56T00558 UDCTFC

E S C U E L A S U P E R IO R P O L IT É C N IC A D E C H IM B O R A Z O
F A C U L T A D D E C IE N C IA S
E SC U E L A
D E B IO Q U ÍM IC A Y F A R M A C IA
A C T IV ID A D C IC A T R IZ A N T E
D E L O S E X T R A C T O S
M E T A N Ó L I C O S D E J u s tic ia c h lo r o s ta c h y a Y P le c tr a n th u s a m b o in ic u s
M E D I A N T E E N S A Y O S in v itr o D E I N H I B I C I Ó N D E
H I A L U R O N I D A S A Y V E N E N O D E C O B R A ( N a ja n a ja )
T ra b a jo d e titu la c ió n p re v io a la o b te n c ió n d e g ra d o a c a d é m ic o d e :
B IO Q U ÍM IC O F A R M A C É U T IC O
A U T O R : D IE G O
A L E X A N D E R M O N G E P IS C O
R IO B A M B A – E C U A D O R
2015
E S C U E L A S U P E R IO R P O L IT É C N IC A D E C H IM B O R A Z O
F A C U L T A D D E C IE N C IA S
E SC U E L A
D E B IO Q U ÍM IC A Y F A R M A C IA
A C T IV ID A D C IC A T R IZ A N T E
D E L O S E X T R A C T O S
M E T A N Ó L I C O S D E J u s tic ia c h lo r o s ta c h y a Y P le c tr a n th u s a m b o in ic u s
M E D I A N T E E N S A Y O S in v itr o D E I N H I B I C I Ó N D E
H I A L U R O N I D A S A Y V E N E N O D E C O B R A ( N a ja n a ja )
T ra b a jo d e titu la c ió n p re v io a la o b te n c ió n d e g ra d o a c a d é m ic o d e :
B IO Q U ÍM IC O F A R M A C É U T IC O
A U T O R : D IE G O
A L E X A N D E R M O N G E P IS C O
T U T O R : B Q F . D IE G O
R E N A T O V I N U E Z A T A P I A M .S C .
R IO B A M B A – E C U A D O R
2015
E S C U E L A S U P E R IO R P O L IT É C N IC A D E C H IM B O R A Z O
F A C U L T A D D E C IE N C IA S
E SC U E L A
D E B IO Q U ÍM IC A Y F A R M A C IA
E l T rib u n a l d e T e s is c e rtific a q u e : E l tra b a jo d e in v e s tig a c ió n : “ A C T IV ID A D C IC A T R IZ A N T E
D E
LO S
EX TR A C TO S
a m b o in ic u s
V EN EN O
M E D IA N T E
D E
C O B R A
M E T A N Ó L IC O S
EN SA Y O S
(N a ja n a ja ).” ,
in
D E
v itr o
D E
J u s tic ia
c h lo r o s ta c h y a
IN H IB IC IÓ N
D E
Y
P le c tr a n th u s
H IA L U R O N ID A S A
Y
d e re s p o n s a b ilid a d d e l s e ñ o r e g re s a d o D ie g o A le x a n d e r
M o n g e P is c o , h a s id o p ro lija m e n te re v is a d o p o r lo s M ie m b ro s d e l T rib u n a l d e T e s is , q u e d a n d o
a u to riz a d a s u p re s e n ta c ió n .
F IR M A
B Q F . D ie g o R e n a to V in u e z a T a p ia M . S c .
D IR E C T O R
__________________
_______________
__________________
_______________
D E T E S IS
L c d a . K a re n A c o s ta L e ó n M . S c .
M IE M B R O
D E T R IB U N A L
D O C U M E N T A L IS T A
__________________
S IS B IB E S P O C H
N O T A
FEC H A
D E T E S IS E S C R IT A
__________________
________________
Y o,
(D ie g o
e x p u e s to s
ESC U ELA
A le x a n d e r
en
e s ta
M onge
T e s is ;
y
el
P is c o ),
soy
p a trim o n io
S U P E R IO R P O L IT É C N IC A
re s p o n s a b le
in te le c tu a l
de
de
la
la s
id e a s ,
T e s is
de
d o c trin a s
G ra d o ,
y
re s u lta d o s
p e rte n e c e
a
la
D E C H IM B O R A Z O
_________________________________ __
D IE G O
A L E X A N D E R
M O N G E P IS C O
D E D IC A T O R IA
D e d ic o e s te p re s e n te T ra b a jo d e T itu la c ió n a l s e r c re a d o r e l c u a l h a d e p o s ita d o e n m i e x is te n c ia ,
su
fo rta le z a
y
s a b id u ría ,
p e rm itié n d o m e
lle g a
a
a lc a n z a r
la s
m e ta s ,
o b je tiv o s
y
p ro p ó s ito s
p la n te a d o s e n e s te p ro y e c to d e in v e s tig a c ió n .
A
m is
p ro g e n ito re s ,
p o r s e r q u ie n e s h a n
fo rja d o
en
m í un
e s p íritu
lu c h a d o r, c o n
h u m id a d
y
re s p o n s a b ilid a d ; a m i e s p o s a e h ijo p o r e s ta r e n c a d a in s ta n te y a p o y á n d o m e e n lo s m o m e n to s
m á s d ifíc ile s e n e s ta in v e s tig a c ió n ; a m is h e rm a n o s p o r b rin d a rm e s u a p o y o in c o n d ic io n a l; a m is
s u e g ro s y fa m ilia re s a lle g a d o s p o r s u c o la b o ra c ió n e n to d o m o m e n to .
A m is a m ig o s y c o m p a ñ e ro s p o r s e r u n s o p o rte h a s ta e l fin a l.
D ie g o
i
A G R A D E C IM IE N T O
Q u ie ro
a g ra d e c e r
en
p rim e ra
in s ta n c ia
a l D io s
T o d o p o d e ro so
por
d a rm e
la
v id a
y
h a b e rm e
por
lo s
sa b e re s
p ro p o rc io n a d o la s a tis fa c c ió n d e c u lm in a r m i c a rre ra u n iv e rs ita ria .
A
n u e s tra
casa
de
e s tu d io s
E s c u e la
S u p e rio r
P o lité c n ic a
de
C h im b o ra z o
a d q u irid o s .
A
m i fa m ilia p o r a y u d a rm e e n c a d a in s ta n te d e lu c h a e n e l d e s a r ro llo d e m i c a rr e ra e s tu d ia n til, a
m i esposa
por ser un
e je
fu n d a m e n ta l in c o n d ic io n a l y
a
to d o s q u ie n e s d e a lg u n a m a n e ra h a n
a p o rta d o u n g ra n ito d e a re n a e n e s ta in v e s tig a c ió n .
Ig u a lm e n te
c o o p e ra c ió n
es
g ra tific a n te
el apoyo
del B Q F.
D ie g o
V in u e z a
y
L cda.
K a re n
A c o s ta
por su
y a s e s o ra m ie n to e n la e la b o ra c ió n d e e s te tra b a jo d e in v e s tig a c ió n .
D ie g o
ii
ÍN D IC E G E N E R A L
R E SU M E N … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … .
xi
S U M M A R Y … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … ....
x ii
IN T R O D U C C IÓ N … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … .
1
C A P ÍT U T L O
3
I
T E Ó R IC O … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … …
1.
M A R C O
1 .1 .
D ia b e te s … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … .
3
1 .1 .1 .
C o m p lic a c io n e s C r ó n ic a s … … … … … … … … … … … … … … … … … .........
3
1 .1 .1 .1 .
R e tin o p a tía s … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … ...
3
1 .1 .1 .2 .
P ie d ia b é tic o … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … ......
4
1 .1 .1 .3 .
H ip e r te n s ió n … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … ......
4
1 .2 .
C ic a tr iz a c ió n … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … …
5
1 .2 .1 .
P r o c e s o s d e c ic a tr iz a c ió n … … … … … … … … … … … … … … … … … .........
5
1 .2 .1 .1 .
H e m o s t a s i a - F a s e a g u d a . . … … … … … … … … … … … … … . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. .. . .
5
1 .2 .1 .2 .
F a s e in fla m a to r ia :… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … .
5
1 .2 .1 .3 .
P r o life r a tiv a o d e G r a n u la c ió n … … … … … … … … … … … … … … … .........
6
1 .2 .1 .4 .
F a s e d e E p ite liz a c ió n … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … …
6
1 .2 .1 .5 .
F a s e d e r e m o d e la c ió n o d e c o n tr a c c ió n … … … … … … … … … … … ...........
6
1 .3 .
C ic a tr iz a c ió n e n p ie d ia b é tic o … … … … … … … … … … … … … … … … …
6
1 .4 .
J u s tic ia c h lo r o s ta c h y a … … … … … … … … … … … … … … … … .................
7
1 .4 .1 .
C o m p o s ic ió n Q u ím ic a y A c tiv id a d F a r m a c o ló g ic a … … … … … … … … ....
8
1 .5 .
P le c tr a n th u s a m b o in ic u s … … … … … … … … … … … … … … … .................
8
1 .5 .1 .
C o m p o s ic ió n Q u ím ic a y A c tiv id a d F a r m a c o ló g ic a … … … … … … … … ....
9
1 .6 .
H ia lu r o n id a s a (E C 3 .2 .1 .3 5 ) … … … … … … … … … … … … … … … … … ..
9
1 .7 .
V e n e n o d e c o b r a ( N a ja n a ja )… … … … … … … … … … … … … … … … … .
10
C A P ÍT U L O
II
12
2.
M A R C O
M E T O D O L Ó G IC O … … … … … … … … … … … … … … … … ...
12
2 .1 .
P a r te E x p e r im e n ta l… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … .
12
2 .1 .1 .
S i t i o d e i n v e s t i g a c i ó n … … … … … . . … … … … … … … … … . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. .. . . .
12
2 .1 .2 .
M a te r ia p r im a … … … ...… … … … … … … … … … … … … … … … … … … …
12
2 .1 .3 .
M a te r ia le s , e q u ip o s y r e a c tiv o s … … … … … … … … … … … … … … … … …
12
2 .1 .3 .1 .
M a te r ia le s … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … .....
12
2 .1 .3 .2
E q u ip o s … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … .....
13
2 .1 .3 .3 .
R e a c tiv o s … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … ...
13
2 .2 .
T é c n ic a s … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … ....
14
iii
3
2 .2 .1 .
C o n tr o l d e c a lid a d d e la m a te r ia p r im a … … … … … … … … … … … … … ...
14
2 .2 .1 .1 .
D e te r m in a c ió n d e h u m e d a d … … … … … … … … … … … … … … … … … … ..
14
2 .4 .1 .2 .
D e te r m in a c ió n d e c e n iz a s to ta le s … … … … … … … … … … … … … … … … .
15
2 .2 .2 .
E n s a y o fito q u ím ic o … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … ..
16
2 .2 .2 .1 .
E n s a y o d e D r a g e n d o r ff… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … .
16
2 .2 .2 .2 .
E n sa y o d e M a y e r … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … ..
16
2 .2 .2 .3 .
E nsayo de W agner… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … …
17
2 .2 .2 .4 .
E n s a y o d e L ie b e r m a n - B u c h a r d … … … … … … … … … … … … … … … … …
17
2 .2 .2 .5 .
E n s a y o d e B a lje t… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … …
17
2 .2 .2 .6 .
E n sa y o d e S u d á n III… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … ..
17
2 .2 .2 .7 .
E n s a y o d e B o r n tr a g e r … … … … … … … … … … … … … … … … … … … .......
17
2 .2 .2 .8 .
E n s a y o d e c a te q u in a … … … … … … … … … … … … … … … … … .… … … …
17
2 .2 .2 .9 .
E n s a y o d e s a p o n in a s … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … .
18
2 .2 .2 .1 0 .
E n s a y o d e c lo r u r o fé r r ic o … … … … … … … … … … … … … … … … … … .....
18
2 .2 .2 .1 1 .
E n s a y o d e S h in o d a … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … …
18
2 .2 .3 .
P r e p a r a c ió n
18
de
lo s
e x tr a c to s
de
J u s tic ia
c h lo r o s ta c h y a
y
P le c tr a n th u s
a m b o in ic u s … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … …
21
2 .2 .4 .
D e te r m in a c ió n d e la in h ib ic ió n d e h ia lu r o n id a s a … … … … … … … … … ...
21
2 .2 .4 .1 .
In h ib ic ió n d e h ia lu r o n id a s a … … … … … … … … … … … … … … … … … .......
21
2 .2 .4 .2 .
V e n e n o d e C o b r a (N a ja n a ja ) … … … … … … … … … … … … … … … … … …
23
C A P ÍT U L O
III
24
3.
M A R C O
D E
R E SU L T A D O S,
D IS C U S IÓ N
Y
A N Á L IS IS
D E
R E SU L T A D O S… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … …
24
3 .1 .
R e s u lta d o s y d is c u s io n e s … … … … … … … … … … … … … … … … … … … .
24
3 .1 .1 .
C o n tr o l d e c a lid a d d e la m a te r ia p r im a … … … … … … … … … … … … … ..
24
3 .1 .2 .
T a m iz a je fito q u ím ic o … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … …
25
3 .1 .3 .
C r o m a t o g r a f í a e n c a p a f i n a … … … … … … … … … … . . . . . . . . . . . . . . . . .. . .. .. .. . .. .. . . .
26
3 .1 .3 .1 .
C r o m a to g r a fía s d e l e x tr a c to d e P le c tr a n th u s a m b o in ic u s … … … … … … …
26
3 .1 .3 .2 .
C r o m a to g r a fía s d e l e x tr a c to d e J u s tic ia c h lo r o s ta c h y a … … … … … … … …
27
3 .1 .4 .
C u a n tific a c ió n d e fla v o n o id e s to ta le s … … … … … … … … … … … … … … ..
27
3 .1 .5 .
A n á lis is d e l p r o to c o lo d e in h ib ic ió n d e h ia lu r o n id a s a … … … … … … … …
28
C O N C L U S IO N E S … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … .
31
R E C O M E N D A C IO N E S … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … ...
32
B IB L IO G R A F ÍA
A N E X O S
iv
ÍN D IC E D E A B R E V IA T U R A S
g
G ra m o s
m L
M ililitro s
%
P o rc e n ta je
S
Segundo
N
N o rm a lid a d
dL
D e c ilitro
M
M o ra lid a d
°C
G ra d o s c e ls iu s
P .a .
P le c tr a n th u s a m b o in ic u s
J .c .
J u s tic ia c h lo r o s ta c h y a
A D A
A s o c ia c ió n A m e ric a n a d e la D ia b e te s
O M S
O rg a n iz a c ió n M u n d ia l d e la S a lu d
α
A lfa
β
B e ta
m m ol
M ilim o l
km
K ilo m e tro
m g
M ilig ra m o s
M SP
M in is te rio d e S a lu d P ú b lic a
ug
M ic ro g ra m o
uL
M ic ro litro
IN E N
In s titu to N a c io n a l d e N o rm a s E c u a to ria n a s
v
ÍN D IC E D E T A B L A S
T A B L A
N °1 -2
E s q u e m a d e tra ta m ie n to s d e a c u e rd o a c a d a e s p e c ie v e g e ta l p a ra la
in h ib ic ió n d e h ia lu ro n id a s a … … … … … … … … … … … … … … … … ..
T A B L A
N °2 -2
E squem a
de
tra ta m ie n to s
de
a c u e rd o
a
cada
e s p e c ie
v e g e ta l e n
la
in h ib ic ió n d e l v e n e n o d e c o b ra (N a ja n a ja ) … … … … … … … … … …
23
24
T A B L A
N °1 -3
C o n tro l d e c a lid a d d e la s d ife re n te s e s p e c ia le s in v e s tig a d a s … … … ...
T A B L A
N °2 -3
T a m iz a je fito q u ím ic o
y
T A B L A
N °3 -3
22
P le c tr a n th u s
P o rc e n ta je
de
de
lo s e x tra c to s
de
J u s tic ia
c h lo r o s ta c h y a
a m b o in ic u s … … … … … … … … … … … … … … … … .
in h ib ic ió n
de
h ia lu ro n id a s a
de
lo s
25
e x tra c to s
m e ta n ó lic o s d e P le c tr a n th u s a m b o in ic u s y J u s tic ia c h lo r o s ta c h y a … .
T A B L A
N °4 -3
E fe c to
J u s tic ia
de
lo s
e x tra c to s
m e ta n ó lic o s d e
P le c tr a n th u s a m b o in ic u s
28
y
c h lo r o s ta c h y a e n la in h ib ic ió n d e h ia lu ro n id a s a d e l v e n e n o
d e c o b ra … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … …
vi
29
ÍN D IC E D E C U A D R O S
C U A D R O
N °1 -1
C la s ific a c ió n d e lo s g ra d o s d e s e v e rid a d d e l p ie d ia b é tic o d e a c u e rd o
c o n la e s c a la d e W a g n e r… … … … … … … … … … … … … ...................
4
C U A D R O
N °2 -1
T a x o n o m ía d e J u s tic ia c h lo r o s ta c h y a … … … … … … … … … … ..........
7
C U A D R O
N °3 -1
T a x o n o m ía d e P le c tr a n th u s a m b o in ic u s ... … … … … … … … … … .......
8
C U A D R O
N °1 -3
R f d e lo s c o m p u e s to s o b te n id o s p o r c ro m a to g ra fía d e c a p a fin a d e l
P le c tr a n th u s a m b o in ic u s … … … … … … … … … … … … … … … … ......
C U A D R O
N °2 -3
26
R f d e lo s c o m p u e s to s o b te n id o s p o r c ro m a to g ra fía d e c a p a fin a d e
J u s tic ia c h lo r o s ta c h y a … … … … … … … … … … … … … … … … … ......
v ii
27
ÍN D IC E D E F IG U R A S
F IG U R A
N °1 -1
F ó rm u la d e l á c id o h ia lu ró n ic o … … … … … … … … … … … … … … … ..
10
F IG U R A
N °1 -2
D ia g ra m a d e o b te n c ió n d e m e ta b o lito s s e c u n d a rio s … … … … … … …
16
F IG U R A
N °2 -2
D ia g ra m a
de
flu jo
p a ra
la
o b te n c ió n
de
e x tra c to
de
J u s tic ia
c h lo r o s ta c h y a … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … …
F IG U R A
N °3 -2
D ia g ra m a
de
flu jo
p a ra
o b te n c ió n
de
