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Detección de antígeno circulante galactomanano (Aspergillus) en suero y
Lavado Broncoalveolar
Platelia® Aspergillus EIA
Resumen del inserto Platelia® Aspergillus EIA.
Interés clínico: La aspergilosis invasiva se desarrolla después de la inhalación de conidias del
hongo Aspergillus presentes en el ambiente. Ésta micosis oportunista que se ha incrementado en la
última década, constituye una infección grave con una tasa alta de morbimortalidad. Los pacientes
neutropénicos y los tratados con inmunosupresores y/o corticoesteroides representan la población
con más factores de riesgo para el desarrollo de la aspergilosis.
La eficacia del tratamiento dependerá en gran parte de la precocidad de su aplicación, pero el
diagnóstico de aspergilosis sigue siendo difícil. La búsqueda del antígeno galactomanano de
Aspergillus solubles en suero, se perfila como el principal método serológico capaz de mejorar
el diagnóstico de la infección tanto en precocidad como en especificidad.
La detección del antígeno galactomanano de Aspergillus, debe acompañarse además de los
criterios clínicos, de otros estudios como los radiológicos, cultivo y biopsia para confirmar el
diagnóstico de aspergilosis invasiva, según los criterios de los organismos internacionales que han
dictado pauta al respecto como EORTC (Organización Europea para la investigación y tratamiento
de cáncer) y MSG (Grupo de estudio de las micosis).
Principio: Platelia® Aspergillus Ag., es un ensayo inmunoenzimático de tipo sándwich en
microplaca de un paso, que permite la detección semicuantitativa del antígeno circulante de
galactomanano en suero humano y en el líquido de lavado broncoalveolar (LBA/BAL), utilizando
anticuerpos monoclonales de rata EBA-2 dirigidos contra el galactomanano de Aspergillus.
Muestras: La prueba se efectúa en muestras de suero extraídos en tubos secos (tapa roja o tapa
amarilla) y líquido de lavado broncoalveolar (LBA/BAL).
Respetar las siguientes pautas para la extracción, tratamiento y conservación de las muestras:
• Extraer la muestra de sangre según las prácticas habituales y colocar en tubo seco
tapa amarilla que tiene el gel separador es lo ideal, sino en tubo tapa roja.
• Dejar que el coágulo se forme completamente y centrifugar dentro de los 30
minutos después de tomada la muestra y separar el suero inmediatamente
colocándolo en un tubo seco estéril o criotubo (volumen mínimo 600 µL). Si la
muestra fue tomada en tubos con el gel separador no hace falta separar
porque ya queda separada. Conservar los tubos cerrados.
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• Los sueros podrán almacenarse entre 2 a 8 °C cuando la prueba se realice en las 48
horas siguientes a la toma de muestra.
• Almacenar los sueros a temperatura de -20°C o -70°C cuando la prueba se realice
después de las 48 horas de tomada la muestra.
• La muestra (suero y/o LBA) debe enviarse refrigerada entre 2 a 8 °C en tubos
herméticamente cerrados y depositarlos en envases que cumplan las normas de
bioseguridad, se sugiere el uso de coldpad para conservar la cadena de frío a la
temperatura señalada.
• La muestra no debe estar contaminada.
• Los resultados NO se verán afectados en sueros que contengan 20 mg/L de bilirrubina,
en sueros lipémicos que contengan el equivalente a 2 g/l de triglicéridos o en sueros
hemolizados que contengan 500 mg/dl de hemoglobina. No se han estudiado las
interferencias debidas a un exceso de albúmina.
Procedimiento: Se debe seguir estrictamente las indicaciones del fabricante en la ejecución del
protocolo así como en la interpretación del test.
Criterios de inclusión: Todo paciente masculino o femenino con neutropenia debida a enfermedad
hematooncológica y/o aquellos sometidos a trasplante de médula ósea de preferencia y/o con
trasplante de órgano sólido. Se podrá evaluar otros eventos clínicos como EPOC en pacientes
críticos en Unidad de Cuidados Intensivos u otras enfermedades crónicas que predisponen al
desarrollo de la aspergilosis invasiva.
