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CENTRO NACIONAL DE SANIDAD AMBIENTAL
Procedimientos para la toma de muestra de bioaerosoles
en el contexto de un ataque bioterrorista:
proyecto IB-BIOALERTNET
Sánchez Íñigo F.J., Galán Madruga D., Díaz López G., Fernández Patier R., Cañavate Cañavate C.
Dr. Fco. Javier Sánchez Íñigo
[email protected]
Proyecto cofinanciado por el Programa de Prevención y Lucha contra la Delincuencia (ISEC) de la Unión Europea
(Dirección General de Asuntos de Interior) - Gran Agreement No. HOME/2012/ISEC/AG/CBRN/4000003810
http://ib-bioalertnet.isciii.es/
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Procedimientos para la toma de muestra de bioaerosoles en el contexto de un
ataque bioterrorista: proyecto IB-BIOALERTNET
ESQUEMA
1. INTRODUCCIÓN
1.1 Bioterrorismo
1.2 RE-LAB
1.3 IB-BIOALERTNET
2. BIOAEROSOLES
2.1 Definición
2.2 Toma de muestra de bioaerosoles
2.2.1 Bacterias y virus
2.2.2 Mohos
3. SITUACIÓN DE ALERTA
SANITARIA
3.1 Seguridad del tomador
3.2 Consideraciones previas a la toma
de muestra
3.2.1 Calibración de equipos
3.2.2 Descontaminación de equipos
3.2.3 Manipulación y transporte de equipos
3.3 Consideraciones posteriores a la
toma de muestra
3.3.1 Tiempo, condiciones de conservación
y transporte de la muestra
3.3.2 Recipientes de transporte
3.3.3 Descontaminación de equipos
3.3.4 Custodia y distribución
4. CONCLUSIONES
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ataque bioterrorista: proyecto IB-BIOALERTNET
1. INTRODUCCIÓN
1.1 BIOTERRORISMO
BIOTERRORISMO
Liberación intencionada de microorganismos patógenos o
de sus toxinas o sustancias dañinas contra la población
con el propósito de generar enfermedad y muerte de la
misma, así como de animales y plantas.
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1. INTRODUCCIÓN
1.2 RE-LAB
En caso de amenaza biológica, es necesario establecer
sistemas de alerta temprana y respuesta rápida que
aseguren una gestión efectiva frente a posibles daños a la
salud pública.
En España en 2009 se crea la RE-LAB (Red Española de
Laboratorios de Alerta Biológica) para aportar una
infraestructura científico-técnica de apoyo operacional al
sistema nacional de conducción de crisis, con el objetivo de
dar una respuesta adecuada a estas amenazas.
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1. INTRODUCCIÓN
1.3 IB-BIOALERTNET
Pretende establecer una “Red Ibérica de laboratorios de alerta biológica” y fomentar entre
éstos el intercambio de información y tecnología así como la capacitación y normalización
de los procedimientos que permitan dar una respuesta rápida y eficaz frente a
emergencias de tipo biológico.
• Desarrollo de procedimientos para la toma de muestra de
microorganismos altamente patógenos en distintas matrices ambientales
•Verificación de la operatividad de dichos procedimientos
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1. INTRODUCCIÓN
1.3 IB-BIOALERTNET
Epidemiología NORMAL de los microorganismos patógenos incluidos en el proyecto
Grupo
Bacterias
Microorganismo
AIRE
AGUA
SUELO
Bacillus anthracis
✓
✓
✓
✓
✓
?
?
Yersinia pestis
Clostridium botulinum
Virus
Hongos
Protozoo
Filovirus
?
Variola virus
✓
Orthopoxvirus
✓
Influenza A
✓
Histoplasma capsulatum
✓
✓
Coccidiodes immitis
✓
✓
Plasmodium falciparum
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1. INTRODUCCIÓN
1.3 IB-BIOALERTNET
Posible epidemiología en casos de BIOTERRORISMO
Grupo
Bacterias
Virus
Hongos
Protozoo
Microorganismo
AIRE
AGUA
SUELO
Bacillus anthracis
✓
✓
✓
Yersinia pestis
✓
Clostridium botulinum
✓
✓
✓
Filovirus
✓?