e x tra c to s
de
P le c tr a n th u s
a m b o in ic u s … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … …
F IG U R A
N °1 -3
M ó v il: to lu e n o : a c e ta to d e e tilo fo rm a p ro g re s iv a
(9 3 :7 )-(8 0 :2 0 )-(7 0 :3 0 )-(6 0 -4 0 )… … … … … … … … … … … … … … … .
N °2 -3
20
C ro m a to g ra fía e n c a p a fin a d e l e x tra c to m e ta n ó lic o d e P le c tr a n th u s
a m b o in ic u s . F a s e
F IG U R A
19
C ro m a to g ra fía
en
capa
c h lo r o s ta c h y a .
F ase
fin a
del
M ó v il: a c e ta to
e x tra c to m e ta n ó lic o d e
de
e tilo : á c id o
26
J u s tic ia
fó rm ic o : á c id o
a c é tic o : a g u a (1 0 0 :1 1 :1 1 :2 6 )… … … … … … … … … … … … … … … …
27
28
F IG U R A
N °3 -3
C u rv a d e c a lib ra c ió n d e q u e rc e tin a … … … … … … … … … … … … … ..
F IG U R A
N °4 -3
C u rv a d e C a lib ra c ió n d e la a c tiv id a d d e lo s e x tra c to s m e ta n ó lic o s d e
P le c tr a n th u s a m b o in ic u s y J u s tic ia c h lo r o s ta c h y a e n la in h ib ic ió n d e
h ia lu ro n id a s a
del
veneno
de
c o b ra
(N a ja
n a ja )… … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … … .
v iii
30
ÍN D IC E D E F O T O G R A F ÍA S
F O T O G R A F ÍA
N °1
P e s o d e l c ris o l
F O T O G R A F ÍA
N °2
P e s o d e l c ris o l c o n la m u e s tra
F O T O G R A F ÍA
N °3
M é to d o d e e x tra c c ió n p o r s o x h le t
F O T O G R A F ÍA
N °4
C o n c e n tra c ió n e n ro ta v a p o r d e o ré g a n o e i n s u lin a
F O T O G R A F ÍA
N °5
B la n c o s
F O T O G R A F ÍA
N °6
H ia lu ro n id a s a b o v in a
F O T O G R A F ÍA
N °7
R e a c tiv o s lo s e n s a y o s
F O T O G R A F ÍA
N °8
D is tin to s tra ta m ie n to s d e la s p la n ta s a n a liz a d a s
F O T O G R A F ÍA
N °9
A d ic ió n d e l D M S O 5 %
F O T O G R A F ÍA
N °1 0
A d ic ió n d e l b u ffe r
F O T O G R A F ÍA
N °1 1
A d ic ió n d e l C a C l2
F O T O G R A F ÍA
N °1 2
A d ic ió n d e l h ia lu ro n a to d e s o d io
F O T O G R A F ÍA
N °1 3
In c u b a c ió n d e lo s tra ta m ie n to s a 3 7 ° C
F O T O G R A F ÍA
N °1 4
C a le n ta m ie n to
F O T O G R A F ÍA
N °1 5
E n fria m ie n to
F O T O G R A F ÍA
N °1 6
M e d ic ió n d e a b s o rb a n c ia s
ix
ÍN D IC E D E A N E X O S
A N E X O
A
A n á lis is d e H u m e d a d
A N E X O
B
E x tra c c ió n d e la s p la n ta s P le c tr a n th u s a m b o in ic u s y J u s tic ia c h lo r o s ta c h y a
A N E X O
C
In h ib ic ió n d e h ia lu ro n id a s a
A N E X O
D
D e te rm in a c ió n
de
a b s o rb a n c ia s
de
a m b o in ic u s y J u s tic ia c h lo r o s ta c h y a
x
lo s
d ife re n te s tra ta m ie n to s d e
P le c tr a n th u s
R E SU M E N
Se
d e te rm in ó
e l e fe c to c ic a triz a n te d e lo s e x tra c to s m e ta n ó lic o s d e P le c tr a n th u s a m b o in ic u s y
J u s tic ia c h lo r o s ta c h y a , m e d ia n te lo s e n s a y o s in v itr o d e in h ib ic ió n d e h ia lu ro n id a s a y v e n e n o d e
c o b ra
(N a ja
F a c u lta d
de
n a ja ) , re a liz a d o s e n
C ie n c ia s
de
la
e l L a b o ra to rio
E s c u e la
S u p e rio r
de
F ito fa rm a c ia y A n á lis is In s tru m e n ta l d e la
P o lité c n ic a
de
C h im b o ra z o .
D onde
d is tin to s tra ta m ie n to s p o r c a d a p la n ta e m p le a d a , lo s c u a le s fu e ro n : 0 .0 0 5 g /m L
0 .0 2 g /m L
d e la p a rte fla v ó n ic a d e
d ife re n te s a n á lis is . S e
a c tiv id a d
por
de
s o x h le t
lo s
y
e m p le ó
un
a
p a rtir
b la n c o
de
u tiliz ó
- 0 .0 1 g /m L
y
P le c tr a n th u s a m b o in ic u s y J u s tic ia c h lo r o s ta c h y a p a ra lo s
n e g a tiv o
y
un
c o n tro l d o n d e
e n s a y o s re a liz a d o s . L o s d ife re n te s e x tra c to s s e
re flu jo
se
50
g ra m o s
de
la
p a rte
a é re a
se
p re s e n ta rá la m a y o r
lo g ra ro n
m e d ia n te
seca
la s
de
e x tra c c ió n
d is tin ta s
p la n ta s
u tiliz a d a s . L o s re s u lta d o s o b te n id o s e n la in h ib ic ió n d e h ia lu ro n id a s a fu e ro n s a tis fa c to rio s e n lo s
tra ta m ie n to s c o n P le c tr a n th u s a m b o in ic u s c o n u n 8 2 .5 %
d e in h ib ic ió n e n la d o s is d e 0 .0 2 g /m L
y
m enor
con
lo s
tra ta m ie n to s
de
J u s tic ia
c h lo r o s ta c h y a
en
p ro p o rc ió n .
En
lo s
re s u lta d o s
c o n s e g u id o s p a ra la in h ib ic ió n d e v e n e n o d e c o b ra lo s tra ta m ie n to s d e P le c tr a n th u s a m b o in ic u s
fu e ro n
s a tis fa c to rio s
en
c o m p a ra c ió n
con
lo s
tra ta m ie n to s
de
J u s tic ia
c h lo r o s ta c h y a .
Se
re c o m ie n d a c o n tin u a r c o n la in v e s tig a c ió n e n e l a n á lis is d e in h ib ic ió n d e h ia lu ro n id a s a re s p e c to
a
lo s
e x tra c to s
de
J u s tic ia
c h lo r o s ta c h y a , u tiliz a n d o
un
m é to d o
que
p e rm ita
m e d ir d e
m e jo r
m a n e a la c a n tid a d d e n -a c e tilg lu c o s a m in a lib e ra d a .
P a la b r a s
c la v e s:
V EN EN O
D E
< IN H IB IC IÓ N
C O B R A
C H LO RO STAC H YA >
IN
D E
H IA L U R O N ID A S A
V IT R O >
IN
<PLEC TRAN TH U S
V IT R O >
< IN H IB IC IÓ N
A M B O IN IC U S >
< J U S T IC IA
< P IE D IA B É T IC O > < C IC A T R IZ A C IÓ N > < F L A V O N O ID E S >
xi
D E
SU M M A R Y
T h e H e a lin g E ffe c t o f M e th a n o l E x tra c t o f P le c tr a n th u s a m b o in ic u s a n d J u s tic e c h lo r o s ta c h y a
w as
d e te rm in e d
p e rfo rm e d
F a c u lty
at
of
th e
The
tre a tm e n ts
by
fo r
th e
in
L a b o ra to ry
E s c u e la
each
n e g a tiv e
in h ib itio n
of
p la n t
used,
used
h y a lu ro n id a s e
P o lité c n ic a
w h ic h
fla v o n ic
c o n tro l w a s
of
P h y to p h a rm a c y
S u p e rio r
P le c tr a n th u s a m b o in ic u s
and
v itro
w h e re
de
w e re :
p a rt a n d
and
w ill b e
c o b ra
In s tru m e n ta l
C h im b o ra z o .
0 .0 0 5
J u s tic e
and
–
g /m L
p re s e n te d
th e
A n a ly s is
W h e re
0 .0 1
c h lo r o s ta c h y a
venom
(N a ja
of
n a ja ),
th e
S c ie n c e s
it
w as
used
d iffe re n t
g /m L
and
0 .0 2
g /m L
of
fo r d iffe re n t a n a ly s is . W h ite
m a in
a c tiv ity
of
th e
tria ls . T h e
d iffe re n t e x tra c ts w e re o b ta in e d b y s o x h le t e x tra c tio n a n d flo w fro m 5 0 g ra m s o f th e d rie d a e ria l
p a rt
of
th e
v a rio u s
p la n ts
used.
The
re s u lts
o b ta in e d
in
th e
s a tis fa c to ry in P le c tr a n th u s a m b o in ic u s tre a tm e n ts w ith 8 2 .5 %
and
w ith
in h ib itio n
to
th e
th e
o f c o b ra
J u s tic e
in h ib itio n
J u s tic e
c h lo r o s ta c h y a
venom
tre a tm e n ts
le s s e r
e x te n t.
in h ib itin g
h y a lu ro n id a s e
w er e
in h ib itio n a t d o s e s o f 0 .0 2 g /m L
In
th e
o b ta in e d
re s u lts
fo r
th e
th e P le c tr a n th u s a m b o in ic u s tre a tm e n ts w e re s a tis fa c to ry c o m p a re d
c h lo r o s ta c h y a tre a tm e n ts . It is re c o m m e n d e d fu rth e r re s e a rc h o n th e a n a ly s is o f
o f h y a lu ro n id a s e
a b o u t th e
J u s tic e
c h lo r o s ta c h y a
e x tra c ts , u s in g a m e th o d to b e tte r
m e a s u re th e a m o u n t o f n -a c e ty lg lu c o s a m in e re le a s e d .
K E Y W O R D S:
C O B R A
< IN H IB IT IO N
V EN O M
C H LO RO STAC H YA >
IN
O F
V IT R O >
H Y A L U R O N ID A S E
<PLEC TRAN TH U S
IN
V IT R O >
A M B O IN IC U S >
< D IA B E T IC > < H E A L IN G > < F L A V O N O ID S >
x ii
< IN H IB IT IO N
O F
< J U S T IC E
IN T R O D U C C IÓ N
E l u s o d e la s p la n ta s c o m o a lte rn a tiv a m e d ic in a l n a tu ra l u s a d a p o r lo s a n te p a s a d o s , h a s id o d e
g ra n a y u d a e n e l tra ta m ie n to d e u n s in n ú m e ro d e e n fe rm e d a d e s . P o r e llo , la e n tid a d c ie n tífic a
e n l a a c t u a l i d a d h a m o s t r a d o g r a n i n t e r é s p o r e s t e t i p o d e a l t e r n a t i v a n a t u r a l . ( P r ie to , S . e t a l. 2 0 0 0 .
p. 28)
E s te
tip o
v a lio s o ,
de
a lte rn a tiv a
aunque
O rg a n iz a c ió n
no
se
de
o rig e n
conoce
M u n d ia l d e
la
n a tu ra l
con
c o n s titu y e
e x a c titu d
S a lu d
(O M S )
la
ha
en
p a ís e s
e x te n s ió n
e s tim a d o
de
que
s u b d e s a rro lla d o s
la
u tiliz a c ió n
c e rc a
a
del 80%
un
re c u rso
n iv e l g lo b a l, la
de
la
p o b la c ió n
m u n d ia l e m p le a la s p la n ta s c o m o m e d ic in a n a tu ra l, s ie n d o u s a d o lo s e x tra c to s o s u s p rin c ip io s
a c t i v o s e n l o s t r a t a m i e n t o s m e d i c i n a l e s . ( A k e r e le , O . 1 9 8 5 . p . 1 )
En
la
a m a z o n ia
a n c e s tra le s
han
e c u a to ria n a
u tiliz a d o
la s
e x is te n
h o ja s
p o b la c io n e s c o m o
m achacadas
o
lo s h u a o ra n i
m a c e ra c io n e s
de
lo s c u a le s d e s d e
e s p e c ie s
tie m p o s
v e g e ta le s
p a ra
c u r a c io n e s ta le s c o m o h e r id a s , c o r te s , f r a c tu r a s e n tr e o tr a s . (A ra g a d v a y , S .P . 2 0 0 9 . p . 2 0 )
D e n tro
de
la s e n fe rm e d a d e s c ró n ic a s q u e s e e n c u e n tra n e n e l E c u a d o r la D ia b e te s m e llitu s h a
re p re s e n ta d o u n p ro b le m a d e s a lu d e n la a c tu a lid a d , s ie n d o la p rim e ra c a u s a d e m u e rte e n e l p a ís
o b te n ié n d o s e u n re g is tro d e 4 .6 9 5 m u e rte s , c o n u n p o rc e n ta je d e 7 ,4 4 % y u n a ta s a d e m o rta lid a d
d e 2 9 , 7 6 . ( I N E N , 2 0 1 3 . h ttp ://e c u a d o r e n c if r a s .c o m )
C uando
la
d ia b e te s
no
ha
s id o
c o n tro la d a
o
su
e s ta d io
es
de
c a rá c te r
c ró n ic o
e x is te n
c o m p lic a c io n e s c o m o e n fe rm e d a d e s d e tip o v a s c u la r, in m u n o ló g ic a s y n e u ro ló g ic a s . T o d o e s to
c o n lle v a a l d e s a rro llo d e ú lc e ra s e n e l p ie , p ro d u c ie n d o g a n g re n a s y e n e l p e o r d e lo s c a s o s la
a m p u ta c ió n d e l p ie . L a c ic a triz a c ió n d e la h e rid a e s m u c h a m á s le n ta e n p e rs o n a s q u e p a d e c e n
de
p ie
d ia b é tic o , d e b id o a la c a re n c ia d e fa c to re s d e
sum ado
a
la
d is m in u c ió n
de
irrig a c ió n
s a n g u ín e a
g e n e ra c ió n d e q u e ra tin o c ito s y c o lá g e n o ,
en
los
m ie m b ro s
in fe rio re s ,
lo
cual hace
i n c a p a z l a r e g e n e r a c i ó n t i s u l a r . ( P o r e ts k y , L . 2 0 0 8 . p . 3 7 8 )
T o d o e llo c o n lle v a a l d e s a rro llo e in v e s tig a c ió n d e l u s o d e la m e d ic in a n a tu ra l c o m o a lte rn a tiv a
c u ra tiv a p a ra a q u e lla s p e rs o n a s q u e s u fre n d e p ie d ia b é tic o .
E l g a s to
d e b id o
a
en
un
fá rm a c o s p a ra
c la ro
la
d ia b e te s s e
d e s p la z a m ie n to
de
la
ha
d u p lic a d o e n lo s ú ltim o s a ñ o s e n n u e s tro m e d io ,
p re s c rip c ió n
h a c ia
lo s
nuevos
fá rm a c o s,
hecho
que
re s p o n d e m á s a u n a e s tra te g ia d e m a rk e tin g q u e a v e n ta ja s c lín ic a s re a le s . (T a m a y o , M . 2 0 1 4 . p . 2 5 )
1
D e b id o a e s to , e s m e n e s te r e n c o n tra r n u e v a s a lte rn a tiv a s d e tip o v e g e ta l q u e fa c ilite n e l p ro c e s o
d e c ic a triz a c ió n e n p a c ie n te s q u e p a d e c e n d e d ic h a p a to lo g ía , s ie n d o a s e q u ib le a l u s u a rio , e n
E c u a d o r s e e n c u e n tra u n
el
fá rm a c o d e n o m in a d o tro la m in a e l c u a l e s u tiliz a d o p a ra e l tra ta m ie n to
te ra p é u tic o d e la c ic a triz a c ió n e n e l p ie d ia b é tic o , a u n q u e e s e fe c tiv o , s u c o s to n o e s a c c e s ib le
p a ra
la
ig u a l
p o b la c ió n
fo rm a
que
o c u rre
padece
con
el
de
e s ta
e n fe rm e d a d , p o r p o s e e r b a jo s re c u rs o s e c o n ó m ic o s . D e
fa c to r
de
c re c im ie n to
e p id é rm ic o
re c o m b in a n te
denom inado
H e b e rp ro t-P ® , e s te fá rm a c o p e rm ite u n m e jo r p ro g re s o e n e l tra ta m ie n to d e p ie d ia b é tic o , p e ro
s u c o s to e s m u y a lto lle g a n d o a lc a n z a r u n v a lo r d e 6 .8 5 7 ,3 5 d ó la re s .
( M S P . 2 0 1 3 . h ttp ://w w w .s a lu d .g o b .e c /d ia - m u n d ia l- d e - la - d ia b e te s .h tm l)
Es
a s í,
que
c u ra tiv a
se
com o
s e c u n d a rio s
o p ta
lo
por
e s la
com o
la
u tiliz a c ió n
J u s tic ia
c o m p u e s to s
y
por
de
e s p e c ie s v e g e ta le s
c h lo r o s ta c h y a
fe n ó lic o s ,
tip o
n a tu ra l
P le c tr a n th u s a m b o in ic u s , c u y o s c o m p o n e n te s
fla v o n o id e s ,
in h ib ic ió n
de
adem ás
la
p e rm ita n
in h ib ic ió n
de
una
la
n o s p e rm ite o b te n e r u n m é to d o c o n fia b le y p re c is o , d o n d e n o s e ll e v a a c a b o la
d ia b é tic o ,
no
p e rm ite n
h ia lu ro n id a s a
p ie
que
o tro s ;
en
de
c o m p u e s to s
e n tre
c ic a triz a c ió n
padecen
de
a n to c ia n in a s
c e lu la r
que
la
a lte rn a tiv a
re g e n e ra c ió n
p e rso n a s
ende
y
com o
la
m e jo r
e n z im a
m u e r t e d e l a n i m a l d e e x p e r i m e n t a c i ó n a l s e r u n m é t o d o i n v i t r o . ( P r a th ib a , V ., G u p ta , P .D . 2 0 0 0 . p . 7 8 )
E s te
tip o
de
in v e s tig a c ió n
c o n lle v a
a
un
tra ta m ie n to
de
b a jo
c o s to ,
s ie n d o
una
a lte rn a tiv a
a s e q u ib le p a ra p a c ie n te s q u e s u fre n d e p ie d ia b é tic o , a y u d a n d o a c u m p lir c o n e l tra ta m ie n to s in
lle g a r a la n e c r o s is y p o r e n d e a l a m p u ta m ie n to , a d e m á s d e a p o rta r c o n e l d e s a rro llo d e n u e v a s
in v e s tig a c io n e s n a c io n a le s , s ie n d o la d ia b e te s m e llitu s u n o d e lo s p rin c ip a le s te m a s a tra ta r e n
c u a n t o a m a y o r e s d a t o s d e m o r t a l i d a d e n e l E c u a d o r . ( M S P . h ttp ://w w w .s a lu d .g o b .e c /d ia - m u n d ia l- d e - la d ia b e te s .h tm l)
2
C A P ÍT U L O
1
M A R C O T E Ó R IC O
1 .1
Es
I
D ia b e te s
una
e n fe rm e d a d
de
c a rá c te r m e ta b ó lic o , p ro c e s o
que
tra n s fo rm a
lo s a lim e n to s e n
e n e rg ía
p a ra e l n o rm a l fu n c io n a m ie n to d e n u e s tro c u e rp o h u m a n o .
C u a n d o lo s n iv e le s d e g lu c o s a 7 0 -1 1 0 m g /d L e n la s a n g re s e e n c u e n tra n p o r e n c im a , s e g e n e ra
la
d ia b e te s , e s to s e d e b e a q u e u n a h o rm o n a lla m a d a in s u lin a p ro v o c a u n fa llo in c re m e n ta n d o
lo s n iv e le s d e g lu c o s a e n la s a n g re , e n p a c ie n te s c o n e s ta e n fe rm e d a d , s e p u e d e n o b s e rv a r d o s
t i p o s d e f a l l a s : ( B a lk a n , B . 1 9 9 1 . p . 4 0 )

(T ip o I) L a p ro d u c c ió n d e in s u lin a n o e x is te o e s b a ja .