Limitaciones de la prueba
1.Una prueba negativa de la muestra de suero y/o líquido lavado broncoalveolar (LBA/BAL) no
excluye el diagnóstico de aspergilosis invasiva.
2.Se ha demostrado que la presencia de galactofuranosa en diversas comidas especialmente los
cereales o sus derivados y postres con nata dan una reacción positiva a la prueba e igualmente se
sabe que la leche de vaca con frecuencia tiene alta concentración de galactomanano, por lo que
hay que tener muy en cuenta el factor dietético en la interpretación y evolución de la antigenemia
en neonatos, niños y en todo paciente que tenga una alteración de la barrera intestinal.
3.El uso de terapia antifúngica puede reducir la sensibilidad de Platelia - Aspergillus Ag., en
pacientes con aspergilosis invasiva.
4.Se han descrito reacciones cruzadas con los antígenos polisacáridos de hongos pertenecientes a
los géneros Penicillium, Fusarium, Cryptococcus, Paecilomyces, Geotrichum, Histoplasma,
Paracoccidioides y Alternaria.
5.Los valores cercanos al valor Índice de corte (0.5) deben interpretarse con cautela y basarse en
otras evidencias clínicas, radiológicas o de laboratorio de aspergilosis invasiva, debido a que la
interpretación del resultado del ensayo no incluye zona gris o borde line.
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Interpretación de Resultados
Los sueros y/o líquido Lavado broncoalveolar (LBA/BAL) con un Índice mayor o igual a 0.5
se consideran positivos para el antígeno de Galactomanano de Aspergillus
Considerando la detección precoz del antígeno galactomanano en el suero incluso antes de la
aparición de signos clínicos y/o radiológicos suelen observarse reacciones positivas sin signos
clínicos, estos resultados se consideran “positivos verdaderos” en pacientes en los que
posteriormente se establece el diagnóstico de aspergilosis invasiva probada o probable.
Para aumentar la sensibilidad y precocidad de la prueba es necesario hacer un seguimiento
regular tomando muestra de sangre (suero) al paciente como mínimo 2 veces por semana, para
una mejor interpretación de los resultados, con 2 tomas sucesivas positivas indicarán la presencia de
galactomanano en el suero, signo de una aspergilosis invasiva, éste resultado constituirá un
elemento importante en el diagnóstico de la infección pero no deberá ser el único, siempre se
deberá correlacionar con imagen de alta resolución, la clínica del paciente, cultivo y biopsia
de ser posible.
Por lo antes mencionado, cualquier resultado positivo deberá compararse con los datos
clínicos, radiológicos y biológicos del paciente antes de establecer el diagnóstico definitivo e
instaurar un tratamiento adecuado y deberá efectuarse un seguimiento de la evolución de la
antigenemia, para ello se seguirá tomando las muestras de suero semanal durante el
tratamiento.
Los sueros y/o líquido Lavado broncoalveolar (LBA/BAL) con un Índice menor a 0.5 se
consideran negativos para el antígeno de Galactomanano de Aspergillus
A pesar de la gran sensibilidad de ésta prueba, un resultado negativo NO puede excluir un
diagnóstico de aspergilosis invasiva debido a la baja concentración del antígeno aspergilar durante
las primeras etapas de la infección, por ésta razón ante la persistencia de criterios clínicos y
radiológicos que indican el posible desarrollo de ésta micosis, se debe insistir en la toma de
muestra 2 veces por semana o analizar si es posible un lavado broncoalveolar.
NOTA: la evolución del paciente podrá ser visualizada on line por el médico, para ello
cuenta con una aplicación diseñada para android o smartphone, ya disponible que puede bajar a su
móvil a través de Google play store o por la web: http://www.appergilo.com el médico deberá
registrarse así como a su paciente, igualmente los microbiólogos de los centros participantes desde
la web deberán registrarse y reportar los resultados de los pacientes, los cuales se irán graficando y
así evaluar la curva con los valores permitiendo al clínico diagnosticar, pronosticar y monitorear
tratamiento.
El no cumplimiento del llenado de los datos personales y clínicos del paciente cada vez
que solicita la prueba, podrá ser considerado como un criterio de rechazo de la muestra.
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