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DESCONGELACIÓN DE
EMBRIONES
EDUARDO ANGARITA GOMEZ
MVZ
UNIVERSIDAD DE CALDAS
ANGARITA 2007
MATERIALES PARA DESCONGELACIÓN LENTA
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PLATOS 4 POZOS CON TAPA NUNC.
VIGRO ONE – STEP THAW PLUS . 1 MOLAR CON SUCROSA PARA REHIDRATACIÓN RAPIDA.
VIGRO HOLDING PLUS.
TERMO DESCONGELADOR.
CRONOMETRO.
PIPETA MECANICA 5 MICROLITROS.
PUNTA DE PIPETA DEBE CAMBIARSE CON CADA PASE.
PAJILLA 0.25 CLARA.
JERINGA 1CC PLASTICO PARA MONTAJE.
ANGARITA 2007
EFECTO DEL DESCENSO TÉRMICO SOBRE LAS ESTRUCTURAS CELULARES
CRIOINJURIAS
1- FORMACIÓN DE HIELO INTRA O EXTRACELULAR (por tasas de descenso
térmico muy altas).
2- AUMENTO O DISMINUCIÓN EXCESIVA DEL VOLUMEN CELULAR POR EFECTO
OSMÓTICO.(efecto de la solución)
3- EFECTO TOXICO DEL CRIOPROTECTOR.(Toxicidad Química produciría
Una alteración en la organización de los filamentos que componen el citoesqueleto
Aumentan el espacio perivitelino,aumento del tamaño mitocondrial ,presencia de
Vacuolas y signos de degeneración nuclear ).
4 – ALTERACIONES DE LAS MEMBRANAS CELULARES (Plasmática y organelas signo
importante de muerte celular)
5 - FRACTURA EMBRIONARIA O DE LA ZONA PELUCIDA (Por Expansión de los
cristales de hielo).
ANGARITA 2007
Otros son daño mecánico como consecuencia de formación de burbujas debido
A un aumento de gas soluble.
Alteración en los procesos de difusión y osmosis producto de un aumento
de la viscosidad.
Desnaturalización proteica por cambios de Ph..
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MEDIOS PARA
DESCONGELACIÓN LENTA
ONE STEP TWAN PLUS
HOLDING
IDENTIFICACIÓN EN EL TERMO
MANEJO DE LOS EMBRIONES
EN EL TERM0
DESCONGELACIÓN LENTA
MANEJO DE CAJAS CUATRO
POZOS
MANEJO EN EL
ESTEREOSCOPIO
PASOS EN LA CAJA DE PETRI 4 HUECOS
ONE STEP THAW PLUS 10 -15 MIN
HOLDING 5 MINUTOS
HOLDING 5 MINUTOS
MONTAJE
HOLDING-ESPACIO HOLDING-EMBRION ESPACIO-HOLDING
T.E
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CUERPO LUTEO 3
TRANSFERENCIA EMBRIONES CONGELADOS Y CALIDAD 2
Y 3 EN FRESCOS
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