(T ip o II) L a in s u lin a p ro d u c id a n o e s u tiliz a d a c o rre c ta m e n te p o r la s c é lu la s d e l c u e rp o .
El
d ia g n ó s tic o
A m e ric a n a
(O M S ),
de
y
c la s ific a c ió n
D ia b e te s
donde
su
(A D A )
c la s ific a c ió n
p a ra
y
la
d ia b e te s
e l c o m ité
e s ta
asesor
m e d ia d a
fu e ro n
de
la
d e s a rro lla d o s
O rg a n iz a c ió n
d e p e n d ie n d o
de
su
por
La
A s o c ia c ió n
M u n d ia l d e
e tio lo g ía
y
la
S a lu d
c a ra c te rí s tic a s
f i s i o p a t o l ó g i c a s . ( F ig u e r o la , D . 2 0 0 9 . p . 1 9 3 3 )
1 .1 .1
C o m p lic a c io n e s C r ó n ic a s
L a d ia b e te s a l s e r u n a e n fe rm e d a d p ro g re s iv a p ro d u c e d a ñ o s a o tro s s is te m a s , lle g a n d o in c lu s o a
la
m u e rte
en
e l p a c ie n te
si no
son
tra ta d o s
a
tie m p o .
E n tre
la s
c o m p lic a c io n e s
m á s g ra v e s
e n c o n tra d a s te n e m o s :
1 .1 .1 .1
La
R e tin o p a tía s :
irrig a c ió n
de
lo s v a s o s s a n g u ín e o s q u e
se
p ro d u c e
o s c u re c im ie n to e n la v is ió n .
3
en
la
c ó rn e a e s d e te rio ra d a , g e n e ra n d o
1 .1 .1 .2
Se
P ie d ia b é tic o :
p ro d u c e
un
p ie
d ia b é tic o
cuando
e x is te
un
daño
en
lo s te jid o s c o m o
c o n s e c u e n c ia
de
la
d ia b e te s , p ro v o c a n d o la ú lc e ra e n la s e x tre m id a d e s in fe rio re s lle v a n d o a in fe c c io n e s , n e c ro s is y
en
el peor de
lo s c a s o s e l a m p u ta m ie n to
de
la
p a rte
a fe c ta d a . S e in c lu y e u n a h ip e rq u e ra to s is
p ro v o c a n d o d a ñ o ó s e o a n iv e l d e l ta ló n , o rig in a n d o u n a n e c ro s is s in e l d e b id o c u id a d o , to d o e llo
a
la
d ific u lta d
en
e l p r o c e s o d e c i c a t r i z a c i ó n e n p a c i e n t e s d i a b é t i c o s . ( P o r e ts k y , L . 2 0 0 8 . p . 3 7 8 ) ,
e x is te u n a c la s ific a c ió n d e lo s d is tin to s g ra d o s d e s e v e rid a d
d e l p ie d ia b é tic o c o m o s e m u e s tra
e n e l C u a d ro N °1 .
C U A D R O
N ° 1 -1 . C la s ific a c ió n d e lo s g ra d o s d e s e v e rid a d d e l p ie d ia b é tic o d e a c u e rd o c o n la
e s c a la d e W a g n e r.
P ie
G rado 0
en
rie s g o
por
p re s e n c ia
de
e n fe rm e d a d
v a s c u la r
p e rifé ric a ,
n e u ro p a tía ,
d e fo rm id a d e s o rto p é d ic a s , p é rd id a d e la v is ió n , n e fro p a tía , e d a d a v a n z a d a
G rado 1
U lc e ra s u p e rfic ia l
G rado 2
U lc e ra p ro fu n d a q u e lle g a a te n d ó n , lig a m e n to , a rtic u la c io n e s y /o h u e s o
G rado 3
In fe c c ió n lo c a liz a d a : c e lu litis , a b s c e s o , o s te o m ie litis
G rado 4
G a n g re n a lo c a l
G rado 5
G a n g re n a e x te n s a
F u e n te : A s o c i a c i ó n L a t i n o a m e ri c a n a d e l a D i a b e t e s .
E n tre lo s fa c to re s d e rie s g o c o m o c o n s e c u e n c ia d e la a s o c ia c ió n d e u n o o m á s a p a d e c e r d e p ie
d ia b é tic o te n e m o s :
•N e u ro p a tía p e rifé ric a
•In fe c c ió n
•E n fe rm e d a d v a s c u la r p e rifé ric a
•T ra u m a
•A lte ra c io n e s d e la b io m e c á n ic a d e l p ie
1 .1 .1 .3
La
H ip e r te n s ió n :
rig id e z
c a n tid a d
de
de
c o n s ig u ie n te
la s p a re d e s d e
g lu c o s a , lo g ra n d o
la
p re s ió n
lo s v a s o s s a n g u ín e o s s e
que
s a n g u ín e a
la
c irc u la c ió n
a u m e n ta
p ro d u c e
d e l to rre n te
p ro v o c a n d o
la
d e b id o
s a n g u ín e o
h ip e rte n s ió n
fa c to re s c o m o m a lo s h á b ito s a lim e n tic io s , s e d e n ta ris m o , e n tre o tro s .
4
a
la a c u m u la c ió n d e la
sea
m á s fo rz a d a , p o r
acom pañada
(T a m a y o , M . 2 0 1 4 . p . 2 5 )
de
o tro s
1 .2
C ic a tr iz a c ió n
E s u n p ro c e s o q u e s e p ro d u c e c u a n d o e x is te u n a h e rid a y a s e a u n c o rte , q u e m a d u ra , o a lg ú n tip o
de
le s ió n ,
con
p ro life ra c ió n
el
fin
de
re g e n e ra r
c e lu la r, d o n d e
se
lo s
lle v a
a
te jid o s
cabo
de
un
s in
la
p ie l m e d ia n te
n ú m e ro
d e
c é lu la s
e n c a rg a d a s
de
la
fe n ó m e n o s q u ím ic o s y fís ic o s ,
m e d i a d a p o r p r o t e í n a s s o l u b l e s ( c i t o s i n a s y f a c t o r e s d e c r e c i m i e n t o ) . ( S in g e r , A .J ., C la r k , R .A . 1 9 9 9 .
p. 738)
1 .2 .1
P r o c e s o s d e c ic a tr iz a c ió n
E n tre la s fa s e s o p ro c e s o s a d a rs e e n u n a c ic a triz a c ió n e n c o n tra m o s a lo s s ig u ie n te s :
1 .2 .1 .1
H e m o s ta s ia - F a s e a g u d a :
C u a n d o o c u rre u n a le s ió n y a s e a u n c o rte o u n a h e rid a s e o rig in a u n d a ñ o a n iv e l d e lo s v a s o s
s a n g u ín e o s
s e g u id o
de
la
p é rd id a
de
c é lu la s ,
p la s m a
y
fa c to re s
de
in te rs tic io .
En
e s ta
fa se
in te rv ie n e n lo s e le m e n to s c e lu la re s s a n g u ín e o s lo s c u a le s in ic ia n la c o a g u la c ió n p o r lo ta n to s e
fo rm a e l ta p ó h e m o s tá tic o , d o n d e a c tú a n la c a s c a d a d e lo s fa c to re s d e c o a g u la c ió n
y a g re g a c ió n
p l a q u e t a r i a . ( K ir s n e r , R ., E a g ls te in , W . 1 9 9 3 . p . 6 5 3 )
D a n d o lu g a r a la fo rm a c ió n d e l c o á g u lo , d o n d e la s p la q u e ta s ju e g a n u n p a p e l im p o rta n te e n la
s in te tiz a c ió n d e f a c to r e s d e c r e c im ie n to lo s c u a le s e s tim u la n la e p ite liz a c ió n . (S h a h , M ., F e rg u s o n ,
M .W .J . 1 9 9 5 . p . 1 0 8 )
1 .2 .1 .2
C é lu la s
F a s e in fla m a to r ia :
in m u n o ló g ic a s
com o
lo s
n e u tró filo s
m ig ra n
a
la
h e rid a ,
e s to s
son
a tra íd o s
por
m e c a n is m o s q u im io tá c tic o s , c o m o e l fa c to r q u e e s tim u la g ra n u lo c ito s , m a c ró fa g o s , e n tre o tro s ,
a s í l l e g a n d o a l a u m e n t o d e l c o m p l e j o d i m é r i c o , f a c i l i t a n d o a s u v e l a d i a p é d e s i s . ( L a r ja v a , H ., e t a l.
1993. p. 92)
E x is te
una
fa g o c ito s is
e n z im a s e s p e c ífic a s y
de
m ic ro o rg a n is m o s
ra d ic a le s lib re s d e
que
hayan
o x íg e n o , d o n d e
in g re s a d o
la
h e rid a ,
por
m e d io
de
c ie rto s n e u tró filo s s e d is e c a n c o n e l
t a p ó n h e m o s t á t i c o y o t r o s m u e r e n . ( X u , J ., C la r k , R . 1 9 9 6 . p . 2 3 9 )
5
a
F in a lm e n te ,
lo s
m o n o c ito s
se
tra n s fo rm a n
en
m a c ró fa g o s
u n ié n d o s e
a
p ro te ín a s
que
se
e n c u e n t r a n e n l a m a t r i z e x t r a c e l u l a r , o r i g i n a n d o l a f a g o c i t o s i s . ( V a a la m o , M ., e t a l. 1 9 9 7 . p . 1 0 9 )
1 .2 .1 .3
P r o life r a tiv a o d e G r a n u la c ió n :
E n e s ta fa s e lo s fib ro b la s to s s o n lo s e n c a rg a d o s d e la p ro d u c c ió n d e la m a triz d é rm ic a , lo g ra n d o
lle g a r a la h e rid a d e s d e m ú s c u lo , te n d ó n , tra n s p o rtá n d o s e h a c ia la m a triz la x a d e fib ro n e c tin a .
La
fa lta
de
o x íg e n o
en
la
le s ió n
p e rm ite
la
lib e r a c ió n
de
fa c to re s d e
c re c im ie n to
lo s c u a le s
e s t i m u l a n l a p r o l i f e r a c i ó n d e d i c h o s f i b r o b l a s t o s . ( D e tm a r , M ., e t a l. 1 9 9 7 . p . 1 0 8 )
La
m a triz
de
c o lá g e n o
se
fo rm a
de
la
m ig ra c ió n
de
lo s
fib ro b la s to s
lo s
c u a le s
d e p o s ita n
f i b r o n e c t i n a y á c i d o h i a l u r ó n i c o . ( C la r k , R .A .F ., e t a l. 1 9 9 0 . p p . 1 2 8 - 1 3 4 )
In te rv ie n e n c é lu la s p e rie n d o te lia le s e in te g rin a la s c u a le s a y u d a n e n la e s ta b ilid a d y fo rm a c ió n
de nuevos
1 .2 .1 .4
v a s o s s a n g u í n e o s . ( F o lk m a n , J . 1 9 9 7 . p . 7 9 )
F a s e d e E p ite liz a c ió n :
L o s q u e ra tin o c ito s c ie rra n la h e rid a m ig ra n d o h a c ia lo s b o rd e s d e la h e rid a , a s í e s ta p u e d e s e r
c e r r a d a , l l e g a n d o a r e e s t a b l e c e r l a b a r r e r a c u t á n e a . ( G a b b ia n i, G ., e t a l. 1 9 7 8 . p . 7 6 )
1 .2 .1 .5
La
F a s e d e r e m o d e la c ió n o d e c o n tr a c c ió n :
fib ro n e c tin a ,
in te rv ie n e n
en
á c id o
e s ta
fa se
h ia lu ró n ic o ,
lle g a n d o
a
p ro te o g lic a n o s
la
re p a ra c ió n
de
y
c o lá g e n o
la
p ro d u c id o s
por
e l fib ro b la s to
m is m a , a d e m á s d e s e r s o p o rte tis u la r,
t a n t o e l á c i d o h i a l u r ó n i c o c o m o l a f i b r o n e c t i n a s o n d e g r a d a d o s p o r e n z i m a s . ( T o o le , B P . 1 9 9 1 . p .
3 0 5 ).
F in a lm e n te , la a c tiv id a d c e lu la r s e v e d is m in u id a , tro n á n d o s e e l te jid o c o n ju n tiv o ric o e n
c o l á g e n o . L a d e r m i s a l c a n z a u n 7 0 % d e r e p a r a c i ó n d e l a l e s i ó n . ( M a c h e s n e y , M ., e t a l. 1 9 9 8 . p . 1 5 2 )
1 .3
En
C ic a tr iz a c ió n e n p ie d ia b é tic o
lo s
p ie s
el
p ro c e so
de
c ic a triz a c ió n
es
m ucho
m ás
le n to
d e b id o
a
la
lim ita c ió n
en
la
c irc u la c ió n . E n p a c ie n te s q u e p o s e e n p ie d ia b é tic o la c ic a triz a c ió n p o r lo g e n e ra l e s m u c h o m á s
le n ta
lo
que
no
o c u rre
con
p e rso n a s q u e
no
posean
d ic h a
p a to lo g ía , p o r to d o lo m e n c io n a d o
é s to s p a c ie n te s h a n lle g a d o a p e rd e r la p a rte a fe c ta d a d a d a p o r la a m p u ta c ió n q u e re q u ie re d ic h a
e n f e r m e d a d . ( B o y k o , E J ., e t a l. 1 9 9 9 . p . 2 2 )
6
E n p a c ie n te s c o n p ie d ia b é tic o q u e d is p o n g a n d e u n a u lc e ra s e o rig in a e n p rim e r lu g a r u n a fa s e
in fla m a to ria ,
la
cual
es
p ro p e n sa
a
fa c to re s
a g re s iv o s
e x te rn o s ,
com o
la
d is m in u c ió n
de
la
c a p a c id a d d e lib e ra c ió n d e fa c to re s d e c re c im ie n to , c ito s in a s , c a lid a d d e l e s ta d o d e g ra n u la c ió n ,
p ro d u c c ió n
de
c o lá g e n o ,
c é lu la s
de
re p a ra c ió n
y
lim p ie z a
lo g ra n d o
e l e n to rp e c im ie n to
de
la
re p a ra c ió n c e lu la r. A d e m á s , s e s u m a la M ic ro a n g io p a tía d ia b é tic a la c u a l re d u c e la c a p a c id a d d e
m ig ra c ió n
y
re p a ra c ió n
de
lo s te jid o s e n e l to rre n te s a n g u ín e o , d e b id o a la d e s tru c c ió n d e lo s
v a s o s s a n g u í n e o s d a d o p o r l a d i a b e t e s . ( M a la y , D .S ., e t a l. 2 0 0 6 . p . 4 5 )
La
e p ite liz a c ió n
se
e n c u e n tra
b lo q u e a d a
p o r la
c a re n c ia
de
fa c to re s d e
c re c im ie n to , c o m o
el
fa c to r d e c re c im ie n to d e lo s q u e ra tin o c ito s , e l d e p la q u e ta s y e l tip o d e in s u lin a . T o d o e s to e n
c o n ju n to fa v o re c e q u e e l c ie rre d e la s le s io n e s s e a e n fo rm a m á s le n ta d e lo d e s e a b le , q u e h a y a
m a y o r s u s c e p tib ilid a d p a ra d e s a rro lla r in fe c c io n e s , o c a s io n a d o a s u v e z p o r la fa lta d e re s p u e s ta
d e l o s n e u t r ó f i l o s . ( B r e m , H ., e t a l. 2 0 0 4 . p . 8 7 )
E n c o n c lu s ió n , lo s in c o n v e n ie n te s a l tra ta rs e d e c ic a triz a c ió n d e l p ie d ia b é tic o , s o n p o r la m a la
c irc u la c ió n s a n g u ín e a , s e n s ib ilid a d n e rv io s a d e te rio ra d e b id o a n e u ro p a tía s , lo q u e p re d is p o n e a
u n s in n ú m e ro d e a n o m a lía s lo c a le s , d e fic ie n te re s p u e s ta a n te lo s m ic ro o rg a n is m o s q u e c a u s e n
una
in fe c c ió n , d is m in u c ió n
en
la
v e lo c id a d
de
re p a ra c ió n c e lu la r y la d e b ilid a d e n lo s te jid o s
r e p a r a d o s e n c o m p a r a c i ó n a u n t e j i d o s a n o . ( A r m s tr o n g , D .G ., e t a l. 2 0 0 4 . p . 4 )
1 .4
J u s tic ia c h lo r o s ta c h y a
C U A D R O
N ° 2 -1 . T a x o n o m ía d e J u s tic ia c h lo r o s ta c h y a .
N o m b re C ie n tífic o
J u s tic ia c h lo r o s ta c h y a
R e in o
P la n ta e
P h y lu m
M a g n o lio p h y ta
C la s e
M a g n o lio p s id a
O rd e n
S c ro p h u la ria le s
F a m ilia
A c a n th a c e a e
G é n e ro
J u s tic ia
E p íte to E s p e c ífic o
C h lo ro s ta c h y a
A u to r E p íte to E s p e c ífic o
L e o n a rd
F u e n te : In s t i t u t o d e C i e n c i a s N a t u ra l e s U N A L , 2 0 0 7 .
E s c o n o c id a c o m o in s u lin a v e g e ta l e n la a m a z o n ia e c u a to ria n a , s u s h o ja s tie n e n fo rm a o v a la d a ,
n e rv io s d e ta lla d o s y
flo re s q u e
van
de
to n o
ro s a a n a ra n ja . H a s id o u tiliz a d a p o r p o b la c io n e s
p re h is p á n ic a s p a ra tra ta r p ro b le m a s d e d is e n te ría , a d e m á s d e p o s e e r p ro p ie d a d e s a lu c in ó g e n a s ,
7
s in
d e s c a rta r c o m o
tra ta m ie n to
p a ra
d e só rd e n e s d e
tip o
d i a b é t i c o . ( P o r e ts k y , L . 2 0 0 8 . p . 3 7 8 ) E n
d o s i s b a j a s s e l a e m p l e a e n a n e m i a e i n c l u s o p a r a f o r t i f i c a r e l s i s t e m a i n m u n e . ( B la c p m a , 2 0 0 1 . p .
95)
1 .4 .1
C o m p o s ic ió n Q u ím ic a y A c tiv id a d F a r m a c o ló g ic a
P osee
p ro p ie d a d e s
com o
la s
a n tic o n c e p tiv a s ,
s a p o n in a s
y
lig n a n o s .
a n tia rrítm ic a s
E x is te
ta m b ié n
y
a n tid e p re s iv a s
e s te ro le s ,
a c e ite s
a trib u ib le s
e s e n c ia le s
a
c o m p u e s to s
y
m u c íg a lo s .
c a rá c te r p u lm o n a r c o m o
n e u m o n ía s .
( S to ja n o n s k a , L . 2 0 0 5 . p . 7 4 8 )
Es
u tiliz a d a
en
fo rm a
(B L A C P M A , 2 0 0 1 . p . 9 5 )
d ia b e te s lle g a n d o
a
de
c o c c ió n
p a ra
e n fe rm e d a d e s d e
S in d e s c a rta r e l e m p le o d e e s ta e s p e c ie v e g e ta l e n tra ta m ie n to s c o m o la
fo rm a r u n e n te d e a te n c ió n e n lo s ú ltim o s tie m p o s , p o r e llo e l n o m b re d e
i n s u l i n a v e g e t a l . ( P a z m iñ o , C .O . 2 0 1 1 . p . 2 6 )
1 .5
P le c tr a n th u s a m b o in ic u s
C U A D R O
N ° 3 -1 . T a x o n o m ía d e P le c tr a n th u s a m b o in ic u s .
N o m b re C ie n tífic o
P le c tr a n th u s a m b o in ic u s
R e in o
P la n ta e
S u b re in o
T ra c h e o b io n ta
D iv is ió n
M a g n o lio p h y ta
C la s e
M a g n o lio p s id a
S u b c la s e
A s te rid a e
O rd e n
L a m ia le s
F a m ilia
L a m ia c e a e
S u b fa m ilia
N e p e to id e a e
G é n e ro
P le c tra n th u s
E p íte to E s p e c ífic o
P le c tr a n th u s a m b o in ic u s
F u e n te : In s t i t u t o d e C i e n c i a s N a t u ra l e s U N A L , 2 0 0 7 .
E s u n a e s p e c ie v e g e ta l in tro d u c id a e n e l E c u a d o r p o r lo s c o lo n o s , o riu n d a d e C u b a , e n c o n tra d a
e n c o n tin e n te s c o m o A s ia , Á fric a y A m é ric a L a tin a . T ie n e fo rm a d e a rb u s to c o n u n a a ltu ra d e 1
m e tro , d e h o ja s c o n s id e ra b le , c o n v e llo s id a d e s e n to d a s u s u p e rfic ie y ta llo d e lg a d o , c a re c e d e
flo re s . S u a ro m a e s c a ra c te rís tic o p o r e llo lle v a e l n o m b re c o m ú n . A p lic a d a p a ra c u ra r d o le n c ia s
com o
tra s to rn o s
e s to m a c a le s ,
e x p e c to ra n te ,
adem ás
(M e n é n d e z , R . 1 9 9 9 . p . 1 1 0 )
8
de
poseer
p ro p ie d a d e s
c ic a triz a n te s .
1 .5 .1
En
C o m p o s ic ió n Q u ím ic a y A c tiv id a d F a r m a c o ló g ic a
h o ja s
y
ta llo s
se
han
re a liz a d o
ensayos
fito q u ím ic o s
con
e ta n o l a l 3 0 %
p re s e n c ia d e a c e ite s e s e n c ia l, a z ú c a re s re d u c to re s , á c id o s trite rp é n ic o s y
e v id e n c ia n d o
la
f l a v o n o i d e s . ( T im o r , C .
1991. p. 63)
E l c a rv a c ro l e s u n c o m p o n e n te s e c u n d a rio q u e s e e n c u e n tra p rin c ip a lm e n te e n e l a c e ite e s e n c ia l
d e P le c tr a n th u s a m b o in ic u s , a trib u y é n d o s e le a c tiv id a d a n tim ic ro b ia n a y a n tiin fe c c io s a . E x is te n
m e ta b o lito s q u e s e le s a trib u y e p ro p ie d a d e s c u ra tiv a s e n
re s fria d o s , c o m o b ro n c o d ila ta d o re s , e n
a s m a , d o l o r e s c e f á l i c o s , a n t i i n f e c c i o s o y a n t i c o n v u l s i v a n t e . ( R o ig , J .T . 1 9 7 4 . p . 6 9 3 )
E n tre
lo s
c o m p o n e n te s
fla v ó n ic o s
te n e m o s : a p o g e n in a ,
lu te o lin a , q u e rc e tin a , ta x ifo lin a
en
su
m a y o r í a s i n d e s c a r t a r c r i s o e r i o l , c i r s i m a r i t i n a , s a l v i g e n i n a . ( B r ic s k o r n , C H . 1 9 7 9 . p . 9 0 )
1 .6
H ia lu r o n id a s a (E c 3 .2 .1 .3 5 )
E s ta e n z im a p o s e e u n a fó rm u la q u ím ic a in d e c ifra b le , s ie n d o u n fe rm e n to , s e la h a d e n o m in a d o
b a j o e l n o m b r e d e f a c t o r d e d i f u s i ó n o s p r e a d i n g . ( W a n g , H .J . e t a l. 2 0 0 2 . p . 2 2 )
S e e n c u e n tra e n u n s in n ú m e ro s e s itio s d e l o rg a n is m o h u m a n o , a n im a le s y e n lo s e x tra c to s d e
lo s d ife re n te s ó rg a n o s s itu a d o s e n e l p ro p io o rg a n is m o c o m o , h íg a d o , c e re b ro , ú te ro , p la c e n ta
p e rm itie n d o la d e s in te g ra c ió n d e l á c id o h ia lu ró n ic o p o r p a rte d e la h ia lu ro n id a s a . E n c o n trá n d o s e
en
m ayor
p ro p o rc ió n
en
lo s
te s tíc u lo s
de
m a m ífe ro s ,
en
e s p e c ia l e n
el sem en,
ya
que
lo s
e s p e rm a to z o id e s a l q u e re r fe c u n d a r e l ó v u lo , e s to s n e c e s ita n d is o lv e r la c u b ie rta d e e s te y a s í
p e r m i t i r l a p e n e t r a c i ó n , p r o c e s o m e d i a n t e e l c u a l s e s e g r e g a e s t a e n z i m a . ( G a r c ía L u d e ñ a , J .L . 1 9 5 8 .
p. 348)
D e lo s a n im a le s a e n c o n tra r la h ia lu ro n id a s a s e h a lla e n lo s v e n e n o s d e s e rp ie n te s , e n e s p e c ia l
de
lo s v ip é rid o s , in s e c to s , a ra ñ a s , m o lu s c o s , e n tre
o tro s , s in
b a c te ria s ta le s c o m o e s ta filo c o c o , n e u m o c o c o , C lo s tr id iu m
d e ja r a
un
la d o
su
p re s e n c ia
en
s p p , lo s m á s d e s ta c a d o s , s ie n d o lo s
c a u s a n te s d e in fe c c io n e s g e n e ra liz a d a s y a q u e a l p o s e e r e s ta e n z im a e s ta p e rm ite la d e g ra d a c ió n
d e l á c id o h ia lu ró n ic o y p o r e n d e p e rm ite n q u e la p e rm e a b ilid a d d e la m a triz e x tra c e lu la r s e v e
a f e c t a d a l o g r a n d o a s í s u p r o l i f e r a c i ó n a l o r g a n i s m o . ( G a r c ía L u d e ñ a , J .L . 1 9 5 8 . p . 3 4 8 )
S u o b te n c ió n s e d a p o r e x tra c c ió n d e te s tíc u lo s b o v in o s , s e g u id a d e u n a p u rific a c ió n , a l s e r u n a
e n z im a s e d e g ra d a a c o n d ic io n e s d e te m p e ra tu ra s a lta s (5 7 ° C ) y p H
9
< 4 y > 7 .5 . In a c tiv a d a p o r
ra y o s
X ,
lu z
u ltra v io le ta ,
e s p e c ie s
q u ím ic a s
com o
el yodo,
fo rm o l e n tre
o tra s ,
in s o lu b le
en
a l c o h o l y s o l u b l e e n a g u a . ( S ta n le y , J . 1 9 7 6 . p . 4 0 9 )
D e n tro
de
e n c u e n tra
lo s
el
c o m p o n e n te s
á c id o
h ia lu ro n id a s a
se
g lu c o s a m ín ic o s
que
h ia lu ró n ic o
descom pone
e n tre
el
c o n s titu y e n
de
en
a lto
la
peso
1
de
la
e x tra c e lu la r e n
m o le c u la r
fra g m e n to s
c a rb o n o
m a triz
de
b a jo
p o rc ió n
que
peso
al ser
te jid o s d e
d e g ra d a d o
m o le c u la r,
g lu c o s a m in a
y
a n im a le s s e
por
ro m p ie n d o
el
c a rb o n o
la
e n z im a
lo s
e n la c e
4
del
á c id o
h i a l u r ó n i c o , h e c h o q u e o c u r r e e n c o n d i c i o n e s i n f l a m a t o r i a s . ( W a n g , H .J . e t a l. 2 0 0 2 . p . 2 2 )
F IG U R A
N ° 1 -1 . F ó rm u la d e l á c id o h ia lu ró n ic o
F u e n t e : M e y e r , K .H . y F e l l i n g , J . 1 9 5 0 . p . 3 4 5
A l s e r u n m u c o p o lis a c á rid o e l á c id o h ia lu ró n ic o s e e n c u e n tra e s tre c h a m e n te re la c io n a d o c o n la
p e rm e a b ilid a d
del
s is te m a
de
irrig a c ió n
s ie n d o
c o rre s p o n s a b le
de
p ro c e so s
in fla m a to rio s
y
a lé rg ic o s . (K a k e g a w a , H . 1 9 8 5 . p . 3 3 )
C u a n d o u n te jid o s u fre u n d a ñ o , e s te e s p ro p e n s o a p a d e c e r d e a lg u n a in fe c c ió n , la in fla m a c ió n
p re v ie n e
que
e s to
q u ím ic o -fís ic o
b ra d iq u in in a
y
suceda.
in fe c c io s o ,
s e ro to n in a .
( G u y to n ,
se
A .
lib e ra n
( G a r c ía
1974 .
p.
156)
s u s ta n c ia s
Ludeña,
J .L .
En
la
le s ió n
m e d ia d o ra s
1958.
p.
348)
com o
p ro v o c a d a
p o r a lg ú n
a g e n te
p ro s ta g la n d in a s , h is ta m in a ,
P ro d u c ie n d o
un
in c re m e n to
de
la
p e r m e a b i l i d a d d e l o s v a s o s s a n g u í n e o s y p o r e n d e s u d i l a t a c i ó n . ( S ta n le y , J . 1 9 7 6 . p . 4 0 9 )
1 .7
Se
V e n e n o d e c o b r a (N a ja n a ja )
conocen
c o b ra
de
c e rc a
de
300
e s p e c ie s d e
s e rp ie n te s v e n e n o s a s , e n tre la s c u a le s e n c o n tra m o s a la
a n te o jo s (N a ja n a ja ) p e rte n e c ie n te a la fa m ilia d e la s E la p id e a e , e s te tip o d e fa m ilia
p o s e e u n v e n e n o c o n u n a p o te n te n e u ro to x in a , la c u a l a c tú a e n la p a r á lis is d e
p o s te rio r
e s tá n
p a ro
fo rm a d o s
c a rd io re s p ira to rio .
por
p o lip é p tid o s
L o s c o m p o n e n te s
que
in c lu y e n
que
se
e n c u e n tra n
to x in a s , p é p tid o s y
10
en
lo s m ú s c u lo s y
el veneno
unas 20
de
c o b ra
e n z im a s d is tin ta s ,
c o m o la h ia lu ro n id a s a
g e n e ra n d o lis is
y a u m e n ta n d o la p ro p a g a c ió n d e l v e n e n o e n
la p re s a .
( K a r a llie d d e , L . 1 9 9 5 . p . 7 4 )
E x is te n
dos
tip o s d e
a lfa -n e u ro to x in a s ,
p o rc ió n
que
te rm in a l o
o rig in a n
n ic o tín ic o
un
e s ta d io
fo rm a d o
m e c a n is m o s e n
se
e l c u a d ro
c a ra c te riz a n
por
n e u ro tó x ic o , e l p re s in á p tic o
e l b lo q u e a m ie n to
p o r b e ta -n e u ro to x in a s la s c u a le s v a c ía n
in ic ia l,
por
la s
lle g a n d o
a lfa
y
a
la
de
lo s
k -n e u ro to x in a s c o rre s p o n d e
11
de
p o ta s io
de
por
la
la s v e s íc u la s d e a c e tilc o lin a , e s ta s
p a rá lis is fa c ia l, e l b lo q u e o
m u e r t e d e l s e r v i v o . ( T s e tlin , V ., H u c h o , F . 2 0 0 4 . p . 5 5 7 )
c a n a le s
e s p ro d u c id o
irre v e rs ib le
a l p o s ts in á p tic o
d e l re c e p to r
p ro v o c a n d o
la
C A P IT U L O
2
II
M A R C O M E T O D O L Ó G IC O
2 .1
P a r te E x p e r im e n ta l
2 .1 .1
E s te
S itio D e I n v e s tig a c ió n
e s tu d io
F a c u lta d
de
se
lle v ó
a
C ie n c ia s
cabo
de
la
en
e l L a b o ra to rio
E s c u e la
de
S u p e r io r
F ito fa rm a c ia
P o lité c n ic a
de
y
A n á lis is In s tru m e n ta l d e
C h im b o ra z o
u b ic a d a
en
la
la
P a n a m e ric a n a S u r, k m 1 ½ c o rre s p o n d ie n te a la c iu d a d d e R io b a m b a , P ro v in c ia d e C h im b o ra z o .
2 .1 .2
La
M a te r ia P r im a
re c o le c c ió n
de
la s
h o ja s
de
in s u lin a
v e g e ta l
(J u s tic ia
c h lo r o s ta c h y a )
se
la
re a liz ó
en
la
p ro v in c ia d e S a n to D o m in g o d e lo s T s á c h ila s , p a rro q u ia A llu riq u ín , b a rrio S a n M ig u e l K m . 2 4
v ía Q u ito , c o n u n a te m p e ra tu ra c o n s ta n te d e 2 3 ° C , d e h u m e d a d 7 5 % y p o r c o n s ig u ie n te ta m b ié n
s e re a liz ó la re c o le c c ió n d e la s h o ja s d e l o ré g a n o o re jó n (P le c tr a n th u s a m b o in ic u s ) e n la m is m a
p ro v in c ia , p a rro q u ia S a n to D o m in g o , b a rrio la a u ro ra , a u n a te m p e ra tu ra c o n s ta n te d e 2 3 ° C , d e
h u m e d a d d e 7 5 % . P o s te rio rm e n te s e re a liz ó e l s e c a d o d e lo s d o s tip o s d e e s p e c ie s v e g e ta le s e n
u n a e s tu fa a u n a te m p e ra tu ra d e 6 5 ° C p o r 7 2 h o ra s , s e g u id o d e s u re s p e c tiv a tritu ra c ió n p a ra lo s
d ife re n te s a n á lis is fís ic o -q u ím ic o s .
2 .1 .3
2 .1 .3 .1
M a te r ia le s , r e a c tiv o s y e q u ip o s
M a te r ia le s

