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Seguimiento de Botrytis cinerea
con Herramientas Moleculares
Gonzalo A. Hinojosa H.
Ingeniero Agrónomo M.Sc.
Gerente General
Biocensa SPA
Desafío (2009/10):
Búsqueda de Oportunidades en
Biotecnología Aplicada para la
Agricultura
Oportunidad 1
“Lo que se mide
,se mejora”
Alternativas de Detección
N° Método
Detección Precisión
Tiempo
Observaciones
1
Visual
Infección
Presencia/
Ausencia
Inmediato Detección tardía cuando la
enfermedad destruyó los
frutos.
2
Cámara Infección
Húmeda Latente
Presencia/
Ausencia
12-20 días Detección demora
demasiado (frutos en
destino)
3
PCR
ADN
Presencia/
Ausencia
5 días
Presencia/ Ausencia
insuficiente – Todas las
muestras inoculadas
4
qPCR
ADN
Cuantificación
(N° Cel. Botrytis)
5 días
Detecta y cuantifica en
plazo razonable y utilizable
para manejo técnico y
comercial
Oportunidad 2
17 diferentes
Botrytis
secuenciadas
Similitud
genética 80%
Chimpancé
ADN humanos v/s chimpancés
Similitud 99%
Desafío
Convertir tecnología de punta a nivel mundial en
un servicio exequible para los productores y
comercializadores de Fruta Fresca.
En la Práctica…
• Técnico. Diseño y Construcción de:
– Kit de Extracción de ADN en el cultivo para cada uno
de los Estados Fenológicos Relevantes.
– Kit de Cuantificación de ADN del cultivo y Botrytis.
– Sistema de información y reportabilidad.
• Comercial. Establecer las redes y empaquetar el
servicio
• Financiero. Recolectar los recursos necesarios
para abordar los desafíos técnicos y comerciales.
2010
2011
2012
2013
Inicio de expansión
internacional
Análisis de
Oportunidades
Validación técnica
del servicio
Diseño y desarrollo
del Servicio
Desarrollo
tecnológico del
Servicio
Primeros ensayos
de campo
(cosecha)
Creación de
Biocensa SPA
Primeros ensayos
en Botrytis
Búsqueda y
selección de socio
comercial
Comercialización
del Servicio (AGQ)
Servicio:
Cuantificación Precisa y Oportuna
de la población de Botrytis
cinerea en Arándanos y Uva de Mesa
NUEVA ALIANZA
Manejo
Información
Botrytis
Prestación del Servicio y
Comercialización
Desarrollo
FUNCIONAMIENTO DEL SERVICIO
1
3
TOMA DE MUESTRAS Y ENVÍO
2
RECEPCIÓN Y PROCESAMIENTO
DE LAS MUESTRAS
ANÁLISIS DE DATOS Y REPORTE
DE RESULTADOS
PLAZO TOTAL : 6 días
FUNCIONAMIENTO DEL SERVICIO
1
Programa de toma de muestras durante
el desarrollo del cultivo
6 MUESTRAS
ENVÍO A
POR CUARTEL
AGQ
EN 7 ESTADÍOS FENOLÓGICOS
Hoja
Brotes
Flor
Caída de
Pétalos
Fruto Verde
Coloración
Fruto maduro
Plazo: 1 día
FUNCIONAMIENTO DEL SERVICIO
2
Recepción y análisis de las muestras
RECEPCIÓN
PROCESAMIENTO
EN AGQ
DE MUESTRAS
ANÁLISIS
RESULTADOS
Nº CELULAS BOTRYTIS
POR CANTIDAD MUESTRA
DE MUESTRAS
Plazo: 4 días
CUANTIFICACIÓN DE BOTRYTIS CINEREA
2
EXTRACCIÓN CONJUNTA DEL
ADN DEL HONGO Y LA FRUTA
AMPLIFICACIÓN ESPECÍFICA
DE UNA REGIÓN DE ADN
DETECCIÓN Y CUANTIFICACIÓN
POR PCR TIEMPO REAL
FUNCIONAMIENTO DEL SERVICIO
3
Análisis de datos y reporte de los
resultados
• EVOLUCIÓN DE LA CARGA DE
BOTRYTIS
• APLICACIONES DE
FUNGICIDAS
• CONDICIONES CLIMÁTICAS
• COMPARACIONES CON
PROMEDIOS POR ZONA Y
VARIEDAD
• SOPORTE TÉCNICO
Plazo: 1 día
Servicio
dirigido a
Empresas
Productoras y
Comercializadoras de Uva
de Mesa y
Arándanos.
Disponible hoy
Resultados en 6 días
 Tecnología reconocida
mundialmente por su
precisión en la detección y
cuantificación de ADN.
 Utilizada en Medicina
Clínica y Forense como
standar para detección y
cuantificación.
 Aplicación desarrollada
en Chile por personal
altamente calificado.
 Equipamiento e insumos
Roche, lider mundial en el
rubro.
 Servicio comercializado
por AGQ, líder en servicios
de análisis de laboratorio en
Chile y otros 20 países.
Precio:
Seguimiento Anual < Costo/ha 1 Aplicación
RESULTADOS PREDIO CON BUEN MANEJO
50
Fenhexamid
45
Boscalid
Azufre + Cobre + Extracto de
Cítrico
Bacillus subtilis
40
nº copias de botrytis/mg tejido
Azufre + Dicloran
Bacillus subtilis
35
Cypronidil + Fludioxonil
3,0 mm
Tebuconazole
30
Pre-flor
Botrytis
25
Aplicaciones
Lluvia
20
15
10
Brotación
5
Fruto cuajado
Cierre racimo
0
Envero Cosecha
RESULTADOS PREDIO CON MAL MANEJO
50
45
nº copias de botrytis/mg tejido
40
35
30
25
3,4 mm
Cyprodinil/ Fludioxonil
Trifloxystrobin / Tebuconazole
20
nº Botrytis
Aplicaciones
Lluvia
15
Cosecha
10
Cierre racimo
5
Brotación
0
Pre-flor
Fruto cuajado
Fecha
Envero
Gonzalo A. Hinojosa H.
Gerente General
Biocensa SPA
MUCHAS GRACIAS
La gente percibe el valor de estas soluciones, de acuerdo a:
Valor
Percibido en
un Producto, = Beneficios Funcionales + Beneficios Emocionales + Servicio
servicio, o
Precio+ Coste del tiempo en utilizar el bien + otros Costes
marca
Formulación de VALOR percibido de la KELLOGG´S business school