✓?
?
Variola virus
✓
Orthopoxvirus
✓
Influenza A
✓
Histoplasma capsulatum
✓
✓
Coccidiodes immitis
✓
✓
Plasmodium falciparum
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2. BIOAEROSOLES
2.1 Definición
BIOAEROSOLES
Partículas de origen biológico, en suspensión en el aire
(UNE-EN 13098:2000)
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2. BIOAEROSOLES
2.2 Toma de muestra
Independientemente del contexto (normal o de alerta
sanitaria), la toma de muestra se realizará de igual modo
2.2.1 Bacterias / virus
2.2.2 Mohos
Filtración
Mecanismo: Borboteo
Caudal: 1 m3 / h
Soporte: Solución captadora (30 ml
solución salina, 9 g/l NaCl)
Período: 10 min – 60 min
Caudal: 3 m3 / h
Soporte: Filtro
gelatina/policarbonato
Período: 10 min – 24 h
Impactación en
placa
Caudal: > 3 m3 / h
Soporte: Medios de
cultivo en placa:
- Agares: DG18, extracto de
malta, patata y dextrosa
Período: 1 min – 10 min
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3. SITUACIÓN DE ALERTA SANITARIA
3.1 Seguridad
Legislación sobre protección de los trabajadores contra los riesgos
relacionados con la exposición a agentes biológicos durante el trabajo
LEGISLACIÓN EUROPEA
LEGISLACIÓN NACIONAL
DIRECTIVA 90/679/CEE, DIRECTIVA 93/88/CEE,
DIRECTIVA 95/30/CE, DIRECTIVA 97/65/CE, DIRECTIVA
97/59/CE, DIRECTIVA 2000/54/CE
REAL DECRETO 664/1997
Clasificación de los microorganismos en función de su peligrosidad
Grupo 1
Grupo 2
Grupo 3
Grupo 4
Poco susceptible de
provocar una enfermedad
en el ser humano
Puede causar enfermedad,
pero es poco probable que
se propague a la
colectividad, además de
existir tratamiento
Puede provocar una
enfermedad grave y
supone un serio peligro,
pero existen profilaxis y
tratamientos eficaces
Causa una enfermedad
grave y supone un serio
peligro, con alta
probabilidad de
propagación y sin
tratamiento
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3. SITUACIÓN DE ALERTA SANITARIA
3.1 Seguridad
EPISODIO DE ALERTA SANITARIA POR BIOTERRORISMO
DESCONOCIMIENTO DE LA NATURALEZA / PELIGROSIDAD DEL
MICROORGANISMO CAUSANTE
SE CONSIDERARÁN SIEMPRE ALTAMENTE PATÓGENOS
(agentes biológicos del grupo de riesgo 4 según Real Decreto 664/1997)
SE PROVEERÁ AL PERSONAL ENCARGADO DE LA TOMA DE MUESTRA DE:
▪ Máxima formación en prevención de riesgos
- Medidas profilácticas disponibles
- Procesos de vacunación (ventajas e inconvenientes). Si el trabajador opta
por la vacunación, se debe poner a disposición del trabajador la totalidad de
vacunas eficaces frente a patógenos ambientales disponibles.
▪ Máximas medidas de seguridad posibles
- Trajes tipo 1-B, subtipos 1a ó 1b (UNE-EN 943-1:2003): trajes herméticos a gases y vapores.
Requieren de equipo de suministro de aire respirable (autónomo o semiautónomo). Trajes ligeramente
presurizados.