V a s o s d e p re c ip ita c ió n d e 5 0 m L , 2 5 0 m L y 5 0 0 m L

E s p á tu la

B a lo n e s a fo ra d o s d e 1 0 m L , 2 5 m L , 5 0 m L y 1 0 0 m L

R e frig e ra n te d e b o la s

M a n g u e ra s

P in z a s p a ra s o p o rte u n iv e rs a l

P in z a s p a ra c á p s u la d e p o rc e la n a

T ubos de ensayo

G ra d illa s
12

C á p s u la s d e p o rc e la n a

B a lo n e s e s m e rila d o s d e 2 5 0 y 5 0 0 m L

P ip e ta s a u to m á tic a s g ra d u a d a d e 1 u L -1 0 0 0 u L

E x tra c to r s o x h le t

F ra s c o s c o lo r á m b a r

J e rin g u illa s d e 3 m L

P u n ta s a m a rilla s y a z u le s

P a p e l filtro

E m b u d o d e s e p a ra c ió n

Em budo

G u a n te s d e m a n e jo

M a s c a rilla s d e s c a rta b le s

P in z a s p a ra tu b o s

P e ra d e s u c c ió n

M a tra c e s

P a p e l a lu m in io

P ro b e ta s
2 .1 .3 .2
E q u ip o s

E s tu fa

R e v e rb e ro

A g ita d o r

M u fla

B a la n z a a n a lític a

p H -m e tro

C e n trifu g a

D esecador

R o ta v a p o r

B o m b a a l v a c ío

E s p e c tro fo tó m e tro U V H e λ io s - β
2 .1 .3 .3
R e a c tiv o s

A g u a d e s tila d a y b id e s tila d a

M e ta n o l
13

E ta n o l

D im e tils u lfó x id o 5 %

C lo ru ro d e c a lc io 1 2 .5 m M

A c e ta to d e e tilo

Á c id o c lo rh íd ric o 1 0 N y 1 %

A c e ta to d e s o d io 0 .1 M

H id ró x id o d e s o d io 0 .4 M

Á c id o a c é tic o 0 .1 M

B o ra to d e s o d io 0 .2 M

C lo ru ro d e s o d io 0 .9 %

p -d im e tila m in o b e n z a ld e h íd o

h ia lu ro n id a s a b o v in a (7 9 0 0 u n id a d e s /m L )

