe realizar cultivo, si es positivo se realiza identificación y
pruebas de sensibilidad de Mycobacterium tuberculosisa los fármacos
antituberculosos.

Investigación epidemiológica: se realiza baciloscopia y cultivo a las personas SR
que sean contactos de pacientes con tuberculosis.
BASILOSCOPIA
Es la búsqueda microscópica mediante la coloración de
Ziehl Neelsen (ZN) de Bacilos Ácido-Alcohol Resistentes
(BAAR) en cualquier espécimen clínico
DEFINICION OPERATIVA DEL CASO
TUBERCULOSIS PULMONARcaso Tuberculosis pulmonar

Sospechoso
Persona que presenta “tos con expectoración mucoide o mucopurulenta por
más de 15 días de evolución

Confirmado por laboratorio
Caso con baciloscopia positiva para bacilos ácido alcohol resistentes (BAAR)
o cultivo positivo para Mycobacterium tuberculosis

Confirmado clínicamente
Caso sospechoso con baciloscopia y cultivo negativo, que cumple con criterio clínico,
radiológico y/o prueba de tuberculina positiva.

Confirmado por nexo epidemiológico
Caso sospechoso con criterio bacteriológico negativo que presenta criterios clínico y
epidemiológico positivos.
LINEAMIENTOS DE BIOSEGURIDAD PARA EL
PERSONAL

Todo el personal en el momento deberá ser claramente instruido acerca
de cómo se transmite la enfermedad y de las medidas de bioseguridad
que deberá aplicar en su trabajo cotidiano.

Cuando el personal del laboratorio presente sintomatología respiratoria
(tos y expectoración por más de quince días), se le debe practicar
baciloscopia seriada y cultivo.

Los trabajadores en estado de inmunocompromiso, o con alteración en
piel evitar todo contacto directo con pacientes, muestras,
desinfectantes y material contaminado hasta que haya sanado
completamente.

En el laboratorio no se deben usar joyas durante el trabajo ya que
constituyen peligro porque se pueden contaminar y transportar los
microorganismos.
LINEAMIENTOS DE BIOSEGURIDAD PARA EL
PERSONAL

Lave las manos antes y después de manipular material
biológico ya seaconsiderado infeccioso o no.

Use ayudas mecánicas como: dispensadores, bombas o
pipetas automáticas, ayudadores mecánicos. No pipetee
con la boca

Evite ingresar al laboratorio teléfono celular, libros,
cuadernos o periódicos, que son considerados elementos
transportadores de patógenos.

No consuma alimentos, ni fumar, almacenar comestibles y
aplicarse cosméticos dentro del laboratorio.

Tenga cuidado de no llevar las manos a la boca, nariz,
ojos, cara y cabello con el fin de evitar autoinoculación.
Coloración de Ziehl Neelsen

La coloración se realiza en tres tiempos: tinción,
decoloración y tinción de contraste
Reactivos de la coloración de ZN:
1. Fucsina fenicada
2. Alcohol ácido al 3%
3. Azul de metileno


Número de portaobjetos con extendidos para colorear:
máximo seis
FUNDAMENTO
El mecanismo de la ácido alcohol resistencia, es una propiedad que
tienen las micobacterias de captar en su pared la fucsina fenicada y
retenerla aún con la acción del alcohol ácido, esta característica se
debe al alto contenido de lípidos, péptidos, glicolípidos y
particularmente ácidos micólicos presentes en la pared celular. El
papel del mordiente (solución fenolada) es definitivo porque fomenta
la penetración de la fucsina y su unión con los lípidos bacilares,
haciéndola más liposoluble y menos hidrosoluble.
LABORATORIO VRS TB

No rechazar ningún paciente con orden medica y factura para BK
seriado o cultivo

Registrar libro de BK, datos completos del paciente de manera clara y
sin enmendaduras

Procesar y reportar de manera oportuna y rápida

Si solicitan cultivo – protocolo - orden medica –documentos

Enviar segundas muestras para cultivar y controles positivos

DATO
POSITIVO
inmediatamente
reportarlo
por
correos
correspondientes, jefe del centro de salud que pertenece y vigilancia
epidemiológica

Actualizar libro de BK - CULTIVOS
TECNICA
TINCIÓN: FUCSINA FENICADA

Cubra la totalidad del extendido con fucsina fenicada, previamente filtrada.

Flamee suavemente con la llama de un mechero, pasándolo por debajo de los
portaobjetos, hasta que se observe emisión de vapores, retire la llama y cuando éstos
desaparezcan, flamee nuevamente hasta completar 10 minutos, evitando que hierva la
fucsina, debido a que la pared de los bacilos puede destruirse.

Deje enfriar y lave con agua destilada suavemente y elimine el exceso de agua para
evitar diluir el próximo reactivo a adicionar
Decoloración: alcohol - ácido al 3%

Cubra el extendido teñido con alcohol-ácido al 3% durante 1 minuto
y lave suavemente con agua y limpie la parte posterior del
portaobjeto.

Si el extendido conserva el color rojo o rosado, vuelva a decolorar,
las veces necesarias, con alcohol-ácido,

lave con agua destilada y elimine el exceso de agua para evitar diluir
el próximo reactivo a adicionar.

Limpie la parte posterior del portaobjeto.
Colorante de contraste: azul de metileno

Cubra el extendido ya decolorado, con azul de metileno durante
2 minutos.

Lave suavemente con agua destilada.

Limpie la parte posterior del portaobjeto para retirar residuos de
colorante que puedan interferir con la lectura.

Deje secar a temperatura ambiente en posición vertical
RESULTADO DE LA COLORACION

CONTROL POSITIVO: VACUNA BCG

CONTROL NEGATIVO: Microorganismos ácidoalcohol sensibles. Yogurth
LEPRA
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BIBLIOGRAFIA

Diagnóstico bacteriológico de tuberculosis y micobacteriosis, República de
Colombia, Instituto Nacional de Salud, Subdirección Red Nacional de
Laboratorios Instituto Nacional de Salud

Protocolo de Vigilancia en Salud Pública TUBERCULOSIS, Instituto Nacional
de Salud, Ministerio de salud