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3. SITUACIÓN DE ALERTA SANITARIA
3.2 Consideraciones previas a la toma de muestra
Previamente a tomar la
muestra
3.2.1- CALIBRACIÓN DE EQUIPOS
▪ Objetivo: Asegurar la trazabilidad de las mediciones
-
Calibración anual en caudal y tiempo en laboratorio acreditado por ENAC o EA
(si no es posible, con trazabilidad a patrón nacional)
3.2.2 – CONTROL DE CALIDAD: VERIFICACIÓN
▪ Objetivo: Asegurar que los equipos operan en al rango de calibración
- Siempre antes y después de cada campaña de toma de muestra
3.2.3 - DESCONTAMINACIÓN DE EQUIPOS
- Todos los equipos implicados en la toma de muestra deben ser descontaminados
▪ Objetivo: Garantizar que los microorganismos captados sean producto de la toma de muestra
▪ Tipos: Métodos físicos (esterilización por calor húmedo o seco)
Métodos químicos (esterilización por plasma de baja temperatura o por óxido de etileno)
3.2.4 - MANIPULACIÓN Y TRANSPORTE DE EQUIPOS AL EMPLAZAMIENTO DE TOMA
- Se debe mantener la esterilidad e integridad de los soportes y equipos
▪ Objetivo: Garantizar que los microorganismos captados sean producto de la
toma de muestra
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3. SITUACIÓN DE ALERTA SANITARIA
3.3 Consideraciones posteriores a la toma de muestra
Una vez la muestra ha
sido tomada
3.3.1 - TIEMPO, CONDICIONES DE CONSERVACIÓN Y TRANSPORTE DE LAS MUESTRAS
-
▪ Objetivo: Evitar la contaminación de la muestra y cualquier cambio químico, físico o biológico
Tiempo: Las muestras deben ser procesadas en el laboratorio en un tiempo inferior a 24 h
Temperatura de conservación y transporte: Bacterias o Mohos < 25 ºC, Virus 3 ºC - 5 ºC
3.3.2 - RECIPIENTES DE TRANSPORTE
▪ Objetivo: Garantizar que la muestra no se contamina ni altera, a la vez que no
supone un riesgo ni para las personas ni para el medio
Mohos Filtro en placas Petri / placas Petri, Bacterias y Virus Borboteador cerrado
Contenedor (sistema de embalaje triple) para sustancias de categoría A (OMS)
3.3.3 - DESCONTAMINACIÓN DE EQUIPOS Y TRAJES
▪ Objetivo: Destruir los posibles microorganismos patógenos presentes
▪ Tipos: Esterilización (física o química). Para los trajes, se realiza
previamente una intensa desinfección utilizando hipoclorito sódico, etanol o alcohol
isopropílico como agentes desinfectantes.
3.3.4 - CUSTODIA Y DISTRIBUCIÓN
-
▪ Objetivo: Garantizar la integridad de las muestras
Todas las etapas deben estar documentadas y registradas
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4. CONCLUSIONES
ES NECESARIO SEGUIR TRABAJANDO PARA MEJORAR ASPECTOS QUE
CONDUZCAN A UNA TOMA DE MUESTRA SEGURA, EFICAZ Y RÁPIDA
-
Es necesario uniformizar aspectos previos y posteriores a la toma de muestra (limpieza y
desinfección de equipos, condiciones de conservación y transporte, etc.).
-
Es necesario uniformizar procedimientos para la toma de muestra de microorganismos
aerotransportados, dada la falta de consenso existente, especialmente para virus.
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GRUPO DE TRABAJO DEL C.N.S.A. EN EL PROYECTO IB-BIOALERTNET
• Investigador principal (subproyecto CNSA)
Dr. David Galán Madruga
• Coordinadora
Gema Díaz López
• Procedimiento para toma de muestra de bioaerosoles
Dr. Fco. Javier Sánchez Íñigo, Dr. David Galán Madruga y Dra. Rosalía Fernández Patier
• Procedimientos para toma de muestras acuáticas y sólidas
Dr. Fco. Javier Sánchez Íñigo y Dra. Sonia Aguayo Balsas
• Sistema de Garantía de Calidad
Miguel Ángel Lucena Lozano y Dr. Fco. Javier Sánchez Íñigo
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