h ia lu ro n a to d e s o d io

á c id o h ia lu ró n ic o

v e n e n o d e c o b ra

R e a c tiv o d e D ra g e n d o rff

R e a c tiv o d e W a g n e r

R e a c tiv o d e M a y e r

C lo ru ro fé rric o 5 %

M a g n e s io m e tá lic o

R e a c tiv o d e B a lje t

R e a c tiv o d e F e h lin g

A lc o h o l a m ílic o

A n h íd rid o a c é tic o

C lo ru ro d e s o d io p o lv o

S o lu c ió n d e n in h id rin a 5 %
2 .2
y 0 .2 M
0 .1 5 M
T é c n ic a s
2 .2 .1
C o n tr o l d e c a lid a d d e la m a te r ia p r im a
2 .2 .1 .1
Se
y 0 .2 M
re a liz a
p o rc e la n a
D e te r m in a c ió n d e h u m e d a d
m e d ia n te
debe
e s ta r
m é to d o
ta ra d a
g ra v im é tric o , s e
por
3
horas
m u e s tra p o r 3 h o ra s e n la e s tu fa a 1 0 5 ° C
a
to m a
3 7 °C ,
2g
por
de
m u e s tra
y
se
añade
a la c á p s u la d e
c o n s ig u ie n te
se
p ro c e d e
a
s o m e te r
la
c o n e l fin d e e lim in a r e l a g u a q u e s e e n c u e n tra e n la
14
m u e s tra . L u e g o s e c o lo c a e n u n d e s e c a d o r h a s ta q u e s e e n fríe la m u e s tra p a ra s u p o s te rio r p e s o
e n l a b a l a n z a a n a l í t i c a , o b t e n i é n d o s e u n p e s o c o n s t a n t e . ( M ir a n d a , M a r th a . 1 9 9 2 . p . 3 2 )
C á lc u lo :
(M
%
   =
− M
2
(M
1
1
)
− M )
x 100
D ónde:
M
2
= p e s o d e la c á p s u la c o n la m u e s tra
M
1
= p e s o d e la c á p s u la c o n la m u e s tra d e s e c a d a
M
= p e s o d e la c á p s u la v a c ía ta ra d a
2 .2 .1 .2
D e te r m in a c ió n d e c e n iz a s to ta le s
S e lo re a liz a m e d ia n te m é to d o g ra v im é tric o , s e to m a 2 g d e la m u e s tra y s e c o lo c a s e u n c ris o l
ta ra d o p re v ia m e n te , a n te s s e s o m e te a c a rb o n iz a r la m u e s tra p e rm itie n d o la e lim in a c ió n d e to d o
re s id u o
o rg á n ic o ,
s e g u id o
se
c o lo c a
en
la
m u fla
por
2
h o ra s
a
una
te m p e ra tu ra
de
6 0 0 °C ,
lle g a n d o a o b te n e r u n p o lv o d e c o lo r b la n q u e c in o , s e e n fría tra n s c u rrid o u n a v e z q u e tra n s c u rra
e l t i e m p o e s p e r a d o y s e p e s a h a s t a v a l o r c o n s t a n t e . ( M ir a n d a , M a r th a . 1 9 9 2 . p . 3 2 )
C á lc u lo :
(M
%
      =
(M
D ónde:
M
2
= p e s o d e l c ris o l c o n la c e n iz a
M
1
= p e s o d e l c ris o l c o n la m u e s tra
M
= p e s o d e l c ris o l v a c ío
15
− M
2
1
1
)
− M )
x 100
2 .2 .2
E n s a y o fito q u ím ic o
F IG U R A
N ° 1 -2 . D ia g ra m a d e o b te n c ió n d e m e ta b o lito s s e c u n d a rio s .
F u e n te : M IR A N D A , M . F a rm a c o g n o s i a y p ro d u c t o s n a t u ra l e s , 2 0 1 1 . p . 6 2
2 .2 .2 .1
E n s a y o d e D r a g e n d o r ff
E s te e n s a y o s irv e p a ra e v id e n c ia r la p re s e n c ia d e a lc a lo id e s . L a m u e s tra u n a v e z s e c a s e p ro c e d e
a
d is o lv e r e n
á c id o
c lo rh íd ric o
1% , se
c a lie n ta
p a u la tin a m e n te
y
se
e n fría , a
c o n tin u a c ió n s e
a ñ a d e 3 g o ta s d e l re a c tiv o d e D ra g e n d o rff y s e a g ita v ig o ro s a m e n t e , lo s re s u lta d o p u e d e n s e r (+ )
o p a l e s c e n c i a , ( + + ) t u r b i d e z d e f i n i d a , ( + + + ) p r e c i p i t a d o . ( M ir a n d a , M . 2 0 0 6 . p . 3 9 )
2 .2 .2 .2
E nsayo de M ayer
A l ig u a l q u e
e l e n s a y o a n te rio r n o s s irv e p a ra
o b s e rv a r la p re s e n c ia d e a lc a lo id e s , p ro c e d e d e
ig u a l m a n e ra s e a ñ a d e 1 g o ta d e c lo ru ro d e s o d io e n p o lv o , a c o n tin u a c ió n s e a g ita y s e filtra , s e
a g re g a
3
d e fin id a ,
g o ta s d e l re a c tiv o e n c u e s tió n , e ig u a l s e o b s e rv a : (+ )
( + + + ) p r e c i p i t a d o . ( M ir a n d a , M . 2 0 0 6 . p . 3 9 )
16
o p a le s c e n c ia ,
(+ + )
tu rb id e z
2 .2 .2 .3
E nsayo de W agner
Ig u a l a l m é to d o d e D ra g e n d o rff, s e a ñ a d e 2 g o ta s d e l re a c tiv o d e W a g n e r y s e o b s e rv a e l m is m o
r e p o r t e q u e l o s a n t e r i o r e s m e n c i o n a d o s . ( M ir a n d a , M . 2 0 0 6 . p . 3 9 )
2 .2 .2 .4
E n s a y o d e L ie b e r m a n - B u c h a r d
S e p u e d e e v id e n c ia r la p re s e n c ia d e c o m p o n e n te s d e tip o te rp é n ic o s . L a m u e s tra e s e v a p o ra d a y
se
d is u e lv e
en
c lo ro fo rm o ,
p o s te rio r h o m o g e n iz a c ió n .
s e g u id o
de
la
a ñ a d ic ió n
de
1m L
L a s c o lo ra c io n e s re p o rta d a s p u e d e n
de
a n h íd rid o
a c é tic o
p a ra
su
s e r: ro s a d o - a z u l m u y rá p id o ,
v e r d e i n t e n s o - v i s i b l e m e d i o r á p i d o , v e r d e o s c u r o - n e g r o , f i n a l d e l a r e a c c i ó n . ( M ir a n d a , M . 2 0 0 6 . p .
39)
2 .2 .2 .5
E n s a y o d e B a lje t
E s te m é to d o s irv e p a ra d e te rm in a r la p re s e n c ia d e c o m p o n e n te s c u m a rín ic o s . S e s e c a la m u e s tra
y
se
d is u e lv e
en
e ta n o l, s e
añade
1m L
d e l re a c tiv o d e B a lje t y s e re p o rta ro jo s i e s p o s itiv o .
( M ir a n d a , M . 2 0 0 6 . p . 3 9 )
2 .2 .2 .6
A
E n sa y o d e S u d á n III
1 m L d e la m u e s tra s e le a g re g a 1 m L d e l re a c tiv o d e S u d á n III, s e s o m e te a b a ñ o M a ría h a s ta
que
el
s o lv e n te
se
e v a p o re .
La
p re s e n c ia
de
g o tita s
g ra sa s
o
una
p e l íc u la
ro ja
in d ic a
c o m p o n e n t e s g r a s o s . ( M ir a n d a , M . 2 0 0 6 . p . 3 9 )
2 .2 .2 .7
S irv e
E n s a y o d e B o r n tr a g e r
p a ra
d e te rm in a r la
a p a ric ió n
c lo ro fo rm o , s e a ñ a d e 1 m L
de
q u in o n a s . L a
m u e s tra
s e s e c a y s e d is u e lv e e n 1 m L
de
d e c a l s o d a d a a l 5 % , s i e l c o lo r c a m b ia d e ro s a d o a ro jo la re a c c ió n
e s p o s i t i v a . ( M ir a n d a , M . 2 0 0 6 . p . 3 9 )
2 .2 .2 .8
E n s a y o d e c a te q u in a
E n u n c a p ila r la m u e s tra e s lle n a d a , s e c o lo c a u n a g o ta e n p a p e l filtro , y s e a ñ a d e c a rb o n a to d e
s o d io ,
el
c o lo r
v e rd e
b rilla n te
in d ic a
que
la
c a t e q u i n a . ( M ir a n d a , M . 2 0 0 6 . p . 3 9 )
17
re a c c ió n
es
p o s itiv a
p a ra
d e te rm in a c ió n
de
2 .2 .2 .9
Se
E n s a y o d e s a p o n in a s
s o m e te
a
d ilu c ió n
la
m u e s tra
h a s ta
c in c o
veces su
v o lu m e n
e s d e c ir s i s e
to m a
1m L
del
e x tra c to s e d e b e ría d ilu ir 5 m L c o n la d ilu c ió n , s e a g ita y s e o b s e rv a , la a p a ric ió n d e e s p u m a p o r
m á s d e 2 m i n u t o s i n d i c a q u e l a r e a c c i ó n e s p o s i t i v a . ( M ir a n d a , M . 2 0 0 6 . p . 3 9 )
2 .2 .2 .1 0
E n s a y o d e c lo r u r o fé r r ic o
Se
unas
añade
g o ta s
de
tric lo ru ro
fé rric o
5%
a
la
m u e s tra , e l c o lo r ro jo
in d ic a
que
e x is te n
c o m p o n e n t e s f e n ó l i c o s . ( M ir a n d a , M . 2 0 0 6 . p . 3 9 )
2 .2 .2 .1 1
E n s a y o d e S h in o d a
1 m L d e á c id o c lo rh íd ric o e s a ñ a d id o a l e x tra c to , s e c o lo c a c in ta d e m a g n e s io , s e e s p e ra u n la p s o
de
c in c o
ensayo
se
a m a rillo ,
m in u to s y
e v id e n c ia
com o
se
añade
dos
n a ra n ja
fa se s
y
1m L
la
ro jo
de
una
a lc o h o l a m ílic o , s e
es
in te n s o ,
a lc o h ó lic a
e s ta
donde
c o lo ra c ió n
a g ita
y
re p o sa
lo s c o lo re s
es
la
m u e s tra . E n
pueden
c a ra c te rís tic o s
e s te
a p a re c e r ta n to
de
c o m p u e s to s
f l a v ó n i c o s . ( M ir a n d a , M . 2 0 0 6 . p . 3 9 )
2 .2 .3
P r e p a r a c ió n d e lo s e x tr a c to s d e J u s tic ia c h lo r o s ta c h y a y P le c tr a n th u s a m b o in ic u s
S e re a liz a la e la b o ra c ió n d e lo s e x tra c to s d e la s p la n ta s d e a c u e rd o a lo s s ig u ie n te s d ia g ra m a s d e
flu jo , te n ie n d o e n c o n s id e ra c ió n q u e la p a rte a é re a e s la u tiliz a d a p a ra lo s fin e s d e s e a d o s .
18
F IG U R A
N ° 2 -2 . D ia g ra m a d e flu jo p a ra la o b te n c ió n d e e x tra c to d e J u s tic ia c h lo ro s ta c h y a .
F u e n te : M O N G E , D i e g o . 2 0 1 5
19
F IG U R A
N ° 3 -2 . D ia g ra m a d e flu jo p a ra o b te n c ió n d e e x tra c to s d e P le c tra n th u s a m b o in ic u s
F u e n te : M O N G E , D i e g o . 2 0 1 5
20
2 .2 .4
D e te r m in a c i ó n
d e la in h ib ic ió n
d e h ia lu r o n i d a s a .
P a ra la e v a lu a c ió n d e la a c tiv id a d in h ib ito ria d e la h ia lu ro n id a s a s e u tiliz a rá n d o s e s tu d io s :
2 .2 .4 .1
P a ra
la
In h ib ic ió n d e h ia lu r o n id a s a
m e d ic ió n
de
la
c a n tid a d
de
N -a c e tilg lu c o s a m in a
lib e ra d a
d e l h ia lu ro n a to
de
s o d io
se
re a liz a n lo s s ig u ie n te s p a s o s :

T o m a r 5 0 u L d e h ia lu ro n id a s a b o v in a , la c u a l e s d is u e lta e n b u ffe r a c e ta to 0 ,1 M

La
s o lu c ió n
es
c o n c e n tra c io n e s
d is u e lto s
en
m e z c la d a
de
con
0 .0 0 5 g /m L ,
d im e tils u lfó x id o
50
uL
de
0 .0 1 g /m L
al 5% .
y
lo s
fra c c io n e s
0 .0 2 g /m L
E l g ru p o
de
c o n tro l fu e
fla v ó n ic a s
cada
tip o
tra ta d o
de
con
en
(p H = 3 .6 ).
d ife re n te s
e s p e c ie
50
uL
v e g e ta l
al 5%
de
d im e tils u lfó x id o . E s ta m e z c la s e s o m e te a in c u b a c ió n a p o r 2 0 m in u to s a 3 7 ° C , tra n s c u rrid o
e s e tie m p o lu e g o s e a g re g a 5 0 u L d e c lo ru ro d e c a lc io (1 2 ,5 m M ) p a ra a c tiv a r la e n z im a y s e
d e ja in c u b a r p o r 2 0 m in u to s m á s a la m is m a te m p e ra tu ra .

A l té rm in o d e l tie m p o s e a g re g a 2 5 0 u L
d e h ia lu ro n a to d e s o d io (1 ,2 m g /m L ) y s e in c u b a
d u ra n te 4 0 m in u to s m á s a 3 7 ° C . L u e g o d e la in c u b a c ió n la m e z c la e s tra ta d a c o n 5 0 u L d e
N aO H
baño
0 ,4 M
de
y d e 1 0 0 u L 0 .2 M
agua
h irv ie n d o ,
d im e tila m in o b e n z a ld e h id o
de H C l 10N
se
(4g
d e b o ra to d e s o d io , s o m e tid a la m e z c la
d e ja
de
e n fria r
y
p o s te rio rm e n te
p -d im e tila m in o b e n z a ld e h id o
se
p o r 3 m in u to s e n u n
a g re g a
fu e ro n
1 ,5
m L
d is u e lto s e n
de
50
c o n 3 5 0 m L d e á c id o a c é tic o g la c ia l) y s e in c u b a p o r 2 0 m in u to s a 3 7 ° C
d e s a rro lla r c o lo r. L a a b s o rb a n c ia e s m e d i d a a 5 8 5 n m
E x p re s á n d o s e e s te e fe c to r in h ib id o r d e la s ig u ie n te m a n e ra :
 .      −  .    
 .    
21
m L
h a s ta
e n u n e s p e c tro fo tó m e tro , m id ie n d o la
c a n tid a d d e N - a c e tilg lu c o s a m in a lib e r a d a (S h a s ra b u d h e , A ., D e o d h a r, M . 2 0 1 0 . p . 2 9 9 )
   ó  (% ) = (
p -
)   
T A B L A
N ° 1 -2 . E s q u e m a d e tra ta m ie n to s d e a c u e rd o a c a d a e s p e c ie v e g e ta l p a ra la in h ib ic ió n
d e h ia lu ro n id a s a .
T R A T A M IE N T O S
R E A C T IV O S
B u ffe r
H ia lu r o
C aC L
p H :3 .6
n id a s a
1 2 .5 m M
2
H ia lu r o
N aO H
n a to
y
s o d io
X
B L A N C O
C O N T R O L
X
de
N A
0 .4 M
2
B 4O
p -D M A B
7
0 .2 M
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
M A X IM A
A C T IV ID A D
P le c tr a n th u s
a m b o in ic u s
(0 .0 0 5 g /m L )
e x tr a c to fla v ó n ic o
P le c tr a n th u s
a m b o in ic u s
(0 .0 1 g /m L )
e x tr a c to
fla v ó n ic o
P le c tr a n th u s
a m b o in ic u s
(0 .0 2 g /m L )
e x tr a c to
fla v ó n ic o
J u s tic ia
c h lo r o s ta c h y a
(0 .0 0 5 g /m L )
e x tr a c to fla v ó n ic o
J u s tic ia
c h lo r o s ta c h y a
(0 .0 1 g /m L )
e x tr a c to
fla v ó n ic o
J u s tic ia
c h lo r o s ta c h y a
(0 .0 2 g /m L )
e x tr a c to
fla v ó n ic o
F u e n te : M O N G E , D i e g o . 2 0 1 5
22
2 .2 .4 .2

V e n e n o d e C o b r a (N a ja n a ja )
1 0 0 u g d e v e n e n o d e c o b ra fu e ro n d is u e lto s e n 2 0 u L d e s o lu c ió n s a lin a e in c u b a d o a 3 7 ° C
con
50
ug
de
á c id o
h ia lu ró n ic o
c o n te n id o s e n 0 .1 5 N
en
250
uL
(0 .2
M )
d is u e lta
en
b u ffe r a c e ta to
(p H
5 .0 )
d e c lo ru ro d e s o d io . L a a b s o rb a n c ia d e d ic h a m e z c la fu e m e d id a a 5 8 5
nm .

L as
fra c c io n e s
a n te rio r,
es
fla v ó n ic a s
d e c ir
en
de
cada
tip o
d im e tils u lfó x id o
de
al
p la n ta
5% ,
han
p a ra
su
s id o
d is u e lta s
p o s te rio r
com o
ensayo.
La
en
la
té c n ic a
a c tiv id a d
es
e x p r e s a d a c o m o n m o l e s d e N - a c e t y l g l u c o s a m i n a l i b e r a d a / m i n u t o / m g d e p r o t e í n a . ( M a c h ia d ,
D . e t a l. 2 0 0 6 . p . 1 5 8 )
T A B L A
N ° 2 -2 . E s q u e m a d e tra ta m ie n to s d e a c u e rd o a c a d a e s p e c ie v e g e ta l e n la in h ib ic ió n d e l
v e n e n o d e c o b ra (N a ja n a ja ).
T R A T A M IE N T O S
R E A C T IV O S
B u ffe r p H :5 .0
V eneno de cobra
Á c id o h ia lu r ó n ic o
M Á X IM A
X
X
a m b o in ic u s
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
X
B L A N C O
C O N T R O L
A C T IV ID A D
P le c tr a n th u s
(0 .0 0 5 g /m L )
e x tr a c to fla v ó n ic o
P le c tr a n th u s
(0 .0 1 g /m L )
a m b o in ic u s
e x tr a c to fla v ó n ic o
P le c tr a n th u s
(0 .0 2 g /m L )
a m b o in ic u s
e x tr a c to fla v ó n ic o
J u s tic ia
c h lo r o s ta c h y a
(0 .0 0 5 g /m L ) e x tr a c to fla v ó n ic o
J u s tic ia c h lo r o s ta c h y a (0 .0 1 g /m L )
e x tr a c to fla v ó n ic o
(J u s tic ia
c h lo r o s ta c h y a
(0 .0 2 g /m L ) e x tr a c to fla v ó n ic o
F u e n te : M O N G E , D i e g o . 2 0 1 5
23
C A P IT U L O
3
M A R C O D E R E S U L T A D O S , D IS C U S IÓ N
3 .1
Y A N Á L IS IS D E R E S U L T A D O S
R e s u lta d o s y D is c u s io n e s
3 .1 .1
Se
III
C o n tr o l d e c a lid a d d e la m a te r ia p r im a
to m ó
N o rm a s
com o
re fe re n c ia
R a m a le s
p a ra
la
G u ía
D ro g a s
de
F a rm a c o g n o s ia
c ru d a s,
e x tra c to s
y
y
P ro d u c to s
tin tu ra s .
N a tu ra le s
(N R S P
309,
y
311
en
y
base
312)
a
la s
p a ra
la
o b te n c ió n d e lo s e x tra c to s a in v e s tig a r. T o m a n d o e n c u e n ta la s d e te rm in a d a s a n te s y a d e s c rita s .
A c o n tin u a c ió n s e p re s e n ta n lo s re s u lta d o s o b te n id o s :
T A B L A
N ° 1 -3 . C o n tro l d e c a lid a d d e la s d ife re n te s e s p e c ia le s in v e s tig a d a s .
A N Á L IS IS
J u s tic ia
P le c tr a n th u s
R angos
d e n tr o
E FE C T U A D O S
c h lo r o s ta c h y a
a m b o in ic u s
a c e p ta r
(R e a l
del
lím ite
a
F arm acopea
E s p a ñ o la 2 0 0 2 )
C E N IZ A S (% )
4 .5 %
4%
5%
H U M E D A D
1 3 .2 %
11%
14%
(% )
F u e n te : M O N G E , D i e g o . 2 0 1 5
En
la
T a b la
N °
c h lo r o s ta c h y a
fu e
e n c u e n tra n
T a m b ié n
d e n tro
podem os
c o rre s p o n d ie n te
a
1 -3
el de
de
podem os
o b se rv a n
1 3 .2 %
p a ra
lo
y
e s ta b le c id o
e v id e n c ia r
J u s tic ia
que
o
el
que
el
p o rc e n ta je
de
hum edad
P le c tr a n th u s
a m b o in ic u s
fu e
de
n o rm a d o
p o rc e n ta je
c h lo r o s ta c h y a
y
por
de
la
R eal
P le c tr a n th u s
to ta le s
a m b o in ic u s
J u s tic ia
1 1 % , v a lo re s q u e
F a rm a c o p e a
c e n iz a s
p a ra
fu e
E s p a ñ o la
de
se
(2 0 0 2 ).
4 .5 %
re s p e c tiv a m e n te ,
y
4%
d a to s
a c o rd e a lo s e s ta b le c id o p o r e l e n te re g u la d o r.
A
to d o
e llo ,
podem os
d e c ir
que
lo s
v a lo re s
ta n to
de
hum edad
com o
lo s
de
c e n iz a s
to ta le s
o b te n id o s e n lo s d ife re n te s a n á lis is d e la s d ife re n te s p la n ta s s e e n c u e n tra n d e n tro d e lo s lím ite s
p e rm itid o s , p re s e n ta n d o p ro p o rc io n e s re la tiv a m e n te b a ja s e n lo re fe re n te a m in e ra le s , lo s c u a le s
n o p r o d u c i r í a n i m p e d i m e n t o e n l a p r e p a r a c i ó n d e l o s e x t r a c t o s a o b t e n e r . ( B r u n e n to n , J . 2 0 0 1 . p . 5 9 )
24
3 .1 .2
T a m iz a je F ito q u ím ic o
T o m a n d o c o m o r e f e r e n c i a l a b i b l i o g r a f í a ( M ir a n d a , M . 2 0 0 6 . p . 3 9 ) s e r e a l i z ó e l a n á l i s i s f i t o q u í m i c o .
L o s re s u lta d o s a lc a n z a d o s fu e ro n lo s s ig u ie n te s :
T A B L A
N °2 -3 .
P le c tr a n th u s
T a m iz a je
fito q u ím ic o
de
lo s
e x tra c to s
de
J u s tic ia
c h lo r o s ta c h y a . Y
a m b o in ic u s .
M é to d o r e a liz a d o
R e s u lta d o
R e s u lta d o
C o m p u e s to s id e n tific a d o s
J u s tic ia
P le c tr a n th u s
c h lo r o s ta c h y a
a m b o in ic u s
D r a g e n d o r ff
-
-
A lc a lo id e s
M ayer
-
-
A lc a lo id e s
W agner
-
-
A lc a lo id e s
L ie b e r m a n -B u c h a r d
-
-
C o m p u e s to s te rp é n ic o s
B a lje t
-
++
C u m a rin a s
S u d an III
+
+
G ra sa s
B o r n tr a g e r
++
++
Q u in o n a s
C a te q u in a
+
+
C a te q u in a s
A n to c ia n id in a s
+++
++
A n to c ia n id in a s
E sp u m a
-
-
S a p o n in a s
T r ic lo r u r o fé r r ic o
+++
+++
C o m p u e s to s fe n ó lic o s
S h in o d a
+++
+++
F la v o n o id e s
R e s in a s
-
+
R e s in a s
F e h lin g
-
+
A z ú c a re s re d u c to re s
D ó n d e : (+ ) o p a l e s c e n c i a , (+ + ) t u rb i d e z d e fi n i d a ), (+ + + ) p re c i p i t a d o
F u e n te : M O N G E , D i e g o 2 0 1 5 .
En
la
T a b la
c a n tid a d
am bas
son:
p.
63)
se
puede
q u in o n a s ,
e s p e c ie s
h ia lu ro n id a s a
1991.
N ° 2 -3
y
Es
c a te q u in a s ,
v e g e ta le s ,
veneno
así
o b s e rv a r c la ra m e n te
de
que
hecho
a n to c ia n id in a s ,
que
da
c o b ra , p o r p a rte
al
que
e n c o n tra rs e
en
a
lo s c o m p u e s to s s e c u n d a rio s e n
c o m p o n e n te s
e n te n d e r
de
su
p o s ib le
e fe c to
fla v o n o id e s ,
in h ib ito rio
de
en
la
e s t a s s u s t a n c i a s d e c a r á c t e r f e n ó l i c o . ( T im o r , C .
m a y o ría
in v e s tig a c ió n s e la re a liz a c o n e s te tip o d e c o m p o n e n te s .
25
el
fe n ó lic o s ,
m ayor
c o m p u e s to s
fla v ó n ic o s ,
la
p re s e n te
3 .1 .3
C r o m a to g r a fía s e n c a p a f in a
3 .1 .3 .1
Se
C r o m a to g r a fía s d e l e x tr a c to d e P le c tr a n th u s a m b o in ic u s
re a liz a ro n
lo s
to lu e n o :
a c e ta to
(7 0 :3 0 ),
y
re s p e c tiv o s
de
e tilo
fin a lm e n te
con
ensayos
(9 3 :7 ),
de
to lu e n o :
to lu e n o : a c e ta to
c ro m a to g ra fía s
a c e ta to
de
de
e tilo
e tilo
u tiliz a n d o
(8 0 :2 0 ),
(6 0 :4 0 ),
e s te
lo s
s ig u ie n te s
s o lv e n te s ,
to lu e n o : a c e ta to
ú ltim o
ensayo
de
e tilo
es donde
se
e v id e n c ia c in c o m a n c h a s v is ib le s a la lu z u ltra v io le ta .
F IG U R A
N ° . 1 -3 . C ro m a to g ra fía e n c a p a fin a d e l e x tra c to m e ta n ó lic o d e P .a . F a s e M ó v il:
to lu e n o : a c e ta to d e e tilo fo rm a p ro g re s iv a (9 3 :7 ) -(8 0 :2 0 )-(7 0 :3 0 )-(6 0 -4 0 ).
F u e n te : M O N G E , D i e g o . 2 0 1 5
C U A D R O
fin a d e l
N ° 1 -3 . R f d e lo s c o m p u e s to s o b te n id o s p o r c ro m a to g ra fía d e c a p a
P le c tr a n th u s a m b o in ic u s
C O M PO N E N T E
R f
M ancha 1
0 ,0 5
M ancha 2
0 ,1 2
M ancha 3
0 ,4 7
M ancha 4
0 ,8 0
M ancha 5
0 ,8 3
F u e n te : M O N G E , D i e g o 2 0 1 5 .
26
3 .1 .3 .2
Se
C r o m a to g r a fía s d e l e x tr a c to d e J u s tic ia c h lo r o s ta c h y a .
u tiliz a ro n
lo s
(1 0 0 :1 1 :1 1 :2 6 ).
s ig u ie n te s
s o lv e n te s :
a c e ta to
de
e tilo :
á c id o
fó rm ic o :
á c id o
a c é tic o :
agua
P o s te rio rm e n te , s e o b tu v ie ro n c u a tro m a n c h a s la s c u a le s f u e ro n v is ib le a la lu z
u ltra v io le ta .
F IG U R A
N °2 -3 .
c h lo r o s ta c h y a .
C ro m a to g ra fía
F ase
M ó v il:
en
capa
a c e ta to
de
fin a
e tilo :
del
e x tra c to m e ta n ó lic o d e J u s tic ia
á c id o
fó rm ic o :
á c id o
a c é tic o :
agua
(1 0 0 :1 1 :1 1 :2 6 )
F u e n te : M O N G E , D i e g o . 2 0 1 5 .
C U A D R O N ° 2 -3 . R f d e lo s c o m p u e s to s o b te n id o s p o r c ro m a to g ra fía d e
c a p a fin a d e J u s tic ia c h lo r o s ta c h y a .
C O M PO N E N T E
R f
M ancha 1
0 ,2 5
M ancha 2
0 ,3 5
M ancha 3
0 ,8 0
M ancha 4
0 ,9 0
F u e n te : M O N G E , D i e g o . 2 0 1 5 .
3 .1 .4
Se
C u a n tific a c ió n d e F la v o n o id e s T o ta le s
u tiliz ó
com o
e s tá n d a r
q u e rc e tin a ,
p a ra
c u a n tific a r lo s f la v o n o id e s to ta le s p re s e n te s e n
la s
e s p e c ie s v e g e ta le s a in v e s tig a r, d o n d e s e e la b o ró u n a c u rv a d e c a lib ra c ió n c o n d ic h o e s tá n d a r a
d is tin ta s
m e d ia n te
c o n c e n tra c io n e s ,
la
e c u a c ió n
de
por
la
c o n s ig u ie n te
c u rv a
to m a n d o
se
c a lc u ló
com o
27
la
c o n c e n tra c ió n
re fe re n c ia
la s
de
fla v o n o id e s to ta le s
a b s o rb a n c ia s
m e d id a s
en
el
e s p e c tro fo tó m e tro
u ltra v io le ta
a
377nm
p a ra
cada
d is tin ta
p la n ta
a
a n a liz a r,
d e ta llá n d o s e
a
c o n tin u a c ió n la c u rv a d e c a lib ra c ió n :
F IG U R A
N ° 3 -3 . C u rv a d e c a lib ra c ió n d e q u e rc e tin a .
F u e n te : M O N G E , D i e g o . 2 0 1 5 .
E n e s ta g rá fic a p o d e m o s e v id e n c ia r u n a v e z in te rp o la d o lo s re s u lta d o s d e la s d ife re n te s p la n ta s ,
es
d e c ir
sus
a b s o rb a n c ia s
en
re fe re n c ia
a l e s tá n d a r
que
p a ra
el
P le c tr a n th u s
a m b o in ic u s
se
o b tu v o u n a c o n c e n tra c ió n d e 0 ,2 m g /g d e d ro g a y 0 ,1 5 m g /g d e d ro g a c o r re s p o n d ie n te a J u s tic ia
c h lo r o s ta c h y a .
E s te
hecho
d e m u e s tra
que
p a ra
cada
e s p e c ie
v e g e ta l a n a liz a d a
la
c a n tid a d
fla v o n o id e s p re s e n te s e n d ic h a s p la n ta s s o n re a lm e n te s ig n ific a tiv a s .
3 .1 .5
A n á lis is d e l p r o to c o lo d e I n h ib ic ió n d e h ia lu r o n id a s a
T A B L A
N ° 3 -3 . P o rc e n ta je d e in h ib ic ió n d e h ia lu ro n id a s a d e lo s e x tra c to s m e ta n ó lic o s d e
P le c tr a n th u s a m b o in ic u s y J u s tic ia c h lo r o s ta c h y a .
M a te r ia l
P a r te u sa d a
C o n c e n tr a c ió n
%
I n h ib ic ió n
(g /m L )
P le c tr a n th u s
H o ja s
a m b o in ic u s
J u s tic ia
H o ja s
c h lo r o s ta c h y a
F u e n te : M O N G E , D i e g o . 2 0 1 5 .
28
0 .0 0 5
4 1 .2 5
0 .0 1
50
0 .0 2
8 2 .5
0 .0 0 5
-6 0 1 .2 5
0 .0 1
-6 7 6 .2 5
0 .0 2
-7 1 8 .7 5
de
En
la
T a b la
e x tra c to s
de
N °
3 -3
podem os
P le c tr a n th u s
o b se rv a r
a m b o in ic u s
que
en
lo s
p re s e n ta ro n
d ife re n te s
una
tra ta m ie n to s
a c tiv id a d
a p lic a d o s
s u m a m e n te
con
in te re s a n te
en
lo s
la
in h ib ic ió n d e h ia lu ro n id a s a , o b te n ie n d o u n 8 2 .5 % e n la d o s is d e 0 .0 2 g /m l d e fra c c ió n fla v ó n ic a ,
e s to
q u ie re
d e c ir
que
d ife re n te s
tra ta m ie n to s
e s ta b le c e r
la
a
in h ib ic ió n
m ayor
de
d o s is
m e jo r
lo s e x tra c to s d e
con
e s te
m é to d o ,
e fe c to
in h ib ito rio .
J u s tic ia
ya
que
H echo
que
c h lo r o s ta c h y a , d e b id o
p o d ría n
e x is tir
una
no
a
o c u rre
que
m e z c la
de
no
con
se
lo s
puede
c o m p u e s to s
fla v ó n ic o s y /o c o m p u e s to s re la c io n a d o s p o la re s , o c a s io n a n d o in te rfe re n c ia .
T A B L A
N ° 4 -3 . E fe c to d e lo s e x tra c to s m e ta n ó lic o s d e P le c tr a n th u s a m b o in ic u s y J u s tic ia
c h lo r o s ta c h y a e n la in h ib ic ió n d e h ia lu ro n id a s a d e l v e n e n o d e c o b ra .
P le c tr a n th u s a m b o in ic u s
J u s tic ia c h lo r o s ta c h y a
T IE M P O
M A X IM A
0 .0 0 5 g /m
0 .0 1 g /m
0 .0 2 g /m
0 .0 0 5 g /m
0 .0 1 g /m
0 .0 2 g /m
(S E G )
A C T IV ID A
L
L
L
L
L
L
D
0
0 ,1
0 ,0 1
0 ,0 0 7
0 ,0 3
0 ,0 3 2
0 ,0 3 1
0 ,0 3
30
0 ,1 5
0 ,0 4
0 ,0 3
0 ,0 3
0 ,0 3 2
0 ,0 3 1
0 ,0 3
60
0 ,2
0 ,0 8
0 ,0 6
0 ,0 3
0 ,0 3 2
0 ,0 3 1
0 ,0 3
90
0 ,2 5
0 ,1 2
0 ,1
0 ,0 3
0 ,0 3 2
0 ,0 3 1
0 ,0 3
120
0 ,2 5
0 ,1 6
0 ,1 4
0 ,0 3 1
0 ,0 3 2
0 ,0 3 2
0 ,0 3 1
150
0 ,2 5
0 ,2 1
0 ,1 9
0 ,0 3 1
0 ,0 3 3
0 ,0 3 2
0 ,0 3 1
180
0 ,2 5
0 ,2 2
0 ,2 1
0 ,0 3 1
0 ,0 3 3
0 ,0 3 2
0 ,0 3 1
210
0 ,2 5
0 ,2
0 ,1 9
0 ,0 3 1
0 ,0 3 3
0 ,0 3 2
0 ,0 3 1
240
0 ,2 5
0 ,1 5
0 ,1 3
0 ,0 2 9
0 ,0 3 3
0 ,0 3 2
0 ,0 3 1
270
0 ,2 5
0 ,1
0 ,0 9
0 ,0 2 9
0 ,0 3 3
0 ,0 3 2
0 ,0 3
300
0 ,2 5
0 ,0 5
0 ,0 4
0 ,0 2 9
0 ,0 3 2
0 ,0 3 2
0 ,0 3
F u e n te : M O N G E , D i e g o . 2 0 1 5 .
29
F IG U R A
N °4 -3 .
C u rv a
de
C a lib ra c ió n
de
la
a c ti v id a d
de
lo s
e x tra c to s
m e ta n ó lic o s
de
P le c tr a n th u s a m b o in ic u s y J u s tic ia c h lo r o s ta c h y a e n la in h ib ic ió n d e h ia lu ro n id a s a d e l v e n e n o
d e c o b ra (N a ja n a ja ) .
0 ,2
L
Concentracióng/m
M
A
X I M
A
A
0 .0 0 5 g / m
0 ,1 5
0 .0 1 g / m
L
0 .0 2 g / m
L
L
A
P . a
P . a
P . a
0 .0 0 5 g / m
0 ,1
C T I V I D
L
J .c
0 .0 1 g / m
L
J . c
0 .0 2 g / m
L
J . c
0 ,0 5
0
0
5 0
1 0 0
1 5 0
2 0 0
T ie m
p o
2 5 0
3 0 0
3 5 0
(s e g )
F u e n te : M O N G E , D i e g o . 2 0 1 5 .
D e
a c u e rd o
re s u lta d o s
a
la
en
F ig u ra
c u a n to
P le c tr a n th u s
a
N °4 -3 .
lo s
a m b o in ic u s
a
Los
e x tra c to s
tra ta m ie n to s
la
d o s is
de
de
de
P le c tr a n th u s a m b o in ic u s
J u s tic ia
c h lo r o s ta c h y a ,
0 .0 2 g /m L
p e rm ite
una
la
p re se n ta n
fra c c ió n
e x c e le n te
m e jo re s
fla v ó n ic a
in h ib ic i ó n
de
de
la
h ia lu ro n id a s a e n c o n tra d a e n d ic h o v e n e n o , s in d e s c a rta r la s d e m á s d o s is b a ja s u tiliz a d a s e n e s ta
in v e s tig a c ió n
s ie n d o
a c e p ta b le s ,
e s to
q u ie re
d e c ir
que
a
d o s is
a lta s h a y
m a y o r in h ib ic ió n
de
v e n e n o d e c o b ra . O c u rre d e ig u a l m a n e ra c o n lo s d e m á s tra ta m ie n to s d e J u s tic ia c h lo r o s ta c h y a ,
que
ta m b ié n
a l a u m e n ta r s u s d o s is n o
se
d e s c a rta
un
buen
e fe c to
in h ib ito rio .
La
m e z c la
del
v e n e n o d e c o b ra c o n e l á c id o h ia lu ró n ic o p ro d u c e u n a tu rb id e z , p re c ip ita c ió n o flo c u la c ió n d e l
m e d io , u n a v e z q u e lo s e x tra c to s a c tú a n s o b re d ic h a m e z c la e s to s n o p e rm ite n q u e la re a c c ió n
p ro g re se
s in o
que
en
c a m b io
d is m in u y a ,
donde
lo s
c o m p o n e n te s
i n t e r v i n i e n d o e n d i c h o p r o c e d i m i e n t o . ( B r ic s k o r n , C h . e t a l. 1 9 7 9 . p . 9 0 )
30
fla v ó n ic o s
e s ta ría n
D
C O N C L U S IO N E S

Se
g e n e ra ro n
lo s d ife re n te s e x tra c to s m e ta n ó lic o s ta n to
d e J u s tic ia c h lo r o s ta c h y a ,
vez
o b te n id o s
lo s
de
P le c tr a n th u s a m b o in ic u s c o m o
u tiliz a n d o e l m é to d o d e re flu jo p o r s o x h le j y re flu jo , d o n d e u n a
e x tra c to s
fu e ro n
c o lo ra c ió n d e to n o a m a rillo y ro jo
s o m e tid o s
a
s e p a ra c ió n
de
c o m p o n e n te s fe n ó lic o s , la
d e lo s e x tra c to s re s p e c tiv a m e n te , e v id e n c ia la p re s e n c ia
d e c o m p u e s to s fe n ó lic o s .

Se
re a liz ó
v e g e ta le s ,
e l ta m iz a je
cuya
fito q u ím ic o
d e te rm in a c ió n
de
lo s e x tra c to s m e ta n ó lic o s d e
p e rm i tió
e v id e n c ia r
la
p re s e n c ia
la s d ife re n te s e s p e c ie s
de
c o m p o n e n te s
de
tip o
fe n ó lic o , c o m o fla v o n o id e s y a n to c ia n in a s , e n s u m a y o ría .

Se
c o m p ro b ó
la
a c tiv id a d
in h ib ito ria
de
lo s
e x tra c to s
de
P le c tr a n th u s
a m b o in ic u s
en
la
h ia lu ro n id a s a , s ie n d o la d o s is d e 0 .0 2 g /m l d e fra c c ió n fla v ó n ic a la m á s ó p tim a e n e s te tip o
d e in v e s tig a c ió n y a q u e a m a y o r c o n c e n tra c ió n m a y o r in h ib ic ió n .

S e d e te rm in ó e l e fe c to in h ib ito rio d e lo s e x tra c to s d e P le c tr a n th u s a m b o in ic u s y d e J u s tic ia
c h lo r o s ta c h y a e n la e n z im a h ia lu ro n id a s a e n c o n tra d a e n e l v e n e n o d e c o b ra ,
e s p e c ie s v e g e ta le s s e
donde a am bas
le s a trib u y e u n a e x c e le n te a c tiv id a d in h ib ito ria , c a b e d e s ta c a r q u e e l
m e jo r tra ta m ie n to fu e e l d e l e x tra c to d e P le c tr a n th u s a m b o in ic u s e n la d o s is d e 0 .0 2 g /m L .

M e d ia n te
e s ta
in v e s tig a c ió n
se
puede
c o n c lu ir
que
lo s
e x tra c to s
en
e s p e c ia l
el
del
P le c tr a n th u s a m b o in ic u s p o s e e a c tiv id a d in h ib ito ria y p o r e n d e u n m e jo r e fe c to c ic a triz a n te
e n p a c ie n te s c o n p ie d ia b é tic o .
31
R E C O M E N D A C IO N E S

D e
a c u e rd o
de
a l p re s e n te tra b a jo lo s e x tra c to s d e
in h ib ic ió n
de
la
e n z im a
J u s tic ia c h lo r o s ta c h y a re fe re n te a l m é to d o
h ia lu ro n id a s a ,
no
p re s e n ta
d ic h a
in h ib ic ió n ,
com o
re c o m e n d a c ió n p a ra fu tu ra s in v e s tig a c io n e s , s e ría la d e u tiliz a r u n m é to d o s d e s e p a ra c ió n d e
c o m p o n e n te s d e fa s e s ó lid a , d e s c a rta n d o a s í la s in te rfe re n c ia s .

S e re c o m ie n d a s e g u ir c o n la in v e s tig a c ió n , re fe re n te a u n m é to d o m á s c o m p le to a c e rc a d e la
p u rific a c ió n
de
lo s
m e ta b o lito s
s e c u n d a rio s ,
la s
c u a le s
son
s u s ta n c ia s
e n c a rg a d a s
e x p líc ita m e n te d e la a c tiv id a d b iló g ic a .

S e ría
a c o n s e ja b le
re a liz a r
una
fo rm u la c ió n
de
te c n o ló g ic a
fa rm a c é u tic a , q u e
p e rm ita
una
fá c il a d q u is ic ió n p a ra a q u e llo s p a c ie n te s d ia b é tic o s .

C u a n d o e x is te u n m a y o r %
no
se
usa
d e riv a tiz a c ió n
d e fla v o n o id e s q u e e s tá n p re s e n te s e n lo s e x tra c to s m e ta n ó l ic o s ,
ya
que
e s to s
m id e n
a b s o rb a n c ia s
por
poseer
c o lo rim é tric o s ,
se
p u e d e u tiliz a r m é to d o s in m u n o q u ím ic c o s , e le c tro q u ím ic o .

S e g u ir c o n la in v e s tig a c ió n e n la e la b o ra c ió n d e u n a fó rm u la m a g is tra l p a ra la a p lic a c ió n e n
p a c ie n te s c o n p ie d ia b é tic o .
32
B IB L IO G R A F ÍA
1.
A K E R E L E , O . The
T rad.
M ed.
(B ra s il)
W H O
N e w s le tt.
1,
tr a d itio n a l m e d ic in e p r o g r a m : p o lic y a n d im p le m e n ta tio n . In t.
R e v is ta
pp.
B r a s ile r a
1 -3 .
de
C ie n c ia s
[C o n s u lta :
02
F a r m a c é u tic a s .
E n e ro
2 0 1 5 ].
[e n
lín e a ],
2009,
D is p o n ib le
en:
h ttp ://w w w .s c ie lo .o rg .v e /s c ie lo .p h p ? p id = S 0 3 7 8 1 8 4 4 2 0 0 5 0 0 0 8 0 0 0 0 5 & s c rip t= s c i_ a rtte x t
2.
A R A G A D V A Y ,
S.
a n tiin fla m a to r io
a
E la b o r a c ió n
base
(T E S IS -p re g ra d o )
de
y
c h ilc a
c o n tr o l
de
(B a c c h a r is
(B io q u ím ic a
c a lid a d
la tifo l ia )
F a rm a c é u tic a ).
de
y
tin tu r a
y
h ie r b a m o r a
E s c u e la
S u p e rio r
gel
c ic a tr iz a n te
y
(S o la n u m n i g r u m ).
P o lité c n ic a
de
C h im b o ra z o . F a c u lta d d e C ie n c ia s . E s c u e la d e B io q u ím ic a y F a rm a c ia . R io b a m b a . E c u a d o r.
2009,
pp.
6 5 -6 9 .
[C o n s u lta :
02
E n e ro
2 0 1 5 ].
D is p o n ib le
en:
h ttp ://d s p a c e .e s p o c h .e d u .e c /b its tre a m /1 2 3 4 5 6 7 8 9 /2 1 6 /1 /5 6 t0 0 1 9 0 .p d f
3.
A R M S T R O N G , D ., L A V E R Y , L ., K I M B R I E L , H ., N I X O N , B ., B O U L T O N , A . A c tiv ity
p a tte r n s o f p a tie n ts w ith
adhere
to
(C h ic a g o )
a
s ta n d a r d
26,
pp.
d ia b e tic
p ressure
fo o t u lc e r a tio n : p a tie n ts w ith
o ff-lo a d in g
2 5 9 5 -2 5 9 7 .
a c tiv e
r e g im e n . D ia b e te s
[C o n s u lta :
02
E n e ro
C are.
2 0 1 5 ].
u lc e r a tio n m a y n o t
[e n
lín e a ],
2003,
D is p o n ib le
en:
h ttp ://c a re .d ia b e te s jo u rn a ls .o rg /c o n te n t/2 7 /8 /1 9 8 0 .fu ll
4.
A S O C IA C IÓ N
d ia g n ó s tic o ,
L A T IN O A M E R IC A N A
c o n tr o l
W a s h in g to n : P a b lo
y
tr a ta m ie n to
de
D E
la
L A
D IA B E T E S
D ia b e te s
M e llitu s
A s c h n e r, M D , M S c , p . 4 . [C o n s u lta : 0 2
(A L A D ). G u ía s A L A D
T ip o
E n e ro
2.
[e n
lín e a ],
de
2008,
2 0 1 5 ]. D is p o n ib le
en:
h ttp ://w w w .a la d -la tin o a m e ric a .o rg /p h o c a d o w n lo a d /g u ia s % 2 0 a la d .p d f
5.
B A L K A N , B . H y p e r in s u lin e m ia a n d g lu c o s e to le r a n c e in o b e s e r a to n fo o d . Illin o is -E s ta d o s
U n id o s , E d ito ria l U n iv e rs ita ria , 1 9 9 1 , p p . 4 0 -5 0 .
6.
B L A C P M A . B o le tín L a tin o a m e r ic a n o y d e l C a r ib e d e P la n ta s M e d ic in a le s y A r o m á tic a s .
[e n lín e a ], 2 0 0 7 , (A rg e n tin a ) 6 (5 ), p p . 1 4 4 -3 0 4 . [C o n s u lta : 0 2 E n e ro 2 0 1 5 ]. D is p o n ib le e n :
h ttp ://w w w .u v .e s /p rie to jm /O ld % 2 0 B la c p m a /o ld % 2 0 b la c p m a % 2 0 a rc h iv e /B L A C P M A _ V 6 _
N 5 .p d f
7.
B O Y K O , E .J ., A H R O N I , J .H . e t a l. A
p r o s p e c tiv e s tu d y o f r is k fa c to r s fo r d ia b e tic fo o t
u lc e r . T h e S e a ttle D ia b e tic F o o t S tu d y . D ia b e te s C a r e . [e n lín e a ], 1 9 9 9 , (U S A ) 2 2 (7 ), p p .
1 0 3 6 -4 2 .
[C o n s u lta :
02
E n e ro
2 0 1 5 ].
D is p o n ib le
en:
tr e a tm e n t o f d ia b e tic
fo o t
h ttp ://w w w .n c b i.n lm .n ih .g o v /p u b m e d /1 0 3 8 8 9 6 3
8.
B R E M ,
H .,
u lc e r s . A m
SH E E H A N ,
P .,
B R IE S K O R N ,
A rch
A .J .
P r o to c o l fo r
J S u r g . [e n lín e a ], 2 0 0 4 , (U S A ) 1 8 7 (5 A ): 1 S -1 0 S R e v ie w , p . 5 . [C o n s u lta : 0 5
E n e ro 2 0 1 5 ]. D is p o n ib le e n :
9.
B O U L T O N ,
P harm .
C .H .,
[e n
h ttp ://w w w .n c b i.n lm .n ih .g o v /p u b m e d /1 5 1 4 7 9 8 5
R IE D E L ,
lín e a ],
1977,
W .
T r ite r p e n e
(In d ia )
310
a c id s
(1 1 ),
p.
fr o m
c o le u s
9 1 0 -1 6 .
a m b o in ic u s
[C o n s u lta : 0 8
to u r e ir o .
E n e ro
2 0 1 5 ].
D is p o n ib le e n : h ttp ://b v s .s ld .c u /re v is ta s /p la /v o l4 _ 3 _ 9 9 /p la 0 6 3 9 9 .p d f
10. B R U N E T O N ,
J.
F a r m a c o g n o s ia .
F ito q u ím ic a
P la n ta s
m e d ic in a le s .
Z a ra g o z a -E sp a ñ a .
E d ito ria l A c rib ia . 2 ª e d ic ió n , 2 0 0 1 , p p . 5 9 -6 0 .
11. C L A R K ,
h e a lin g
R .A .F .
and
M e d ic in e ,
norm al
s k in .
U n iv e r s ity
Im m u n o lo g y
pp.
F ib r o n e c tin
and
of
J
In v e st
C o lo r a d o
R e s p ir a to r y
1 2 8 S -1 3 4 S .
m a tr ix
d e p o s itio n
and
fib r o n e c tin
D e r m a to l:S u p p l .
School
of
D e p a r tm e n t
M e d ic in e
and
M e d ic in e , D e n v e r , C o lo r a d o .
[C o n s u lta :
05
r e c e p to r
E n e ro
of
N a tio n a l
[e n
e x p r e s s io n
D e r m a to lo g y
J e w is h
in
and
C e n te r
fo r
lín e a ], 1 9 9 0 , (U .S .A .) 9 4 ,
2 0 1 5 ].
D is p o n ib le
en:
h ttp ://w w w .n a tu re .c o m /jid /jo u rn a l/v 9 4 /n 6 s /p d f/5 6 1 2 9 4 6 a .p d f
1 2 . F I G U E R O L A , D . D ia b e te s m e llitu s ; 1 3 v a e d . M a d rid -E s p a ñ a , E d ito ria le s H a rc o u rt B ra c e ,
2 0 0 9 , p p . 1 9 3 3 -1 9 6 9 .
1 3 . F O L K M A N , J . A n g io g e n e s is a n d
(F ra n c ia ),
pp.
7 9 :1 -8 .
a n g io g e n e s is in h ib itio n : a n o v e r v ie w . [e n lín e a ], 1 9 9 7 ,
[C o n s u lta :
02
E n e ro
2 0 1 5 ].
D is p o n ib le
en:
h ttp ://w w w .n c b i.n lm .n ih .g o v /p u b m e d /9 0 0 2 2 1 7
14. G A B B IA N I,
ju n c tio n s
lín e a ],
in
G .,
C H A P O N N IE R ,
e p ith e lia l c e lls
1 9 7 8 , (R e in o
and
C .,
H U T T N E R ,
m y o fib r o b la s ts
I.
d u r in g
C y to p la s m ic
w ound
U n id o ) 7 6 , p p . 5 6 1 -5 6 8 . [C o n s u lta : 0 8
fila m e n ts
h e a lin g .
E n e ro
J
and
gap
C e ll B io l
[e n
2 0 1 5 ]. D is p o n ib le
en:
h ttp ://w w w .n c b i.n lm .n ih .g o v /p m c /a rtic le s /P M C 5 1 5 3 6 1 /
15. G A R C IA
L U D E Ñ A ,
a p lic a c io n e s .
c ir u g ía .
[e n
J .L .
T e r a p é u tic a s .
lín e a ],
1958,
La
h ia lu r o n id a s a
A n te c e d e n te s
(U S A )
V o l.
e s tu d io
-R e su m e n
X X X V III ,
p.
fa r m a c o ló g ic o .
h is tó r ic o .
348.
A n a le s
[C o n s u lta :
E x p e r im e n ta l
y
de
y
05
M e d ic in a
E n e ro
2 0 1 5 ].
D is p o n ib le
en:
h ttp ://w w w .ra c o .c a t/in d e x .p h p /A n a le s M e d ic in a /a rtic le /d o w n l o a d /1 6 9 7 7 3 /2 5 4 3 1 4
1 6 . G U Y T O N , A . F is io lo g ía h u m a n a . M é x ic o , E d ito ria l In te ra m e ric a n a , 1 9 7 4 , p p . 1 5 6 -1 5 8 .
17. IN E C , L a
d ia b e te s e s la
segunda
causa
m u e r te g e n e r a l e n e l p a ís . [e n lín e a ], Q u ito –
de
E c u a d o r, 2 0 1 3 . [C o n s u lta : 0 5 E n e ro 2 0 1 5 ]. D is p o n ib le e n : h ttp ://e c u a d o re n c ifra s .c o m
18. K A K E G A W A ,
N IS H IO K A ,
H .,
I.
In h ib ito r y
D e g r a n u la tio n fr o m
33,
pp.
M A T SU M O T O ,
e ffe c ts
H .,
of
E N D O ,
T a n n is
K .,
on
SA T O H ,
H ia lu r o n id a s e
M e s e n te r y M a s t C e lls . C h e m . P h a r m . B u ll.
5 0 7 9 -5 0 8 1 .
[C o n s u lta :
08
T .,
E n e ro
N O N A K A ,
A c tiv a tio n
G .,
and
on
[e n lín e a ], 1 9 8 5 , (T o k y o )
2 0 1 5 ].
D is p o n ib le
en:
h ttp ://w w w .u v .e s /p rie to jm /O ld % 2 0 B la c p m a /o ld % 2 0 b la c p m a % 2 0 a rc h iv e /B L A C P M A _ V 3 _
N 4 .p d f
19. K A R A L L IE D D E ,
(L o n d o n )
74,
L.
pp.
A n im a l
to x in s .
3 1 9 -3 2 7 .
B r itis h
Journal
[C o n s u lta :
08
of
A n a e s th e s ia .
E n e ro
2 0 1 5 ].
[e n
lín e a ],
1995,
D is p o n ib le
en:
h ttp ://w w w .b io s c iw e b .n e t/a n im a l/p d f/a n im a l% 2 0 t o x in s .p d f
20. K IR S N E R ,
R .,
E A G L S T E IN ,
W .
El
proceso
de
c u r a c ió n
de
la s
h e r id a s .
C lín ic a s
D e r m a to ló g ic a s . M a d rid , E d ito ria l In te ra m e ric a n a , 1 9 9 3 , p p . 6 5 3 -6 6 2 .
21. L A R JA V A ,
E x p r e s s io n
C lin
H .,
SA L O ,
o f in te g r in s
In v e st [e n
and
T .,
H A A P A S A L M I,
basem ent m em brane
lín e a ], 1 9 9 3 , (N e w
K .,
K R A M E R ,
c o m p o n e n ts
by
R .H .,
w ound
H E IN O ,
J.
k e r a tin o c ty e s .
J
Y o rk ) 9 2 , p p . 1 4 2 5 -1 4 3 5 . [C o n s u lta : 1 1 E n e ro 2 0 1 5 ].
D is p o n ib le e n : h ttp ://w w w .n c b i.n lm .n ih .g o v /p m c /a rtic le s /P M C 2 1 3 2 5 3 7 /
22. M A C H E SN E Y ,
M .1 ., T ID M A N ,
N ., W A S E E M ,
A ., K IR B Y ,
L ., L E IG H ,
I . A c tiv a te d
k e r a tin o c y te s in th e e p id e r m is o f h y p e r tr o p h ic s c a r s . A m J P a th o l. [e n lín e a ], 1 9 9 8 , (U .S .A .)
152
(5 ),
pp.
1 1 3 3 -4 1 .
[C o n s u lta :
11
E n e ro
2 0 1 5 ].
D is p o n ib le
en:
h ttp ://w w w .n c b i.n lm .n ih .g o v /p u b m e d /9 5 8 8 8 8 0
2 3 . M A C H I A H , D .K ., G I R I S H , K .S ., G O W D A , T .V ., A g ly c o p r o te in fr o m
p la n t,
W ith a n ia
s o m n ife r a ,
in h ib its
h y a lu r o n id a s e
a c tiv ity
of snake
a fo lk m e d ic in a l
v e n o m s . C o m p a r a tiv e
B io c h e m is tr y a n d P h y s io lo g y , P a r t C . [e n lín e a ], 2 0 0 6 , (In d ia ) 1 4 3 , p p . 1 5 8 – 1 6 1 . [C o n s u lta :
11
E n e ro
2 0 1 5 ]. D is p o n ib le
e n : h ttp ://w w w .a m a z o n .c o m /g ly c o p ro te in -m e d ic in a l-W ith a n ia -
s o m n ife ra -h y a lu ro n id a s e /d p /B 0 0 0 R R 8 F W Q
2 4 . M A L A Y , D .S ., M A R G O L I S , D .J ., H O F F S T A D , O .J ., B E L L A M Y , S . T h e in c id e n c e a n d
r is k s
of
fa ilu r e
n e u r o p a th ic
to
fo o t
heal
u lc e r .
B io s ta tis tic s , U n iv e r s ity
pp.
3 6 6 -7 4 .
a fte r
J
lo w e r
Foot
e x tr e m ity
A n k le
a m p u ta tio n
Surg.
C e n te r
fo r
o f P e n n s y lv a n ia , P h ila d e lp h ia , P A
[C o n s u lta : 0 8
E n e ro
2 0 1 5 ]. D is p o n ib le
fo r
th e
tr e a tm e n t
C lin ic a l
[e n
of
d ia b e tic
E p id e m io lo g y
and
lín e a ], 2 0 0 6 . (U .S .A .) 4 5 ,
e n : h ttp ://w w w .jfa s .o rg /a rtic le /S 1 0 6 7 -
2 5 1 6 (0 6 )0 0 4 4 3 -1 /fu llte x t
25. M E N E N D E Z ,
R e v is ta
R o sa .,
C ubana.
G O N Z Á L E Z ,
C e n tr o
de
V a n ia .
In v e s tig a c ió n
y
P le c tr a n th u s
D e s a r r o llo
de
a m b o in ic u s
(L o u r)
M e d ic a m e n to s .
Spreng
A r tíc u lo
de
r e v is ió n . [e n lín e a ], 1 9 9 9 , (C u b a ) 3 (3 ), p p . 1 1 0 -1 5 . [C o n s u lta : 0 8 E n e ro 2 0 1 5 ]. D is p o n ib le
e n : h ttp ://b v s .s ld .c u /re v is ta s /p la /v o l4 _ 3 _ 9 9 /p la 0 6 3 9 9 .p d f
2 6 . M I R A N D A , M a r th a . F a r m a c o g n o s ia
y
p r o d u c to s n a tu r a le s . N o r m a s r a m a le s d e
drogas
c r u d a s y e x tr a c to s y tin tu r a s . C u b a . N R S P 3 0 9 , 3 1 1 y 3 1 2 . M IN S A P . 1 9 9 2 , p p 3 2 -6 2
27. M IN IS T E R IO
[e n
lín e a ],
D E
SA L U D
E c u a d o r:
P Ú B L I C A . B o le tín d e l D ía M u n d ia l d e la d ia b e te s . E c u a d o r.
M SP,
2013.
[C o n s u lta :
08
E n e ro
2 0 1 5 ].
D is p o n ib le
en:
h ttp ://
w w w .s a lu d .g o b .e c /d ia -m u n d ia l-d e -la -d ia b e te s -m s p -e je c u ta -a c c io n e s -p a ra -re d u c ir-s u in c id e n c ia -y -c o m p lic a c io n e s /
28. P A Z M IÑ O ,
C a r lo s .
h id r o a lc o h ó lic o
h ip e r g lu c e m ia
de
J u s tic ia
in d u c id a .
S u p e rio r P o lité c n ic a
F a rm a c ia .
D e te r m in a c ió n
de
de
la
a c tiv id a d
h ip o g lu c e m ia n te
L eonard
(in s u lin a ),
c h lo r o s ta c h y a
(T E S IS -p re g ra d o )
C h im b o ra z o .
F a c u lta d
(B io q u ím ic o
de
C ie n c ia s .
en
del
r a to n e s
F a rm a c é u tic o ).
E s c u e la
e x tr a c to
con
E s c u e la
d e B io q u ím ic a y
R io b a m b a - E c u a d o r. 2 0 1 1 , p p 2 5 -2 6 . [C o n s u lta : 0 6 E n e ro 2 0 1 5 ]. D is p o n ib le e n :
h ttp ://d s p a c e .e s p o c h .e d u .e c /b its tre a m /1 2 3 4 5 6 7 8 9 /1 9 9 0 /1 /5 6 T 0 0 2 9 8 .p d f
2 9 . P O R E T S K Y , L . P r in c ip a l o f D ia b e te s M e llitu s . 2 d a e d , N e w Y o rk -U S A , E d ito ria l M e d ic a l
ED , 2008, pp 378- 73.
30. P R IE T O ,
S .,
G O N Z Á L E Z ,
J .A .,
M O L IN A ,
J .,
D IE G U E Z ,
R .,
G A R R ID O ,
G .,
G A M I O T E A , D ., e t a l. C o n tr ib u c ió n a u n a te r a p é u tic a n a tu r a l e n e l tr a ta m ie n to a n tiv ir a l.
R ev
L a tin o a m
H abana:
Q u ím . R o ig
J T . P la n ta s m e d ic in a le s , a r o m á tic a s y v e n e n o s a s d e C u b a . L a
E d ito r ia l C ie n tífic o -T é c n ic a . [e n
lín e a ], 2 0 0 0 . (C u b a ) 2 8 , p . 1 0 8 . [C o n s u lta : 0 8
E n e ro
2 0 1 5 ].
D is p o n ib le
en:
h ttp ://s c ie lo .s ld .c u /s c ie lo .p h p ? p id = S 0 0 3 4 -
7 5 1 5 2 0 0 3 0 0 0 3 0 0 0 0 6 & s c rip t= s c i_ a rtte x t
31. SH A SR A B U D H E ,
A .,
D E O D H A R ,
M .
A n ti-h y a lu r o n id a s e ,
a n ti-e la s ta s e
a c tiv ity
of
G a r c in ia in d ic a . In te r n a tio n a l J o u r n a l o f B o ta n y . [e n lín e a ], 2 0 1 0 . (C h in a ) 6 , p p . 2 9 9 – 3 0 3 .
[C o n s u lta :
08
E n e ro
2 0 1 5 ].
D is p o n ib le
en:
h ttp ://s c ia le rt.n e t/fu llte x t/? d o i= ijb .2 0 1 0 .2 9 9 .3 0 3 & o rg = 1 1
32. S IN G E R ,
1999,
A .J .,
C L A R K ,
(E n g la n d )
R .A .
C u ta n e o u s
p p .7 3 8 – 7 4 6 .
341,
W ound
H e a lin g . N . E n g . J . M e d . [e n
[C o n s u lta :
08
E n e ro
2 0 1 5 ].
lín e a ],
D is p o n ib le
en:
h ttp ://w w w .n c b i.n lm .n ih .g o v /p u b m e d /1 0 4 7 1 4 6 1
33. SH A H ,
M .,
a d d itio n
of
Im m u n o lo g y
FO R E M A N ,
T G F -b 3
and
to
D .M .
c u ta n e o u s
D e v e lo p m e n t
M a n c h e s te r , U K . [e n
N e u tr a liz a tio n
rat
of
w ounds
D iv is io n ,
T G F -b 1
reduces
School
of
lín e a ], 1 9 9 5 , (U c k a n ia ) 1 0 8
and
T G F -b 2
s c a r r in g .
B io lo g ic a l
J
or
C e ll
S c ie n c e s ,
exogenous
Sci
C e lls ,
U n iv e r s ity
of
(3 ), p p . 9 8 5 -1 0 0 2 . [C o n s u lta : 0 8 E n e ro
2 0 1 5 ]. D is p o n ib le e n : h ttp ://w w w .n c b i.n lm .n ih .g o v /p u b m e d /1 0 4 7 1 4 6 1
3 4 . S T A N L E Y , J . A n a to m ía y fis io lo g ía
h u m a n a . M é x ic o , E d ito ria l In te ra m e ric a n a , 1 9 7 6 , p .
409.
35. ST O JA N O N SK A ,
L .
E v o lu tio n
of
d e x a m e th a s o n e
–
in d u c e d
in s u lin
R e s is ta n t
in
r a t;
O c k la h o m a -U S A , E d ito ria l O m e g a , 2 0 0 5 , p p .7 4 8 -5 6 .
3 6 . T A M A Y O , M . In flu e n c ia d e u n tr a ta m ie n to in te g r a l d e p ie d ia b é tic o e n la d is m in u c ió n
ín d ic e
de
h o s p ita l
2013”.
a m p u ta c io n e s
de
lo s
p a c ie n te s
p r o v in c ia l g e n e r a l d o c e n te
(T E S IS -p re g ra d o )
(M é d ic o ).
a te n d id o s
en
R io b a m b a , d u r a n te
U n iv e rs id a d
T é c n ic a
la
u n id a d
e l p e r ío d o
de
de
p ie
d ia b é tic o
del
del
e n e r o – s e p tie m b r e d e
A m b a to . F a c u lta d
de
S a lu d .
E s c u e la d e M e d ic in a A m b a to , E c u a d o r, 2 0 1 4 , p . 2 5 . [C o n s u lta : 0 6 E n e ro 2 0 1 5 ]. D is p o n ib le
en:
h ttp ://re p o s ito rio .u ta .e d u .e c /b its tre a m /1 2 3 4 5 6 7 8 9 /6 5 9 5 /1 /M a r% C 3 % A D a % 2 0 A le x a n d ra % 2
0 T a m a y o % 2 0 F re ire .p d f
37. T IM O R ,
C .
E v a lu a c ió n
fís ic o -q u ím ic a
d e l a c e ite
e s e n c ia l d e
la s
h o ja s
de
P le c tr a n th u s
a m b o in ic u s (L o u r ) S p r e n g . R e v is ta C u b a n a F a r m a c é u tic a . [e n lín e a ], 1 9 9 1 , (C u b a ) 2 5 (1 ),
pp.
6 3 -6
[C o n s u lta :
08
E n e ro
h ttp ://b v s .s ld .c u /re v is ta s /p la /v o l4 _ 3 _ 9 9 /p la 0 6 3 9 9 .p d f
2 0 1 5 ].
D is p o n ib le
en:
38. T S E T L IN ,
V .I.,
H U C H O ,
F.
Snake
and
s n a il
to x in s
a c tin o
on
n ic o tin ic
a c ty lc h o lin e
r e c e p to r s : fu n d a m e n ta l a s p e c ts a n d m e d ic a l a p p lic a tio n s . [e n lín e a ], 2 0 0 3 , (R u s ia ), p . 5 5 7 .
[C o n s u lta :
08
E n e ro
2 0 1 5 ].
D is p o n ib le
en:
h ttp ://w w w .s c ie n c e d ire c t.c o m /s c ie n c e /a rtic le /p ii/S 0 0 1 4 5 7 9 3 0 3 0 1 4 5 4 6
39. T O O L E ,
B .P .
P r o te o g ly c a n s
and
h y a lu r o n a n
in
m o r p h o g e n e s is
H a y E D , e d . C e ll b io lo g y o f e x tr a c e llu la r m a tr ix . P le n u m
pp.
3 0 5 -3 4 1 .
[C o n s u lta :
08
and
d iffe r e n tia tio n .
In :
P r e s s . [e n lín e a ], 2 0 0 1 , (U .S .A .),
E n e ro
2 0 1 5 ].
D is p o n ib le
en:
h ttp ://w w w .n a tu re .c o m /ja /jo u rn a l/v 5 9 /n 1 2 /a b s /ja 2 0 0 6 1 0 1 a .h tm l
40. V A A L A M O ,
M .,
M A T T IL A ,
K A R J A L A IN E N -L IN D S B E R G ,
s tr o m a l
c e lls
express
L .,
M .L .,
c o lla g e n a s e -3
JO H A N SSO N ,
K Ä H Ä R I,
(M M P -1 3 )
V .M .
and
N .,
et
K A R IN IE M I,
a l.
A .L .,
D is tin c t p o p u la tio n s
c o lla g e n a s e -1
(M M P -1 )
in
of
c h r o n ic
u lc e r s b u t n o t in n o r m a lly h e a lin g w o u n d s . J In v e s t D e r m a to l. [e n lín e a ], 2 0 0 1 . (F in la n d ia ),
109,
pp.
9 6 -1 0 1 .
[C o n s u lta :
08
E n e ro
2 0 1 5 ].
D is p o n ib le
en:
h ttp ://w w w .n a tu re .c o m /jid /jo u rn a l/v 1 2 9 /n 1 1 /fu ll/j id 2 0 0 9 2 9 8 a .h tm l
41. W A N G ,
H .J .,
PA U L ,
I.C .,
Z E L N IK ,
R .,
M IK U T A ,
K .,
L A V IC ,
a b s o lu te s te r e o c h e m iis tr y o f th e tip e r n o id b a r b a tu s in . J A m e r C h e m
D .
S tr u c tu r e
and
S o c . E v a lu a c ió n fís ic o -
q u ím ic a d e l a c e ite e s e n c ia l d e la s h o ja s d e P le c tr a n th u s a m b o in ic u s (L o u r ) S p r e n g . R e v is ta
C ubana
F a r m a c é u tic a . [e n
lín e a ], 1 9 7 3 , (C u b a ) 7 8
(5 5 8 /6 0 0 ), p p . 8 5 5 5 -6 9 [C o n s u lta : 0 8
E n e ro 2 0 1 5 ]. D is p o n ib le e n : h ttp ://w w w .b v s .s ld .c u /re v is ta s /p la /v o l4 _ 3 _ 9 9 /p la 3 9 9 .p d f
42. X U ,
J .,
in te g r in s .
C L A R K ,
J
R .A .F .
C e ll B io l
[e n
E x tr a c e llu la r
lín e a ],
1996,
m a tr ix
(U .S .A .)
a lte r s
132,
PD G F
r e g u la tio n
of
fib r o b la s t
p p . 2 3 9 -2 4 9 . [C o n s u lta : 0 8
2 0 1 5 ]. D is p o n ib le e n : h ttp ://jc b .ru p re s s .o rg /c o n te n t/1 3 2 /1 /2 3 9 .a b s tra c t
E n e ro
A N E X O S
A n e x o A . A n á lis is d e H u m e d a d
F o to g r a fía N ° 1 . P e s o d e l c ris o l
F o to g r a fía N ° 2 . P e s o d e l c ris o l c o n la m u e s tra
A n e x o B . E x tra c c ió n d e la s p la n ta s P le c ty r a n th u s a m b o in ic u s y J u s tic ia c h lo r o s ta c h y a
F o to g r a fía N ° 3 . M é to d o d e e x tra c c ió n p o r s o x h le t
F o to g r a fía
N °4 .
re s p e c tiv a m e n te
C o n c e n tra c ió n
en
ro ta v a p o r
de
o ré g a n o
o re jó n
e
i n s u lin a
v e g e ta l
A n e x o C . In h ib ic ió n d e h ia lu ro n id a s a
F o to g r a fía N ° 5 . B la n c o s F o to g r a fía N ° 6 . H ia lu ro n id a s a b o v in a F o to g r a fía N ° 7 . R e a c tiv o s
F o to g r a fía N ° 8 . D is tin to s tra ta m ie n to s d e la s p la n ta s a n a liz a d a s
F o to g r a fía N ° 9 . A ñ a d ic ió n d e l D M S O 5 %
F o to g r a fía N ° 1 0 . A ñ a d ic ió n d e l b u ffe r
F o to g r a fía N ° 1 1 . A ñ a d ic ió n d e l C a C l2
F o to g r a fía N ° 1 2 . A ñ a d ic ió n d e l h ia lu ro n a to d e s o d io
F o to g r a fía N ° 1 3 . In c u b a c ió n d e lo s tra ta m ie n to s a 3 7 ° C
F o to g r a fía N ° 1 4 . C a le n ta m ie n to
A nexo
D .
D e te rm in a c ió n
de
a b s o rb a n c ia s
de
F o to g r a fía N ° 1 5 . E n fria m ie n to
lo s
d ife re n te s
tra ta m ie n to s
a m b o in ic u s y J u s tic ia c h lo r o s ta c h y a
F o to g r a fía N ° 1 6 . M e d ic ió n d e a b s o rb a n c ia s
de
P le c tr a n th u s